受體的研究方法

『壹』 膜表面糖蛋白研究方法

天,這不是一個網路知道可以回答的問題,如果你是做科研的話.目前還沒有一種方法可以研究所有膜受體.
你的分子是蛋白還好辦些,購買它的抗體.然後有幾種方法可以參考,western先確定是否存在該受體；用Ab-蛋白聯合的柱子去抓目的蛋白,然後做質譜,可以拿到部分序列,再搜索是否存在符合度高的已知蛋白；有了已知蛋白,查找其抑制劑或抗體,用競爭阻斷的方法反過去確證你的問題.
如果是非蛋白分子,那需要做很多工作,比如分子能否進入細胞?它引起什麼變化?是否能量依賴等?這些有助於確定方向.

『貳』 受體是如何被發現的

高濃度的CO2可以通過植物關閉氣孔來減少氣體交換和CO2的吸收。但是，目前為止，我們仍不知道植物如何環境中感知CO2，以及植物對高濃度CO2響應的分子機制。2020年5月10日，BioRxiv預印本雜志在線發表了來自波蘭波茲南大學的 Łukasz Gałgański課題組題為「Mitogen-

該研究研究表明有絲分裂原激活的蛋白激酶（MAPKs）是植物CO2的受體蛋白。這個結論還是有些意外的，畢竟MAPKs激酶研究歷史已經有幾十年了，從未有報道表明該激酶是CO2的受體。不過，值得一提的是，該研究結論仍然在預印本上，還有待同行評議正式發表。

氣孔由葉片表面上的成對保護細胞形成，以控制蒸騰水分損失和光合作用的CO2利用。植物需要精確調節氣孔，以適應環境壓力並在各種環境壓力下生存。氣孔的打開可以由藍光和紅光、葉片的細胞空間中的CO2濃度降低及相對空氣濕度增加觸發。而脫落酸（ABA）（見下圖1），黑暗，[CO2]升高和相對空氣濕度降低又能觸發氣孔關閉。氣孔關開的變化受到保衛細胞中離子濃度和滲透活性溶質的變化的控制，這些溶質驅動滲透水吸收或從保衛細胞流出（見下圖1）。

CO2濃度升高觸發氣孔關閉的感測和信號轉導機制仍然不太清楚。其中參與該過程的分子成分，包括βCA1和βCA4、HT1、OST1/SnRK2.6、SLAC1和ALMT12 / QUAC1陰離子通道等被鑒定為參與氣孔CO2信號轉導（見下圖2）。但是這些組件之間的詳細互動和調節機制以及包括未知CO2/HCO3-感測器在內的其他關鍵組件仍有待確定。

之前研究表明，ABA調節高濃度的CO2誘導的氣孔關閉，而CO2又能影響ABA誘導的氣孔閉合。然而，在沒有ABA和ABA信號轉導的關鍵因子的情況下，高[CO2]濃度仍然可以誘導氣孔的關閉。之前研究表明，MPK12和MPK4激酶是通過HT1失活而促進SLAC1介導的高CO2濃度誘導的氣孔關閉途徑的重要上游介質。此外，煙草中的NtMPK4沉默會破壞高[CO2]濃度和黑暗誘導的氣孔關閉運動。

該研究表明MPK4激酶在體內和體外都能被CO2激活，並且能夠結合CO2。此外，與與細菌感染引起的MPK4激活不同，CO2誘導的MPK4激活獨立於上游調節激酶MKK1和MKK2。此外，研究還表明一旦被激活，MPK4容易被碳酸氫鹽失活。

綜上所述，該研究認為將應激反應性MPK4作為CO2受體，為植物將各種環境信號的整合機制提供了新的思路。因此，該文認為MPK4是調節光合作用CO2可用性的主要樞紐，可能有助於尋找增加植物吸收CO2的新方法。不過該文章的結論還有待進一步驗證，並不能作為確認的研究結果來討論。

『叄』 常見目的基因導入受體細胞的方法及過程

1，植物細胞；常用農桿菌轉化法（其中能將目的基因整合到Ti質粒上的T-DNA上）常用於雙子葉和裸子植物。
基因槍法；單子葉植物。
花粉管通道法；剪掉柱頭
2，動物細胞；顯微注射技術（注射到受精卵中）
3，微生物；感受態細胞法或鈣離子處理法（用含有鈣離子溶液處理使其成為感受態細胞）

『肆』 什麼是受體有何特徵和類別簡述一種分離提純受體的方法、原理。

受體是細胞內或細胞表面的一種天然分子，可以識別並特異地與有生物活性的化學信號分子（配體） 結合，從而激活或啟動細胞內一系列生物化學反應最後導致該信號物質特定的生物效應。絕大多數 受體為蛋白質，極少數是非蛋白受體。 受體與配體結合具有特異性、親和性、飽和性 受體分為細胞內受體（甾醇類激素）和細胞外受體（離子型通道受體、G 蛋白偶聯型受體、具有酶 活性的受體）。 分子克隆技術提取微量受體：從細胞中提取所有微量mRNA 逆轉錄成cDNA，將其重組入載體質粒 子，繼而讓其轉染缺乏受體的培養細胞群，其中少數細胞可能還有能編碼受體所需的 cDNA，並表 達成表面受體。

『伍』 什麼是受體結合分析

體結合分析nbsp;nbsp;nbsp;nbsp;一、直接的細胞表面受體結合在4℃下脂蛋白與LDL受體結合,nbsp;但脂蛋白受體復合物尚未內在化(internalized),脂蛋白與LDL受體處於平衡狀態,因而可進行平衡結合研究。此項研究的數據可用Scatchard分析來測定脂蛋白與LDL受體的親合力及每個細胞受體結合脂蛋白的量。所用脂蛋白濃度取決於平衡解離常數(Kd),nbsp;應採用大致與Kd數值相等的濃度。以下是常用的放射標記脂蛋白濃度范圍:nbsp;人類LDL,nbsp;0.25-12ug/ml;nbsp;人類III型β-極低密度脂蛋白(β-VLDL),nbsp;0.2-10ug/ml;nbsp;狗Aponbsp;Enbsp;HDLC,nbsp;0.01-1.2ug/ml;nbsp;狗β-VLDL,0.54-4ug/ml;nbsp;及Aponbsp;E-雙十二醯磷酸膽鹼(DMPC)復合物,nbsp;0.005-1.0ug/ml。(所有濃度基於Lowry等人的蛋白測定法)————————————————————————————nbsp;nbsp;nbsp;nbsp;方案4:nbsp;用於研究125I-標記脂蛋白與完整細胞表面LDL受體平衡結合的方法nbsp;nbsp;nbsp;nbsp;(1).nbsp;實驗前,nbsp;將帶細胞的培養皿置一大盒冰上的金屬托盤上預冷10-15分鍾。nbsp;nbsp;nbsp;nbsp;(2).nbsp;在15ml塑料錐形管內制備並在冰上預冷15分鍾後的脂蛋白溶液組成是:DMEM-Hepes-LPDS[N-2羥乙基哌嗪-N『-2磺酸乙烷(Hepes),nbsp;(代替重碳酸鹽)pH7.4緩沖的DMEM,nbsp;含10%LPDS]。它含有為雙份培養皿准備的6-12種不同濃度的125I-標記脂蛋白。每種濃度的125-I標記脂蛋白的第三塊培養皿內的溶液通過加入20-100倍過量非標記配體來測定非特異結合。nbsp;nbsp;nbsp;nbsp;(3).nbsp;當細胞培養皿在冰上時,nbsp;棄去細胞培養基,nbsp;用含放射標記脂蛋白的培養基替代。可採用在16mm皿內加0.25ml,nbsp;22mm皿內加0.45ml,nbsp;35mm皿內加0.95ml,nbsp;60mm皿內加1.9ml。從每管中取兩份(每份20ul)測放射活性,nbsp;他們用於Scatchard分析法的計算及確定有放射活性脂蛋白的濃度。在冰上孵育並輕搖冷浴中的細胞3-5小時。(4℃下多數脂蛋白的受體結合在5-6小時內達到平衡,nbsp;但對多數情況而言,nbsp;孵育3-4小時足以達到平衡)。nbsp;nbsp;nbsp;nbsp;(4).nbsp;孵育終止時,nbsp;仍置細胞於冰上,棄去培養基,用冷的PBS-BSA(每mlPBS含2mgnbsp;BSA)洗滌單層細胞三次。繼之用相同緩沖液孵育10分鍾,nbsp;並用冷PBS快速洗滌,nbsp;先後重復兩次。洗滌細胞時,nbsp;用與重復分配器相連的長管進行。洗滌液沿孔壁流下,nbsp;覆蓋所用細胞。細胞與培養皿的附著力差別很大,nbsp;所以對一些培養物必須十分小心。nbsp;nbsp;nbsp;nbsp;(5).nbsp;將細胞從冰上移開,nbsp;用重復分配器(加樣器)在每孔中加入0.1Mnbsp;NaOHnbsp;0.5ml,nbsp;用手輕搖平皿,nbsp;以確保整個平皿都被NaOH覆蓋。封蓋,nbsp;在室溫下孵育10分鍾使細胞溶解。nbsp;nbsp;nbsp;nbsp;(6).nbsp;將已溶細胞移入12×75mm管內,nbsp;用0.5mlnbsp;NaOH洗各孔一次,nbsp;將洗液倒入管內。nbsp;nbsp;nbsp;nbsp;(7).nbsp;塞好試管,nbsp;在r-計數儀上進行125I計數。現在多數計數器可進行重復實驗平均取值,nbsp;消除背景以及計算100%對照的百分比,nbsp;這可節省手工計算的時間。nbsp;nbsp;nbsp;nbsp;(8).nbsp;在測定蛋白濃度之前將試管置4℃保存,nbsp;可使用根據Techniconnbsp;Lowry方案設計的Technicon自動分析II型儀,nbsp;用BSA作標准。此自動分析儀直接從12×75mm原管中自動取樣。當採用的是單層細胞且屬接觸抑制(如成纖維細胞)或為接近匯合時,每孔中的細胞蛋白幾乎完全一樣,nbsp;因而只需進行抽樣測定。但當使用非接觸抑制細胞(如平滑肌細胞)或在培養中有不分化的細胞(如巨噬細胞)時,nbsp;因各孔之間變化大而需逐管分析。nbsp;nbsp;nbsp;nbsp;(一)、Scatchard分析nbsp;nbsp;nbsp;nbsp;平衡結合研究得來的數據可通過Scatchard分析進行線性化。根據這一分析可確定125I-標記配基與受體結合的親合力常數(Kd)和受體飽和時受體結合脂蛋白的數量。通過在X軸上標出「毫微克結合量(B)及在Y軸上標繪結合/游離比(B/F),如果在平衡時配基與受體均為純體,nbsp;並且呈簡單的雙分子反應(如LDL與LDL受體的平衡結合),nbsp;那麼就可得到一條直線。現有一種用於稱為Scatdata的IBMPC的

『陸』 如何去尋找分泌型蛋白作用的受體

有多種方法。可以正向的篩一些突變的細胞系；也可以根據蛋白共表達，互作等線索來挑出候選基因，然後進一步驗證

『柒』 簡述激素受體的研究方法

從分子上面做起，很大的。現在國外用得比較新的使基因挑除。也可以用單抗。總之比一個博士論文差不多。大工程啊。去專業外文文獻資料庫查一下吧。

『捌』 歸經的研究方法

歸經指中葯對人體某部分具有選擇性治療作用的特性。中葯歸經理論是中葯葯性理論的一個重要組成部分。目前實驗研究的思路可概括為兩大類：一是根據中葯有效成分在體內的分布及其作用部位研究中葯的歸經；二是根據葯理效應選定某些特異性的葯理觀察指標研究中葯的歸經。
1.對確定歸經的依據進行探討
主要有兩種方法：一是以所治病證的臟腑歸屬確定歸經。如能治療咳嗽、氣喘等肺系疾病的葯物歸入肺經；能治療心悸怔忡等心系疾病的葯物歸入心經；能治療陽痿、遺精等腎系疾病的葯物歸入腎經等。二是以葯物的自然屬性確定歸經。如以五味配五臟來確定葯物的歸經，則辛入肺、苦入心、甘入脾、咸入腎、酸入肝；以五色配五臟來確定葯物的歸經，則色白入肺、色赤入心、色黃入脾、色青入肝、色黑入腎；以五氣配五臟來確定葯物的歸經，則燥氣入肝，焦氣入心，香氣入脾，腥氣入肺，腐氣入腎；以葯物的質地、形狀等特徵為依據來確定葯物的歸經，則質之輕者上入心肺，質之重者下入肝腎。如質地重墜之牡蠣、磁石能沉墜入肝腎；胡桃形似腦而補腦等。此種標定方法多採用取類比象的方法，不足以反映歸經理論的普遍規律。
2.葯物有效成分代謝分布測定法
該方法就是通過現代葯物動力學的技術，觀察中葯中的某些成分在體內臟器的分布特點，以此來說明中葯活性成分在體內的分布與中葯歸經的關系，從而揭示中葯歸經的實質。在多數情況下，病變部位的葯物濃度與其葯效有直接關系，運用此種方法能從一定層次上反映葯物的歸經。
3.微量元素法
不少研究者認為中葯的某些作用與微量元素有關。提出微量元素「歸經」假說，認為中葯的微量元素在體內的遷移，選擇性富集及微量元素絡合物對疾病部位的特異親合是中葯歸經的重要基礎，並從中醫「腎」功能方面探討，認為微量元素鋅、錳是中葯歸腎經的物質基礎。通過對常用的21味補腎助陽葯進行微量元素的系統分析，提出了以微量元素Zn、Mn、Fe作為共同的物質基礎，實施對神經-內分泌-免疫調節網路的控制而呈現整體效應。明目類中葯富含Zn、Mn、Fe等微量元素，其含量與眼組織中微量元素的濃度相關。
4.環核苷酸測定法
cAMP、cGMP普遍存在於體內各組織，且是細胞功能的重要調節物質，而且對多種信息尤其是葯物的刺激非常靈敏，各臟器組織中的含量水平基本可以反映細胞功能的某一動態平衡狀態，許多中葯都是通過調節體內環核苷酸含量起作用。用五味子、魚腥草、漢防己水煎劑分別給鼠灌胃，用放射免疫法測定動物腦、心、肺、肝、脾等組織中cAMP、cGMP含量，發現各組織cAMP、cGMP含量及cAMP/cGMP比值的變化與各葯物歸經有關。
5.受體學說研究法
歸經與受體學說均強調葯物選擇性作用。不少學者認為葯物的有效成分及其受體是歸經的物質基礎。對於中葯來說，其作用來自於某種有效成分的結構、構象符合了某種受體的要求，從而結合產生作用，表現為具有一定的限定性和選擇性。而中葯所要說明的就是這種限定性和選擇性。從受體學說來看，葯物對作用部位的選擇性就是受體對葯物的選擇性。受體具有飽和性、特異性和可逆性，某些受體的分布可以跨器官、跨系統。中葯進入體內後，由於受受體性質的限制，只能作用於特定的受體，表現為某一種或某幾種效應，而非其他效應，這與中醫葯理論上的歸經極其相似。如細辛含消旋去甲烏葯鹼，具有興奮β1受體作用，而β1受體主要分布在心臟、腸壁組織，因此細辛可治療心臟疾病，即古人言的歸心經；檳榔含有乙醯膽鹼，為心臟受體接受產生抑製作用，為胃腸受體接受產生興奮作用，從而驗證了《本草經解》所雲檳榔歸心、胃、大腸經的論述。

『玖』 如何來做配體受體的結合實驗

衡量受體的存在一個主要標志是受體的飽和性，即繪制出特異性結合的飽和曲線。原理是根據活性物質與標記的活性物質競爭同一受體的原理測定活性物質和含量，屬飽和分析法一類。實驗中總結合減去非特異就是特性結合，然後繪制出飽和曲線和競爭曲線，算出Bmax和Kd值。
要注意的是放射性標記的配體要純

『拾』 什麼是受體試用受體學說解釋葯物的作用機制

葯物的作用必須與機體內的「接受物質」（receptive substance）結合，才能發揮葯理作用。
一種學說。受體是一種假想的概念，目前認為受體必須符合以下四相：（1）有高度選擇性的激動劑；（2）有高度特異性的拮抗劑；（3）有高度敏感性的生物效應；（4）不是酶的作用底物或酶的競爭物。
受體學說在臨床上也得到了廣泛應用。

相關概念
「受體病」就是一個應運而生的新概念。受體病是由於受體的數量和質量發生了異常改變而引起的一種病理狀態。如非胰島素依賴型糖尿病就是一個典型例證。這種病人對外源性胰島素不敏感，用通常的注射胰島素的方法治療，很難奏效。
意義
「受體學說」不斷推動著葯理學的發展，現已成為葯理學研究不可動搖的基石