㈠ 核酸蛋白檢測儀步驟
核酸蛋白檢測儀使用並不難,那麼核酸蛋白檢測儀步驟是什麼呢?
在儀器使用前,首先連接好所需配套儀器:層析柱、恆流泵、自動部分收集器、記錄儀(色譜工作站)。將各類插頭與插座接妥(220v電源)。按下檢測儀on電源開關,電源指示燈亮,說明整台儀器電源開始工作,然後觀察光源指示燈,如果亮了,表示光源已開始工作,整台儀器可進入工作狀態,將檢測儀波長旋鈕旋到所需波長刻度上,把量程旋鈕撥到100%t檔(儀器預熱20分鍾,待基線平直後可加樣測試)。
接通記錄儀電源開關,使電源開關撥到「通」指示燈亮。可根據記錄儀說明書調換不同的紙速度,用戶根據需要自行掌握,測量用10mv檔。此時記錄儀指針從零點開始向右移動某一刻度,調節檢測儀「光量」旋鈕使指針停腔穗豎留在記錄儀大約中間位置5mv左右數字顯示為50左右。
把檢測分析儀器進樣口聚乙烯塑料管接到恆流泵上,使凝膠層析柱中緩沖液流過檢測儀(恆伍大流泵流量視凝膠層析柱大小選1-3ml/min)。用「調零」調整吸光度a值為0(量程開關撥到100%t調節光量旋族攜鈕,使記錄儀指針在10mv數字顯示為100,即透光率為100%。把量程開關撥到「0.0」檔,緩慢調節a調零旋鈕,使記錄儀指示在「o」位,檢測儀顯示為「o」)。以上步驟結束,析系統平衡後即可用洗脫液開始洗脫樣品,洗脫前再調一次吸光度0點。
㈡ 核酸和蛋白質序列分析的內容和方法有哪些
核酸和蛋白質序列分析的內容和方法有哪些
蛋白質結構分析方法:X射線晶體衍射分析和核磁共振
x 射線衍射法的解析度可達到原子的水平,使它可以測定亞基的空間結構、各亞基間的相對拓撲布局,還可清楚的描述配體存在與否對蛋白質的影響。多維核磁共振波譜技術已成為確定蛋白質和核酸等生物分子溶液三維結構的唯一有效手段。NM R技術最大的優點不在於它的解析度,而在於它能對溶液中和非晶態的蛋白質進行測量。
蛋白質的序列結構測定:
1.到目前為止,最經典的蛋白質的氨基酸序列分析方法是,sarI等人基於Edman降解原理研製的液相蛋白質序列儀,及後來發展的固相和氣相的蛋白質序列分析儀。
2.質譜:早期的質譜電離的方式主要是電子轟擊電離(EI),它要求樣品的揮發性好,一般與
氣相色譜聯用。但使用G C/M S分析,肽的長度受到限制,只能分析小的肽段。近年來,
在離子化的技術及儀器方面取得了突破性進展,使得質譜所能測定的分子量的范圍大大超
出了10k u。因此,軟離子化技術、基質輔助的激光解吸/離子化(MALDI)和電噴霧離子化(E SI)顯得尤為有前途。通過串聯質譜技術(MS/MS)和源後衰減基質輔助的激光解吸/離子化(PSD—MAIDI—MS),人們就可以從質譜分析中獲得肽及蛋白質的結構信息。
㈢ 核酸提取儀的主要步驟及方法
1. 環境溫度:5℃~40℃;環境相對濕度;電壓:50%~80%范圍:100~240Vac,50/60 Hz。
2. 將儀器放在水平實驗台上。
3. 放置儀器時應保證儀器周圍10cm內無障礙物;多台儀器同時使用時,每台儀器之間的距離應不小於50cm。
4. 儀器主機通電之前,必須先用六角扳手取下磁棒架固定螺絲,否則通電運行將會損壞儀器。
5. 96孔板和磁力棒套的安裝必須與對應的卡槽完全契合。
6. 請勿將該儀器安放在過度潮濕、高溫或陽光直射等溫度變化劇烈的區域,這可能會影響儀器的性能。
7. 請勿和其它大功率器件如離心機、空調等共用同一電源插座以免電源電壓波動影響系統運行。
8. 請將適配器連接到儀器,把適配器與電源插座相連,並打開儀器開關。
9. 請勿在有潛在有害液體或氣體的環境中操作該儀器。
10. 本儀器詳細操作步驟,請參閱以下的說明。
1.5注意事項
1. 儀器應放在濕度低、灰塵少並遠離水源的地方,室內應通風良好,儀器後方勿緊靠牆壁或堆放其他物品,以免影響散熱。
2. 實驗運行過程中禁止直接關閉電源開關。如果需要提前停止實驗,請先在觸屏軟體上點擊停止運行並確認後再關閉電源。
3. 裂解孔、洗滌孔和洗脫孔的樣本體積應在50μL-1000μL,避免體積過多,溢出孔位。
4. 機器運行及測試進行時,請勿觸摸加熱條,以免燙傷。
5. 紫外燈開啟滅菌時,請勿直視紫外光。
6. 移動儀器之前,請先切斷電源,再用螺釘固定磁棒架。
7. 儀器長期不使用時,請拔掉插頭,並用軟布或塑料袋覆蓋儀器,以防止灰塵進入。
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