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血細胞分析儀計數方法

發布時間:2024-03-14 09:43:12

Ⅰ 血球計數板的計數公式

紅細胞數/L=N×5×10×稀釋倍數。N為:五個中方格的RBC總數。

計數需要注意的:

1、目鏡測微尺每格長度=兩個重疊刻度間物鏡測微尺格數×10/兩個重疊刻度間目鏡測微尺格數。

2、以同樣方法,分別在不同倍率的物鏡下測定測微尺上每格的實際長度。

3、如此測定後的目鏡測微尺的尺度,僅適用於測定時所用的顯微鏡的目鏡和物鏡的放大倍數。若更換物鏡,目鏡的放大倍數時,必須再進行校正標定。

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血球計數板優點:此法是在顯微鏡下直接進行測定,方便快捷並且儀器損耗較小。

血球計數板缺點:在一定的容積中的微生物的個體數目包括活細胞均被計算在內,還有微小雜物也被計算在內。這樣得出結果往往偏高。這種方法常用於形態個體較大的菌體或孢,若是觀測細菌或是黴菌,就要換成油鏡了!

參考資料

網路-血球計數板

Ⅱ 細胞計數的方法

你好,很高興為你解答:
顯微鏡直接計數法:
顯微鏡直接計數法是將小量待測樣品的懸浮液置於一種特別的具有確定面積和容積的載玻片上(又稱計菌器),於顯微鏡下直接計數的一種簡便、快速、直觀的方法。細胞(英文名:cell)並沒有統一的定義,比較普遍的提法是:細胞是生物體基本的結構和功能單位。已知除病毒之外的所有生物均由細胞所組成,但病毒生命活動也必須在細胞中才能體現。

Ⅲ 血細胞怎麼做計數實驗

實驗
目的原理 了解血細胞計數的原理並掌握紅細胞、白細胞、血小板計數的方法,紅細胞計數結果結合血紅蛋白值還可以計算出紅細胞平均血紅蛋白量(MCH)可作為生理機能檢查和臨床診斷的指標。用相應的稀釋液將血液稀釋若干倍(另有抗凝、固定、著色作用),置於計數室中,在顯微鏡下計數一定容積內的血細胞數。 稀釋血液有血細胞吸管法和試管法,本實驗採用後者。

實驗對象與用品 雞或家兔。血細胞計數板、專用蓋玻片、吸血管、顯微鏡、手撳計數機、血細胞稀釋液、拭鏡紙、毛筆。

方法步驟

(一)熟悉計數室

血細胞計數板系一長方形厚玻片,常用的改良牛氏(Improved-Neubauer) 計數板在中央橫溝的兩邊各有一計數室,兩計數室結構完全相同。計數室較兩邊的蓋玻片支柱低0.1毫米。因此,放上蓋玻片時,計數板與其間距即計數室空間的高為0.1毫米(圖8-1)。在低倍顯微鏡下可見計數室被雙線劃分成9個邊長為1毫米的大方格。四角的大方格又各分為16個中方格,這是用來計數白細胞的。中央大方格被劃分為25個中方格,每一中方格又劃分成16個小方格(圖8-2稱25×16,也有的計數板為16×25的,小方格面積一致)。中央大方格的四角及中心5個中方格(16×25者則為四角上的中方格)為紅細胞或血小板計數范圍。

(二)紅細胞計數

先用試管稀釋法制備禽類血細胞懸液:將禽類紅細胞稀釋液Ⅰ、Ⅱ分別置水浴鍋中預熱到41~42℃,取Ⅰ液1mL於試管中,用吸血管加入新鮮雞血(或肝素抗凝血)20霯,再加入Ⅱ液1mL混勻,置該水浴鍋中保溫50s左右,置室溫,即為待檢的血細胞懸液。可用於充液計數。取干潔的計數板,置於水平的顯微鏡載物台上,蓋上蓋玻片,使兩側各空出少許。搖勻血細胞懸液,用滴管吸取,將滴管尖輕輕置於蓋玻片邊緣外,讓滴出的血細胞懸液憑毛細管作用吸入計數室內,剛好充滿計數室為宜(圖8-3)。靜置2min後計數,先用低倍鏡觀察,不均勻則拋棄。計數時用虹彩、集光器、反光鏡等調節入射光角度和強度,認清 計數室位置。採用「由上至下,由左至右,順序如弓」的順序,對壓邊線細胞採取「數上不數下,數左不數右」的原則(圖8~4)。依次計數並記錄5個中方格中分別有多少個紅細胞。

(三)血小板計數

採取血液並立即與抗凝劑混合(由於血小板具有趨向於凝集和粘附於異物表面的特性)。以血小板稀釋液(10%EDTANa2 10mL與0.8%NaCl90mL組成)將血液稀釋200倍,混勻後滴入血細胞計數室內,靜置15min,待血小板下沉後。於高倍鏡下計數(同紅細胞 計數)。在高倍鏡下血小板呈橢圓形、圓形或不規則的折光小體分布於紅細胞間,注意與雜質相區別。也可用復方尿素稀釋液稀釋血液,應靜置20min以上,待紅細胞充分溶解後再充液計數。
(四)計算

按計數室構造及血液稀釋倍數,將血細胞計數結果換算成每立方毫米中血細胞的個數。以每100mL血液中的血紅蛋白量(g)乘以10再除以紅細胞數(106/mm3)得紅細胞平均血紅蛋白量(MCN,單位μμg)。

(五)儀器洗滌

計數板、蓋玻片和測定管用清水沖洗,再用綢布或細布沾干。

要求與思考題

1.計算結果,報告中簡要說明計算過程。求出本組同學測定的均值並評價之。

2.了解各類稀釋液成分,分析各物質的作用。

注意事項

1.充液前應充分混勻血細胞懸液,充液要連續、適量,充液後應待血細胞下沉後再計

數。

2.計數板、蓋玻片、吸血管及測定管等用過後必須立即按要求洗滌干凈。

組織建議 將相同類型的計數板集中在一個組內,便於指導。本實驗屬於基本操作,各位朋友均應獨立操作得出結果。

附註:

1.本法可同時計數禽類白細胞數,計算方法也類似。

2.禽類血細胞稀釋液為:

Ⅰ液

中性紅 25.0mg

NaCl 0.9g

加蒸餾水至100.0mL
Ⅱ液

結晶紫 12.0mg

檸檬酸鈉 3.8g

福爾馬林 0.8mL

加蒸餾水至100.0mL

3.哺乳類紅細胞稀釋液可用生理鹽水或阿揚(Hayem)氏液(NaCl 1g,Na2SO4·10H2O 5g,HgCl2 0.5,加蒸餾水至200mL過濾)。白細胞稀釋液成分為冰醋酸0.1mL,1%龍膽紫1mL加蒸餾水至100mL,或直接用2%醋酸溶液。

4.血小板復方尿素稀釋液配方為:尿素10g,檸檬酸鈉0.5g,甲醛0.1mL,加蒸餾水到100mL,混合,待完全溶解後過濾。置冰箱內可保存1~2周。

Ⅳ 關於血球儀的測量方法

血球儀的測量方法:
1、采血
血液分析一般要求用抗凝的靜脈血,盡可能不用末梢皮膚穿刺采血。因為不同部位皮膚穿刺血的細胞成分及細胞與血漿的比例常不一致,與靜脈血的差別更大。從技術角度講,毛細血管采血量較少,全自動的血液分析儀需血量較大,不易採到足夠量,更不能在需要的時候進行重復檢查,因此除了少數不易取靜脈血如嬰兒、大面積燒傷的病人及某些需要經常采血檢查的病例,如白血病、腫瘤放療或化療病人外,均應採用靜脈血檢測。
2、容器的選擇
存放抗凝血的容器應盡量採用密閉式的,以防止水分蒸發或環境污染等方面的影響。為了減少對血小板分析的影響,應使用塑料試管,采血後應立即混勻。如果採用玻璃製品應首先對容器進行硅化處理,以防止血小板黏附,造成血小板計數的減少。
目前在發達國家普遍使用真空采血系統,這一系統使標本在采血和測試期間完全與外界隔離,避免空氣或異物污染血液,也防止發生溶血,提高檢測准確性,同時也防止采血及檢驗人員因直接接觸血液而受到感染的危險。
3、抗凝劑
國際血液標准化委員會(ISCH)推薦使用的抗凝劑是EDTA二鉀,含量規定為1.5-2.2mg/ml血。此抗凝劑不影響白細胞計數及大小,對紅細胞形態影響也最小,並且可以抑制血小板的聚集。EDTA二鈉用於血常規檢查與EDTA二鉀抗凝血的結果相比無明顯變化,但其溶解度較低,抗凝速度慢,不適合末梢血的抗凝。
需要注意的是EDTA二鉀可以使紅細胞體積輕度膨脹,采血後短時間內MPV非常不穩定,半小時後方趨於平穩。枸櫞酸鹽類抗凝劑對MPV及其他凝血因子影響極小,可用於血小板的分析。
4、稀釋標本
在使用半自動血液分析儀時,血液需要經過預稀釋以後方能檢驗,應特別注意稀釋溶血現象。稀釋溶血是指血液經高倍稀釋後,隨著放置時間的延長血細胞自行溶解的現象。所以血液稀釋後應盡快測定,以避少數量的減低。
5、溶血標本對分析結果的影響
由於標本的處理不當,例如采血不順利、劇烈震盪等,可以造成標本試管內溶血。溶血嚴重的標本可以使紅細胞和血球壓積下降、血紅蛋白相對增加,導致MCH和MCHC增高,而平均紅細胞體積正常。這一結果可以使臨床醫生作用錯誤的判斷,造成不良後果。所以對於溶血的標本,應重新採集標本後測定。
6、存放時間對結果的影響
抗凝全血在室溫的條件下進行儀器測定,紅細胞、白細胞和血小板各項指標可以穩定24個小時,白細胞分類可穩定6-8小時,血紅蛋白可穩定數日。但如果在顯微鏡下進行白細胞分類,兩小時後粒細胞形態即有變化,所以如果需要做顯微鏡形態學檢查,應及早推制血片。雖然4攝氏度條件可延長血液儲存期,但血小板不宜在低溫下儲存,會影響計數和體積,因此如不能及時檢測血液應在室溫下保存。
很多文獻報道EDTA鹽抗凝的靜脈血,在采血後的一小時內檢測MPV不穩定,血小板體積逐漸增高,可增大20%左右,一小時後趨向平穩,在1-6小時內變化小於3%。這是由於血液與EDTA鹽抗凝劑混合後,血小板形狀由凹形變為球形,體積增大的原因。所以為了結果的准確性,應該在一小時後進行測定。
我們發現用EDTA抗凝的末梢血也應至少在15分鍾以後進行測定,因為在這段時間內有些標本血小板暫時的聚集現象,使血小板計數假性減少,這不僅影響血小板其它指標的准確性,也造成白細胞計數有所增高。取血後立刻檢測,標本的血小板和白細胞體積分布直方圖也是異常的,放置一段時間後再測定就可得到分布正常的直方圖
7、溶血劑的用量及溶血時間
全自動血液分析儀可以控制溶血劑的加入量及溶血劑作用時間。但在使用半自動血細胞計數儀進行血細胞計數時,需要在血液預稀釋後人工加入溶血劑,溶血以後再進行血細胞計數和分類計數,正確掌握溶血劑用量及溶血時間非常重要。如果加入量不足或加入後放置時間過短,可以造成溶血不完全,使未溶解的紅細胞計入白細胞中,造成白細胞假性增加。溶血不完全也可影響血紅蛋白的准確性。如果加入溶血劑量過多或放置時間太久白細胞明顯變形,使白細胞直方圖異常,白細胞分類計數結果不準確,甚至不能進行分類計數。

Ⅳ 血常規分析儀簡易操作規程

血常規 檢測儀又叫 血液 細胞分析儀、血球儀、血球計數儀等,是醫院臨床檢驗應用非常廣泛的儀器之一下面我為大家詳細介紹下血常規分析儀簡易操作規程,希望大家喜歡。

血常規分析儀操作規程1、 開機 前的准備

檢查試劑是否足量,有無渾濁變質,試劑管道有無扭結;

檢查主機與氣源間的電路、氣路連接是否正確;

檢查分析儀與 外接設備 的連接是否正確;

檢查電源連接是否正確。

血常規分析儀操作規程2、開機和用戶登錄

如果連接列印機,先開列印機開關。再依次打開氣源後部、機器左側面的電源開關及觸摸屏左下方開關,待登錄界面出現後,輸入用戶名和密碼後,進入主界面。

血常規分析儀操作規程3、本底檢查

在主界面點擊“計數”按鈕,檢查顯示在“計數”界面的本底結果是否滿足以下要求:WBC≤0.3×109/L RBC≤0.3×1012/L HGB≤1g/L PLT≤10×109/L 如果本底沒有達到要求,將會提示“本底異常”,請執行清洗或維護程序。

血常規分析儀操作規程4、每日質控

在進行樣本分析前,每日需對分析儀進行質控分析。

血常規分析儀操作規程5、選擇工作模式

A.在“計數”界面下,點擊“模式”按鈕,彈出“工作模式”對話框。

B.點擊模式項的“開放-全血” 、“開放-預稀釋”或者“自動-全血”單選按鈕選擇需要的工作模式。

C.點擊“CBC”或“CBC+5DIFF”單選按鈕選擇測量模式。

D.在“編號”框輸入下一個分析樣本的樣本編號。對於“自動-全血”模式,在“編號” 、“管架號”和“試管號”編輯框分別輸入起始樣本的樣本編號、管架號(輸入范圍為1-20)和試管號(輸入范圍1-10)。如選擇使用內置條碼掃描儀自動錄入下一個分析樣本的編號和/或自動錄入管架號,點擊“自動掃描編號”和/或“自動掃描管架號”復選框,然後輸入起始樣本的其他信息

E.設置完成後,點擊“確定”按鈕,保存輸入的內容並返回“計數”界面

F.操作者也可在樣本分析前,點擊“工作單”按鈕,錄入和修改待分析樣本的完整工作單信息

血常規分析儀操作規程6、開放進樣全血測量

A.混勻用K2EDTA(1.5~2.2mg/mL 血)抗凝的樣本,放到采樣針下,確保采樣針入血樣內

B.按吸樣鍵,采樣針自動吸入樣本,聽到蜂鳴器響後,移開樣本,分析儀自動執行樣本分析

血常規分析儀操作規程7、開放進樣預稀釋測量

A.在“計數”界面,點擊“稀釋液”按鈕,關閉加稀釋液對話框

B.按吸樣鍵,讓分析儀自動排出的稀釋液沿管壁流入管內,需小心避免液體濺出或產生氣泡。聽到蜂鳴器響後,移開離心管。操作者也可使用移液器取120μL稀釋液到離心管中

C.加稀釋液完畢,點擊“確定”按鈕,關閉加稀釋液對話框

D.人工採集40μL血樣注入盛有稀釋液的離心管中,蓋好蓋子後混勻

E.將該預稀釋血樣放置3分鍾後,再次混勻,放入采樣針下,按吸樣鍵,采樣針自動吸入樣本,聽到蜂鳴器響後,移開樣本,分析儀自動執行樣本分析

血常規分析儀操作規程8、自動進樣全血測量(配置自動進樣器)

A.如使用內置條碼掃描儀自動錄入下一樣本編號,將粘貼好條碼標簽的樣本試管放入試管架

B.如不自動掃描樣本編號,將試管按照樣本編號順序依次放入試管架的各試管位中

C.將放置好試管的試管架依次水平放置在進樣器的右側槽中。將有“MINDRAY”標志的側背向分析儀。一次最多能同時放置5個試管架

D.在“工作單”界面下點擊“開始”按鈕,或者在“計數”按鈕界面下點擊“計數”按鈕,分析儀自動執行樣本分析

E.分析結束後,所有試管架自動移到進樣器的左側槽,可取走樣本

血常規分析儀操作規程9、休眠

液路相關操作停止的時間超出設定的時間間隔後,分析儀會自動進入休眠狀態。此時,仍可以執行與液路無關的任意操作。

分析儀處於休眠狀態時,可按吸樣鍵取消休眠。

血常規分析儀操作規程10、關機

每日工作完畢,在主界面點擊“關機”按鈕執行關機。

當屏幕變為黑屏後,關掉主機電源,並關閉其它外接設備的電源。

清空廢液桶中廢液,並妥善處理。

血常規分析儀 注意事項

1、電源要求

A.分析儀必須在良好接地條件下使用

B.必須使用指定規格的熔斷器

C.確認輸入電壓符合分析儀要求 2、環境要求

A.正常工作溫度范圍:15℃~30℃

B.運行溫度范圍:10℃~40℃

C.正常工作濕度范圍:30%~85%

D.大氣壓力范圍:70kPa~106kPa

E.環境應盡可能無塵、無機械振動、無大噪音源和電源干擾

F.遠離強電磁場干擾源

G.不要靠近電刷型電機、閃爍熒光燈和經常開關的電接觸性設備

H.避免陽光直射或置於熱源及風源前

I.選擇一個通風良好的位置

J.不要將主機放置在斜面上

3、故障處理

若出現故障,可點擊界面左上角的故障信息區獲取故障幫助信息

4、定期維護

每日:執行正常關機

每月:分析儀每運行一個月左右,需要清洗開放采樣部件,自動采樣部件(配置自動進樣器),並請執行探頭清潔液維護,需用探頭清潔液清洗分血閥、流動室、RBC池等組件或清洗整機

每兩個月:當分析儀每運行兩個月左右,請 手工 清洗分血閥

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