葯代研究代謝途徑的常用方法

A. 同位素示蹤法建立以前的代謝研究方法是什麼

同位素標記是研究體內代謝水平的常用方法,將同位素標記的化合物引進代謝體系來觀察其代謝過程與結果的方法就是同位素示蹤法。同位素有穩定同位素和放

B. 物質代謝的研究方法

5.純酶的應用：從完整動物發展到亞細胞結構水平的各種方法中，各種酶都是相互混雜，而且與生物體內各種組成成分也未分開。這對完全了解一化學反應的細節是極其困難的。使用純酶不但能知道它所催化的確切反應，而且還可詳細研究其促進反應的各個方面。將許多由純酶促進的反應依次拼湊起來，對一些重要物質的代謝途徑，不論是合成的抑或是分解的，均可大體弄清。事實也是如此。現在蛋白質、糖類、脂類、核酸、生物氧化，以及一些生物活性物質等在體內的轉變途徑，都已有一定的了解。
此外，在物質代謝途徑的研究中，微生物也常被利用。從上面的敘述可以看出，在物質代謝的研究中，就使用的材料而言，是由完整動物逐漸發展到純酶。這一發展過程，正是現代科學技術和儀器發展的結果。近代技術和儀器的發展不但能定位、分離、提純、追蹤、鑒別及測定代謝物及其產物，而且還能對參加物質代謝中生物分子的組成、結構、構型、構象及其各種性質等加以研究，而所得結果往往有可能用以解釋或確定其在物質代謝中的功能。

C. 闡述代謝組學研究中對代謝物進行分離分析的常用技術有哪些

闡述代謝組學研究中對代謝物進行分離分析的常用技術有哪些
代謝組學的研究方法與蛋白質組學的方法類似，通常有兩種方法。一種方法稱作代謝物指紋分析 （metabolomic fingerprinting），採用液相色譜-質譜聯用（LC-MS）的方法，比較不同血樣中各自的代謝產物以確定其中所有的代謝產物。從本質上來說，代謝指紋分析涉及比較不同個體中代謝產物的質譜峰，最終了解不同化合物的結構，建立一套完備的識別這些不同化合物特徵的分析方法。另一種方法是代謝輪廓分析（metabolomic profiling）,研究人員假定了一條特定的代謝途徑，並對此進行更深入的研究。
對於代謝產物來說，不僅只有質譜峰這個特徵。更進一步說，質譜（MS）並不能檢測出所有的代謝產物，並不是因為質譜的靈敏度不夠，而是由於質譜只能檢測離子化的物質，但有些代謝產物在質譜儀中不能被離子化。採用核磁共振（NMR）的方法，可以彌補色譜的不足。劍橋大學的Jules Griffin博士，正在使用質譜與核磁共振結合的方法，試圖建立機體中的完整代謝途徑圖譜。Griffin用核磁共振檢測高豐度的代謝產物，由於核磁共振檢測的靈敏度不高，所以只用於分析低豐度代謝產物。

D. 研究微生物代謝途徑常用的方法有哪些

微生物的代謝調節主要有兩種方式：酶合成的調節和酶活性的調節.
酶合成的調節
【酶合成的調節】：微生物細胞內的酶可以分為組成酶和誘導酶兩類.組成酶時微生物細胞內一直存在的酶,它們的合成只受遺傳物質的控制,而誘導酶則時在環境中存在某種物質的情況下才能夠合成的酶.例如,在用葡萄糖和乳糖作碳源的培養基本上培養大腸桿菌,開始時,大腸桿菌只能利用葡萄糖而不能利用乳糖,只有當葡萄糖被消耗完畢以後,大腸桿菌才開始利用乳糖,只有當葡萄糖被消耗完畢以後,大腸桿菌才開始利用乳糖.
酶活性的調節
【酶活性的調節】：微生物還能夠通過改變已有酶的催化活性來調節代謝的速率.酶活性發生主要原因時,代謝過程中產生的物質與酶結合,致使酶的結構產生變化.這種調節現象在核苷酸、維生素的合成代謝中十分普遍.
總結
上述兩種調節方式時同時存在,並且密切配合、協調作用的.通過對代謝的調節,微生物細胞內一般不會累積大量的代謝產物.

E. 代謝流分析實驗如何進行

然而，從自然界分離具有特殊性狀的野生型微生物菌種以及利用傳統誘變方法篩選遺傳性狀優良的菌種，則是代謝設計和靶點選擇的重要信息資源和理論依據。經過長達數十年的研究，生物化學家已對相當數量生物細胞內的代謝途徑進行了鑒定，並繪制出較完整的代謝網路圖，這就為代謝工程的實施奠定了基礎。然而，正確的靶點設計還必須對現有的代謝途徑和代謝網路信息進行更深入的分析。首先，根據化學動力學和計量學原理測定代謝網路中的代謝流分布（即代謝流分析），其中最重要的是細胞內碳和氮元素的流向比例關系；其次，在代謝流分析的基礎上調查其控制狀態、機制和影響因素（即代謝控制分析）；最後，根據代謝流分布和控制的分析結果，確定代謝設計的合理靶點，通常包括擬修飾基因的靶點、擬導入途徑的靶點或者擬阻斷途徑的靶點等。代謝流分析是指導代謝工程（被稱為第三代基因工程）的重要方法，目前國內仍處於研究的初期階段，國內天津大學趙學明教授翻譯了該領域著名的圖書《代謝工程-原理與方法》，可以得到詳細的信息。

F. 葯用植物次生代謝產物生產途徑有哪些

葯用植物次生代謝產物的五種生產途徑。
1、直接從植物中提取次生代謝產物；
2、化學合成模擬；
3、微生物(細菌或真菌)發酵；
4、利用植物組織和細胞培養法生產次生代謝產物；
5、利用基因工程生產次生代謝產物。

G. 葯代動力學有哪些實驗步驟

1.要擬定方案
2.要招募受試者
3.通過倫理委員會
4.對受試者要有知情同意書
5.實驗葯物和受試葯物的准備
6.受試者服葯
7.采血
8檢測分析
9.統計報告

H. 體內葯物分析常用的分析方法有

葯學專業知識（一）第六章生物葯劑學，是研究葯物吸收、分布、代謝與排泄過程，闡明葯物制劑劑型因素，生物因素與葯效關系。下面小編總結了葯物在體內的各過程：

體內過程示意圖
了解完葯物在體內的過程示意圖，接著我們來掌握執業葯師考試中涉及的相關考點：

1. 需要掌握的幾個概念

2. 葯物的跨膜轉運

【相關考題】

1.大部分口服葯物的胃腸道中最主要的吸收部分是

A.胃

B.小腸

C.盲腸

D.結腸

E.直腸

2.藉助載體或酶促系統，消耗機體能量，從膜的低濃度一側向高濃度一側轉運的方式是

A.濾過

B.簡單擴散

C.易化擴散

D.主動轉運

E.膜動轉運

答案：B D

I. 急求葯物代謝論文1500字

中葯是中華民族的偉大瑰寶，有著豐富的資源和悠久的
傳承歷史，歷經了千百年的臨床實踐，雖然積累了豐富的臨床
經驗，為中華民族的健康事業作出巨大的貢獻。但是中葯的
研發仍然充滿了挑戰，如葯材來源變異大、有效成分不明、質
量控制困難、缺乏清晰准確的安全性評價、葯理作用機制不明
等等。因此，至今還沒有一種中葯通過美國FDA的新葯審
批；而且，歐盟已經頒發了(歐盟傳統葯品法案)，也直接影響
了中葯的出口。為了扭轉目前這種尷尬的境地，實現真正與
國際接軌。發展祖國中醫葯事業，必須對中葯的安全性、作用
機理及其葯理活性成分有明確的認識，並深入剖析。近十多
年來。在西方葯物發現和開發階段利用體外和計算機輔助研
究技術進行化合物的吸收、分布、代謝、排泄和毒性(ADME／
T)特性研究，大大提高了新葯研發的成功率【1]。所以借鑒西
方新葯研發的成功經驗，將ADME／T評價體系引入到中葯的
研究中。特別是葯物代謝研究，不僅有利於揭示中葯的真正有
效成分和作用機理，而且有利於研究中葯復方的配伍規律等。
本文將綜述葯物代謝(Dmg Metabolism)在中葯研究中的應用
概況及其進展。
1 葯物的代謝
葯物在機體內的消除方式主要有兩種：一種是葯物不經
任何代謝而直接以原型隨糞便和尿液排出體外；另一種是部
分葯物在體內經代謝後，再以原型和代謝物的形式隨糞便和
尿液排出體外。葯物的代謝(drug metabolism)也稱為葯物生
物轉化(biotransformation)，是葯物從體內消除的主要方式之
一【2J
。葯物在體內的代謝主要分為兩個步驟【3j，第一步稱為
I相代謝反應。葯物在I相反應中被氧化、還原或水解，催化
I相代謝反應的酶主要為肝微粒體中的細胞色素P450酶。
第二步稱為Ⅱ相結合反應。葯物在Ⅱ相結合反應中與一些內
源性的物質(如葡萄糖醛酸、硫酸、甘氨酸、谷胱甘肽等)結合
或經甲基化、乙醯化後排出體外。催化Ⅱ相結合反應的酶主要
有葡萄糖醛酸轉移酶、谷胱甘肽一s一轉移酶、磺基轉移酶和
乙醯基轉移酶等【4 】。其中P450酶在眾多外來化合物的生
物轉化過程中扮演了重要角色，被P450酶催化的底物相當廣
泛，90％以上葯物的氧化是由P450酶催化的。是人體內最重
要的代謝酶，其催化的I相代謝反應是化合物在體內代謝的
關鍵步驟。因為這一步反應通常是葯物從體內清除的限速步
驟，可影響化合物的半衰期、清除率等動力學特性，且P450酶活性常常隨遺傳因素、年齡、疾病狀態或其他葯物相互作用的
影響而發生改變L7J。
一般來說，葯物在體內經過代謝轉化後其葯理活性發生
了較為復雜的變化，大致分為四種情況：第一，代謝物活性或
毒性降低；第二，形成活性代謝物；第三，形成毒性代謝物；第
四，前葯的代謝激活。總之，葯物代謝轉化的最終結果是使葯
物極性增加。有利於葯物的排出體外【2．3】。
2 葯物代謝研究的方法
葯物代謝的研究方法分為體內法和體外法，兩者各有優
缺點，所以通常兩者相結合進行葯物的評價研究。體外研究
可以通過高通量篩選對大量化合物進行篩選，對大量候選化
合物的葯動學特性作出初步的評價。縮小體內篩選的范圍，一
般應用於葯物發現和開發的初期。體內代謝研究是體外研究
的良好的銜接點，因為有時候應用體外模型預測體內參數不
理想，必須藉助體內篩選。當然在葯物開發的後期，也要進行
動物和人體體內葯物代謝研究，總之，兩者相輔相成【3J。
2．1 體內法葯物的體內代謝研究主要是在整體水平上進
行的。給予一定劑量的葯物後，於不同的時間段分別收集膽
汁、尿液和糞便，然後用高效液相色譜法(HPLC)或液質聯用
技術(LC-MS／MS)等方法在膽汁、尿液和糞便樣品中尋找葯
物的代謝物(包括I相和Ⅱ相代謝物)。並對代謝產物進行初
步的分析和鑒定，最終確定葯物在體內的代謝途徑。
2．2 體外法肝臟是葯物代謝的主要和重要器官之一，是葯
物生物轉化的主要場所，因為富含有豐富的肝葯酶，所以大部
分的葯物在肝臟被代謝。故葯物的體外代謝模型多以肝臟為
基礎。常見的有：肝微粒體體外溫孵法、肝細胞體外溫孵法、離
體肝灌流法、肝切片法和重組I)450酶體外溫孵法等。葯物體
外代謝研究中應用到的方法除了高效液相色譜法(HPLC)或
液質聯用技術(LCMS／Ms)，還有分子生物學的方法，如we．
ston bloting等。體外法因有其獨特的快速簡便和節約成本等
優勢和特點。所以在葯物代謝研究中得到了廣泛的應用。
除了肝臟以外，口服葯物還必須經過胃腸道消化吸收後
才能進入血液發揮療效(如人參皂苷的體內代謝[8 )，因此葯
物在胃腸內菌群的代謝越來越受到人們的重視，而且已經有
人把葯物在腸內菌代謝的研究引入到葯物代謝的研究范疇。
其常見的研究方法也有整體腸內菌代謝實驗和離體實驗兩
種，前者是對人或動物服葯後的消化道各部分及其內容物進
行分析，後者有糞便溫孵法和消化道內容物溫孵法，隨著微生
物技術的發展，也可用腸內菌純菌株、混合菌或粗酶進行代謝
研究。3 葯物代謝在中葯研究中的應用
3．1 中葯代謝產物譜的定性研究
要了解中葯在體內的代謝轉化規律，首先應該明白其在
體內轉化成什麼產物，而且這些產物有可能是活性增強的產
物或活性減弱的產物。也有可能是毒性成分。因此對代謝產物
譜的研究顯得特別重要，它不僅可以闡明其在體內的代謝途
徑和機制，也可以進行代謝產物的有效性和安全性評價。國
內對這一方面的研究報道較多，一般是將中葯代謝後的各種
生物樣品採用各種手段分離後進行分析鑒定。如阿基業等人
給予大鼠一定劑量的鹽酸關附甲素後，在不同時間間隔收集
大鼠尿液，應用液質聯用法進行分析鑒定。結果表明關附甲素
在大鼠體內可以轉化成為關附壬索、關附醇胺、關附甲素葡萄
糖醛酸和硫酸結合物、關附壬索葡萄糖醛酸和硫酸結合物，經
過生物轉化，代謝產物的極性增加，葯效下降【9j。李曉海等人
採用大鼠肝微粒體體外溫孵法和大鼠體內法對左旋一葉蔌鹼
的代謝轉化進行了研究，代謝產物分別鑒定為6一位羥基、6．位
羰基及5一位a及B羥基取代的左旋一葉蔌鹼，還證實了體內
6一位羥基代謝物進一步形成了Ⅱ相結合物。最終基本闡明左
旋一葉蔌鹼在大鼠體內外代謝轉化的途徑Cio】。徐文等人將
待測淫羊藿苷和淫羊藿次苷Ⅱ與新鮮配製的大鼠腸內溶物懸
液在37℃孵化，採用高效液相色譜同時測定孵化前後溶液中
淫羊藿苷和淫羊藿次苷Ⅱ的濃度，結果表明淫羊藿苷被腸道
菌群迅速代謝成淫羊藿次苷Ⅱ，而淫羊藿次苷Ⅱ不被代
謝[11]。
3．2 中葯代謝酶譜的研究
鑒定參與中葯代謝的代謝酶種類及其貢獻，對中葯現代
化的研究同樣重要。因為遺傳因索和環境因素造成人體對葯
物代謝的存在差異，這種差異表現為代謝酶的表達差異，其根
本原因是代謝酶的基因多態性決定的，依此可將人群分為強、
中和弱代謝型等表型C12J。強代謝者和弱代謝者之間葯代動
力學性質存在顯著差異[13J，因此給予不同代謝表型人群相同
的劑量，葯物產生的療效會完全不一樣。甚至會中毒現象的發
生【l 。所以鑒定參與中葯代謝的代謝酶種類及其貢獻有利
於指導臨床合理用葯，保證用葯安全有效。此外中葯代謝酶
譜的研究還有利於研究中葯的配伍規律、中葯毒性研究等。
高凱等人採用大鼠肝微粒體體外溫孵法和高效液相色譜技
術，通過運用不同的CYP同工酶選擇性抑制劑和底物進行抑
制實驗，初步選出介導甘草次酸單羥化所涉及的CYP同工酶
為CYP 3A1／2和CYP 2C9／10 cis}，研究結果提示當甘草次酸
在CYP 3A1／2和CYP 2C9／lO弱表達的代謝者人群中使用
時，應該注意劑量的控制，否則可能會出現中葯的安全性問
題。
3．3 中葯對代謝酶的誘導或抑制以及葯物間相互作用研究
中葯的化學成分非常復雜。許多中葯有效成分對
CYP450酶表現出明顯的誘導或抑制。如中葯白芷中富含呋
哺香豆素化合物，研究發現白芷提取物可以抑制大鼠肝微粒
體CYP 3A、CYP 2C和CYP 2D1的活性，所以會抑制甲苯磺
丁脲、地西泮、硝苯地平等在體內的代謝[16]。中葯黃芩的主
要有效成分黃芩苷。對 1Al、CYP 2B1和CYP 2Cll這3種同工酶有明顯的誘導作用【l 。
中葯在lJ笛床上常復方用葯或與化合物合並用葯。這就有
可能發生葯物間的相互作用，引起葯效、葯動學、毒性等的變
化。葯物間的相互作用主要表現為葯物代謝酶的誘導或抑
制。如人參的有效成分人參皂苷Rd，它對CYP3A4有抑製作
用；而人參再造丸、通心絡等中成葯組方中又含有人參，因此
如果患者在服用通心絡、人參再造丸等中成葯時，同時服用經
CYP3A4代謝的化學葯硝苯地平、胺碘酮等，就可能會導致低
血壓等不良反應[18]。高月等人考察中葯丹參、苦參、人參及
其與藜蘆合用對大鼠肝P450酶活力及mRNA表達的影響，
結果顯示這3種中葯與藜蘆配伍合用後均不同程度的抑制了
P450酶含量和主要的葯物代謝酶CYP3A及CYP2E1的酶活
力。提示可能正是由於3種中葯與藜蘆配伍後對葯物代謝酶
的抑製作用減緩了劇毒中葯藜蘆中相關物質的代謝．致毒性
增加，產生了不期望的中葯毒性【l 。
4 展望
隨著科學技術的發展，中葯代謝的研究除了深入研究單
一成分的代謝外。首先應加強有效部位、單味葯材和中葯復方
的代謝研究，這樣才能更准確更全面的闡明中葯的葯效作用
機制；其次，應該深入開展中葯基於代謝酶的配伍規律的研
究，闡明中葯復方中各單味葯材之間的相互關系以及中葯復
方的解毒機制。總之，隨著中葯代謝的深入研究，以及其他學
科和技術的合作。必將揭示中葯的代謝規律、中葯的配伍規律
和解毒機制等，為中葯新葯的研製、創新葯物的發現以及指導
臨床用葯作出貢獻。