1. 影響熒光分光光度法定量測定的主要因素有哪些
影響熒光分光光度法定量測定的主要因素
1.激發光照射
有一些熒光物質若受到強光照射,會發生分解而導致F↓。所以,熒光分光光度計通常在激發光單色器後裝配有光閘,在測定時才打開光閘讓激發光照射樣品池。
2.溫度
溫度↑,熒光效率下降,F↓。因為,溫度↑,增加分子間碰撞機會而使能量消耗掉。
3.pH值
pH值能改變某些熒光物質的電子構型從而影響熒光強度。
4.溶劑
有些溶劑會使熒光效率下降,也可能帶來干擾熒光。
2. 關於熒光分析的問題,急!!!!!!!!!
一般來說,化學分析法比熒光分析法更為准確。 但是熒光分析以其不需要復雜的制樣過程,分析時間短,可實現多種元素同時無損檢測等特點得到越來越廣泛地應用。
提高熒光分析法准確度的方法如下:
(1)溶劑:溶劑能影響熒光效率,改變熒光強度,因此,在測定時必須用同一溶劑。
(2)濃度:在較濃的溶液中,熒光強度並不隨溶液濃度呈正比增長。因此,必須找出與熒光強度呈線性的濃度范圍。
(3)酸度:熒光光譜和熒光效率常與溶液的酸度有關,因此,須通過條件試驗,確定最適宜的pH值范圍。
(4)溫度:熒光強度一般隨溫度降低而提高,因此,有些熒光儀的液槽配有低溫裝置,使熒光強度增大,以提高測定的靈敏度。在高級的熒光儀中,液槽四周有冷凝水並附有恆溫裝置,以便使溶液的溫度在測定過程中盡可能保持恆定。
(5)時間:有些熒光化合物需要一定時間才能形成;有些熒光物質在激發光較長時間照射下會發生光分解。因此,過早或過晚測定熒光強度均會帶來誤差。必須通過條件試驗確定最適宜的測定時間,使熒光強度達到量大且穩定。為了避免光分解所引起的誤差,應在熒光測定的短時間內才打開光閘其餘時間均應關閉。
(6)共存干擾物質 有些干擾物質能與熒光分子作用使熒光強度顯著下降,這種現象稱為熒光的猝滅(quenching);有些共存物質能產生熒光或產生散射光,也會影響熒光的正確測量。故應設法除去干擾物,並使用純度較高的溶劑和試劑。