鄰甲苯胺方法的實驗分析

『壹』 腎上腺素和胰島素對血糖濃度的影響實驗方案

胰島素和腎上腺素 對家兔血糖濃度的影響 掌握血糖 (blood sugar) 的測定方法及 激素 (hormone) 對血糖濃度的影響。 了解血糖測定的臨床意義。 實驗目的與要求 機體的血糖水平受多種激素的調節而維持穩定 影響血糖的激素分為兩類： 降低血糖的激素：胰島素 (insulin) 升高血糖的激素：腎上腺素 (adrenaline) 、胰升糖素、 糖皮質激素和生長激素 血漿 (plasma) ：全血經抗凝處理後得到的液體成分， 含有凝血因子、纖維蛋白原等 血清 (serum) ：全血凝固後析出的液體， 不含纖維蛋白原 血 樣 實 驗 原 理 620 nm 測定待測血樣的吸光度 (A) 與同樣處理的葡萄糖標准溶液比較 ( 標准管法 ) 即可求得血樣中葡萄糖的含量。 酸性、加熱 -3 H 2 O 羥甲基糠醛 鄰甲苯胺 醛亞胺（藍色） 葡萄糖 (glucose) 鄰甲苯胺法測定血糖濃度 2 、血樣的採集 1 ）心臟內取讓爛模血 5ml ，加入抗凝劑（草酸鈉）【胰 -1 、腎 -1 】 2 ）皮下注射 胰島素 0.5ml/kg （ 2U/kg ）， 1 小時後 1% 腎上腺素 0.4ml/kg ，半小時後 3 ）心臟內取血 5ml ，加入抗凝劑【胰 -2 、腎 -2 】 1 、動物的准備 家兔兩只，禁食一晚。標記後，測量體重並記錄坦緩。 實 驗 步 驟 4 、鄰甲苯胺法測定血歷殲糖濃度 1 ）取大試管，按 Page78 表格添加試劑 2 ）混勻各管，沸水浴中加熱 10min 後取出，流水冷卻。 3 ）用空白管校正吸光度零點，讀取各管 620nm 的吸光度。 3 、血漿的制備 血樣採集後， 2000rpm 離心 5min ，取上清。 數據 空白 對照 注射激素前 注射激素後 胰島素組 胰 -1 胰 -2 腎上腺組 腎 -1 腎 -2 G 胰 -1 ＞ G 胰 -2

『貳』 激素對血糖濃度的影響及血糖的測定實驗報告

一，實驗目的
掌握血糖的測定原理和方法；掌握血糖的正常范圍及意義；熟悉調節血糖的激素對血糖濃度的影響。
二，實驗原理
家兔動物實驗。獲取家兔注射激素前後的血液樣本並對其；進行血糖測定。鄰苯甲胺方法測定血糖濃度。
實驗採取前後對照的方法，對家兔注射腎上腺素和胰島素，並通過耳緣靜脈采血，獲取激素注射前後的血液樣本，採用鄰甲苯胺法處理樣本，最終與標品比色得出結論。
1.調節血糖的激素有：胰島素、腎上腺素、胰高血糖素、腎上腺皮質激素、生長素和甲狀腺素等。胰島素是體內唯一能使血糖降低的激素，其他激素均使血糖升高。
2.腎上腺素升高血糖的機制主要作用於肝細胞膜受體，通過cAMP-蛋白激酶系統激活肝磷酸化酶，同時抑製糖原合成酶，導致肝糖原分解加速。胰島素降低血糖的機制是：降低肝細胞cAMP水平，從而抑制肝磷酸化酶，激活糖原合成酶，促進肝糖原的合成；胰島素誘導糖酵解關鍵酶類的合成，阻遏糖異生關鍵酶的合成；胰島素促進葡萄糖進入紅細胞、肌肉等組織的異化擴散，促進糖的利用。
3.血液中的葡萄糖，在熱的冰醋酸溶液中可脫水生成5-羥甲基-2-呋喃甲醛（或稱羥甲基糠醛）。後者在與鄰甲苯胺縮合，生成藍綠色的西夫式鹼（Schiffbase）。其色澤的深淺與葡萄糖濃度成正比。與同樣處理的標准葡萄糖溶液比色，即可求得待測血液中葡萄糖的含量。
三，實驗材料
1.材料：家兔兩只,刀片，草酸鈉，小燒杯。
2.試劑：①腎上腺素(1mg／lml)②胰島素(20單位／ml)③碘酒、消毒酒精④飽和硼酸溶液⑤鄰甲苯胺-硼酸⑥5％ 三氯醋酸溶液⑦飽和苯甲酸溶液⑧標准葡萄糖貯存液⑨標准葡萄糖應用液
四，實驗方法
1.取健康正常家兔一隻，實驗前飢餓14~16h左右，稱體重。
2.耳緣靜脈采血。小刀颳去耳緣的毛，用酒精棉球擦拭使其充血，再用干棉球擦乾。 刀片劃開耳緣靜脈，使血液滴入成有足夠草酸鈉的小燒杯中，注意收集期間要不斷地晃動燒杯防止血液凝固。採集完畢後干棉球壓迫血管止血。
3.給家兔注射腎上腺素（0.5mg/只），半小時後同樣方法採得血液。
4.緩緩放入潔凈試管內，加5%三氯醋酸3.6ml，同時搖動使之充分混畝穗轎叢勻。3000rpm離心5min，製得無蛋白血濾液（上清液）。
5.取四支試管，分別加入2.5ml鄰甲苯胺試劑。並向試管1加入1ml蒸餾水，試管2加入1ml標准葡萄糖應用液，試管3加入1ml注射激素前的血液的無蛋白濾液，試管4加入1ml注射激素後的血液的無蛋白濾液。
6.混勻後沸水加熱8min，取出並用自來水沖洗試管使之冷卻。而後置於722型分光光度計630nm比色，空白管校正零點。
7.表加試劑如下表：
ml
空白管
標准管
待測管甲（葯前）
待測管乙（葯後）
蒸餾水
1.0
―
－
－
標准葡萄糖應用液（1mg/ml）
－
1.0
－
－
無蛋白血濾液（葯前）
－
－
1.0
－
無蛋白血濾液（葯後）
－
－
－
1.0
鄰甲苯胺試劑
2.5
2.5
2.5
2.5
同理，對家兔進行腎上腺素注射（劑量為5單位/公斤體重）並進行上述步驟，最終得出結果。
五，實驗結果
據試驗，在注射胰島素實驗中，家兔重量為2.95公斤，依照比例注射15單位的胰島素。在注射腎上腺激素的實驗中，家兔重量為2.90公斤，注射1mg的腎上腺激素。
血糖測定：（葡萄糖標准液濃度為5.50mmol/L）
空白管
標准管
注 射胰島素前
注射 胰島素後
注射腎上腺激素前
注射腎上腺激迅帆卜素後
血清/ml
-
-
0.02
0.02
0.02
0.02
葡萄糖標准液/ml
-
0.02
-
-
-
-
生理鹽水/ml
0.02
-
-
-
-
-
酶酚混合液/ml
1.5
1.5
1.5
1.5
1.5
1.5
曝光值
0
0.135
0.363
0.116
0.315
0.508
由此得出：
注射胰島素前血糖濃度為14.79mmol/L。
注射胰島素後血糖濃度為4.73 mmol/L。
注射腎上腺激素前血糖濃度為12.83 mmol/L。
注射腎上腺激素後血糖濃度為20.70 mmol/L。
得出結論：注射胰島素可有效的降低血糖。2．注射腎上腺素能使血糖上升。
六，討論
實驗中要注意如下問題：
1.采血及注射激素時，應盡量使家兔保持安靜。家兔不安靜的情況下，腎上腺素分泌增多，血糖濃度升高，對實驗結果有影響。
2.采血後要及時分離出血漿，避免溶血。溶血時紅細胞內糖類擴散到血漿中，會對實驗結果有影響。
3.采血量要准確，不能採得太少不夠實驗需要的血量，也不能採得太多傷及家兔。
4.由於血細胞不斷從血漿攝取葡萄糖加以利用，因此, 采血後及時進行檢測，否則血糖濃度將逐漸降低。

『叄』 那些因素影響鄰甲苯胺法測定血糖的顯色反應如何減少這些因素對實驗的影響

1.本法不需要除去蛋白質，鄰甲苯胺試劑只與糖醛起反應，不與血中其他還原物質起反應。故悶基咐測定值較Folin-吳憲法為低。

2.顯螞純色反應與水的含量有關，故應使標准管和測定管的含水量一致。

3.溫度對顯色反應有明顯影響，煮沸時間和溫度應鋒汪准確控制。

4.顯色後顏色不穩定，室溫每放置1分鍾，顏色降低0.15％。

5.鄰甲苯胺試劑中冰醋酸濃度很高，使用不當容易損壞比色儀器。

6.鄰甲苯胺是致癌劑，測定過程中應小心使用。

『肆』 實驗室鄰甲本胺的處理方法

為了實現鄰甲苯胺及其同分異構體的完全分返鄭離,先將鄰甲苯胺及其同分漏褲頌異構體乙醯化,再採用氣相色譜一質譜聯用方法,通過改進色譜條件,使其取得了完全分離.試驗結果表明,採用氣一質聯用方法可以實現鄰甲苯胺及其同分異構體的完全純蔽分離.

『伍』 鄰甲苯胺的合成方法

1.由鄰硝基甲苯還原而得。還原反應可利用鐵粉作還原劑，也可在銅催化劑存在下於260-280℃運梁進行加氫反應製得鄰甲苯胺。工業品鄰甲苯胺的含量（總氨基物含量）在99%以上，加氫還原法每噸產品消耗鄰硝基甲苯1300kg、氫氣940m3。
2.其制備方法是由鄰硝基甲苯經催化加氫還原製得。由於加氫催化劑的不同，反應條件各異，如用銅催化劑，反應溫度260℃，也可用鎳催化劑。
精製方法：按照製造方法不同，含有間甲苯胺、對甲苯胺、硝基甲苯等雜質。特別是對甲苯胺含量較多，並含有微量的水分。精製方法和苯胺類似，但用蒸餾的方法難以將其他的甲苯胺分離。因此首先將粗製鄰甲苯胺蒸餾兩次，再溶解於四倍體積的乙醚中，加入等當量的草酸乙醚溶液。將生成的對甲苯胺草酸絕高鹽過濾除去，濾液蒸去乙醚後旁宏運濾出生成的鄰甲苯胺草酸鹽。用含有草酸的水重結晶5次，再用碳酸鈉溶液處理。游離出的鄰甲苯胺用氯化鈣乾燥後減壓蒸餾三次可得純品。
3.取鄰硝基甲苯在稀酸介質中用鐵粉還原，然後分離。上述所得鄰甲苯胺粗品加酸溶解成鹽，再加氫氧化鈉沉澱，即得純品。

『陸』 新生兒大便紅細胞隱血怎麼回事

新生兒最容易出現的問題就是腸胃問題，判斷他們腸胃是否存在問題最直接有效的方法就是仔細觀察他們的大便狀況。如果新生兒的大便形態和氣味出現異常，就要懷疑是腸胃問題。 新生兒大便紅細胞隱血怎麼回事 ？盯仿

大便潛血(又稱便隱血)是指消化道少量出血，紅細胞被消化破壞，糞便外觀無異常改變，肉眼和顯微鏡下均不能證實的出血。

血紅蛋白中的亞鐵血紅素，有類似過氧化物酶的作用，具有弱過氧化物酶活動，能催化過氧化物酶，放出新生態氧，將無色的受體氧化為顯色的物質。

1、鄰甲苯胺法

試劑：①150g/l鄰甲苯胺—冰醋酸溶液：稱取鄰甲苯胺150g，加冰醋酸到1000ml。或用10g/l鄰甲聯苯胺溶液：稱取鄰甲聯苯胺1g，溶於冰醋酸及無水乙醇各50ml的混合液中置棕色瓶中，保存於4℃冰箱中，可用8～12周，知姿若變為暗色，應重新配製。

②3%過氧化氫液。

2、匹拉米洞法

試劑：①50g/l匹拉米洞：稱取匹拉米洞(氨基比林)5g，加95%乙醇至1000ml，搖至全部溶解。

②冰醋酸，

③3%過氧化氫液。

3、無色孔雀綠法

試劑：①10g/l無色孔雀綠：稱取1g無色孔雀綠溶於100ml 95%乙醇中，搖至全部溶解，如呈綠色加少許鋅粉，退色後過濾。濾液中加入少許鋅粒，貯存於棕色瓶中。

②冰醋酸液

③3%過氧化氫液。

4、硫酸甲氨基酚法

試劑：①10g/l硫酸甲氨基酚乙酸溶液：稱取硫酸甲氨基酚1g，溶於40ml蒸餾水中，加冰乙酸30ml溶解，蒸餾水加至100ml混勻 。放入棕色瓶中避光保存，如有變色則應重新配製。

②3% 過氧化氫溶液。

方法：取少許糞便塗於玻片中央，滴加10g/l硫酸甲氨基酚乙酸溶液3滴，及3% 過氧化氫溶液3滴混勻，立即觀察結果。

陰性(-)：3分鍾後不出現玫瑰紅色或櫻紅色。(+)：30~60秒鍾內顯玫瑰紅色或櫻紅色。強陽性(++)：立即顯玫瑰紅色或櫻紅色。

最強陽性(+++)：立即顯深玫瑰紅色或深櫻紅色。

輕微腹瀉的孩子，常拉出象血一樣的糞便，實際上這是食物或葯物中的顏料染上的，每當產生懷疑時，可化驗糞便，這樣可以消除父母的疑慮。

當寶寶的腹瀉是由感染引起的時，有時會出現一種短暫的但又引人注目的血性糞便。寶寶可能會發高燒，不僅便便里有血，偶爾還有膿、黏液和未消化的食物。這時候請及時帶寶寶就醫。通常情況下，當醫生發現寶寶的這種情況時，會第一時間觀察寶寶是否有脫水的症狀，然後再做化驗。

不僅要確定腹瀉和出血的原因，測定血細胞數，還要做糞便的培養和塗片，以找出特殊感染的證據。某些腹瀉可用抗生素來治療，因此所有患這種疾病的病人都要由醫生診斷和治療，特別要注意急性均痢。

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