Ⅰ 什麼是葯敏實驗
葯敏試驗的前提是殲判滲要先做細菌培養以確定致病菌,然後對致病菌進行的葯物敏感氏脊性試驗。它針對性用葯,准確用葯,沖遲精確用葯。避免抗生素的濫用,改變經驗用葯的模式。
Ⅱ 葯敏試驗。
簡稱葯敏試驗(或耐葯試驗)。旨在了解病原微生物對各種抗生素的敏感(或耐受)程度,以指導臨床合理選用抗生素葯物的微生物學試驗。一種抗生素如果以很小的劑量便可抑制、殺滅致病菌,則稱該種致病菌對該抗生素「敏感」。反之,則稱為「不敏感」或「耐葯」。為了解致病菌對哪種抗菌素敏感,以合理用葯,減少盲目性,往往應進行葯敏試驗。其大致方法是:從病人的感染部位採取含致病菌的標本,接種在適當的培養基上,於一定條件下培養;同時將分別沾有一定量各種抗生素的紙片貼在培養基表面(或用不銹鋼圈,內放定量抗生素溶液),培養一定時間後觀察結果。由於致病菌對各種抗生素的敏感程度不同,在葯物紙片周圍便出早純擾現不同大小的抑制病菌生長而形成的「空圈」,稱為抑菌圈。抑菌圈大小與致病菌對各種抗生素的敏感程度成正比關系。於是可以根據試驗結果有針對性地陸旦選用抗生素。近年已有自動化的葯敏試驗儀器問世,使試驗更加迅速、准確。目前濫用抗生素,致使抗葯菌增加,甚至因長期大量使用廣譜抗生素,殺傷體內正常微生物,失去微生物的相互制約作用,從而使一些褲納少見的或一般情況下的非致病菌大量繁殖,引起所謂「二次感染」的情況屢有發生,給治療造成人為的困難。因此,提倡使用葯敏試驗,堅持合理用葯十分重要。
Ⅲ 試述聯合葯物敏感試驗結果及進行聯合葯敏試驗的目的
聯合葯敏試驗可能出現四種結果:①無關作用,兩種葯物聯合作用碼野的活性等於其單獨活性;②拮抗作用,兩種葯物聯合作用顯著低於單獨抗菌活性;③累加作用,兩種葯物聯合作用時的活性等於兩宴緩種單獨抗菌活性之和;④協同作用,兩種葯物聯合作用顯著大於其單獨作用的總和。
聯合葯敏試驗的目的是:①治療混合性感染;②預防或推遲細菌晌模模抗生素耐葯性的發生;③聯合用葯可以減少劑量,避免達到毒性劑量;④聯合用葯比單一用葯效果更好。
Ⅳ 葯敏試驗的具體操作方法
1葯敏實驗操作步驟:在超潔凈工作台內,先將滅菌好的培養基做好標記,無菌取病料(即:肝臟、心臟組織)一小塊,輕輕在滅菌的培養基上塗布幾下(不要突破培養基),然後用接種環再密集劃線。然後,將制備好的葯敏片分別按標記好的位置貼在培養基的表面。記錄好培養皿的標記及葯敏片的順序。最後,將培養皿放入37℃恆溫箱中培養8—12小時即可。
2葯敏實驗結果觀察:培養好後會發現細菌再培養基上均勻分布,同時會看到葯敏片周圍有不同程度的抑菌圈。抑菌圈越大,說明該雞群對這種葯物越敏感;抑菌圈小或沒有抑菌圈,說明該雞群對這種葯物不敏感或已經產生了耐葯性。若在培養皿中出現一團一團的細菌時說明培養皿中有雜菌感染。
Ⅳ 葯敏試驗的結果觀察
在塗有細菌的瓊脂平板上,抗菌葯物在瓊脂內向四周擴散,其濃度呈梯度遞減,晌或鉛因此在紙片周圍一定距離內的細菌生長受到抑制。過夜培養後形成一個抑菌圈,抑菌圈越大,說明該菌對此葯敏感性越大,反之越小,若無抑菌圈,則說明該菌對此葯具有團櫻耐葯性。其直徑宴好大小與葯物濃度、劃線細菌濃度有直接關系。
Ⅵ 請問葯敏試驗是通過怎樣的方法
葯敏試驗根據美國臨床標准委員會(NCCLS)推薦的K-B瓊脂法進行,葯敏紙片選擇中國生物好雹製品鑒定所葯敏紙片,試驗所選擇葯物必須包括下列抗生素:氨苄西林(AMP),阿莫西林/克拉維酸(AMC),頭孢噻吩(CFT),頭孢噻肟(CTX),慶大黴素(GEN),萘啶酸(NAL),環丙沙星(CIP),四環素(TBT),利福平(RFA),復方新諾明(SMZ)。葯敏結果判定標准按照NCCLs手冊2005版。
1. 操作方法:
(1)將待檢菌接種於普通營養瓊脂平板,37℃培養16~18小時,然後挑取普通營養瓊脂平板上的純培養菌落,懸於3ml生理鹽水中,混勻後與菌液比濁管比濁。以有黑字的白紙為背景,調整濁度與比濁管(0.5麥氏單位)相同。
(2)用無菌棉拭子蘸取菌液,在管壁上擠壓去掉多餘菌液。用棉拭子塗布整個M-H培養基表面,反復幾次,每次將平板旋轉60度,最後沿周邊繞兩圈,保證塗均勻。
(3)待平板上的水分被瓊脂完全吸收後再貼紙片。用無菌鑷子取葯敏紙片貼在平板表面,紙片一貼就不可再拿起。每個平板貼5張紙片,每張紙片間距不少於24mm,紙片中心距平皿邊緣不少於15mm。在菌接種後15分鍾內貼完紙片。
(4)將平板反轉,孵育18~24小時後取出,用游標卡尺測量抑菌圈直徑,從平板背面測量最接近的整數毫米數並記錄(附表6)。抑菌環的邊緣以肉眼見不到細菌明顯生長為限。有的菌株可出現蔓延生長,進入抑菌環,磺胺葯在抑菌環內出現輕微生長,這些都不作為抑菌環的邊緣。結果判斷依據鑒定所葯敏紙片判定標准。
(5)每次葯敏試驗必須用ATCC 25922大腸桿菌做質控。只有當質控菌株的抑菌圈直徑在允許范圍內測試菌株的結滲襪知果才可以報告。ATCC 25922的結果必須與測試菌株同時記錄和報告在附表6中。
0.5麥氏比濁管配製方法:
0.048M BaCL2 (1.17% W/V BaCL2 . 2H2O) 0.5ml
0.36N H2SO4 (1%, V/V) 99.5ml
將二液混合,置螺口試管中,放室溫暗處保存。用前混勻。有效期為6個月。
2. 注意事項:
(1) 制備MH瓊脂平板應用直徑90mm平皿,在水平的實驗台上傾注。瓊脂厚為4±0.5mm(約25-30ml培養基),瓊脂凝固後叢消塑料包裝放4℃保存,在5日內用完,使用前應在37℃培養箱烤乾平皿表面水滴。傾注平皿前應用pH計測pH值是否正確(pH應為7.3)。pH過低會導致氨基糖苷類,大環內酯類失效,而青黴素活力增強。
(2) 葯敏紙片長期儲存應於-20℃,日常使用的小量紙片可放在4℃,但應至於含乾燥劑的密封容器內。使用時從低溫取出後,放置平衡到室溫後才可打開,用完後應立即將紙片放回冰箱內的密封容器內。 過期紙片不能使用, 應棄去。
(3) 不穩定葯物如亞胺培南, 頭孢克洛, 克拉維酸復合葯等, 應冷凍保存, 最好在-40 ℃以下。
(4) 保證質控菌株不變異的簡便方法,將新得到的凍干菌株接種含血的M-H平板復活。然後每株細菌接種10支高層瓊脂管,放置冰箱保存。每月取出一支,傳出細菌供常規用。待用剩至最後一支,可傳種在M-H平板上,再接種一批高層瓊脂管備用。如此可保證原始菌種永不接觸抗菌素。
3.質量控制
質量控制方法 是用與常規實驗相同的操作方法,測定質控菌株的抑菌環。應使用新鮮傳代的菌種。接種菌液的塗布方法等均同常規操作,測定的抗菌素種類也應與常規測定的種類相同。
1、取患者的分泌物或者血液做細菌培養,看哪種細菌感染,並且對哪種葯州瞎物敏感橘芹。根據葯敏結果選擇敏感抗生素,達到最理想的治療效果,同時也不會因為盲目使用抗生素造成機體耐葯的現象。
2、葯敏試驗在臨床上常常會用到,從標本的採集、細菌培養到葯物敏感試驗,要求都是比較嚴格的,這個過程中一定要嚴格的注意外圓跡畢環境,防止受到污染影響結果。葯敏試驗主要用於反復感染治療之後沒有好轉,甚至症狀沒有減輕,最終選擇最敏感的葯物殺滅細菌,達到臨床的治療效果。
Ⅷ 葯敏試驗的因變數
葯敏試驗的因變數是細菌對不同抗生素的敏感性。葯敏試驗是一種常用的微生物學實驗方法,用於測試細逗銀菌對不同抗生素的敏感性,以確定最佳治療方案。在葯敏試驗中,細菌樣本被分成不同的組,每組都暴露在不同的抗生素中,然後觀察細菌的生長情況,以確定細菌對不同抗生素好棗的敏感性。因此,葯敏試驗的因變數是細菌對不同抗生素的敏感性,這是確定治療方案的關鍵因素。葯敏試驗的結果可以幫助醫生選擇最有效的抗生素治療細菌友指拆感染,從而提高治療效果,減少葯物濫用和抗生素耐葯性的發生。
Ⅸ 葯物敏感試驗的葯物敏感試驗的方法
測定細菌對抗菌葯物敏感性的試驗稱為葯物敏感試驗或簡稱葯敏試驗。由於養雞業中抗菌葯物的廣泛使用,導致抗葯菌株越來越多,盲目用葯常常效果不佳。因此,進行葯物敏感試驗已成為正確使用抗菌葯物的必要手段。葯物敏感試驗的方法有多種,如紙片擴散法、試管法、挖洞法等。其中,紙片擴散法簡便易行,出結果快,是目前生產中最常見的方法,現將該種方法介紹如下:
(1)葯敏紙片的准備
常用抗菌葯敏紙片已有商品供應,一般可以買到,可直接利用。
(2)葯敏培養基的制備
①普通肉湯瓊脂:又稱營養瓊脂。蛋白腖10克、氯化鈉(NaCl)15克、磷酸氫二鉀(K2HPO4)1克、瓊脂20克、牛輪歲逗肉浸出液1000毫升(可用牛肉浸膏10克浸於1000毫升蒸餾水代替)。
牛肉浸出液的配製方法:取瘦牛肉去掉脂肪、腱膜等,絞碎或切碎,按500克牛肉加1000毫升蒸餾水混合,置4℃冰箱內過夜,取出後加熱到80~90℃,經1小時後,以數層紗布濾除肉渣並擠出肉水,再用脫脂棉過濾,量其體積並用蒸餾水補足1000毫升,分裝後20分鍾高壓蒸汽滅菌,即製成牛肉浸出液。
將以上其他成分加入到牛肉浸出液中,加熱溶解,冷卻後調pH至7.6,煮沸10分鍾,用濾紙過濾後分裝,再以10.4萬帕高壓蒸汽滅菌25分鍾,取出後冷卻至55℃左右,在90毫升直徑滅菌的平皿上傾注成4毫米厚的平板。做好的平雀乎板,密封包裝後可在冰箱中保存2~3周。使用前應將平皿置37℃溫箱中培養24小時,確認無菌後再用於試驗。
②鮮血瓊脂:將滅菌的營養瓊脂加熱融化,至45~50℃時加入無菌鮮血5%(每100毫升營養瓊脂中加入鮮血5~6毫升)傾注平皿。無菌鮮血,用無菌手術取健康動物(綿羊或家兔等)的血液,加入盛有無菌5%檸檬酸鈉溶液的容器中(血與5%檸檬酸鈉的比例為9∶1)混勻,置冰箱中保存備用。
(3)試驗方法
臨床上分離到的細菌進行純培養。用滅菌的接種環挑取被檢菌的純培養物劃線或塗布於平板上,並盡可能使其密而均勻。用滅菌鑷子將葯敏紙片平放於平板上並輕壓使其緊貼平板。直徑9.0厘米的平皿可貼7張紙片,紙片間距不少於24毫米,紙片與平皿邊緣距離不少於15毫米。貼好後將平板底部朝上置於37℃溫箱中培養24小時,取出觀察結果。
(4)結果判定
凡對被檢菌有抑制力的抗菌葯物,由於向周圍擴散,抑制細菌的生長,故在紙片周圍出現一個無細菌生長的圓圈,稱為抑菌圈。抑菌圈越大,說明該菌對此種葯物敏感度越高,反之越低。如果無抑菌圈,則說明該菌對此種葯物具有耐葯性。所以,判定結果時,以抑菌圈直徑的大小來作為細菌對該葯物敏感度高低的標准。
一般來說,抑菌圈直徑70毫米以上為極度敏感,15~20毫米為高度敏感,10~15毫米為中度敏感,10毫米以下為低敏感,無抑菌臘賣圈為不敏感。對多黏菌素的作用,抑菌圈在10毫米以上者為高度敏感,6~9毫米為低度敏感。
經葯敏試驗後,應該選擇極度敏感或高度敏感的葯物進行治療。