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光學分析方法中

發布時間:2023-01-23 14:15:15

A. 光的特性分析方法包括

光同時具備以下四個重要特徵:

1、在幾何光學中,光以直線傳播。筆直的「光柱」和太陽「光線」都說明了這一點。

2、在波動光學中,光以波的形式傳播。光就像水面上的水波一樣,不同波長的光呈現不同的顏色。

3、光速極快。在真空中為3.0×108m/s,在空氣中的速度要慢些。在折射率更大的介質中,譬如在水中或玻璃中,傳播速度還要慢些。

4、在量子光學中,光的能量是量子化的,構成光的量子(基本微粒),我們稱其為「光量子」,簡稱光子,因此能引起膠片感光乳劑等物質的化學變化。

B. 光學分析法的紫外-可見分光光度法

紫外-可見光區一般指波長200nm至760nm范國內的電磁波。根據物質分子對此光區電磁波的吸收特性進行定性和定量分析的方法稱為紫外-可見分光光度法。紫外分光光度法使用的輻射波長范圍是200~400nm,主要是引起分子中的外層價電子的能級躍遷。分子吸收此區域的紫外線後,在發生價電子能級躍遷的同時,也伴隨著分子的振動和轉動能級的躍遷,故形成帶狀紫外吸收光譜。據此可進行某些類型的有機物的定性、定量和結構分析:可見分光光度法使用的輻射波長范圍是400~760nm,具有長共軛結構的有機物或有色無機物吸收一定波長的可見光後,發生價電子能級躍遷,並伴隨振動和轉動能級的躍遷,其吸收光譜也是帶狀光譜。通常紫外分光先度計都有可見光波段,因此常將兩者一起稱為紫外-可見分光光度法。

C. 光學分析的分類

光學分析可分為非光譜法及光譜法兩大類方法。 分子信標技術是熒光分析方法在DNA檢測領域的又一延伸。分子信標的概念是1996年由Tyagi等提出的。分子信標是一段與特定核酸互補的DNA探針,空間結構上呈「發夾」結構,其中環序列是與靶DNA互補的探針;莖的一端連接上一個熒光分子,另一端連上一個淬滅分子。當靶序列不存在時,分子信標呈「發夾」結構,莖部的熒光分子與淬滅分子非常接近(7~10nm),熒光分子發出的熒光被淬滅分子吸收,此時檢測不到熒光信號;當有靶序列存在時,分子信標的環序列與靶序列特異性結合,形成穩定的雙鏈體線性結構,此時熒光分子與淬滅分子分開,產生可被檢測的熒光信號。分子信標技術具有背景信號低、靈敏度高、特異性強等優點,在DNA檢測中有著廣闊的應用前景。目前,分子信標技術已應用於PCR靶標的實時熒光定量檢測。Perlette等在袋鼠腎細胞質中注入分子信標,實時檢測了活細胞中的RNA及RNA/DNA雜交過程。通過選擇不同的熒光分子-淬滅分子對,可設計出多色分子信標,熒光系統檢測到不同顏色的熒光,可實現多個靶序列的同時檢測。另外,可利用金錶面對熒光的淬滅作用,將熒游標記的「發夾」分子固定在金錶面,沒有靶序列時熒光被金錶面淬滅,有靶序列雜交後產生熒光。
實際上,分子信標是一種基於熒光能量轉移(FRET)的技術。熒光能量轉移是指當熒光給體和受體間的分子距離足夠近時,發生分子間的能量轉移,熒光從一個分子向另一個分子轉移。因為DNA的存在可影響體系的能量轉移,引起熒光強度的改變,熒光能量轉移技術在DNA檢測中有著廣泛的應用。高峰等研究了吖啶橙-羅丹明B二聚體能量體系作為熒光探針用於DNA的測定。Bazan等在帶正電的共軛聚電解質(cationicconjugatedpolymers,CCP)中加入熒游標記的肽苷酸(PNA-C*),由於PNA本身不帶電,不會和共軛聚電解質發生作用。當溶液中加入和PNA互補的DNA時,DNA帶有很強的負電荷,會和帶正電的共軛聚電解質形成復合物,同時DNA和熒游標記的肽苷酸雜交,形成共軛聚電解質-DNA-(PNA-C*)的三元復合物,拉近了共軛聚電解質和熒光探針C*熒光強度即可判斷出是否有待測DNA。 常用的比色法有兩種:目視比色法和光電比色法,兩種方法都是以朗伯-比爾定律(A=εbc)為基礎。常用的目視比色法是標准系列法,即用不同量的待測物標准溶液在完全相同的一組比色管中,先按分析步驟顯色,配成顏色逐漸遞變的標准色階。試樣溶液也在完全相同條件下顯色,和標准色階作比較,目視找出色澤最相近的那一份標准,由其中所含標准溶液的量,計算確定試樣中待測組分的含量。
光電比色法是在光電比色計上測量一系列標准溶液的吸光度,將吸光度對濃度作圖,繪制工作曲線,然後根據待測組分溶液的吸光度在工作曲線上查得其濃度或含量。與目視比色法相比,光電比色法消除了主觀誤差,提高了測量准確度,而且可以通過選擇濾光片來消除干擾,從而提高了選擇性。但光電比色計採用鎢燈光源和濾光片,只適用於可見光譜區和只能得到一定波長范圍的復合光,而不是單色光束,還有其他一些局限,使它無論在測量的准確度、靈敏度和應用范圍上都不如紫外-可見分光光度計。20世紀30~60年代,是比色法發展的旺盛時期,此後就逐漸為分光光度法所代替。

D. 在光學分析法中,採用鎢燈作光源的是什麼光譜,採用氘燈作光源的是什麼光譜

氘燈一般用的是紫外光譜,鎢燈一般用於400nm~2500nm,他們經常結合使用在光譜儀或者單色儀中 極星光學

E. 光學分析法有哪些類型

光學分析法是基於物質對光的吸收或激
發後光的發射所建立起來的一類方法,
比如紫外-可見分光光度法,紅外及拉曼
光譜法,原子發射與原子吸收光譜法,
原子和分子熒光光譜法,核磁共振波譜
法,質譜法等。

F. 原理為輻射的發射的光學分析法有哪些

金屬的光譜分析法是指通過分析樣品的光譜特性來定量其中不同元素的含量。以較為先進的直讀光譜儀為例,具體分析過程包括:1.通過電容火花放電的方式使被測金屬表面蒸發形成原子蒸汽,由於受到高能激發,這些原子的核外電子會從基態躍遷到激發態,由於激發態的電子處於不穩態,會躍遷回基態,並放出光子,形成光源。2.不同的元素其發出的光子特徵波長不一樣。將光源的光通過分光系統分光後,由光電檢測器檢測各個元素特徵波長上的光強,光強的大小就表示該元素含量的高低。與化學分析法相比,光譜分析的突出優點在於全元素同時分析,分析速度快,通常在30秒內可以報出所有元素的含量,並且由於全自動分析,分析准確度高。而化學分析則不同的元素需要採取不同的分析方法,速度極其慢,而且測定結果受外圍環境以及操作員操作水平限制,重復性和准確度較差。國內目前能制備大型的直讀光譜分析儀,價格一般20w左右,江蘇沒有生產商。大型儀器的缺點在於運行維護成本高,佔地面積大,對外界環境的要求高,不適用於中小企業的使用。小型光譜儀目前國內正處於研製階段,尚未有商業成型的儀器。國外的小型光譜儀售價一般在40w左右。

G. 光學分析法可分為光譜法與非光譜法,兩者的本質區別是

我是學分析化學的.
光譜法是輻射光子與物質作用,引起物質電子或原子結構發生變化,產生發射或吸收光子的現象,這類光譜發最終獲得的數據也通常是直觀的波長—強度圖譜.
光譜法有紫外-可見吸收、分子熒光磷光光譜、紅外吸收光譜、拉曼光譜、核磁共振.
非光譜法是光子與物質作用,物質本身並沒有太大改變,只是光的輻射方向與物理性質的變化.
通常這類有折射法、旋光色散法、偏振法.

你的答案可以填:紫外-可見、紅外、熒光.折射、旋光色散、偏振.

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