植物基因功能研究方法

Ⅰ 植物轉基因技術有哪些

農桿菌介導法、DNA直接插入法、花粉管通道法和植物病毒介導法。

農桿菌介導法就是指利用農桿菌轉化受體細胞，將目標基因插入受體細胞基因組的轉化技術。該方法是目前研究最多，機理最清楚，應用最為廣泛和成熟的植物轉基因技術。DNA直接插入法是指不需要藉助質粒載體的轉化而實現外源目標基因插入的方法。

(1)植物基因功能研究方法擴展閱讀：

植物轉基因技術注意事項：

用戶需要注意對於功能基因組的研究和分子育種，由於不需要植物組織培養、苄基腺嘌呤激素和pH值調節等，因此花序浸潤法具有簡單、快速、高效和實用等特點。隨著該方法的進一步完善，它在植物基因工程及其衍生領域中將表現出更大的潛力。

同時對於難以採用組織培養途徑進行離體轉化的物種，凡是開花期比較集中或去掉主薹後能集中抽發側薹而開花，並且種子量較大，都可以嘗試這種方法進行轉基因。

Ⅱ 怎樣探索一些與發育相關的基因如何進一步驗證其功能

探索驗證與發育相關的基因，比方說，控制開花的基因我們假設是一個。
1、用某種方法把它敲除，即基因敲除，植物不開花了，那我們就可以說，這是控制開花的基因；
2、用反義RNA進行抑制，基因不表達了，也可以確定；
3、把這個基因克隆出來，轉到另外一種生物上面，這種轉基因生物能開花了，呵呵，就可以驗證了。

很簡單吧？其實很難，確定一個基因要好多年。。。

Ⅲ 研究植物基因表達的組織特異性的方法有哪些多多益善

研究植物基因表達的組織特異性的方法有哪些多多益善
從DNA到蛋白質的過程叫基因表達(gene expression)，對這個過程的調節即為基因表達調控(regulation of gene expression or gene control)。 基因調控是現代分子生物學研究的中心課題之一。因為要了解動植物生長發育規律。形態結構特徵及生物學功能，就必須搞清楚基因表達調控的時間和空間概念，掌握了基因調控機制，就等於掌握了一把揭示生物學奧秘的鑰匙。基因表達調控主要表現在以下幾個方面：①轉錄水平上的調控；②mRNA加工、成熟水平上的調控；③翻譯水平上的調控； 基因表達調控的指揮系統有很多種，不同生物使用不同的信號來指揮基因調控。原核生物和真核生物之間存在著相當大差異。原核生物中，營養狀況、環境因素對基因表達起著十分重要的作用；而真核生物尤其是高等真核生物中，激素水平、發育階段等是基因表達調控的主要手段，營養和環境因素的影響則為次要因素。

Ⅳ 研究基因功能的方法和原理

基因轉導、反義技術、轉基因和基因剔除、染色體轉導、RNA干涉等是目前研究基因功能的主要方法。

Ⅳ 試述一個基因的分子生物學的研究方法

額，這個題目好大，我從植物基因組的研究隨便說下。
一般來說，一個基因的研究涉及到基因的定位以及功能驗證，至於機理和其他研究則不在討論范圍內。
基因的定位：一般來說，首先植物通過雜交來構建定位群體，這其中包括初級定位群體和精細定位群體。初級定位群體一般是F2群體，精細定位群體一般是近等基因系還有染色體片段代換系。通過分子標記，可將基因定位在染色體上的某個區域。這時候又有幾種方法。一般來說，如果能直接定位的話當然最好，但是如果標記定位區域有幾個開放閱讀框，即所謂的候選基因，則需要克隆這幾個基因，然後通過轉基因將這些候選基因分別轉到野生型植株體內，觀察基因的表達的變化，從而確定到底是哪個基因。
然後就是功能驗證，一般就是轉基因，如果是隱性基因的話，會選擇用RNA干涉或者其他方法敲除掉這個基因的顯性基因來驗證功能。
說的很粗略，大概就是這么個意思，因為涉及到很多知識，要詳細說起來的話上萬字也不一定說的完，而且有的我也不是很清楚，處於學習過程中。

Ⅵ 植物定量抗病性狀的遺傳的基本分析方法是什麼

經典的數量遺傳學把控制數量性狀的基因作為一個整體來研究，認為數量性狀是由許多作用相等的微效基因共同影響的。進行數量遺傳學分析，要選取表型對立的親本雜交，建立適宜的子代實驗群體，觀測群體性狀的表型分布，個體或品系間表型的相關，利用統計分析方法，將所得觀測結果配合群體均值、方差、協方差的理論模型，估算基因數目，計算遺傳力，描述與數量表型相關基因的特徵，諸如加性效應、顯性效應、上位效應、基因型與環境互作效應等。

用於遺傳分析的定量抗病性指標很多，諸如病害潛伏期、病斑長度、病斑數量、病原菌繁殖量、發病率、發病嚴重度、病害發展曲線下面積（，AUDPC），等等。這些指標都具有數量性狀的一般特點，其變異是連續的，在雜種一代往往表現出兩親本的中間類型，無顯性和表現部分顯性，有時還會出現超親分離，表現雜種優勢。定量抗病性的性狀易受環境條件的影響，在子二代既有基因型分離的差異，又有環境引起的表型變異。控制定量抗病性狀的基因數目多，單個基因效應小，但其作用是可以累加的。經典數量遺傳學並不企圖認知單個的基因，而是用統計的方法從基因的總效應上進行分析。

不同的定量抗病性指標，遺傳基礎可能不同。因而同一個品種對同一種病害的定量抗病性，因選用的指標不同，遺傳分析的結果也不相同。在進行定量抗病性遺傳分析時，應選擇病理學意義明確、差異明顯而穩定、易於定量觀測和統計分析的性狀。國內一些研究單位習慣選用病情指數作為定量指標，並不合理。病情指數是一個綜合指標，其兩個組分，即發病率與嚴重度，不論病理學意義和遺傳基礎都不相同。即使病情指數相同，由於兩者的貢獻率不同，也並不是等值的。定量抗病性的表達，不僅取決於寄主基因型和環境條件，也取決於病原菌。分析定量抗病性遺傳仍要提倡選用純凈的菌種接種致病。依靠自然發病或使用混雜的菌種接種，因缺乏可靠而均一的致病性，或者由於菌量偏低、菌種的適合度偏低等原因，而難以揭示發病程度的遺傳差異。寄主的生理狀態和發育階段對發病程度有明顯影響，必須選擇適當的接種時間和接種方法。對於定量抗病性，品種與病原菌菌系之間沒有顯著的互作，如果發現顯著的互作，就要檢查是否受到定性抗病性的干擾。

抗病性的定量性狀對環境高度敏感，在進行遺傳分析時，必須保持環境要素穩定並適於發病。環境不適宜，品種在一個地方表現抗病，而在另一個地方就可能表現感病。環境敏感性狀難以准確測度，往往低估抗病性狀的遺傳率。

Ⅶ 轉基因植物有哪些分析鑒定方法

分析、確定了75個品種的轉基因構建成分,為開展轉基因檢測奠定了基礎。

2、不同類型的植物提取基因組DNA的方法略有差異,該研究優化了CTAB、SDS快速提取法,並選擇了磁珠吸附試劑盒法,成功提取了適合於PCR反應的植物基因組DNA。

3、以植物內源基因18SrRNA為靶標,設計、優化後篩選出特異性引物和探針,建立了以18SrRNA為目標的檢測植物基因組DNA提取質量的PCR與熒光PCR鑒定體系。

4、首次以CaMV35S、FMV啟動子、NOS終止子、標記基因NPTII、抗除草劑基因EPSPS、PAT、抗蟲基因CryIAb為檢測目標,設計、篩選出特異性引物,優化實驗參數,建立了轉基因植物PCR定性檢測方法體系,靈敏度達0。

1﹪。

5、克隆了CaMV35S、FMV啟動子、NOS終止子、標記基因NPTII、抗除草劑基因EPSPS、PAT、抗蟲基因CryIAb的陽性質粒作為轉基因植物檢測的陽性對照。

6、於反應體系中引入UNG酶,建立了無污染的熒光PCR擴增體系。

7、首次以FAM熒光素標記探針5端作為發光基團,以TARMA標記探針3端為淬滅基團,以CaMV35S、FMV啟動子、NOS終止子、標記基因NPTII、抗除草劑基因EPSPS、PAT、抗蟲基因CryIAb為檢測目標,設計、篩選出特異性引物和探針,優化實驗參數,建立了轉基因植物通用性熒光PCR定性檢測方法體系。

8、以FAM和TET兩種熒光素標記外源基因和內源基因,建立了轉基因大豆抗除草劑基因EPSPS和轉基因玉米抗蟲基因CryIAb的熒光PCR定量檢測體系,兩體系的靈敏度均達到0。

1﹪以上。

9、首次利用反向PCR技術擴增出華番1號基因組未知DNA序列,並通過DNA測序,利用BLAST軟體進行同源性比較,找出載體與基因組整合位點DNA序列。

10、利用熒光PCR技術,設計出特異性引物與探針,優化實驗參數,建立了一種靈敏、精確、定量和鑒定華番1號品種特異性的高效檢測體系。

這在國內為首次利用整合位點進行轉基因植物檢測和品種特異性鑒定的方法……