熒光分析測定方法

1. 如何利用熒光分析法測定溶液中鋁離子的含量

在適宜酸度下，鋁離子能與8-羥基喹啉反應生成穩定的8-羥基喹啉鋁配位化合物，該配位化合物用氯仿萃取後，其萃取液在365nm紫外光照射下，會產生熒光，熒光峰值位於530nm處，以此可建立鋁離子含量的熒光測定方法。在0.002~0.24
μg·mL-1Al的范圍內，熒光強度與Al的濃度成線性關系。

2. 熒光檢測方法

熒光檢測是一種自然發光反應，通過熒光素酶與 ATP進行反應，可檢測人體細胞、細菌、黴菌、食物殘渣，在15秒鍾內得到反應結果。光照度通過專用設備進行測量，並以數字形式予以表示，在1975年首先被應用到食品工業中，在1985年在化妝品製造業中得到應用。
熒光定量：採用國際主流的熒光定量PCR技術，迅速提升技術水平。
結果穩定：檢測結果CV值與進口全自動PCR儀接近，具有自檢功能，避免錯誤數據的輸出。
封閉操作：全部檢測過程均為閉管操作，於反應管處檢測熒光，有效防止污染，解決PCR技術中最棘手之難題。
准確定量：滿足臨床對量化的需求，定量盪圍寬，可涵蓋大部分病原微生物，自動曲線擬合。
靈敏度高：利用光譜信號靈敏性的優勢，有效提高檢測靈敏度。
安全：全程無毒檢測。
操作簡便：省去後處理的煩瑣過程。
直接列印：直接列印結果，無須記錄大量數據。
升級版：FS1000有與電腦連接的數傳輸口，可以連接電腦，根據用戶需要提供先進分析軟體，全面分析實驗數據。（電腦和列印機選配件）
故障率低：維護非常簡單。
節約資源：可利用現用PCR擴增儀，最大限度節約資源。

3. 液體激光熒光光譜法

方法提要

直接向水樣中加入熒光增強劑，使之與水樣中鈾醯離子生成一種簡單的配合物，在激光(波長337nm)輻射激發下產生熒光。採用標准鈾加入法定量測定鈾。

測定范圍為0.02～20μg/L。

水樣中常見干擾離子的含量為:Mn²⁺1.5mg/L，Fe³⁺鐵6mg/L，Cr⁶⁺6mg/L，腐握旅升殖酸3mg/L。

儀器和裝置

鈾分析儀 最低檢出限0.05μg/L。

微量注射器 50μL或0.1mL玻璃移液管。

試劑

熒光增強劑 熒光增鎮渣強倍數不小於100倍。

鈾標准儲備溶液ρ (U)=1.00mg/mL配製同83.5.1。

鈾標准溶液 用pH2的HNO₃酸化水將鈾標准儲備溶液逐級稀釋，配製為ρ(U)=10.0μg/mL，0.500μg/mL和0.100μg/mL的鈾標准溶液。

分析步驟

取5.00mLpH為3.0～11.0的被測水樣(如鈾含量較高，可用水適當稀釋)於石英比色皿內段老，調節補償器旋鈕直至表頭指示為零(不為零時，可記錄讀數N₀)，加入0.5mL熒光增強劑，充分混勻，測定熒光強度為N₁，再加入0.050mL0.100μg/mL鈾標准溶液(高檔測量應加入0.050mL0.500μg/mL鈾標准溶液)，充分混勻，測定熒光強度為N₂。

按下式計算水樣中鈾的含量:

岩石礦物分析第四分冊資源與環境調查分析技術

式中:ρ(U)為水樣中鈾的質量濃度，μg/L;N₀為水樣未加熒光增強劑前的熒光強度;N₁為加熒光增強劑後水樣的熒光強度;N₂為樣品加標准鈾後的熒光強度;ρ₁為加入標准鈾溶液的濃度，μg/mL;V₁為加入標准鈾溶液的體積，mL;V為分析用水樣的體積，mL;K為水樣稀釋倍數;R為全程回收率，%。

注意事項

液體激光熒光法中，當加入熒光增強劑進行水樣測量時，如試樣產生沉澱，必須將被測試樣經稀釋或其他方法處理，不再產生沉澱後，方可進行測量。

4. 分子熒光分光光度法

分子熒光分光光度法是根據物質的熒光譜線位置及其強度進行物質鑒定和含量測定的方法。

由於不同的物質其組成與結構不同，所吸收的紫外-可見光波長和發射光的波長也不同，同一種物質應具有相同的激發光譜和熒光光譜，將未知物的激發光譜和熒光光譜圖的形狀、位置與標准物質的光譜圖進行比較，即可對其進行定性分析。

熒光分光光度計是最常見的實驗儀器，主要用於對經光源激發後產生熒光的物質或經化學處理後產生熒光的物質成份分析。在檢測食品安全、自然環境污染等重要的人類課題上，發揮積極的作用。

熒光分光光度計是用於掃描液相熒游標記物所發出的熒光光譜的一種儀器，有濾光片熒光計、濾光片-單色器熒光計等，通常均由以下四個部分組成：激發光源、用於選擇激發光波長和熒光波長的單色器、樣品池及測量熒光的檢測器。

5. 熒光分析法的特點

熒光分析是一種先進的分析方法，它比電子探針法、質譜法、光譜法、極譜法等都應用的較廣泛和普及，這同熒光分析具有很多優點分不開的。熒光分析所用的設備較簡單，如目測熒光儀和熒光光度計構造非常簡單完全可以自己製造。比起質譜儀、極譜儀和電子探針儀來它在造價上要便宜很多倍，而且熒光分析的最大特點是：分析靈敏度高、選擇性強和使用簡便。同時具備這三大特點的儀器並不多 。 在紫外線照射下能直接發射熒光的化學元素並不很多，所以對一些元素進行熒光分析時大部分採用間接測定法，這就是用有機試劑與被測定的元素組成絡合物。這些絡合物在紫外線照射下能發射出不同波長的熒光素，然後由熒光強度測定出該元素的含量。由於有機熒光試劑的品種繁多，用熒光分析可測定的元素有六十多種 。
例如對鉛的熒光分析：鉛離子Pb與Cl離子組成鉛氯絡合物，該絡合物在短波紫外光270毫微米激發下，它會發射出藍色熒光，熒光峰值波長在480毫微米，根據熒光強度在標准工作曲線上測定出Pb的含量。該法能測定0.1~0.6微克鉛/毫升。