⑴ 酶解分離原生質體有哪些常用的方法
分離常用方法:分離原生質體時,首先要使酶制劑大量吸附到細胞壁上去。
因此,一般先將材料分離成單細胞,然後分解細胞壁。採用將酶液減壓滲入組織,或將組織切成薄片等方法,都可增加酶液與纖維素分子接觸的機會。用酶法分離原生質體可以採用以下兩種不同的方法路線。兩步法或順序法:首先用離析酶或果膠酶處理組織使胞間層降解,把細胞分開再用纖維素酶處理這些游離的細胞,使原生質體釋放出來。
一步法或同時法:即把一定量的纖維素酶、果膠酶和半纖維素酶組成混合酶溶液,將材料置於其中處理,一次即可得到分離的原生質體。因為一步法方便省力,因此很常用。