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澱粉測定方法研究進展

發布時間:2023-09-02 16:09:40

㈠ 甘薯中澱粉含量如何測定要具體方法、步驟

簡單的來說:
使用高壓鍋在121度的溫度下,用0.5N的硫酸水解澱粉,時間:10min。把澱粉水解成葡糖糖,用碘液檢查澱粉是否水解徹底,後用鹼液中和。然後,加入醋酸鉛、硫酸鈉去除雜質、鉛等。定容250ML.。過濾,取濾液用來檢測總糖的含量,然後取另一份濾液用直接滴定法測定還原糖的含量,總糖減去還原糖就等於用酸水解以後的葡萄糖含量,乘以0.9就是澱粉的含量。關鍵控制的環節是盡量控制好樣品水解的程度,因為馬鈴薯中含半纖維素較多,容易被水解掉,產生誤差。

復雜的來說:
食品中澱粉的測定(5009.9-2003 食品中澱粉的測定)
第一法 酶水解法
一、目的與要求:
1、了解食品中澱粉含量的分析原理及分析方法
2、掌握用酶水解法和酸水解法測定澱粉的方法。
二、實驗原理
樣品經除去脂肪及可溶性糖類後,其中澱粉用澱粉酶水解成雙糖,再用鹽酸將雙糖水解成單糖,最後按還原糖測定,並折算成澱粉。
三,試劑:
1、0.5%澱粉酶溶液:稱取澱粉酶0.5克,加100毫升水溶解,數滴甲苯或三氯甲烷,防止長霉,貯於冰箱中。
2、碘溶液:稱取3.6克碘化鉀溶於20毫升水中,加入1.3克碘,溶解後加水稀釋至100毫升。
3、乙醚
4、85%乙醇
5、6N鹽酸:量取50毫升鹽酸加水稀釋至100毫升。
6、甲基紅指示液:0.1%乙醇溶液。
7、20%氫氧化鈉溶液。
8、鹼性酒石酸銅甲液:稱取34.639克硫酸銅(CuS04•5H2O)。加適量水溶解,加0.5毫升硫酸,再加水稀釋至500毫升,用精製石棉過濾。
9、鹼性酒石酸銅乙液:稱取173克酒石酸鉀鈉與50克氫氧化鈉,加適量水溶解,並稀釋至500毫升,用精製石棉過濾,貯存於橡膠塞玻璃瓶內。
10、0.1000N高錳酸鉀標准溶液。
11、硫酸鐵溶液:稱取50克硫酸鐵,加入200毫升水溶解後,人100毫升硫酸,冷後加水稀釋至1000毫升。
四、操作方法:
1、樣品處理:
稱取2-5克樣品,置於放有折疊濾紙的漏斗內,先用50毫升乙醚分5次洗除脂肪,再用約100毫升85%乙醇洗去可溶性糖類,將殘留物移入250毫升燒杯內,並用50毫升水洗濾紙及漏斗,洗液並入燒杯內,將燒杯置沸水浴上加熱15分鍾,使澱粉糊化,放冷至60℃以下,加20毫升澱粉酶溶液,在55-60℃保溫1小時,並時時攪拌。然後取1滴此液加1滴溶液,應不顯現藍色,若顯藍色,再加熱糊化並加20毫升澱粉酶溶液,繼續保溫,直至加碘不顯藍色為止。加熱至沸,冷後移入250毫升容量瓶中,並加水至刻度,混勻,過濾,棄去初濾液。取50毫升濾液,置於250毫升錐形瓶中,並加水至刻度,沸水浴中迴流1小時,冷後加2滴甲基紅指示液,用20%氫氧化鈉溶液中和至中性,溶液轉入100毫升容量瓶中,洗滌錐形瓶,洗液並人100毫升容量瓶中,加水至刻度,混勻備用。
2、測定:
吸取50毫升處理後的樣品溶液,於400毫升燒杯內,加入25毫升鹼性酒石酸銅甲液及25毫升乙液,於燒杯上蓋一表面皿,加熱,控制,在4分鍾內沸騰,再准確煮沸2分鍾,趁熱用鋪好石棉的古氏坩堝或c4垂融坩堝抽濾,並用60℃熱水洗滌燒杯及沉澱,至洗液不呈鹼性為止。將古氏坩堝或垂融坩堝放回原400毫升燒杯中,加25毫升硫酸鐵溶液及25毫升水,用玻棒攪拌使氧化亞銅完全溶解,以0.1000N高錳酸鉀標准溶液滴定至微紅色為終點。
同時量取50毫升水及與樣品處理時相同量的澱粉酶溶液,按同一方法做試劑空白實驗。
計算:X1=((A1-A2)×0.9)/( m1×50/250×V1/100×1000)×100
X1:樣品中澱粉的含量,%;
A1:測定用樣品中還原糖的含量,mg;
A2:試劑空白中還原糖的含量,mg;
0.9:還原糖(以葡萄糖計)換算成澱粉的換算系數;
m1:稱取樣品質量,g;
V1:測定用樣品處理液的體積,毫升(m1)。
第二法 酸水解法
一、原理:
樣品經除去脂肪及可溶性糖類後,其中澱粉用酸水解成具有還原性的單糖,然後按還原糖測定,並折算成澱粉。
二、試劑:
1、乙醚;
2、85%乙醇溶液;
3、6N鹽酸溶液;
4、40%氫氧化鈉溶液;
5、10%氫氧化鈉溶液;
6、甲基紅指示液:0.2%乙醇溶液
7、精密PH試紙
8、20%乙酸鉛溶液
9、10%硫酸鈉溶液
10、乙醚
11、鹼性酒石酸銅甲液。 (配製見前)
12、鹼性酒石酸銅乙液; (配製見前)
13、硫酸鐵; (配製見前)
14、0.1000N高錳酸鉀標液
三、儀器:
1、水浴鍋
2、高速組織搗碎機:1200r/min
3、皂化裝置並附250毫升錐形瓶。
四、操作方法:
1、 樣品處理
A、糧食,豆類、糕點、餅乾等較乾燥的樣品,稱取2.0-5.0克磨碎過40目篩的樣品,置於放有慢速濾紙的漏斗中,用30毫升乙醚分三次洗去樣品中的脂肪,棄去乙醚。再用150毫升85%乙醇溶液分數次洗滌殘渣,除去可溶性糖類物質。並濾干乙醇溶液,以100毫升水洗滌漏斗中殘渣並轉移至250毫升錐形瓶中,加入30毫升6N鹽酸,接好冷凝管,置沸水浴中迴流2小時。迴流完畢後,立即置流水中冷卻。待樣品水解液冷卻後,加入2滴甲基紅指示液,先以40%氫氧化鈉溶液調至黃色,再以6N鹽酸校正至水解液剛變紅色為宜。若水解液顏色較深,可用精密PH試紙測試,使樣品水解液的PH約為7。然後加20毫升20%乙酸鉛溶液,搖勻,放置10分鍾。再加20毫升10%硫酸鈉溶液,以除去過多的鉛。搖勻後將全部溶液及殘渣轉入500毫升容量瓶中,用水洗滌錐形瓶,洗液合並於容量瓶中,加水稀釋至刻度。過濾,棄去初濾液20毫升,濾液供測定用。
B、蔬菜、水果、各種糧豆含水熟食製品:按1:1加水在組織搗碎機中搗成勻漿(蔬菜、水果需先洗凈、晾乾、取可食部分)稱取5-10克勻漿(液體樣品可直接量取),於250毫升錐形瓶中,加30毫升乙醚振搖提取(除去樣品中脂肪),用濾紙過濾除去乙醚,再用30毫升乙醚淋洗兩次,棄去乙醚。以下按A自「再用150毫升85%乙醇溶液」起依法操作。
2、測定:
吸取50毫升處理後的樣品溶液,於400毫升燒杯內,加25毫升鹼性酒石酸銅甲液及25毫升乙液。於燒杯上蓋一表面皿加熱,控制在4分鍾沸騰再准確煮沸2分鍾,趁熱用鋪好石棉的古氏坩堝或G4垂融坩堝抽濾,並用60℃熱水洗滌燒杯及沉澱,至洗液不呈鹼性為止。將古氏坩堝或垂融坩堝放回原400毫升燒杯中,加25毫升硫酸鐵溶液及25毫升水,用玻棒攪拌使氧化銅完全溶解,以0.1000N高錳酸鉀標液滴定至微紅色為終點。
同時吸取50毫升水,加與測樣品時相同量的鹼性酒石酸銅甲乙液、硫酸鐵溶液及水,按同一方法做試劑空白試驗。
計算: x2=((A3-A4)×0.9)/( M2×V2/500×1000)×100
式中:
X2:樣品中澱粉含量,%;
A3:測定用樣品中水解液中還原糖含量,mg;
A4:試劑空白中還原糖的含量,mg;
m2:樣品質量,mg;
V2:測定用樣品水解液體積,m1;
500:樣品液總體積,ml;
0.9:還原糖折算成澱粉的換算系數。

㈡ 澱粉酶的測定方法有哪些

植物中的澱粉酶能將貯藏的澱粉水解成麥芽糖。澱粉酶幾乎存在於所有植物中,其中以禾穀類種子的澱粉酶活性最強。植物中有α–澱粉酶和β–澱粉酶,其活性因植物的生長發育時期不同而有所變化。通過本實驗掌握澱粉酶的提取和測定方法。
原理:
α–澱粉酶和β–澱粉酶,各有其一定的特性,如β–澱粉酶不耐熱,在高溫下易鈍化,而α–澱粉酶不耐酸,在pH3.6以下則發生鈍化。通常提取液中同時有兩種澱粉酶存在,測定時,可根據它們的特性分別加以處理,鈍化其中之一,即可測出另一酶的活性。將提取液加熱到70℃維持15 min以鈍化β–澱粉酶,便可測定α–澱粉酶的活性。或者將提取液用pH3.6之醋酸在0℃加以處理,鈍化α–澱粉酶,以求出β–澱粉酶的活性。
澱粉酶水解澱粉生成的麥芽糖,可用3,5–二硝基水楊酸試劑測定。由於麥芽糖能將後者還原生成3–氨基–5–硝基水楊酸的顯色基團,在一定范圍內其顏色的深淺與糖的濃度成正比,故可求出麥芽糖的含量。以單位重量樣品在一定時間內生成的麥芽糖的量表示酶活力。

㈢ 怎樣測定果實中的澱粉

答:澱粉是光合作用形成的單糖縮合而成的一種產物,在果實發育中,葉子所製造的碳水化合物運入果實,以澱粉的形式貯藏起來。澱粉在果實中還可通過澱粉酶水解成糖,這個作用是一個可逆反應。在果實發育的初期,果實中的積累大於消耗,因此澱粉含量不斷增長,直至呼吸躍變期後澱粉加速糖化,分解大於積累,澱粉含量逐漸減少。因此果實澱粉含量在一定程度上與果實的成熟度有關。
(1)方法原理
澱粉遇碘可生成藍色絡合物,在一定濃度范圍內,藍色的深淺與澱粉的含量成正比。用高氯酸作提取劑,顯色後在分光光度計上測定其吸光度,同時用蘋果純澱粉作為標准進行比較。
(2)試劑配製
①0.01摩爾/升碘酸鉀溶液:稱取在105℃下烘過2小時的碘酸鉀(KIO3)3.567克溶於水,洗入1000毫升容量瓶中加水至刻度,此為0.1摩爾/升碘酸鉀溶液。吸取10毫升放入100毫升的容量瓶中,加水至刻度即為0.01摩爾/升碘酸鉀溶液。
②9.2摩爾/升高氯酸溶液:即60%的HClO4。
③5%碘化鉀溶液:5克 KI溶於100毫升水中。
④硫代硫酸鈉溶液:4克 Na2S2O3·5H2O溶於100毫升水中。
⑤蘋果純澱粉:將未成熟的元帥蘋果洗凈擦乾,在菜擦子上擦碎加去離子水少許,用紗布過慮,再用水洗殘渣一次,將濾液合並,放在大燒杯中靜置過夜。次日澱粉即沉於杯底,小心棄去上層混濁液,再加水攪勻,如此傾洗多次,直至可溶性糖及其他雜物均被洗出。澄清後傾出上層水液。為除去其中的蛋白質,加入10%的氯化鈉溶液,放置2小時,傾去上層清夜,用去離子水洗沉澱直至無氯離子。用82%乙醇洗滌數次,最後用乙醚抽洗幾次,此時,澱粉為純白色,干後可作為標准澱粉用。
(3)儀器設備
高速組織搗碎機、萬分之一天平、百分之一天平等。
(4)測定步驟
將蘋果去皮,從萼凹到果頂方向,對角線取兩個碶形小塊,粗粗切碎。稱取100克加水100毫升,立即放在高速組織搗碎機上搗碎3分鍾。再取漿狀物10.00克(相當於樣品5克)邊搖邊用吸管加入9.2摩爾/升高氯酸20毫升,放置10分鍾。然後洗入100毫升容量瓶中,加水定容搖勻。用漏斗通過玻璃棉過慮,吸出一定量(視澱粉多少而定,一般為1~4毫升)放入另一100毫升容量瓶中加水至4毫升,加碘化鉀1毫升,搖勻,再加0.01摩爾/升碘化鉀液,搖勻,放置5分鍾。在分光光度計上620毫微米波長下比色。
因為藍色溶液中含有澱粉的膠體顆粒,所以每個有色溶液都要用它自己的褪色溶液作為空白。作法是將藍色溶液加兩滴硫代硫酸鈉溶液使藍色褪去,倒入另一比色杯中作為空白。
標准曲線的繪制:稱取蘋果純澱粉0.1000克,加水9毫升,搖勻,再加9.2摩爾/升高氯酸20毫升,邊加邊搖,放置10分鍾,洗入100毫升容量瓶中,加水至刻度搖勻。吸取0、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0毫升分別放入100毫升容量瓶中,相應加水至4毫升,各加5%碘化鉀溶液1毫升,搖勻,再加0.01摩爾/升碘酸鉀溶液1毫升,再搖勻,放置5分鍾,用水稀釋至100毫升。這時100毫升中含澱粉0、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0毫克,照上法在分光光度計上測定其吸光度,將濃度作橫坐標,吸光度作縱坐標,做標准曲線。
(5)結果計算
澱粉(%)(以鮮重為基礎)=查表毫克數×V×100/W×V1×10 000
式中:V——樣品稀釋體積(毫升);
V1——吸取濾液體積(毫升);
W——樣品鮮重(克)。
(6)注意事項
①澱粉有直鏈澱粉和支鏈澱粉兩種。不同樹種、品種,這兩種澱粉的比例不同,因此,據實踐證明,用蘋果提純的澱粉作為測定果實中澱粉的標准效果較好。
②加高氯酸溶液時,邊加邊搖,以免局部酸度過大。最後應將沿邊的果汁沖下去,這時酸的濃度約為6.2摩爾/升,並嚴格控制浸出時間。
③加碘化鉀和碘酸鉀液時體積要准確,否則會影響顯色的深淺。
④如果沒有高速組織搗碎機,可用菜擦子擦碎果肉,迅速用研缽磨成糊狀,稱取5克樣品,加入9.2摩爾/升高氯酸液20毫升,放置10分鍾,用水洗入100毫升容量瓶中,加水定容,過濾後按上法進行。
標准澱粉0.1000克,加水4毫升,加9.2摩爾/升高氯酸液20毫升,放置10分鍾,然後按上法進行,畫出標准曲線。

㈣ 檢驗澱粉的方法及現象

方法有二:
1.
用食鹽,方法如下:
將食鹽在炒鍋里加熱一段時間,之後取出待用,向待檢驗的水中加醋(最好是白醋或醋精),再加少許未加熱的鹽,攪拌之後加入加熱炒過的鹽,如果混合液變藍則說明水中有澱粉.(注:食鹽要加碘的)
2.
利用丁達爾現象:
將待測液裝入透明玻璃杯,置於較黑暗處,用手電筒(光柱控制在直徑2-3厘米,用白紙裹上)從側面照射杯中液體,如果看到光柱(光柱中有小顆粒),則說明有澱粉.(因為澱粉溶在水裡會形成膠體)

㈤ 澱粉的國標測定方法

生化需氧量(biochemical
oxygen
demand
)簡稱bod。是表示水中有機物等需氧污染物質含量的一項綜合指標。它說明水中有機物處於微生物的生化作用進行氧化分解,使之無機化或氣體化時所消耗水中溶解氧的總數量,其單位以ppm(毫克/升)表示。
bod一般指的是微生物可降解的有機物的量,即廢水中可降解有機物的量。
bod的測定方法包括:
1.標准稀釋法
這種方法是最經典的也是最常用的方法。簡單的說,就是測定在20±1℃溫度下培養五天前後溶液中的溶氧量的差值。求出來的bod值稱為「五日生化需氧量(bod5)」。
2.生物感測器法
其原理是以一定的流量使水樣及空氣進入流通量池中與微生物感測器接觸,水樣中溶解性可升華降解的有機物受菌膜的擴散速度達到恆定時,擴散到氧電極表面上的氧質量也達到恆定並且產生一恆定電流,由於該電流與水樣中可生化降解的有機物的差值與氧的減少量有定量關系,據此可算出水樣的生化需氧量。通常用bod5標准樣品對比,以換算出水樣的bod5的值。
3.活性污泥曝氣降解法
控制溫度為30℃-35℃,利用活性污泥強制曝氣降解樣品2小時,經重鉻酸鉀消解生物降解後的樣品,測定生物降解前後的化學計量需氧量,其差值即為bod。根據與標准方法的對比實驗結果,可換算成為bod5值。
4.測壓法
在密閉的培養瓶中,水樣中溶解氧被微生物消耗,微生物因呼吸作用產生與耗氧量相當的co2,當co2被吸收後使密閉系統的壓力降低,根據壓力測得的壓降可求出水樣的bod值。

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