常用分析方法hplc

⑴ HPLC法中定量分析方法大致有哪幾種

氣相色譜定量檢測一般就兩種，一個是外標法，一個是標法，對於沒有標准物質的，就只能靠容面積歸一法粗略定量。

通過對人類和環境有影響的各種物質的含量、排放量的檢測，跟蹤環境質量的變化，確定環境質量水平，為環境管理、污染治理等工作提供基礎和保證。簡單地說，了解環境水平，進行環境監測，是開展一切環境工作的前提。

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HPLC根據固定相和流動相的成分分為正相色譜和反向色譜。

正相色譜法

採用極性固定相（如聚乙二醇、氨基與腈基鍵合相）；流動相為相對非極性的疏水性溶劑（烷烴類如正已烷、環已烷），常加入乙醇、異丙醇、四氫呋喃、三氯甲烷等以調節組分的保留時間。常用於分離中等極性和極性較強的化合物（如酚類、胺類、羰基類及氨基酸類等）。

⑵ HPLC原理及基本操作是什麼

原理

高效液相色譜法儀根據各種各樣的相互作用力來分離混合物。這種相互作用力通常是分析物及分析管柱之間的一種非共價性質。

使用高效液相色譜時，液體待檢測物在不同的時間被注入色譜柱，通過壓力在固定相中移動，由於被測物中不同物質與固定相的相互作用不同，不同的物質順序離開色譜柱，通過檢測器得到不同的峰信號，每個峰頂都代表一個另外化合物的種類，最後通過分析比對這些信號來判斷待測物所含有的物質。

以液體為流動相而設計的色譜分析儀器稱為液相色譜儀。採用高壓輸液泵，高效固定相和高壓靈敏檢測器等裝置的液相色譜儀成為高效液相色譜儀。高效液相色譜儀種類繁多，但不論何種類型的高效液相色譜儀，基本上都分為4個部分：高壓輸液裝置，進樣系統，分離系統和檢測系統。

操作

將要分離和分析的樣品混合物以不連續的小體積（通常為微升）引入滲透通過色譜柱的流動相流中。樣品的組分以不同的速度通過色譜柱，這是與吸附劑（也稱為固定相）的特定物理相互作用的函數。每個組分的速度取決於其化學性質，固定相（柱）的性質以及流動相的組成。

特定分析物洗脫（從色譜柱中出現）的時間稱為其保留時間。在特定條件下測得的保留時間是給定分析物的識別特徵。

可以使用許多不同類型的色譜柱，其中填充了粒徑，孔隙率和表面化學性質各異的吸附劑。使用較小的顆粒尺寸的包裝材料需要使用較高的操作壓力（「背壓」）的和通常改善的色譜解析度（連續的分析物從柱中出現的峰之間的分離度）。吸收劑顆粒本質上可以是疏水的或極性的。

常用的流動相包括水與各種有機溶劑的任何混溶性組合（最常見的是乙腈和甲醇）。一些HPLC技術使用無水流動相（請參見下面的正相色譜法）。

流動相的水性成分可能包含酸（例如甲酸，磷酸或三氟乙酸）或鹽以幫助分離樣品成分。在色譜分析過程中，流動相的組成可以保持恆定（「等度洗脫模式」）或變化（「梯度洗脫模式」）。等度洗脫通常在分離與固定相親和力非常不同的樣品成分時非常有效。

在梯度洗脫中，流動相的組成通常從低到高洗脫強度變化。流動相的洗脫強度由分析物的保留時間反映，高洗脫強度可產生快速洗脫（=較短的保留時間）。

反相色譜中的典型梯度曲線可能始於5％的乙腈（在水或水性緩沖液中），然後在5–25分鍾內線性增長至95％的乙腈。恆定流動相組成的周期可以是任何梯度曲線的一部分。例如，流動相的組成可以在5％的乙腈中保持1-3分鍾，然後線性變化直至95％的乙腈。

流動相的選定組成取決於各種樣品組分（「分析物」）和固定相之間的相互作用強度（例如，反相HPLC中的疏水相互作用）。根據它們對固定相和流動相的親和力，在色譜柱中進行分離過程中，分析物會在兩者之間分配。

此分配過程類似於液-液萃取過程中發生的分配過程，但該過程是連續的，而不是逐步進行的。在此示例中，使用水/乙腈梯度洗脫，一旦流動相在乙腈中的濃度更高（即，在洗脫強度更高的流動相中），則更多的疏水性組分將較晚洗脫（從色譜柱中洗脫）。

流動相組分，添加劑（例如鹽或酸）和梯度條件的選擇取決於色譜柱和樣品組分的性質。通常對樣品進行一系列的試驗，以便找到可以充分分離的HPLC方法。

用途

高效液相色譜作為一種重要的分析方法，廣泛的應用於化學和生化分析中，常用於醫葯品、化學、環保、生命科學、與食品工業的研究上。

高效液相色譜從原理上與經典的液相色譜沒有本質的差別，它的特點是採用了高壓輸液泵、高靈敏度檢測器和高效微粒固定相，可將液體混合物中的成分分離、成分定性及定量分析。適於分析高沸點不易揮發、分子量大、不同極性的有機化合物。例如：可檢測分析食品中的三聚氰胺的含量。

⑶ HPLC分類及其原理

HPLC分類有很多種，可以根據不同的依據進行分類。

1. 根據流動相和固定相的極性不同，HPLC可以分為正相色譜和反相色譜。

正相高效液相色譜： 色譜柱中的固定相是由硅膠、氧化鋁等極性化合物組成。當色譜運行時，由於樣品中的極性化合物對固定相有較強的親和力，使它們在色譜柱中的保留時間比非極性化合物長，因此非極性化合物最先被洗脫出來。許多物質都可以用正相色譜法分析，但由於葯物、食物和其他生物製品大都是非極性的，所以在日常生活中應用不如反向色譜法廣泛。

反相高效液相色譜 ：固定相由非極性化合物組成，如十八烷基硅烷、C18、C8等有機化合物。流動相是極性的。因此，極性高的化合物最先被洗脫，低極性或無極性的化合物最後洗脫。

HPLC大都是對葯物、食品、生化分子等物質進行分析，而它們在自然界中都是極性物質（水溶性）。因此，反相高效液相色譜應用更為廣泛。

2. 根據分離原理的不同，HPLC可分為以下六種。

親和色譜： 主要利用樣品與固定性之間的親和性，實現分離。

離子交換色譜： 基於固定相與流動相的帶電基團發生可逆交換，達到分離目的。離子交換樹脂用於分離含有帶電離子的樣品。對於陰離子，使用陰離子交換樹脂；對於陽離子，使用陽離子交換樹脂。主要用於分離酸性和鹼性化合物。

離子對色譜： 在反相色譜的流動相或固定相中加入離子配對劑，與樣品中可電離的成分形成「對離子」。常用的離子配對劑有戊烷、己烷、庚烷或辛烷磺酸鹽等。

吸附色譜： 是利用吸附性不同的原理，根據樣品中的組分對固定相的親和力不同而發生分離。

空間排阻色譜： 按樣品中的組分的分子大小順序進行分離。色譜柱是由瓊脂糖、葡聚糖、聚丙烯醯胺等軟凝膠製成，也可用烷基葡聚糖、聚苯乙烯等半剛性凝膠。

手性色譜： 用於分離樣品中的光學活性異構體。固定相採用化學鍵合硅膠。常應用於醫葯、生物等領域。

3. 根據分析目的不同，HPLC可以分為分析型液相色譜和制備型液相色譜。

分析型液相色譜： 主要利用檢測器對混合物中各組分進行定性和定量分析。

制備型液相色譜： 主要是對混合物中各組分進行分離純化。制備型的色譜柱和進樣量都比分析型大。

4. 正如大家所知道的，混合物的分離是由於流動相流過HPLC色譜柱完成的，其中流動相可以是單一的溶劑，也可以是混合溶劑，因此HPLC可以分為等度洗脫和梯度洗脫兩種類型。

等度洗脫： 只有一種溶劑，所有的操作都是在一種溶劑下進行的。

梯度洗脫： 流動相由兩種或兩種以上的溶劑組成，並不斷改變其濃度配比。

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參考資料：Types Of HPLC | Their Principle And Application

⑷ 高效液相色譜有幾種定量方法其中那種是比較精確的定量方法並簡述

峰面積法、峰高法、歸一法、外標法。峰面積法是比較精確的定量方法

⑸ hplc是下列哪種分析法的簡寫符號

hplc是高效液相色譜法的簡寫符號。根據查詢相關公開信息顯示，高效液相色搭毀譜法指高效液咐襲相色譜。高效液相色譜法（HPLC）又稱高壓液相色譜、高速液相色譜、高分離度液相色譜、近代柱色譜等。高效液相色知簡備譜是色譜法的一個重要分支，以液體為流動相。

⑹ HPLC-EL - SD、hplc - uv、比色法等不同分析方法的優缺點

1、優點：HPLC-EL-SD是一種重要的分離分析手段，獲得了廣泛的應用；悄廳hplc-uv佔有極其重要的地位，據估計，70％左右的葯品標准中的含量測定採用hplc-uv方法；比色法在早期啟仔隱採用分部收集柱有色洗脫液後，用分光法和滴定法進行測定。
2、缺點：HPLC-EL-SD柱所用的固定相粒度很小(10μm以下)，因此它的分離效率偏低；hplc-uv中的流動相可以選擇不同極性的液體，缺少親和力戚梁；比色法應用於高沸點、熱穩定性差、摩爾質量大的化合物的分離分析，限於分離分析低沸點的化合物及氣體。

⑺ 高效液相色譜法中定性和定量依據是什麼在HPLC中的定量方法有哪些

定性是依據保留時間
定量是依據峰面積和樣品量的線性關系
定量方法常用的有：面積歸一化法，外標法，內標法

⑻ HPLC、UV、GC、TLC是什麼檢測方法

TLC:薄層色譜法.系將適宜的固定相塗布於玻璃板、塑料或鋁基片上，成一均勻薄層。待點樣、展開後，根據比移值（Rf）與適宜的對照物按同法所得的色譜圖的比移值（Rf）作對比，用以進行葯品的鑒別、雜質檢查或含量測定的方法。薄層色譜法是快速分離和定性分析少量物質的一種很重要的實驗技術，也用於跟蹤反應進程。
PC:紙色譜法.是一種可以測試物質的純度與分離混合物的方法，因為它可以快速的完成分析，而且對材料的限制很少，所以是一種極方便而且有用的分析方法。紙色譜法用的分離原則跟薄層色譜法一樣，物質分布在一個固定相與流動相。固定相通常是濾紙，流動相會帶著物質在上面流動，這個裝置將會根據混合物中不同物質對固定相的附著力和對流動相的溶解度而分離出來。分析顏料時，如果顏料中含有不只一種物質，不同顏色的物質會就根據溶劑和不同溶質的極性分開，這是因為不同的分子結構極有可能有不同的極性。這些不同的極性造就對溶劑的不同溶解度，使各種溶質會在溶劑擴散的不同位置沉澱在固定相上以斑點呈現，就可以根據固定相上的斑位置及大小作分析。
HPLC:高效液相色譜法.是色譜法的一個重要分支，以液體為流動相，採用高壓輸液系統，將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動相泵入裝有固定相的色譜柱，在柱內各成分被分離後，進入檢測器進行檢測，從而實現對試樣的分析。
GC:氣相色譜.可分為氣固色譜和氣液色譜。氣固色譜指流動相是氣體，固定相是固體物質的色譜分離方法。例如活性炭、硅膠等作固定相；氣液色譜指流動相是氣體，固定相是液體的色譜分離方法。例如在惰性材料硅藻土塗上一層角鯊烷，可以分離、測定純乙烯中的微量甲烷、乙炔、丙烯、丙烷等雜質。

⑼ 馨鮮酮含量檢測方法

1. 高效液相色譜法（HPLC）：HPLC是一種常用的分析方法，可以用於檢測馨鮮酮的含量。該方法需要使用高效液相色譜儀，將馨鮮酮從食品樣品中分離出基缺來，然後測量其濃度。
2. 氣相色譜法（GC）：GC也是一種常用的分析方法，可以用於檢測馨鮮酮的含量。該方法需要使用氣相色譜儀，將馨鮮酮從食品樣品中分離出來，然後測量其濃度。
3. 毛細管電泳法（CE）：CE是一種高效、快速的磨衡分析方法，可以用於檢測馨鮮酮的含量。該方法需要使用毛細管電泳儀，將馨鮮酮從食品樣品中分離出來，然後測量其濃度。
4. 紅外光譜法（IR）：IR可以用於分析分子結構和化學鍵，也可以用於檢測馨鮮酮的含量。該方法需要使用紅外光譜儀，將食品樣品和馨鮮酮分別進行紅外光譜分析，然後根據吸收峰的強度計算馨鮮搏游辯酮的含量。

⑽ 請問在色譜分析中提到的「HPLC」指的是什麼

是高效液相色譜的意思.英文全稱:
High Performance Liquid Chromatography