㈠ 高效液相色譜法測定對硝基酚為什麼要加鹽酸
鹽酸是用來調節樣品PH值的，在液相色譜分析中，有兩種情況下需要調節PH值，一種是為了適合液相色譜柱的適合范圍，比如普通的C18柱適用於PH4-PH9之間，也有適用於1.5-11ph值之間的，還有一種是樣品在某個PH值會有一個較大吸收峰，比如對硝基酚在PH1.5左右在405nm處可能有個吸收極大值（舉例說明，具體數值可能有誤）；
㈡ 如何分離對硝基苯酚、對硝基苯胺和硝基苯的混合物
先加入氫氧化鈉溶液，對硝基苯酚成鈉鹽進入水相，調酸萃取。對硝基苯胺和硝基苯加入鹽酸，對硝基苯胺成鹽酸鹽進入水相，調減萃取，最後剩下的就是硝基苯。
㈢ 六種苯酚類化合物的高效液相色譜法測定
方法提要
在酸性條件下，用GDX-502固相萃取柱吸附水中酚類化合物，乙腈解析柱中有機酚，高效液相色譜-紫外檢測器檢測。
方法適用於飲用水、地下水及湖庫水中苯酚、對硝基酚、間甲酚、2，4-二氯酚、2，4，6-三氯酚、五氯酚6種酚類的測定。對水中6種酚通常可檢測到10～50ng/L水平。
儀器
高效液相色譜儀帶紫外檢測器，恆流梯度泵系統。
色譜柱WatersSymmetryC8，4.6mm×250mm，粒徑5μm或性質相似的色譜柱。
GDX-502固相萃取小柱將使用過的SPE小柱填充物去掉並清洗干凈，濕法加入約為0.5g純化溶脹後的GDX-502樹脂，打開活塞放出甲醇，直到液面剛好達到樹脂床頂部。用10mL乙腈淋洗樹脂，再用10mL水淋洗樹脂，每次淋洗保持液面不低於樹脂床。
針頭過濾器孔徑0.45μm，直徑13mm，有機系。
固相萃取裝置12管固相萃取裝置。
真空泵。
采樣瓶1L具磨口玻璃塞的棕色玻璃細口瓶。
氮吹儀。
微量注射器10μL、50μL、100μL、1000μL等氣密性微量注射器。
K.D濃縮瓶25mL，帶1mL定量管，須標定容積後使用。
試劑
空白試劑水去離子水蒸餾再經Millipore處理。
高效液相色譜流動相為水(含1%乙酸)和乙腈的混合溶液。
碳酸氫鈉溶液c(NaHCO3)=0.05mol/L。
硫代硫酸鈉(Na2S2O3·5H2O)。
乙腈，甲醇HPLC級。
丙酮(C3H6O)農殘級。
乙酸。
鹽酸。
標准儲備溶液苯酚、對硝基酚、間甲酚、2，4-二氯酚、2，4，6-三氯酚、五氯酚六種的混標，購自國家標准物質研究中心。保存在-18℃冰箱中。
GDX-502樹脂使用前用丙酮浸泡數日，數次更換新溶劑到丙酮無色。再用乙腈迴流提取6h以上。純化後的樹脂密封保存在甲醇中備用。
替代物標准2-氟苯酚和2，4，6-三溴苯酚混標。
樣品的採集與保存
1)水樣採集。必須採集在玻璃容器中，在采樣點采樣及蓋好瓶塞時，樣品瓶要完全注滿，不留空氣。若水中有殘余氯存在，要在每升水中加入80mg硫代硫酸鈉除氯。
2)水樣保存。避光、4℃下中保存。采樣後7d內完成提取。40d內完成分析。
分析步驟
1)水樣預處理。用孔徑0.45μm的玻璃纖維濾膜，去除水中機械雜質。根據水中酚類化合物含量，取水樣50～1000mL，加入2-氟苯酚和2，4，6-三溴苯酚等替代物標准，用6mol/LHCl調至pH2。水樣以10mL/min的流速流經已活化的GDX-502固相萃取柱。當水樣完全流過柱子後，用0.05mol/L碳酸氫鈉溶液10mL淋洗柱子。用N2或空氣將柱中水分充分抽干。用4mL每次1mL乙腈淋洗小柱，前兩次淋洗液需在柱中平衡10min，後兩次平衡2min，合並淋洗液，最終用乙腈定容為1.00mL。0.45μm有機相濾膜過濾，HPLC分析。
2)校準曲線。
3)高效液相色譜分析條件。
紫外檢測器:雙波長檢測，檢測波長280nm和290nm。柱溫35℃。
流動相組成:A泵，99%水+(1+99)乙酸;B泵，100%乙腈。
流動相流量:1mL/min，恆流。梯度洗脫，洗脫程序，見表82.41。
表82.41 洗脫程序
4)色譜圖的考察。見圖82.13。
定性與定量分析
1)定性分析。以樣品保留時間和標樣保留時間相比較來定性。根據標准色譜圖各組分的保留時間，確定出被測樣品中目標物數目和名稱。對有檢出的樣品需用其他方法確證，如GC-MS等技術。
圖82.13 六種標准酚類樣品在不同檢測波長下的液相色譜圖(2μg/mL)
2) 定量分析。每個工作日必須測定一種或幾種濃度的標准溶液來檢驗校準曲線或響應因子。如若某一化合物的響應值與預期值間的偏差大於 10%，則必須用新的標准對該化合物繪制新的校準曲線或求出新的響應因子。使用紫外檢測器時，6 種酚類的最大吸收波長不同，為提高分析靈敏度，苯酚、間甲酚採用 280nm 波長定量; 對硝基酚、2，4 -二氯酚、2，4，6-三氯酚、五氯酚採用 290nm 波長定量。計算公式參見式 (82.16) 。
方法性能指標
1) 精密度、檢出限和線性范圍。按實驗方法，配製濃度為 0.5μg / mL 酚類混合標准樣品，按選定的工作條件分析，重復檢測 7 次，計算方法的精密度。檢出限的測量是以相對於基線噪音 3 倍時組分峰高所對應的濃度。各組分的精密度、檢測下限和線性范圍見表82.42。
表82.42 方法精密度、檢出限及線性范圍
2) 准確度。分別將 50μL 濃度為 2μg / mL 的混合標准樣品加入 0.25L 和 1.0L 試劑空白水中，用 502 樹脂固相萃取柱吸附富集，洗脫後定容 1.0mL，HPLC 測定，計算加標回收率。結果見表82.43。
表82.43 方法的准確度
3) 基體加標回收率。從北京不同地區取護城河水過濾後，分別取 1L 水加入表82.44中不同量的標准樣品，及未加入標准樣品的 1L 水，經水樣預處理，在 HPLC 上檢測，得到加標回收率。
表82.44 地表污水加標回收率
注: 2-氟苯酚、2，4，6-三溴苯酚為替代物，回收率均符合控制限要求。
㈣ 測定苯酚的方法
還有：
一：苯酚的測定—氧化還原滴定法
方法原理： 供試品加水溶解，取適量置碘瓶中，精密加溴滴定液（0.05mol/L）後再加鹽酸，立即密塞，振搖30分鍾，靜置15分鍾後，注意微開瓶塞，加碘化鉀試液，立即密塞，充分振搖後，加三氯甲烷，搖勻，用硫代硫酸鈉滴定液（0.1mol/L）滴定，至近終點時，加澱粉指示液，繼續滴定至藍色消失，並將滴定的結果用空白試驗校正，根據滴定液使用量，計算苯酚的含量。
試樣制備： 1. 溴滴定液（0.05mol/L）
配製：取溴酸鉀3.0g與溴化鉀15g，加水適量使溶解成1000mL，搖勻。
標定：精密量取本液25mL，置碘瓶中，加水100mL與碘化鉀2.0g，振搖使溶解，加鹽酸5mL，密塞，振搖，在暗處放置5分鍾，用硫代硫酸鈉滴定液（0.1mol/L）滴定至近終點時，加澱粉指示液2mL，繼續滴定至藍色消失。根據硫代硫酸鈉滴定液（0.1mol/L）的消耗量，算出本液的濃度，即得。
室溫在25℃以上時，應將反應液降溫至約20℃。本液每次臨用前均應標定濃度。
貯藏：置玻璃塞的棕色玻瓶中，密閉，在涼處保存。
2. 碘化鉀試液
取碘化鉀16.5g，加水使溶解成100mL，本液應臨用新制。
3. 澱粉指示液
取可溶性澱粉0.5g，加水5mL攪勻後，緩緩傾入100mL沸水中，隨加隨攪拌，繼續煮沸2分鍾，放冷，傾取上層清液，即得，本液應臨用新制。
4. 硫代硫酸鈉滴定液（0.1mol/L）
配製：取硫代硫酸鈉26g與無水碳酸鈉0.20g，加新沸過的冷水適量使溶解成1000mL，搖勻，放置1個月後濾過。
標定：取在120℃乾燥至恆重的基準重鉻酸鉀0.15g，精密稱定，置碘瓶中，加水50mL使溶解，加碘化鉀2.0g，輕輕振搖使溶解，加稀硫酸40mL，搖勻，密塞，在暗處放置10分鍾後，加水250mL稀釋，用本液滴定至近終點時，加澱粉指示液3mL，繼續滴定至藍色消失而顯亮綠色，並將滴定結果用空白試驗校正。每1mL硫代硫酸鈉滴定液（0.1mol/L）相當於4.903mg的重鉻酸鉀。根據本液的消耗量與重鉻酸鉀的取用量，算出本液的濃度。
室溫在25℃以上時，應將反應液及稀釋用水降溫至約20℃。
5. 稀硫酸
取硫酸57mL，加水稀釋至1000mL。
操作步驟： 精密稱取供試品約0.75g，置500mL量瓶中，加水適量使溶解並稀釋至刻度，搖勻，精密量取25mL，置碘瓶中，精密加溴滴定液（0.05mol/L）30mL，再加鹽酸5mL，立即密塞，振搖30分鍾，靜置15分鍾後，注意微開瓶塞，加碘化鉀試液6mL，立即密塞，充分振搖後，加三氯甲烷1mL，搖勻，用硫代硫酸鈉滴定液（0.1mol/L）滴定，至近終點時，加澱粉指示液，繼續滴定至藍色消失，並將滴定的結果用空白試驗校正。每1mL溴滴定液（0.05mol/L）相當於1.569mg的C6H6O。
註：「精密稱取」系指稱取重量應准確至所稱取重量的千分之一。「精密量取」系指量取體積的准確度應符合國家標准中對該體積移液管的精度要求。
二：
WS/T 49-1996 尿中苯酚的氣相色譜測定方法 (一) 液晶柱法
http://www.gb99.cn/ViewDownloadUrl.asp?ID=2466
pdf文件，無法在此顯示。可以自己下載觀看（適用於濃度很低的情況）
其實這些方法都有不同的適用范圍，很難說孰優孰劣。
㈤ 如何測量水中的對硝基苯酚的濃度
根據對硝基苯酚的濃度范圍可以採取不同的辦法：
比如，對於常量對硝基苯酚可以採取電導滴定的辦法；對於微量對硝基苯酚可以採用反相液相色譜的辦法分析。