紫外可見光定量分析方法

1. 紫外可見分光光度法是什麼

紫外可見分光光度法：是根據物質分子對波長為200-760nm這一范圍的電磁波的吸收特性所建立輪宴起來的一種定性、定量和結構分析方法。

紫外可見分光光度法從問世以來，在應用方面有了很大的發展，尤其是在相關學科發展的基礎上，促使分光光度計儀器的不斷創新，功能更臘配銀加齊全，使得光度法的應用更拓寬了范圍。

分光光度計的主要部件

1、光源：發出所需波長范圍內的連續光譜，有足夠的光強度，穩定。可見光區：鎢燈，碘鎢燈（320-2500nm)，紫外區：氫燈，氛燈（180-375nm)氬燈：紫外、可見光區均可用作光源。

2、單色器：將光源發出的連續光譜分解為單色光的裝置。

3、棱鏡：依據不同波長光通過棱鏡時折射率不同，光柵：在鍍鋁的玻璃表面刻有數量很大的等寬度等間距條痕。利用光通過光柵時發生衍射和干涉現象而分光。

4、吸收池：用於盛待測及參比溶液，可見光區∶光學玻璃池；紫外區賣虛：石英池。

5、檢測器：利用光電效應，將光能轉換成電流訊號，光電池，光電管，光電倍增管。

6、檢流計：刻度顯示或數字顯示、自動掃描記錄。

2. 紫外可見分光光度計定量分析的原理和方法是怎樣的

分光光度計的基本原理是溶液中的物質在光的照射下，產生了對光吸收的效應，物質對光的吸收是具有選擇性的。各種不同的物質都具有其各自的吸收光譜，因此當某單色光通過溶液時，其能量就會被吸收而減弱，光能量減弱的程度和物質的濃度有一定的比例關系，也即符合比色原理——比耳定律

3. 紫外可見分光光度法是什麼

紫外-可見光光譜（Ultraviolet–visible spectros，UV-Vis），又稱紫外-可見分子吸收光譜法，是以紫外線-可見光區域電磁波連續光譜作為光源照射樣品，研究物質分子對光吸收的相對強度的方法。

通過分子紫外-可見分子吸收光譜法的分析可以進行定性分析，並可依據朗伯-比爾定律進行定量分析。

當光的波長減小到一定數值時，溶劑對它產生強烈的吸收，即「端吸收」，樣品測試就在「端吸收」的透明界限之內。

光具有與其波長成反比的一定量的能量。因此，較短波長的光攜帶更多的能量，而較長波長的光攜帶較少的能量。需要特定數量的能量來將物質中的電子提升到更高的能量狀態，我們可以將其檢測為吸收。

物質中不同鍵合環境中的電子需要不同的特定能量來促使電子達到更高的能量狀態。這就是為什麼在不同物質中對不同波長會發生光吸收的原因。人類能夠看到一系列可見光，從大約 380 nm（我們看到的紫色）到 780 nm（我們看到的紅色）。

1紫外光的波長比可見光短，約為 100 nm。因此，光可以通過其波長來描述，這在 UV-Vis 光譜中可用於通過定位與最大吸光度相對應的特定波長來分析或識別不同的物質（參見 UV-Vis 光譜的應用部分）。

對溶劑要求

含有雜原子的有機溶劑，通常均具有很強的末端吸收。因此，當作溶劑使用時，它們的使用范圍均不能小於截止使用波長。例如甲醇、乙醇的截止使用波長為205nm 。另外，當溶劑不純時，也可能增加干擾吸收。

因此，在測定供試品前，應先檢查所用的溶劑在供試品所用的波長附近是否符合要求，即將溶劑置1cm石英吸收池中，以空氣為空白（即空白光路中不置任何物質）測定其吸光度。

溶劑和吸收池的吸光度，在220～240nm 范圍內不得超過0.40，在241～250nm范圍內不得超過0.20，在251～300nm范圍內不得超過0.10，在300nm以上時不得超過0.05。

4. 紫外吸收光譜分析法的定性和定量分析的依據是什麼

物質吸收波長范圍在200～760nm區間的電磁輻射能而產生的分子吸收光譜稱為該物質的紫外可見吸收光譜，利用紫外可見吸收光譜進行物質的定性、定量分析的方法稱為紫外可見分光光度法。其光譜是由於分子之中價電子的躍進而產生的，因此這種吸收光譜決定於分子中價電子的分布和結合情況。

其在飼料加工分析領域應用相當廣泛，特別是在測定飼料中的鉛、鐵、鉛、銅、鋅等離子的含量中的應用。熒光分析也是近年來發展迅速的痕量分析方法，該方法操作簡單、快速、靈敏度高、精密度和准確度好，並且線形范圍寬，檢出限低。

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紫外光譜

准確測定有機化合物的分子結構，對從分子水平去認識物質世界，推動近代有機化學的發展是十分重要的。採用現代儀器分析方法，可以快速、准確地測定有機化合物的分子結構。在有機化學中應用最廣泛的測定分子結構的方法是四大光譜法：紫外光譜、紅外光譜、核磁共振和質譜。紫外和可見光譜，簡寫為UV。

5. 紫外_可見分光光度法，用吸收系數法定量，公式是什麼

一、原理可見光、紫外線照射某些物質，主要是由於物質分子中價電子能級躍遷對輻射的吸收，而產生化合物的可見紫外吸收光譜。基於物質對光的選擇性吸收的特性而建立分光光度法或稱吸收光譜法的分析方法。它是以朗伯──比耳定律為基礎。1朗伯—比耳定律A=lg—-=ECLT式中A為吸收度；T為透光率；E為吸收系數，採用的表示方法是（E1％1cm），其物理意義為當溶液濃度為1%（g/ml），液層厚度為1cm時的吸收度數值；C為100ml溶液中所含被測物質的重量（按乾燥品或無水物計算），g；L為液層厚度，cm。二、使用范圍凡具有芳香環或共軛雙鍵結構的有機化合物，根據在特定吸收波長處所測得的吸收度，可用於葯品的鑒別、純度檢查及含量測定。三、儀器可見-紫外分光光度計。其應用波長范圍為200～400nm的紫外光區、400～850nm的可見光區。主要由輻射源（光源）、色散系統、檢測系統、吸收池、數據處理機、自動記錄器及顯示器等部件組成。本儀器是根據相對測量的原理工作的，即先選定某一溶劑（或空氣、試樣）作為標准（空白或稱參比）溶液，並認為它的透光率為100％（或吸收度為0），而被測的試樣透光率（或吸收度）是相對於標准溶液而言，實際上就是由出射狹縫射出的單色光，分別通過被測試樣和標准溶液，這兩個光能量之比值，就是在一定波長下對於被測試樣的透光率（或吸收度）。本儀器可精密測定具有芳香環或共軛雙鍵結構的有機化合物、有色物質或在適當條件下能與某些試劑作用生成有色物的物質。使用前應校正測定波長並按儀器說明書進行操作。四、儀器的校正1.波長的准確度試驗以儀器顯示的波長數值與單色光的實際波長值之間誤差表示，應在±1.0nm范圍內。可用儀器中氘燈的486.02nm與656.10nm譜線進行校正。2.吸收度的准確度試驗3.雜散光的試驗4.波長重現性試驗5.解析度試驗五、測定方法1.對照品比較法（1）按各品種項下的方法，分別配製供試品溶液和對照品溶液，對照品溶液中所含被測成分的量應為供試品溶液中被測成分標示量的100±10%，所用溶劑也應完全一致，在規定的波長測定供試品溶液和對照品溶液的吸收度後，按下式計算含量，即得。（2）計算式A樣×G對/稀釋倍數×100×1含量（%）=————————————--×100%A對×G樣/稀釋倍數×100×12.吸收系數法（1）按各品種項下的方法配製供試品溶液，在規定的波長處測定其吸收度，再以該品種在規定條件下的吸收系數計算含量。用本法測定時，應注意儀器的校正和檢定。（2）計算式A樣含量（%）=——————————————-×100%G樣/稀釋倍數×(E1％1cm)對×100×13.計算分光光度法採用計算分光光度法應慎重。本法有多種，使用時均應按各品種項下規定的方法進行。當吸收度處在吸收曲線的陡然上升或下降的部位測定時，波長的微小變化可能對測定結果造成顯著影響，故對照品和供試品測試條件應盡可能一致。若測定時不用對照品，如維生素A測定法，則應在測定時對儀器作仔細的校正和檢定。六、注意事項1.空白溶液與供試品溶液必須澄清，不得有渾濁。如有渾濁，應預先過濾，並棄去初濾液。2.測定時，除另有規定外，應以配製供試品溶液的同瓶溶劑為空白對照，採用1cm的石英吸收池。3.在規定的吸收峰波長±2nm以內測試幾個點的吸收度，以核對供試品的吸收峰波長位置是否正確，除另有規定外，吸收峰波長應在該品種項下規定的波長±2nm以內；否則應考慮該試樣的真偽、純度以及儀器波長的准確度，並以吸收度最大的波長作為測定波長。4.一般供試品溶液的吸收度讀數，以在0.3～0.7之間的誤差較小。5.吸收池應選擇配對，否則要引入測定誤差。

6. 採用紫外光譜法對多組分同時進行定量分析還有哪些方法

還有雙波長等吸收法。

測定物質分子在紫外光區吸收光譜的分析方法。紫外吸收光譜是物質吸收紫外光後，其價電子從低能級向高能級躍遷，產生吸收峰形成的。但是，並非所有的有機物質在紫外光區都有吸收，只有那些具有共軛雙鍵（π鍵）的化合物，其π電子易於被激發發生躍遷，在紫外光區形成特徵性的吸收峰。一般來講，飽和的烷烴類在紫外光區沒有吸收峰，芳香烴中的π鍵構成的環狀共軛體系約在波長為200～300納米的區間有吸收峰，而且芳核環數越多，吸收峰的波長也越長。例如，兩環芳烴的吸收峰在230納米；三環以上的芳烴吸收峰在260納米；五環芳烴茈的特徵性吸收峰在248納米；卟啉類化合物具有典型的吸收帶：釩卟啉的最大吸收峰在410、574、535納米，鎳卟啉在395、554、516納米。因此，根據紫外吸收光譜可以檢測芳烴、非烴化合物，並應用於有關的地質研究。

7. 紫外可見分光光度法的定性,定量分析的依據是什麼

1，定性分析的依據：紫外光波長具有一定的范圍，不同的物質最大吸收波長不一樣，比如甲物質在紫外的a和b波長處有吸收現象，而且在a處達到最大吸收，則甲物質的紫外最大吸收波長是a。不同的物質的這種波長不一樣。

2，定量分析依據：根據朗伯-比爾定律，物質濃度和吸收波長的強度成正比關系。

紫外-可見分光光度法是在190～800nm波長范圍內測定物質的吸光度，用於鑒別、雜質檢查和定量測定的方法。

當光穿過被測物質溶液時，物質對光的吸收程度隨光的波長不同而變化。因此，通過測定物質在不同波長處的吸光度，並繪制其吸光度與波長的關系圖即得被測物質的吸收光譜。

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紫外分光光度計注意事項：

1，開機前將樣品室內的乾燥劑取出，儀器自檢過程中禁止打開樣品室蓋。

2，比色皿內溶液以皿高的2/3～4/5為宜，不可過滿以防液體溢出腐蝕儀器。測定時應保持比色皿清潔，池壁上液滴應用擦鏡紙擦乾，切勿用手捏透光面。測定紫外波長時，需選用石英比色皿。

3，測定時，禁止將試劑或液體物質放在儀器的表面上，如有溶液溢出或其它原因將樣品槽弄臟，要盡可能及時清理干凈。

4，實驗結束後將比色皿中的溶液倒盡，然後用蒸餾水或有機溶劑沖洗比色皿至干凈，倒立晾乾。關電源將乾燥劑放入樣品室內，蓋上防塵罩，做好使用登記，得到管理老師認可方可離開。