布魯氏菌病研究方法

1. 布氏桿菌凝集試驗的介紹

待測血清中抗布氏桿菌抗體與膠乳試劑相遇，發生抗原-抗體反應，出現肉眼可見的凝集反應。

2. 什麼是布魯氏菌在什麼情況下就會被感染

布魯氏桿菌，是一種革蘭氏陰性的不運動細菌。這種細菌嗜氧，一般橘鉛答無莢膜，而光滑型的布魯氏桿菌則有微莢膜，呈氧化酶陽激冊性，在光學顯微鏡下多呈微小的球狀，球桿狀等。大多數在細胞內寄生，可以在很多種家畜體內存活。

簡單介紹完了布魯氏桿菌，那麼我們接下來說說它帶來的疾病。布魯氏桿菌可以引起布魯氏桿菌病，一般將其簡稱為布病，人和家畜都可以感染到的慢圓慧性傳染性疾病，造成的危害很大，而感染此病的多為牛、羊、豬三種常見的家養牲畜。其中在羊身上的細菌，對人的傳播性最強，危害最嚴重。

預防此病要普及預防知識，從根源處避免此病發生，少吃生冷食物，將食物加熱，等到熟透了再吃，更要學會挑選合格的商品進行購買。對於家畜要定期檢疫，及時發現病菌並消滅，隔離。

3. 怎樣防治豬的布魯氏菌病

豬的布魯氏菌病是豬感染布魯氏菌以後發生的一種慢性傳染病。主要症狀是流產、死產、胎衣滯留以及關節炎等。公豬感染可發生睾丸炎和不育症等。
公母豬都能發病，尤其8～10月齡的豬最易感染，6～7月齡豬次之，5月齡內的豬不感染。
布魯氏菌廣泛存在於病豬流產胎兒、胎衣、乳腺和淋巴結中。常隨胎兒、胎衣、尿、乳汁等排出體外，污染棚圈、豬舍及飼養用具，以致廣泛傳播。
健康豬常由於吃到被病豬糞、尿、流產胎兒、羊水、胎衣等污染過的飼料和飲水而得病。交配是傳染的另一途徑，種公豬和患布魯氏菌病的母豬交配時能被傳染發病，患病的公豬再和其他健康母豬交配時就會擴大傳染。
一般認為公豬和母豬姿漏的發病率高，懷孕母豬，尤其第一胎母豬發病率更高，但閹割後的公、母豬則感染率低。另一方面飼料量不足，營養不全，膘情不好，抗病力低，都容易感染。豬場缺乏嚴格的衛生防疫制度，病豬的污染物處理不當，病豬隔離不嚴，都能給疫病傳播創造條件。
發病後的症狀是母豬多在懷孕後兩三個月發生流產，產下死胎多，產後少發生胎衣停滯不下。並發症有下痢，精神不振，食慾減退，乳房水腫，有少數病豬和畝發生陰道炎和子宮炎，以致不能懷孕。有的病豬轉入隱性，經交配受孕，第二胎常可正常產仔，極少見到重復流產。
公豬常發生睾丸炎，兩側或單側睾丸明顯腫大、疼痛。如睾丸由於慢性炎症作用常因此萎縮，病豬性慾減退或喪失，失去配種能力。
豬的布魯氏菌病還表現在關節發炎。因此，顯現跛行，據調查，約有41%的病豬後肢關節腫大，疼痛，運動不靈活。
本病防制工作很重要，應從以下幾方面入手：
（1）優良品種的種豬場，病豬必須保留時，可在嚴格隔離下，用金黴素或土黴素治療。病豬最好不做種用。
（2）在預防上應首先嚴防本病侵入健康豬群。注意檢疫工作，檢疫後認為血清凝集價正常，隔離30天再第二次檢疫，認為健康時方可合群並跡棚爛圈。
（3）如因不慎引進病豬，應在尚未大量傳播開前採取果斷措施，病豬和可疑病豬均應隔離淘汰。
（4）本病流行的地區也可用豬種2號弱毒凍干苗進行預防，每次200億活菌飲服，飲服2次，間隔30～45天。

4. 布魯氏菌病簡介

目錄

• 1 拼音
• 2 概述
• 3 病原學

1 拼音

bù lǔ shì jun1 bìng

2 概述

布魯氏菌病（brucellosis）又稱地中海弛張熱，馬爾他熱，波浪熱或波狀熱，是由布魯氏菌引起的人畜共患性全身傳染病，其臨床特點為長期發熱、多汗、關節痛及肝脾腫大等。

1814年Bur首先描述「地中海弛張熱」，並與瘧疾作了鑒別。1860年Marston對本病作了系統描述，且把傷寒與地中海弛張熱區別開。1886年英國軍醫Bruce在馬爾他島從死於「馬爾他熱」的士兵脾臟中分離出「布魯氏菌」，首次明確了該病的病原體。1897年Hughes根據緩此頃本病的熱型特徵，建議稱「波浪熱」。後來，為紀念Bruce，學者們建議將該病取名為「布魯氏菌病」。1897年Wright與其同事發現病人血清與布魯氏菌的培養物可發生凝集反應，稱為Wright凝集反應，從而建立了迄今仍用的血清學診斷方法。我國古代醫籍中對本病雖有描述，但直到1905年Boone於重慶對本病作正式報道。

3 病原學

布魯氏菌為革蘭氏陰性短小桿菌，初次分離時多呈球狀，球桿狀和卵圓形，故有人建議稱「布魯氏菌」。該菌傳代培養後漸呈短小桿狀，菌體無鞭毛，不形成芽胞，毒力菌株可有菲薄的莢膜。1985年WHO布魯氏菌病專家季員會把布魯氏菌屬分為6個種19個生物型，即羊種（生物型1～3），牛種（生物型1～7.9）。豬種（生物型1～5）及綿羊型副睾種，沙林鼠種，犬種（各1個生物型）。我國已分離到15個生物型，即羊種（1～3型），牛種（1～7.9型），豬種（1.3型），綿羊副睾種和犬種各1個型。臨床上以羊、牛、豬三種意義最大，羊種致病力最強。多種生物型的產生可能與病原菌為適應不同宿主而發生遺傳變異有關。

本菌生長對營養要求較高，目前實驗室研究多用牛、羊新鮮胎盤加10%兔血清製作培養基，其效果較好。但即使在良好培養條件下生長仍較緩慢，在不良環境，如坑生素的影響下，本菌易發生變異。當細菌壁的脂多糖（LPS）受損時細菌落即由S型變為R型。當胞壁的肽聚糖受損時，則細菌失去胞壁或形成胞壁不完整的L型布魯氏菌。這種表型變異形成的細菌可在機體內長期存在，伺環境條件改善後再恢復原擾陸有特性。

本菌有A、M和G三種抗原成份，G為共同抗原，一般牛種菌以A抗原為主。A與M之比為扒咐20：1；羊種菌以M為主，M比A為20：1；豬種菌A：M為2：1。制備單價A、M抗原可用其鑒定菌種。布魯氏菌的抗原與傷寒、副傷寒、沙門菌、霍亂弧菌、變形桿菌OX19等的抗原有某些共同成份。本菌致病力與各型菌新陳代謝過程中的酶系統，如透明質酸酶、尿素酶、過氧化氫酶、琥珀酸脫氫酶及細胞色素氧化酶等有關。細菌死亡或裂解後釋放內毒素是致病的重要物質。

布魯氏菌在自然環境中生活力較強，在病畜的分泌物，排瀉物及死畜的臟器中能生存4個月左右，在食品中約生存2個月。加熱60℃或日光下曝曬10～20分鍾可殺死此菌，對常用化學消毒劑較敏感。

5. 犬布魯氏菌病有哪些特徵如何防治

布氏桿菌病是一種接觸性傳染的細菌性人畜共患傳染病，犬多數呈隱性感染，少數出現臨床症狀;其特徵主要是引起生殖系統障礙，生殖器發炎、流產等;下面我們一起來看看你犬布氏桿菌病的症狀、診斷、治療及預防方法：

犬布氏桿菌病是一種革蘭氐染色陰性的球桿菌;布氏桿菌屬有7個種，其中感染犬的主要是流產布氐桿菌(牛型)、馬爾他布氏桿菌(羊型)、豬布氏桿菌(豬型)和犬布氏桿菌;各種布氏桿菌在形態上沒有區別，只是在致病力方面有所不同;布氐桿菌在普通培養基上可以生長，但以肝湯培養基和馬鈴薯培養基上生長最茂盛;本菌對自然環境的抵抗力較強，在污染的土壤和水中可存活20~120天;在胎兒體內可存活6個月，在衣服、皮毛上能存活150天;陽光直射可存活4小時;在70℃加熱5分祌，即可被殺死，煮沸立即死亡;用2%石炭羨虛酸、來蘇爾、0、1%的福爾馬林和5%的新鮮石灰水數分鍾就可殺滅本菌;

該病傳染源主要是病犬和帶菌犬;最危險的傳染源是受感染的妊娠母犬，在其流產和分娩時隨胎兒、胎衣排出大量病菌，流產後的陰道兄櫻燃分泌物和乳汁也含有病菌;感染公犬精液中含有病菌,可通過交配傳染給母犬;傳播途徑主要是消化道和黏膜，多因攝取被病菌污染的飼料和飲水而感染;另外通過有損傷的皮膚和結膜也能感染;犬感染布氏桿菌病後，病菌主要在淋巴結、脾臟、子宮、胎盤以及前列腺的巨噬細胞內增殖，可引起公犬及母犬的不孕(育)或流產;

犬布氏桿菌病的症狀

大多為隱性感染，少數表現發熱性全身症狀;臨床檢査偶爾可見發熱、嗜睡、淋巴結病變及體重下降;性成熟犬多表現繁殖障礙;母犬妊娠後3月時發生流產，流產後陰道內流出褐色或綠灰色的分泌物，持續時間1~6周不等、或不孕或發生早期胎兒自溶，或弱胎;公犬常發生睾丸炎、前列腺炎、睾丸萎縮，導致不育;

犬布氏桿菌病的診斷

單從臨床症狀做出診斷較難;確診需要血液，精液或組織(胎兒、胎盤、脾、淋巴結、前列腺等)進行細菌培養及鑒定;常用的有快速平板凝集試驗、試管凝集試驗及瓊脂凝膠擴散反應;建議進行綜合分析，最後確診;

犬布氏桿菌病的防治

1、狗狗的血清如呈現陽性反應，應馬上採取隔離;

2、加強檢疫，發現病犬即行隔離或撲殺;目前尚未研究出有效的菌苗;被污染的犬舍、產房要用10%石灰乳或5%熱火鹼徹底消毒，流產胎兒、胎衣、羊水及陰道分泌物要妥善消毒或深埋;為犬接生或處理時應帶上手術手套;

3、布氏桿菌對卡那黴素、慶大黴素、鏈黴素及氯黴素等均敏感，對病犬可在隔離條件下進行治療;配合應用維生素C、維生素K，效果更好;

4、不要接觸患有布氏桿菌病的動物以及人，實驗室應合理地處理患病動物，照顧患病的動物的人要穿防護衣，洗手消毒;空頌擾氣飛沫傳染也會使本病在實驗設施中大規模的發生;

6. 布魯氏菌的具體研究

布魯氏菌部分外膜蛋白基因的克隆、表達及免疫原性研究
中文摘要:布魯氏菌是革蘭氏陰性的兼性細胞內寄生菌，可以引發世界范圍內人和牲畜及野生哺乳動物的感染，也是生物武器研究的熱點。布魯氏菌引發的傳染性疾病和巨大的經濟損失已經引起全世界的關注。 常用布魯氏菌疫苗功能基因序列分析及AMOS檢測方法研究
中文摘要：試驗內容,AMOS-PCR是一種能夠鑒別診斷布魯氏菌病原的一種PCR方法,本試驗中對其分型鑒定進行了研究。對我國常用疫苗S2、M5、S19、104M使用該方法，並做單一基因的AMOS-P.... 布魯氏菌熒光定量PCR快速檢測方法的建立及檢測試劑盒的組裝
中文摘要: 本研究以布魯氏菌(Brucella)基因組編碼31kDa核周質蛋白的BCSP31基因設計了布魯氏菌屬熒光定量PCR特異性引物和Taqman熒光探針，優化了熒光定量PCR反應體系和條件。
布魯氏菌BLS-L7/L12重組亞單位疫苗的初步研究
中文摘要：布魯氏菌病(Brucellosis)(簡稱布病)是由布魯氏菌(Brucella．spp)引起的人、畜共患傳染病。世界上有170多個國家和地區有人、畜布病存在和流行。在我國布病已波及28個....
布魯氏菌種特異性抗原抗體免疫膠體金試紙條的研製及初步應用
中文摘要: 將牛布魯氏菌雜交瘤細胞株4B8、1C9、1G9、1E2和羊布魯氏菌雜交瘤細胞株3C6、2D10、1E10擴大培養,制備單克隆抗體。純化後抗體非特異帶消失,抗體效價為1×106萬....
布魯氏菌種特異性單克隆抗體的研製和抗原捕捉ELISA方法的建立
中文摘要: 本研究選用兩株光滑型布魯氏菌B.abortus 544A和B.melitensis 16M,採用熱酚法和酚-甲醇法提取純化了二者的LPS和O鏈抗原，選擇SDS-聚丙烯醯胺凝膠電泳和瓊脂糖....
布魯氏菌新型疫苗的構建及其免疫原性研究
中文摘要: 布魯氏菌病（Brucellosis）是由細胞內寄生的革蘭氏陰性小桿菌布魯氏菌引起的一種人畜共患病。它以發熱，流產為主要症狀，嚴重威脅著人畜健康。全世界每年出現500,000例人布魯氏菌病....
白城地區布魯氏菌病的流行病學調查及病原學研究
中文摘要：布魯氏菌病(Brucellosis)是一種人畜共患疾病,流行於世界160多個國家。「近年來在我國畜牧業發展地區」，布魯氏菌病在人、畜間疫情愈演愈烈，范圍逐漸擴大，呈暴發和流行態勢，僅2006....
樹突狀細胞在布魯氏菌疫苗誘導免疫應答中的作用研究
中文摘要:：布魯氏菌病是由布魯氏菌引起的一種聳薰不即靜主要經消化道、呼吸道和泌尿生殖黏膜以及皮膚傷口感染,引起母畜流產和人的「波浪熱」等疾病。
大量研究證明：巨噬細胞是布魯氏菌的易感細胞。
奶牛布魯氏菌的PCR檢測與分子分型研究
中文摘要: 為了調查奶牛布魯氏菌病的流行和發病情況,本研究利用虎紅平板凝集試驗(RBT)和試管凝集試驗(SAT)對浙江省奶牛養殖較為集中的金華地區30個奶牛場28243頭奶牛進行布魯氏菌病原普查,結....
布魯氏菌外膜蛋白Omp39和Omp14的原核表達及其免疫原性鑒定
中文摘要：布魯氏菌病(Brucellosis)是由細胞內寄生的革蘭氏陰性布魯氏菌引起的一種人畜共患病。臨床上以發熱,流產為主要症狀,嚴重威脅著人畜健康。據世界衛生組織統計表明,全世界每年出現50萬....
牛、羊布魯氏菌單克隆抗體乳膠凝集試驗檢測方法的建立及初步應用
中文摘要: 參考已報導LPS和O-側鏈的提取方法，熱酚法、冷酚法。對牛布魯氏菌(B.abortus 544A)、羊布魯氏菌(B.melitensis 16M)的LPS和O-側鏈進行了提取純化鑒定。
羊布魯氏菌是革蘭氏陰性需氧桿菌。分類上屬於布魯氏菌屬,為非抗酸性,無芽孢,無莢膜,無鞭毛呈球桿狀。組織塗片或滲出液中常集結成團,且可見於細胞內，培養物中多單個排列。布魯氏菌在皮膚里能生存45～60天,土壤中存活40天，乳中存活數周。
對熱抵抗力弱，一般消毒葯能很快將其殺死。 布魯氏菌分子標記、毒力缺失疫苗株△YZ-2的研究
中文摘要: 當前布魯氏菌疫苗種類繁多,但各有缺陷。比如不能區分人與動物是人工免疫接種還是野生菌感染,並且病毒強,返祖現象嚴重,甚至使接種的人與動物發病,而不能廣泛應用,致使當前布魯氏菌病趨年上升。 ....
布魯氏菌的脂肪酸分型研究
中文摘要: 目的獲得布魯氏菌脂肪酸成分的數據資料,探索脂肪酸分型方法對布魯氏菌進行分型的可能性。 方法選擇布魯氏菌的19個標准株、7個疫苗株、64個野毒株,經化學方法提取菌體脂肪酸後，用氣相....

7. 影響布病虎紅平板凝集實驗因素有哪些

由於布魯氏菌培養的營養條件苛刻而且時間長，所以布魯氏菌病的診斷以血清學診斷為主。其原理主要是根據相應抗原抗體可以在體外發生特異性結合並呈現可見反應，用已知抗原(或抗體)檢測體液中未知的抗體(或抗原)。
虎紅平板凝集試驗（RBPT）靈敏度高，價格便宜，操作方便，檢測快速，適於群體布魯氏菌病的普查。在國際貿易中是牛、羊、豬布魯氏菌病檢測的指定試驗，在我國也用於人布魯氏菌病監測的初篩。
檢測布魯氏菌病所用的虎紅平板凝集抗原是用抗原性良好的布魯氏菌菌株經培養，滅活，離心收集菌體用虎紅染料染色後，懸浮於乳酸緩沖液中制備而成。

試驗原理：虎紅平板凝集試驗又稱為班氏孟加拉紅平板凝集試驗。由於所用的抗原是酸性（PH3.6-3.9）帶色的抗原，該抗原與被檢血清作用時能抑制血清中的IgM類抗體的凝集活性、檢查的抗體是IgG類，因此提高了反應的特異性。
虎紅平板凝集試驗具體方法如下：
一、材料准備
1、虎紅平板凝集抗原、標准陽性血清、陰性血清由制標單位提供，按說明書使用。
2、被檢血清應新鮮，無明顯蛋白凝塊，無溶血和無腐敗氣味。
3、潔凈的玻片或玻璃板，其上劃分成4cm2的方旅族昌格。
4、吸管或移液器，適於滴加0.03mL液體。
5、牙簽、混合棒或火柴桿，供攪拌用。
二、操作方法
1、實驗前，應將血清和抗原在室溫放置30-60min。
2、將玻璃板上各格標記被檢血清號，然後加相應被檢血清0.03mL。
3、在被檢血清旁滴加虎紅平板凝集抗原0.03mL。
4、用牙簽類小棒攪動血清和抗原，使之充分混合，在5分鍾內觀察結果。
5、每次試驗應設陰性血清、陽性血清對照。
三、結果判定
1、在陰、陽性血清對照成立的條件下，方可對被檢血清進行判定。
2、受檢血清在4min內出現肉眼可見凝集現象者判為陽性(+)，無凝集現象，呈均勻粉紅色者判為陰性(-)。

四、方法評價
1、虎紅平板凝集試驗檢測布魯氏菌病，方法簡便、快速、容易操作，適於基層大面積檢疫；
2、該方法敏感性較好，檢查牛的陽性率稍高於綿羊、山羊。
3、因為在酸性環境下IgM活性受抑，該法主要是檢查IgG類凝集抗體，所以特異性較好，與補體結合試驗、二巰基乙醇（2-ME）試驗和抗球蛋白試驗有穗高較高的吻合率。
4、該法受制備抗原時條件影響較大，所以每批制備拆扒抗原應予以檢查、標化方可應用。

8. 母畜傳染性流產的布魯氏菌病

布魯氏菌是一種革蘭氏陰性、細胞內寄生菌，能引起人禪頃和多種動物的急性和慢急性感染，被感染的人和動物表現為流產及不孕不育等症狀。 布魯氏菌細胞膜銷鬧是一個三層膜的結構，最內層的膜稱為細胞質膜、外層膜稱為外周胞質膜，最外層膜稱為外膜。外膜與聚肽糖（peptidoglycan，PG）層緊密結合組成細胞壁，外膜含有脂多糖（lipolpolysaccharide，LPS）、蛋白質和磷脂層。 布魯氏菌種特異性抗原抗體免疫膠體金試紙條的研製及初步應用 中文摘要: 將牛布魯氏菌雜交瘤細胞株4B8、1C9、1G9、1E2和羊布魯氏菌雜交瘤細胞株3C6、2D10、1E10擴大培養,制備單克隆抗體。純化後抗體非特異帶消失,抗體效價為1×106萬.... 布魯氏菌種特異性單克隆抗體的研製和抗原捕捉ELISA方法的建立 中文摘要: 本研究選用兩株光滑型布魯氏菌B.abortus 544A和B.melitensis 16M,採用熱酚法和酚-甲醇法提取純化了二者的LPS和O鏈抗原,選擇SDS-聚丙烯醯胺凝膠電泳和瓊脂糖.... 布魯氏菌新型疫苗的構建及其免疫原性研究 中文摘要: 布魯氏菌病（Brucellosis）是由細胞內寄生的革蘭氏陰性小桿菌布魯氏菌引起的一種人畜共患病。它以發熱，流產為主要症狀，嚴重威脅著人畜健康。全世界每年出現500,000例人布魯氏菌病.... 白城地區布魯氏虧襲罩菌病的流行病學調查及病原學研究 中文摘要: 布魯氏菌病(Brucellosis)是一種人畜共患疾病,流行於世界160多個國家。近年來在我國畜牧業發展地區,布魯氏菌病在人、畜間疫情愈演愈烈,范圍逐漸擴大,呈暴發和流行態勢,僅2006.... 樹突狀細胞在布魯氏菌疫苗誘導免疫應答中的作用研究 中文摘要: 布魯氏菌病是由布魯氏菌引起的一種人獸共患傳染病,主要經消化道、呼吸道和泌尿生殖黏膜以及皮膚傷口感染,引起母畜流產和人的「波浪熱」等疾病。大量研究證明,巨噬細胞是布魯氏菌的易感細胞。