㈠ 感受態細胞(細菌),什麼是感受態細胞
野生型E.coli並不容易轉化,這是由於細菌產生一種酶能迅速降解進入的外源DNA。經過多年的努力,科學家們發現了一種方法可以增加細胞吸收外源DNA的效率。那就是用化學方法處理細胞,使其改變膜對DNA的通透性。這種細胞就稱為感受態細胞,即細胞處於能攝入核酸分子時的生理狀態。這種方法已經成為基因工程的常規技術,它對於我們利用體外DNA重組技術來了解真核和原核生物的基殲碰因功能特別重要。細菌的轉化有兩種類型:一種是自然轉化(natural transformation),在自然轉化中細菌可以自由地吸收DNA,通過它來進行遺傳轉化;另一種是工程轉化(engineered transformation),在這種轉化中,細菌發生改變使得它們能攝入並轉化外源DNA。枯草桿菌中的轉化屬於自然轉化,E.coli轉化就腔嫌屬於氏圓談工程轉化。
㈡ 將目的基因導入微生物細胞。 是叫做…感受態細胞法 還是 鈣離子處理法
額,這個叫轉化。Cacl2法是用來做感受態細胞的,感受態細胞才會來轉化。
㈢ 將目的基因導入微生物細胞時,用鈣離子處理細胞,有什麼作用,它處理的是什麼
鈣離子處理過的細胞稱為感受態細胞 。所謂感受態 就是能夠比較容易吸收物質 即轎賣通透性變大 不管是原核還是真核的都可以。用氯化讓帆歲鈣處理細菌後,實質是增加了細胞膜的通透性,坦睜不是細胞壁。 細胞壁本來就是全透性的 。
㈣ 鈣離子處理細胞的方法與感受態細胞法的區別
將目的基因導入微生物細胞,應採用感受態細胞法(Ca2+處理法)
㈤ 中Ca2+處理細菌是增加細胞壁還是細胞膜的通透性
是增加細菌細胞壁的通透性
細菌細胞壁的主要功能是保護細胞、維持細胞形狀、協助鞭毛運動等,而且還與細菌的抗原性、致病性和對噬菌體的敏態蘆感性有關。細菌的細胞壁梁閉悶是多孔性的,可容許水和一些化學物質通過,但大分子的物質不能通過
高等教育出版社的《現代分子生物學》中沒有明確指出作用部位和原理:「將快速生長中的大腸桿菌置於經低溫預處理的低滲氯化鈣溶液中,便會造成細胞膨脹(形成原生質球),並與轉化混合物中的外源DNA形成粘附在細胞表面的復合物。立即將該體系轉移到42度下做短暫的熱刺激,復合物便會被細胞所吸收。」
轉化把純化的DNA導入細菌細胞的過程稱為轉化。原核細胞的轉化過程就是導入外源DNA的過程。對於大腸桿菌來說,人們一般採用先用冰冷的CaCl2處理,然後置於42°C高溫下幫助其吸收外源的DNA,這種方法的最大轉化頻率為10-3,其效率是每微克DNA一般可以轉化107~108個細胞。目前CaCl2轉化方法的機制尚不清楚,可能是細胞壁被打了一些孔,DNA分子從這些孔洞中進入細胞,而這些孔洞隨後又可以被宿主細胞修復。可以接橡彎受DNA的細胞稱為感受態細胞。大腸桿菌需要誘導才能變成感受態細胞,而有些細菌細胞則在自然條件下,或是在改變培養基和其他培養條件下就可變成感受態細胞。
㈥ 將目的基因導入微生物細胞時,用鈣離子處理細胞,有什麼作用,它處理的是什麼
首先用鈣離子處理細胞,使細胞處於一昌亂種能吸收周圍dna分子的生理狀態(感受態細胞)。然後將重組表達載體dna分子耐察檔溶於緩沖液與感受態細胞混合,在一定溫度下促進感受態細胞吸收dna分子,完成沒扒轉化過程
㈦ 將目的基因導入微生物細胞之前,要用Ca2+處理細胞,處理過的細胞叫()A.感受態細胞B.敏感性細胞C
由於原核生物繁殖快、多為單細胞、遺傳瞎山物質相對較少等,磨純中所以常用原核生物作為受體.在將目的基因導入微生物細胞之前,要用Ca2+處理細胞,使處理過的細胞成為感褲彎受態細胞,便於重組質粒的導入.
故選:A.
㈧ 用鈣離子處理成為感受態細胞的轉化方法
原因:目的基因導入植物細胞時,由於沒有經過鈣離子處理沒有變成感受態細胞,細胞的通透性小,目的基因難以進入細胞。
感受態細胞主要原理:
1、通過處理使細胞的通透性變大。
2、使得細胞膜表面出現一些孔洞,便於外源基因或載體進入感受態細胞。
3、由於細胞膜的流動性,這種孔洞會被細胞自身所修復。
(8)用ca2處理細胞稱為什麼方法擴展閱讀:
氯化鈣法:
1、將快速生長的大腸桿菌置於經低溫(0℃)預處理的低滲氯化鈣溶液中,便會造成細態棗胞膨脹,同時Ca2+會使細胞膜磷脂雙分子層形成液晶結構,促使細胞外膜與內膜間隙中的部分核酸酶解離開來,離開所在區域,誘導細胞成為感受態細胞。
2、此時,將該體系轉移到42℃下做短暫的熱刺激(90s),細胞膜的液帆燃拆晶結構會發生劇烈擾動,並隨機出現許多間隙,外源DNA就可能被細胞吸收。進入細胞的外源DNA分子通過復制、表達,實現遺傳信息的轉移,使受體細胞出現新的遺傳性狀。
3、將轉化後的細段信胞在選擇性培養基上培養,篩選出帶有外源DNA分子的陽性克隆。
㈨ 用鈣離子將受體細胞變為感受態細胞的方法叫什麼法
准確來說是:鈣離子轉化法
㈩ 將同的基因導入微生物的方法:先用Ca2+處理再融合為什麼一定要用Ca2+這個過程怎麼理解
用鈣離子處理細胞,是為了讓細胞處於一種能吸收周圍環境中DNA分子的生理狀態,這種細胞稱為感受態細謹搭皮胞,這種狀態的細胞更易完成目的基因的導枝慎入。可參考就中祥差生物選修三。