❶ 細胞爬片和冰凍切片,石蠟切片有哪些區別
細胞爬片和冰凍切片,石蠟切片有哪些區別
1.冰凍切片 是免疫組織化學染色中最常用的一種切片方法.其最突出的優點是能夠較完好地保存多種抗原的免疫活性,尤其是細胞表面抗原更應採用冰凍切片.新鮮的組織及已固定的組織均可作冰凍切片.
冰凍時,組織中水份易形成冰晶,往往影響抗原定位.一般認為冰晶少而大時,影響較小,冰晶小而多時,對組織結構損害較大,在含水量較多的組織中上述現象更易發生.冰晶的大小與其生長速率成正比,而與成核率(形成速率)成反比,即冰晶形成的數量愈多則愈小,對組織結構影響愈嚴重.因此,應盡量降低冰晶的數量.Fish認為冰凍開始時,冰晶成核率較慢,以後逐漸增加,其臨界溫度為-33.C,從-30.C降至-43.C之間,成核率急劇增加達1018,然後再減慢.基於上述理論可採取以下措施減少冰晶的形成
2.石蠟切片 其優點是組織結構保存良好,在病理和回顧性研究中有較大的實用價值,能切連續薄片,組織結構清晰,抗原定位準確.用於免疫組化技術的石蠟切片制備與常規製片略有不同:①脫水、透明等過程應在4℃.C下進行,以盡量減少組織抗原的損失.②組織塊大小應限於2cm×1.5cm×0.2cm,使組織充分脫水、透明、浸蠟.③浸蠟、包埋過程中,石蠟應保持在60℃以下,以溶點低的軟蠟最好(即低溫石蠟包埋).