❶ 急呀 知道的給說一下 生化實驗！！！製作定 量分析測定標准曲線的原理和方法
植物生理生化實驗課程教學大綱
一、課程基本概況
1. 課程名稱：植物生理生化實驗
2. 課程名稱（英文）： Experiments of Plant physiology and Biochemistry
3. 課程編號：B16035
4. 課程總學時：60學時（均為實驗教學）
5. 課程學分：3學分
6. 課程分類：必修課
7. 開設學期：第3、4學期
8. 適用專業：園藝、農學、植物保護、植物生物技術等農科類本科專業。
9. 先行課：《物理學》、《化學》、《分析化學》、《植物生理生化》等。
二、課程性質、目的和任務
本課程是植物生理學的配套課程，是農科類各專業必修的專業基礎課，屬於以植物為對象各專業的工具課程之一。其先行課為物理學、化學、分析化學、植物學、生理生化。該課程主要介紹植物生理生化的實驗研究技術以及常用植物生理生化指標的分析方法及原理，為專業課的學習與科學研究工作提供技術支持與手段。
通過本課程的學習，要求學生掌握植物生理生化的一些基本實驗技術與原理，熟悉植物生理生化常規儀器的使用方法，能獨立設計並完成一般性實驗內容，操作規范，能夠完成以植物為材料的基本的科學研究工作。從而達到更好地利用植物、人為地影響和改造植物，使之更大限度的為人類服務的目的。。
三、主要內容、重點及難點
實驗一 應用紙層析分離鑒定氨基酸
（一）目的要求：學習紙層析分離技術，掌握紙層析分離鑒定氨基酸的原理和方法。
（二）重點：紙層析分離鑒定氨基酸的原理、操作方法、結果分析。
（三）難點 點樣適量、分析確定層析結果。
實驗二 氨基酸含量的測定——茚三酮比色法
（一）目的要求：掌握茚三酮比色法測定氨基酸含量的原理和方法；學習分光光度計的使用；學習標准曲線的製作。
（二）重點：實驗原理和操作方法
（三）難點：樣品提取、標准曲線製作和使用。
實驗三 可溶性糖含量的測定——蒽酮法
（一）目的要求：掌握蒽酮法測定可溶性糖含量的原理和方法，了解可溶性糖含量這一生理指標的意義。練習分光光度計的使用和標准曲線的製作。
（二）重點：實驗原理和方法；蒽酮試劑的配製。
（三）難點：樣品提取及適度稀釋，標准曲線製作和使用。
實驗四 蛋白質含量的測定
（一）方法：考馬斯亮藍比色法；福林酚比色法
（二）目的要求：掌握測定蛋白質含量的原理和方法，了解蛋白含量測定的意義及使用方面。練習分光光度計的使用和標准曲線的製作。
（三）重點：了解實驗原理，正確運用方法。
（四）難點：樣品提取及適度稀釋，標准曲線製作和使用。
實驗五 酶的基本性質
（一）目的要求：通過實驗，進一步理解酶的重要性質和影響酶活性的條件。
（二）重點：酶的專一性，溫度、pH、激活劑、抑制劑對酶活性的影響，鑒定酶促反應速度快慢的依據和方法
（三）難點：鑒定酶促反應速度快慢的依據和方法。
實驗六 RNA的提制
（一）目的要求：掌握濃鹽法提制RNA的原理和方法，進一步理解RNA的理化性質。
（二）重點：理解實驗原理和各步操作的方法、意義和目的。
（三）難點：理解實驗原理和各步操作的方法、意義和目的。
實驗七 RNA含量的測定
（一）目的要求：掌握苔黑酚法測定RNA含量的原理和方法；學習RNA含量和純度的計算方法及計算原理；進一步練習分光光度計的使用和標准曲線法的應用。
（二）重點：掌握苔黑酚法測定RNA含量的原理和方法；學習RNA含量和純度的計算方法及計算原理。
（三）難點：正確稱量，掌握測定原理。
實驗八 澱粉酶活性的測定
（一）目的要求：了解α澱粉酶和β澱粉酶催化的產物和作用條件，掌握α澱粉酶活性、β澱粉酶活性和澱粉酶總活性的測定原理和方法；進一步理解酶的作用條件。
（二）重點：澱粉酶活性的測定原理和方法，進一步理解酶的作用條件。
（三）難點：通過控制實驗條件，准確測定不同澱粉酶的活性。
實驗九 電泳法分離酶或蛋白質
（一）方法：醋酸纖維薄膜電泳；聚丙烯醯胺凝膠電泳
（二）目的要求：掌握電泳的概念、原理以及電泳技術
（三）重點：電泳的原理和電泳技術
（四）難點：電泳技術的掌握
實驗十 穀物種子中賴氨酸含量測定
（一）方法：茚三酮溶液顯色法；染料結合（DBL）法；.三硝基苯磺酸（PDAB）法
（二）目的要求：掌握測定原理、方法及技術
（三）重點：原理及標准曲線製作
（四）難點：材料處理
實驗十一 植物組織水勢的測定
（一）方法：小液流法
（二）目的要求：學習並掌握小液流法植物組織水勢的測定方法，理解水分在細胞內外的轉移的條件和水勢的概念。
（三）重點：測定原理和方法
（四）難點：根據試材確定濃度系列；檢驗操作方法。
實驗十二 呼吸強度的測定
（一）方法：小籃子法；氧電極法。
（二）目的要求：掌握呼吸強度的測定原理和方法；學習滴定管的使用。
（三）重點：測定原理和方法。
（四）難點：滴定管的使用；滴定終點的把握。
實驗十三 葉綠素含量的測定
（一）方法：光電比色法
（二）目的要求：掌握分光光度法測定葉綠素含量的原理和方法；學習分光光度計的使用。
（三）重點：葉綠素的提取、含量計算。
（四）難點：葉綠素的提取、定容；按要求稀釋到適當濃度；正確地使用分光光度計。
實驗十四 光合色素的提取分離與理化性質
（一）目的要求：進一步理解光合色素的重要理化性質；學習鑒定理化性質的方法。
（二）重點：光合色素的種類；光合色素的化學與光學性質；紙層析分離鑒定光合色素的方法。
（三）難點：皂化反應；吸收光譜。
實驗十五 硝酸還原酶活力測定
（一）方法： 對-氨基苯磺酸法。
（二）目的要求：掌握測定硝酸還原酶活力的原理及方法，加深對硝酸還原酶在植物體內重要作用的認識；學習真空泵的使用；練習標准曲線的製作。
（三）重點：測定原理和方法；真空泵的使用；標准曲線的製作。
（四）難點：理解測定原理；製作出符合要求的標准曲線；理解各步操作的目的性。
實驗十六 種子生活力的測定
（一）方法（三種方法同時做）：紅墨水染色法；TTC染色法；BTB顯色法。
（二）目的要求：理解測定原理；學會用三種方法測定種子生活力。
（三）重點：三種方法的原理與操作；各步注意事項。
（四）難點：在實踐中能根據具體種子的特點選擇適用的測定方法；能正確判別種子的生活力。
實驗十七 超氧化物歧化酶（SOD）活性測定
（一）方法：NBT光化還原法。
（二）目的要求: 認識SOD的作用及測定SOD活性的意義，掌握SOD的測定原理和方法。
（三）重點：掌握測定原理和方法；理解照光的意義。
（四）難點：測定原理；具體使用中能根據酶活決定加入提取液的數量；各種試劑的作用；實驗條件的控制。
實驗十八 過氧化物酶（POD）活性的測定
（一）方法：聯苯胺氧化法；愈創木酚法。
（二）目的要求：認識過氧化物酶的作用，掌握過氧化物酶活性的測定原理和方法。
（三）重點：明了測定原理；掌握測定方法。
（四）難點：具體使用中能根據酶活決定加入提取液的數量及三濾乙酸的量；准確保溫。
實驗十九 丙二醛（POD）含量的測定
（一）方法：硫代巴比妥酸法。
（二）目的要求：認識丙二醛的來源、作用及測定意義，掌握測定原理和方法。
（三）重點：測定原理和方法
（四）難點：明了測定原理；掌握測定方法。
實驗二十 植物細胞差別透性的測定
（一）方法：電導率儀法。
（二）目的要求：了解逆境對細胞膜透性的影響，掌握電導儀法測定細胞膜透性的原理和方法；學習電導儀的使用。
（三）重點：明了測定原理；掌握測定方法；學會使用電導率儀。
（四）難點：正確控制實驗環節，正確使用電導率儀。
實驗二十一 光合強度的測定
（一）方法：改良半葉法；氧電極法；光合測定儀法。
（二）目的要求：學習不同方法測定光合強度的原理；進一步理解總光合強度和凈光合強度；掌握測定方法；要求能根據需要和條件獨立完成光合強度測定。
（三）重點：相關儀器的使用、測定原理和方法；實驗環節的條件控制。
（四）難點：正確使用儀器和測定方法。
實驗二十二 脯氨酸含量影響
（一）方法：酸性茚三酮法；磺基水楊酸法。
（二）目的要求：掌握脯氨酸的測定方法及原理；能根據需要獨立完成測定過程。
（三）重點：標准曲線的製作、植物材料的處理。
（四）難點：標准曲線的製作、植物材料的處理。
實驗二十三 植物根系活力的測定
（一）方法：TTC比色法；α-萘胺氧化法。
（二）目的要求：理解根系活力的內涵，掌握根系活力的測定原理和方法。
（三）重點：實驗原理和方法
（四）難點：操作方法
實驗二十四 維生素C含量的測定
（一）方法：滴定法；二苯胺萃取比色法；2，4二硝基苯肼比色法；熒光法。
（二）目的要求：掌握測定原理和方法；能根據需要和條件選擇適當的測定方法。
（三）重點：相關儀器的使用、測定原理和方法；實驗環節的條件控制。
（四）難點：正確掌握操作方法。
實驗二十五 綜合性實驗——植物組織中POD的提取分離純化與鑒定
（一）方法：採用分段鹽析法提取分離POD；用透析法脫鹽；用福林酚法測定蛋白質含量；愈創木酚法測定POD活性，計算比活力和回收率；用聚丙烯醯胺凝膠電泳分離鑒定POD同工酶。
（二）目的要求：掌握實驗的基本原理和方法；能設計實驗操作流程。
（三）重點：相關儀器的使用、測定原理和方法；各實驗環節的銜接。
（四）難點：實驗技術的綜合運用。
實驗二十六 設計性實驗——植物組織衰老過程中的生理變化
（一）方法和實驗流程：設計使植物組織衰老的處理方法；根據理論知識，設計在衰老的不同階段測定與衰老有關的生理指標；確定各生理指標的測定方法；寫出實驗設計方案；配製葯品；取材、測定；寫出實驗報告。
（二）目的要求：學習實驗設計方法，初步培養科學研究的基本能力。
（三）重點：實驗設計、相關儀器的使用、測定原理和方法；各實驗環節的銜接。
（四）難點：試驗設計、實驗技術的綜合運用。
四、學時分配表
教學時數分配
順 序
授 課 內 容
學時分配
小計
生化實驗部分
（第三學期與生化理論課教學平行開課）
實驗一
應用紙層析分離鑒定氨基酸
4
4
實驗二
氨基酸含量的測定——茚三酮比色法
3
3
實驗三
可溶性糖含量的測定——蒽酮法
3
3
實驗四
蛋白質含量的測定——福林酚法
3
3
實驗五
RNA的提制
4
4
實驗六
RNA含量的測定
3
3
實驗七
澱粉酶活性的測定
4
4
實驗八
聚丙烯醯胺凝膠電泳分離同工酶
6
6
綜合性實驗
（任選）
將蛋白質含量測定、酶活性測定、聚丙烯醯胺凝膠電泳三項實驗內容綜合起來，開設綜合性實驗植物組織POD的提取分離純化與鑒定。
18
18
備選實驗一
酶的基本性質
4
4
備選實驗二
穀物種子中賴氨酸含量測定
3
3
生理實驗部分
（第四學期與植物生理理論課教學平行開課）
實驗十一
植物細胞水勢測定
3
3
實驗十二
呼吸強度測定
3
3
實驗十三
光合色素含量測定
3
3
實驗十四
光合色素的提取分離與理化性質
3
3
實驗十五
硝酸還原酶活性測定
3
3
實驗十六
種子生活力快速測定
3
3
實驗十七
超氧化物岐化酶（SOD）活性測定
3
3
實驗十八
過氧化物酶（POD）活性測定
2
2
實驗十九
丙二醛（MDA）含量測定
3
3
實驗二十
細胞差別透性測定
4
4
備選實驗一
光合強度測定
4
4
備選實驗二
脯氨酸含量測定
3
3
備選實驗三
根系活力測定
3
3
備選實驗四
維生素C含量測定
3
3
設計性實驗（任選）
將光合色素含量測定、POD、SOD活性測定、MDA含量測定和細胞差別透性測定結合起來，開設設計性實驗植物組織衰老過程中的生理變化。
15
15
註：根據需要和實驗室條件從中選擇60學時實驗，生理、生化部分各30學時。
五、課程教學的基本要求和主要環節
（一）實驗教學的基本要求：
1．堅持精講多練的原則，講授、演示、指導與學生獨立設計獨立完成相結合，讓學生成為實驗課主體。
2．將能力培養做為實驗課的主要目標追求。一方面要求學生掌握實驗原理，能根據實驗原理適當調整實驗步驟；另一方面訓練學生能根據專業研究的需要，能獨立地從選擇實驗內容、確定實驗方法、試劑配製、實驗條件控制、儀器使用等環節完成實驗內容；
3．把培養學生動手能力做為實驗課重點之一，達到規范操作目的。
4．實驗內容可根據需要和實驗室條件在大綱范圍內選擇10～11項，並應根據需要和實驗室條件啟動備選實驗。
（二）教學主要環節
1．實驗教學：與相應理論課相伴進行。
2．考試及成績構成：本課程為考查課。成績由兩部分構成，一是實驗報告成績，占總成績的30%～50%；二是期末考試成績，占總成績的50%～70%。
六、本課程與其它課程的聯系與分工
本課程與物理學、化學、分析化學、植物學、生理生化理論課有重要聯系，與化學尤其是分析化學的聯系尤為重要。
化學課為本課程奠定試劑配製、實驗室基本操作方法與操作規范的基礎，本課程運用這些知識與技能基礎完成教學，並在教學中使之鞏固和強化；
植物學為以植物為材料試材准備和取捨提供基礎知識；
植物生理生化為本課程的學習提供必要的理論指導，本課程的學習加深對生理生化知識的理解，並使深奧的理論知識具有可操作性，甚至使之物質化。
七、建議教材與參考教材
建議教材：劉永軍主編《植物生理生化實驗》，中國農業科技出版社，2002年。
參考教材：
1．李合生主編. 植物生理生化實驗原理及技術.北京：高等教育出版社，2000.
2．李建武等主編. 生物化學實驗原理和方法. 北京：北京大學出版社，2000.
3．白寶璋等. 植物生理學測試技術. 中國科學技術出版社，1993
4．西北農業大學. 基礎生物化學實驗指導. 陝西科學技術出版社，1986
5．張志良主編. 植物生理學實驗指導（第二版）. 北京：中國農業出版社，2000.
6．鄒琦主編. 植物生理學實驗指導. 北京：高等教育出版社，1990.
7．朱廣廉等主編. 植物生理學實驗. 北京：北京大學出版社，1990 .
9．李秀錦主編. 實用生化實驗技術. 北京：中國農業出版社，1995.
10．劉福嶺編著. 食品物理與化學分析方法. 北京：輕工業出版社，1987.
11．張承圭等合編. 生物化學儀器分析與技術. 北京：高等教育出版社，1990.
12．何忠孝主編. 電泳. 北京：科技出版社，1999.
13．華東師范大學生物系植物生理教研組編. 植物生理學實驗指導，人民教育出版社，1980
14．.植物生理與分子生物學報
15．.植物生理學通訊
❷ 鐵的化合物的制備和檢測實驗報告
鐵化合物的制備及其組成的測定實驗報告
（20學時）
實驗目的：
1.了解並掌握鐵化合物的制備方法及組成測定方法
2.掌握水浴加熱、非水溶劑洗滌的方法
3.進一步熟練滴定操作方法
4.掌握實驗結果數據的處理方法
實驗原理：
1. 黃色鐵化合物Fex(C2O4)y•zH2O的制備
H2C2O4•2H2O+Fe(NH4)2(SO4)2•6H2O Fex(C2O4)y•zH2O + (NH4)2SO4
2. 綠色鐵化合物KxFey(C2O4)z•wH2O的制備
Fex(C2O4)y•zH2O＋K2C2O4•H2O+H2O2 Kd Fea(C2O4)b•cH2O+ H2O
Kd Fea(C2O4)b•cH2O+ H2C2O4•2H2O KxFey(C2O4)z•wH2O
1. 鐵化合物的分析
在酸性條件下，高錳酸鉀可同時氧化草酸根和二價鐵離子：
Fex(C2O4)y•zH2O＋H2SO4＋KMnO4 Fe2(SO4)3+ K2SO4+ Mn2++CO2+H2O
(5C2O42-＋8H2SO4＋2KMnO4 K2SO4+2 Mn2++7 SO42-+ 10CO2+8H2O)
用鋅片或鋅粉還原高價鐵成低價鐵：
Fe3+＋Zn Fe2+＋Zn2+
低價鐵與高錳酸鉀反應:
Fe2+ + KMnO4＋H2SO4 5 Fe3+ + Mn2++ K2SO4+H2O
用硫氰酸銨來檢測三價鐵離子：
Fe3+＋SCN- Fe (SCN )3(血紅色)
實驗步驟：
1. 黃色鐵化合物Fex(C2O4)y•zH2O的制備
稱取7.5 g H2C2O4•2H2O固體溶於75ml水中（甲溶液）。稱取15g Fe(NH4)2(SO4)2•6H2O固體溶於60ml蒸餾水中，再加約1.5ml 2mol/L H2SO4溶液酸化，放在水浴上加熱到溶解（乙溶液）。
在攪拌條件下把甲溶液加到乙溶液中，將甲、乙溶液混合後在40－600C水浴加熱。靜止，待產物沉澱完全後，並冷卻到室溫以下抽濾，過濾時盡可能將沉澱攪拌後倒在布氏漏斗中央，用蒸餾水分3次洗滌產物，再用丙酮分2次洗液產物，抽干，將表面皿凹面朝上放在沸水燒杯上，將過濾的沉澱物連同濾紙一起放在表面皿凹面上烘乾。烘乾程度以成鬆散粉體為准。烘乾後產品放入塑料袋中保存，稱重，以備後面實驗使用。
2．綠色鐵化合物KxFey(C2O4)z•wH2O的制備
稱取2 g自製的黃色化合物，加入5ml蒸餾水配成懸浮液，邊攪拌邊加入3.2g K2C2O4•H2O固體。在400C水浴下滴加過氧化氫溶液，不能加快，否則會爆沸，此時有棕色沉澱析出。加熱至沸，將3.2g H2C2O4•2H2O固體慢慢加入至亮綠色透明溶液，往清液中加入8ml95％乙醇，如產生混濁，微熱可使其溶解，放在暗處待其析出晶體並自然冷卻到室溫，晶體抽濾、用5ml1：1乙醇溶液洗滌產物、抽干，裝入塑料袋中保存，稱重，另用紙包好以免見光組成發生變化，產品以備後實驗使用。
3．產物定性試驗
（1）將0.5g自製的黃色化合物配成酸性溶液（2mol/LH2SO4）。進行定性分析。
①加NH4SCN溶液檢驗鐵的價態
②在酸性溶液試驗與KMnO4溶液的作用，觀察現象並檢驗反應後鐵的價態。再加1片Zn片，反應後再次檢驗鐵的價態。
綠色化合物定性分析可與上述方法相同，並將結果以表格列入相關表格中。
4．黃色化合物的組成測定
（1）在電子天平上准確稱取0.12-0.15g的自製產品各兩份，分別加入20ml2mol/LH2SO4溶液溶解，並稍加熱以促使加快溶解（低於400C），在70-800C水浴下用KMnO4標准溶液滴定至紅色為終點。(開始速度放慢些)。記下消耗的KMnO4標准溶液的體積為V1。
（2）在已到終點的上述滴定液中按講義操作，求出第二次滴定的KMnO4標准溶液的體積為V2。（也可用Zn片來代替Zn粉作還原劑還原高價鐵，還原反應結束後將過量的Zn片用玻璃棒挑出，用少蒸餾水沖洗Zn片和玻璃棒上溶液入上述溶液中，再用標准溶液滴定。在還原過程中當酸度不足時可補加6mol/LH2SO4溶液1－3ml，以維持溶液的足夠酸度）。
將有關數據記錄下來以便後期處理，計算該黃色化合物的組成。
實驗結果與處理
1．鐵化合物產量（g）
黃色鐵化合物Fex(C2O4)y•zH2O 6．5 綠色鐵化合物KxFey(C2O4)z•wH2O 6．4
a) 鐵化合物定性分析
取0.5g產品配成酸性溶液實驗
試樣 ① ②
步驟 1 2 3 4
試劑 KSCN KMnO4溶液 KSCN Zn粉 KSCN
黃色鐵化合物
綠色鐵化合物
從上表結果中可看出，黃色化合物的鐵是正？價，綠色化合物的鐵是正？價。
b) 鐵化合物的組成測定（CKMnO4=0.0320 mol/L）
（1）化學方程式見原理部分，計算公式如下：
i. 每克產品含C2O2-4 mmol數：
ii. 每克產品含C2O2-4 mmol數：
iii. 每克產品含H2Ommol數：
黃色：
（2）將有關數據記入下表中：
化合物種類 黃色化合物 綠色化合物
序 號 1 2 1 2
稱樣重W/g
第一次消耗
KMnO4體積V1 /ml
第二次（與鐵）消耗
KMnO4體積V2/ml
草酸根消耗
KMnO4體積V3/ml
每克產品含
C2O2-4 mmol數
平均 =
平均 =
每克產品含
Fe mmol數
平均nFe = 平均nFe=
每克產品含
水mmol數 稱重： 烘乾：
摩爾比 :nFe: nH2O
化成整數摩爾比
:nFe: nH2O
化合物的可能化學式 K3Fe(C2O4)3•3H2O
❸ 怎樣測試自製櫻桃酒中黃麴黴素
黃麴黴素（AF)的檢測方法從最初以薄層層析法為主，發展到高效液相色譜法、微柱法、酶聯免疫吸附法等多種方法普遍應用，其進展與新的化學檢測手段和新儀器的出現密不可分。這些新方法、新手段的快速應用，為黃麴黴毒素的檢測提供了更廣泛的選擇餘地，適應了不同的檢測目的和要求。
薄層層析法
薄層層析法（TLC）是測定AF的經典方法，其原理是將樣品經過提取、柱層析、洗脫、濃縮、薄層分離後，在波長365nm紫外光下產生藍紫色或黃綠色熒光，並根據其在薄層上顯示的最低檢出量來確定其含量。
高效液相色譜法
HPLC具有高解析度，分析時間較短等優點。它的原理是樣品溶液中欲分離的幾種化合物在流動相和固定相之間有不同的分配量，從而達到分離的目的。AF經柱後電化學衍生化後，能發射特徵性熒光，被熒光檢測器捕獲後而得到檢測，最後經化學工作站處理數據。這一檢測方法，將化學分析試驗與領先的計算機技術結合，使自動化程度得到極大的提高，在試驗空間、人力和儀器都保持不變的情況下，能檢測更多的樣品。HPLC是近幾年發展起來的檢測AFB1的方法，主要是用熒光檢測器檢測。該法快速而准確，但需要昂貴的儀器設備，未能廣泛使用。
微柱法
微柱法測定AF，是利用微柱管內的硅鎂型吸附劑吸附AF並在365nm紫外光下顯示熒光，其強度與一定濃度的AF含量成正比關系，由此可簡略定量AF。
酶聯免疫吸附法
酶聯免疫吸附法（ELISA）是抗原（或抗體）吸附劑和用酶標記的抗體（或抗原）與標本中的待測物（抗原和抗體）起特異的免疫學反應，用測定酶活力的方法來增加測定的敏感度，是一種定性或半定量的方法。大致採用兩種方法檢測AF：一種是用雙抗體夾心法；另一種是用競爭法。免疫吸附法測定的試劑盒及配套儀器、方法被列入國家標准（GB/T5009 22-1996第二法）。
關於運用酶聯免疫法檢測AFB1的檢測報道也較多，目前國外已有較成熟的檢測食品及飼料中AFB1等真菌毒素的ELISA試劑盒出售，我國自20世紀90年代以來也有一些以ELISA檢測食品及飼料中AFB1的研究報道。
其他方法
（1）溴化熒光分光光度法（SFB）
樣品經甲醇-水混合溶劑提取後，部分提取液通過固相分離進行柱前處理，500μL純化的提取液用溴試劑衍生化後，用熒光檢測計中檢測，樣品熒光吸收度與硫酸喹啉液的吸收度比較可直接換算成AF的總含量。該法已通過AOAC和美國農業部聯邦穀物檢測中心的認證。
（2）超光譜方法（HS）
超光譜法是基於反射能基礎上的一種非侵入無破壞的映像技術，用於農產品檢測中，能夠快速地提供該產品的有關化學和其他方面的內部細節。另據研究報道，培訓黃蜂可用於AF檢測。由於AF主要是由黃麴黴產生的，寄生黃蜂通過培訓能把黃麴黴的氣味和糖水聯系起來，並對這些氣味產生有區別的行為反應，藉此來識別目標氣味的存在。這種培訓反應正在應用於儲藏玉米、花生的AF監控和檢測實踐當中，目前還未給出有關的結果評定。
各方法對比
薄層層析法對樣品處理繁瑣，實驗過程復雜，所需時間多，易受雜質干擾，較適合於對AF的定性檢測，是研究AF初期所使用的主要方法。今後，雖然薄層層析法在不斷地改進，並在一般實驗室均可完成操作，但由於它復雜的前處理過程致使在應用中仍然會受到一定程度的限制。
高效液相色譜法測定AF，技術水平要求較高，目前採用這種方法檢測AF較多，但具體一次實驗所使用的化學葯劑和處理途徑差別很大，對實驗結果的精度造成影響，這種方法還應在實踐中進一步改進。但總體上說高效液相色譜法操作較為簡便，同時可檢測多個AF種類，適於大批量樣品的分析。將免疫親和柱與高效液相色譜法結合應用，是目前採用較多的一種方法，今後將被廣泛應用。
微柱法測定AF，主要是用來檢驗AF的存在與否以及快速篩選出超標樣品，而要對AF種類進行區分定量檢驗，則需要對不同AF組分進行分離，再利用其他方法檢測。因此，微柱法並不能完成整個AF檢測過程，僅適用於定性檢驗。
酶聯免疫吸附法操作簡便，使用較為安全，但由於酶本身的不穩定性，用此方法檢驗AF有可能帶來假陽、陰性結果，而且研製出的AF快速測試盒多以測定最具毒性的種屬為主，食品和飼料工業上利用它來界定食品或飼料中AF的超標問題。酶聯免疫吸附法的檢測精度還有待於提高。
溴化熒光分光光度法的最大優點是檢測時不使用AF對照品，同時快速、靈敏，適合大批量樣品普查，儀器價格也較低，張雪輝等比較了用SFB法和溴衍生HPLC檢測中葯中AF的結果，發現SFB法在測定中葯時可能出現許多假陽性結果。
❹ 銀量、硼量、錫量、鉛量及鎵量的測定 交流水平電極發射光譜法
1 范圍
本方法規定了地球化學勘查試樣中銀、硼、錫、鉛、鎵含量的測定方法。
本方法適用於水系沉積物、土壤試料中銀、硼、錫、鉛、鎵量的測定。
本方法檢出限（3S）：銀0.020μg/g；硼1.0μg/g；錫0.6μg/g；鉛0.5μg/g；鎵0.4μg/g。
本方法測定范圍：銀0.06μg/g～5.0μg/g；硼3μg/g～600μg/g；錫1.8μg/g～200μg/g；
鉛1.5μg/g～200μg/g；鎵1.2μg/g～200μg/g。
2 規范性引用文件
下列文件中的條款通過本方法的本部分的引用而成為本部分的條款。
下列不注日期的引用文件，其最新版本適用於本方法。
GB/T 20001.4 標准編寫規則 第4部分：化學分析方法。
GB/T 14505 岩石和礦石化學分析方法總則及一般規定。
GB6379 測試方法的精密度通過實驗室間試驗確定標准測試方法的重復性和再現性。
GB/T 14496—93 地球化學勘查術語。
3 方法提要
試料以硫酸鉀、硫粉、碳粉、聚三氟氯乙烯粉、三氧化二鋁、氧化鎂混合物作緩沖劑，鎘和銻作內標，其中銀分析內標線為：Cd 326.11nm，硼分析內標線為：Sb259.81nm，錫分析內標線為：Cd 326.11nm，鉛分析內標線為：Cd 326.11nm，鎵分析內標線為：Sb 326.75nm。於平面光柵攝譜儀上，用水平電極、對電極攝譜（截取曝光），譜板可在GBZ-1型自動測光儀上測量各元素譜線的相對黑度，根據相對黑度的高低可測得試料中銀、硼、錫、鉛及鎵的含量。
注1：聚三氟氯乙烯使硼形成氟化硼，有利於蒸發。這種緩沖劑的分餾效應明顯，可截取曝光，抑制了大量基體元素的蒸發，降低了光譜背景，從而降低了測定元素的檢出限。
注2：採用水平電極攝譜，弧焰穩定，分析精密度提高。
4 試劑
除非另有說明，在分析中僅使用確認為分析純的試劑和蒸餾水。
4.1 硫酸鉀
光譜純
4.2 沉降硫
4.3 碳粉
光譜純
4.4 聚三氟氯乙烯粉
4.5 三氧化二鋁
光譜純
4.6 氧化鎂
光譜純
4.7 氧化鎘
光譜純
4.8 三氧化二銻
光譜純
4.9 二氧化硅
光譜純
4.10 三氧化二鐵
光譜純
4.11 氧化鈣
光譜純
4.12 硫酸鈉
光譜純
4.13 二氧化鈦
光譜純
4.14 硼酸
光譜純
4.15 二氧化錫
光譜純
4.16 氧化鉛
光譜純
4.17 三氧化二鎵
光譜純
4.18 硫代硫酸鈉
4.19 無水亞硫酸鈉
4.20 醋酸
φ（HAc）=28%
4.21 硫酸鋁鉀
4.22 米吐爾
4.23 對苯二酚
4.24 無水碳酸鈉
4.25 溴化鉀
4.26 乙醇溶液（1+1）
4.27 緩沖劑
按（50+28+2+5+10+5+0.05+0.4）的比例稱取50g硫酸鉀（4.1）、28g沉降硫（4.2）、2g碳粉（4.3）、5g聚三氟氯乙烯粉（4.4）、10g三氧化二鋁（4.5）、5g氧化鎂（4.6）、0.05g氧化鎘（4.7）、0.4g三氧化二銻（4.8），研磨8h以上，混合備用。
4.28 基物
按（70.5+12+5+5+5+2+0.5）的比例稱取70.5g二氧化硅（4.9）、12g三氧化二鋁（4.5）、5g三氧化二鐵（4.10）、5g氧化鈣（4.11）、5g硫酸鈉（4.12）、2g氧化鎂（4.6）、0.5g二氧化鈦（4.13），研磨2天以上，混勻備用。
4.29 銀標准系列
用銀礦石一級標准物質GBW07258［含銀量為446μg/g］與湖北水系沉積物監控樣43GRD—36［含銀量為0.028μg/g］，按不同比例稀釋配製成含銀量為：5.0μg/g、2.0μg/g、1.0μg/g、0.5μg/g、0.2μg/g、0.1μg/g、0.06μg/g、0.028μg/g共8個標准系列。按表1手續配製。
表1 銀標准系列的配製
將4.29.1～4.29.8分別在瑪瑙研缽中研磨2h後，裝入磨口玻璃瓶中備用。
4.30 硼標准
4.30.1 硼標准Ⅰ（w（B）=3.0%）稱取0.4290g不烘的硼酸（4.14），補加基物（4.28）至2.5000g，用瑪瑙研缽研磨2h後，裝入磨口小玻璃瓶中備用。
4.30.2 硼標准Ⅱ（w（B）=0.30%）稱取1.0000g硼標准Ⅰ（4.30.1）及9.000g基物（4.28），在瑪瑙研缽中研磨2h後，裝入磨口小玻璃瓶中備用。
4.31 錫標准
4.31.1 錫標准Ⅰ（w（Sn）=10.0%）稱取0.3174g已在105℃乾燥2h的二氧化錫（4.15）及2.1826g基物（4.28），在瑪瑙研缽中研磨2h後，裝入磨口小玻璃瓶中備用。
4.31.2 錫標准Ⅱ（w（Sn）=1.0%）稱取0.2500g錫標准Ⅰ（4.31.1）及2.2500g基物（4.28），在瑪瑙研缽中研磨2h後，裝入磨口小玻璃瓶中備用。
4.32 鉛標准
4.32.1 鉛標准Ⅰ（w（Pb）=10.0%）稱取0.2693g已在105℃乾燥2h的氧化鉛（4.16）及2.2307g基物（4.28），在瑪瑙研缽中研磨2h後，裝入磨口小玻璃瓶中備用。
4.32.2 鉛標准Ⅱ（w（Pb）=1.0%）稱取0.2500g鉛標准Ⅰ（4.32.1）及2.2500g基物（4.28），在瑪瑙研缽中研磨2h後，裝入磨口小玻璃瓶中備用。
4.33 鎵標准
4.33.1 鎵標准Ⅰ（w（Ga）=10.0%）稱取0.3360g已在105℃乾燥2h的三氧化二鎵（4.17）及2.1640g基物（4.28），在瑪瑙研缽中研磨2h後，裝入磨口小玻璃瓶中備用。
4.33.2 鎵標准Ⅱ（w（Ga）=1.0%）稱取0.2500g鎵標准Ⅰ（4.33.1）及2.2500g基物（4.28），在瑪瑙研缽中研磨2h後，裝入磨口小玻璃瓶中備用。
4.34 硼、錫、鉛、鎵混合標准［w（B）=600μg/g，w（Sn）=200μg/g，w（Pb）=200μg/g，w（Ga）=200μg/g］
稱取2.000g硼標准Ⅱ（4.30.2），0.200g錫標准Ⅱ（4.31.2），0.200g鉛標准Ⅱ（4.32.2），0.200g鎵標准Ⅱ（4.33.2）及7.4000g基物（4.28），在瑪瑙研缽中研磨2h後，裝入磨口小玻璃瓶中備用。
4.34.1 硼、錫、鉛、鎵混合標准系列配製手續見表2。
表2 硼、錫、鉛、鎵混合標准系列配製
按表2分別稱取標准和基物後，在瑪瑙研缽中研磨2h後，裝入磨口小玻璃瓶中備用。
4.35 顯影液
A液：稱取10g米吐爾（4.22）、260g無水亞硫酸鈉（4.19）、50g對苯二酚（4.23）溶於5000mL水中，搖勻，儲存於棕色玻璃瓶中在暗房內保存。貯存期為3個月。
B液：稱取160g無水碳酸鈉（4.24）、160g溴化鉀（4.25）溶於4000mL水中，搖勻，儲存於棕色玻璃瓶中在暗房內保存。貯存期為3個月。
4.36 定影液
稱取960g硫代硫酸鈉（4.18）、60g無水亞硫酸鈉（4.19）、192mL醋酸（4.20）、30g硼酸（4.14）和60g硫酸鋁鉀（4.21）溶於4000mL水中，搖勻，儲存於棕色玻璃瓶中在暗房內保存。貯存期為3個月。
5 儀器及材料
5.1 攝譜儀
PGS-2平面光柵攝譜儀。儀器規格見附錄A（A.1）條。
5.2 自動測微光度計
GBZ-1型。
5.3 兩電極規格
3.5 mm×4 mm×0.7mm無頸碳電極。
5.4 感光板
天津I型光譜感光板。
5.5 瑪瑙研缽
6 分析步驟
6.1 試料
試料粒徑應小於0.074mm，在室溫乾燥後，裝入磨口小玻璃瓶中備用。
試料量 稱取0.1g試料，精確至0.0002g。
6.2 空白試驗
隨同試料分析全過程用基物（4.28）做雙份空白試驗。
6.3 質量控制
選取同類型水系沉積物或土壤一級標准物質2個～4個樣品，隨同試料同時分析。
6.4 測定
6.4.1 稱取試料（6.1）和0.0500g緩沖劑（4.27）置於5mL瓷坩堝中，依次放入瑪瑙研缽（5.5）中研磨1min將試料與緩沖劑混勻，同時等份裝入兩支3.5mm×4mm×0.7mm無頸碳電極（5.3）中。壓緊，加兩滴乙醇溶液（4.26），待試料將溶液吸收後，於紅外燈下乾燥45min。
註：在測定土壤試料時，當試料有機質高時需灼燒，否則攝譜時易跳濺。
6.4.2 在附錄A（A.1）條的儀器工作條件，在各元素分析線對的波長處，依次對試料進行水平對電極攝譜。按附錄A（A.3）條顯影與定影。按附錄A（A.4）條的測量條件在自動測光儀上測量試料譜線的相對黑度。測量時每條譜帶要調焦。同時在繪制的工作曲線（6.5）上查得試料中各元素的含量，並列印分析結果。含量超過工作曲線范圍的可再用緩沖劑按比例沖稀，再重新按（6.4.1）條進行。
6.5 工作曲線的繪制
6.5.1 於一組5mL瓷坩堝中分別稱取0.1000g銀標准系列（4.29.1～4.29.8），並分別加入0.0500g緩沖劑，依次在瑪瑙研缽中研磨1min後再裝入電極中，壓緊。
6.5.2 於另一組5mL瓷坩堝中分別稱取0.1000g混合標准系列（4.34.1.1～4.34.1.8），分別加入 0.0500g緩沖劑（4.27），依次在瑪瑙研缽中研磨1min後再裝入電極中，壓緊。
6.5.3 以下按（6.4.1～6.4.2）條步驟進行攝譜、顯影與定影，並測量分析線的相對黑度。以銀、硼、錫、鉛、鎵量的lgC為橫坐標，黑度差ΔP為縱坐標，繪制各元素的工作曲線。
7 分析結果的計算
按下式計算銀（硼、錫、鉛、鎵）的含量：
區域地球化學勘查樣品分析方法
式中：m1——從工作曲線上查得的各元素的量，μg；m0——從工作曲線上查得空白試驗（6.2）中各元素的量，μg；m—試樣質量，g。
8 精密度
銀、硼、錫、鉛、鎵量的精密度見表3至表7。
表3 精密度［w（Ag），10-6］
表4 精密度［w（B），10-6］
表5 精密度［w（Sn），10-6］
表6 精密度［w（Pb），10-6］
表7 精密度［w（Ga），10-6］
附 錄 A
（資料性附錄）
A.1 攝譜儀工作條件
表A.1 攝譜儀工作條件
電極架形狀：水平電極架
中間波長：314.0nm
狹 縫：12μm
遮光板：自製的，6 mm×8mm
光柵刻線：1302條/mm
激發光源：交流電弧，電流18A
曝光時間：41s截取曝光
A.2 感光板的裁板與放置
測定硼元素感光板裁用9cm×6cmⅠ型感光板，放置在暗盒短波位置，距暗盒邊緣1.5cm處；測定其他元素裁用大感光板9cm×18cmⅠ型感光板，放置在暗盒長波位置，距暗盒另一側邊緣3.0cm處。
A.3 顯影與定影條件
A.3.1 顯影
顯影液配製 取顯影液（4.37）中A液、B液按1+1混合。
顯影溫度 19℃顯影。
顯影時間 測定硼元素感光板（短波，9cm×6cmI型感光板）顯影3min；測定其他元素用大感光板（長波，9cm×18cmⅠ型感光板）顯影4min。
A.3.2 定影
將光譜感光板經顯影後立即放入定影液（4.38）中定影0.5h。
A.4 測量條件
採用PGS-2型二米平面光柵攝譜儀光柵轉角為11.0°時的色散曲線，參考線Fe280.7nm，每條譜線要調焦，用GBZ-1型自動測微光度計進行測量並自動處理數據。
附 錄 B
（資料性附錄）
B.1 從實驗室間試驗結果得到的統計數據和其他數據
如表B.1至表B.5。
本方法精密度協作試驗數據是由多個實驗室進行方法合作研究所提供的結果進行統計分析得到的。
表B.1至表B.5中不需要將各濃度的數據全部列出，但至少列出3個或3個以上濃度所統計的參數。
B.1.1 列出了試驗結果可接受的實驗室個數（即除了經平均值及方差檢驗後，屬界外值而被舍棄的實驗室數據）。
B.1.2 列出了方法的相對誤差參數，計算公式為RE=-x0）/x0×100%，公式中為多個實驗室測量平均值；x0為一級標准物質的標准值。
B.1.3 列出了方法的精密度參數，計算公式為RSD=×100%，公式中Sr為重復性標准差、SR為再現性標准差。為了與GB/T20001.4所列參數的命名一致，本方法精密度表列稱謂為「重復性變異系數」及「再現性變異系數」。
B.1.4 列出了方法的相對准確度參數。相對准確度是指測定值（平均值）占真值的百分比。
表B.1 Ag統計結果表
表B.2 B統計結果表
表B.3 Sn統計結果表
表B.4 Pb統計結果表
表B.5 Ga統計結果表
附加說明
本方法由中國地質調查局提出。
本方法由武漢綜合岩礦測試中心技術歸口。
本方法由武漢綜合岩礦測試中心負責起草。
本方法主要起草人：楊波涌、丁 瑩。
本方法精密度協作試驗由武漢綜合岩礦測試中心葉家瑜、江寶林組織實施。
❺ 食品分析的方法
膳食調查的方法：
1、稱重法。步驟：確定調查對象和家庭成員；確定家庭食物種類；確定調查的天數；確定用餐人次總數。注意事項：市品重轉換可是重量；不要疏漏小雜糧和零食的登記；人日數和總人日數的計算。
2、記賬法。多用於建有伙食賬目的單位，集體食堂或部隊，
步驟為：與膳食管理人員見面，了解伙食結存，了解進餐人數，了解食物購進數量，食物消費量計算和記錄，計算總人日數，核對記錄結果，編制歸檔。
注意事項：食物消費量隨季節變化較大，應在不同季節內開展多次短期調查；如果被調查單位人員的勞動強度、性別、年齡等組成不同，按標准人核算；要注意攝入自製的食品，要分開登記；注意是各種食物的可食部；不要疏漏小雜糧和零食的登記；要結合稱重法。
3、化學分析法。非常精確的一種調查方法，都是在實驗室中進行，
4、詢問法。分24小時回顧法和膳食史法，
步驟：確定調查對象的基本內容；確定回顧調查表的內容；
注意事項：不適用於小的兒童和年齡較大的老人。
5、食物頻率法。就是用食物食用的頻率來估算。
步驟：確定家庭就餐的總人日數；統計食物的種類；某一階段食用次數。
注意事項：盡量估算準確。
❻ 化學實驗方案
http://www.ahnu.e.cn/kecheng/jxcg/all/1_7/cailiao/zongjiebaogao.htm
化學是一門以實驗為基礎的學科。化學上的許多理論和定律都是從實驗中發現歸納出來的。同時，化學理論的應用、評價也有賴於實驗的探索和檢驗。雖然到了近代乃至現代，化學的飛速進步已經產生了各種新的研究方法，但是，實驗方法仍然是化學不可缺少的研究手段。新課程改革將科學探究作為突破口，科學探究不但是一種重要的學習方式，同時也是中學化學課程的重要內容，它對發展學生的科學素養具有不可替代的作用。而化學實驗是科學探究的重要形式。
用化學實驗的方法學習化學，既符合化學的學科特點也符合學生學習化學的認識特點，是化學教學實施素質教育的基本手段。新課程標准提倡學生獨立進行或合作開展化學實驗研究。通過化學實驗能激發學生的學習興趣，幫助學生通過使用探究形成化學概念、理解化學基礎理論、掌握化學知識和技能，培養學生的科學態度和價值觀，幫助學生發展思維能力和訓練實驗技能，從而達到全面提高學生的科學素養的目的。
一、對新課程標准下的中學化學實驗的認識
《普通高中化學課程標准》明確了高中化學課程的基本理念：立足於學生適應現代生活和未來發展的需要，著眼於提高21世紀公民的科學素養，構建「知識與技能」、「過程與方法」、「情感態度與價值觀」相融合的高中化學課程目標體系。「知識與技能」即過去的「雙基」；「過程與方法」是讓學生掌握學習的方法，學會學習；「情感態度與價值觀」是人文關懷的體現。所以新的課程理念的核心是「讓學生在知識探索的過程中，在知識、學法、人文等方面得到發展。」其中第5條特別強調：「通過以化學實驗為主的多種探究活動，使學生體驗科學研究的過程，激發學習化學的興趣，強化科學探究的意識，促進學習方式的轉變，培養學生的創新精神和實踐能力。」[1]高中化學課程由2個必修模塊和6個選修模塊組成，其中「化學實驗」是作為一個獨立的模塊有別於以往教材的處理，突出其重要的地位。
教育部2001年頒發的《基礎教育課程改革綱要》為化學課程改革指明了方向，根據新的教學理念及由此產生的新課程標准，對照新舊教材，我們不難發現新課程在實驗教學方面有以下幾個主要方面的轉變：
1、從只注重培養實驗操作能力向培養實驗思維能力和培養實驗操作能力並重轉變，改變以往為「教」設計實驗變為「學」設計實驗，使實驗更好地配合學生的主動學習，打破以往教師壟斷實驗方案的設計向教師幫助、指導學生參與實驗方案的設計的轉變，這就是所謂的化學實驗的探究化[2]。改變化學實驗「照方抓葯」式的現狀的關鍵，是加強化學實驗的探究化設計，這對於更好發揮化學實驗的功能，促進學生科學素養主動、全面的發展具有重要的意義。例如：必修1中「驗證鐵能否與水蒸氣反應」的探究實驗，教材一方面提供了實驗必要的儀器和葯品，讓學生來設計實驗方案；另一方面又提供了一個實驗方案，讓學生參考並嘗試利用該方案進行實驗，最後讓學生小結交流探究活動的收獲。這樣的實驗教學，在指導學生學習設計實驗的同時又鍛煉了學生進行實驗探究的動手能力。
另外，新課標不再硬性劃分演示實驗和學生實驗，而是給教師創造性和學生的主動性提供空間。教師通過實驗創設學習情景，為學生提供可觀察的化學現象和實驗操作，其活動指向是學生自主觀察、分析思考、交流討論、實驗研究，不是教師單純的表演或展示。從這一角度看，它和學生實驗一樣，都是學生的活動。在新課標中也提倡學生進行合作開展化學實驗研究實現從「單兵作戰」的自發研究向群眾性研究與組隊研究的「兩條腿走路」轉變。
2、從只重視理論到理論與實際相結合的轉變，更加重視化學實驗與生活、技術的聯系，注重用實驗探究的方法解決實際問題；使學生的課內學習轉變為課內和課外相結合的模式，更適應開放式學習的需要，這就是所謂的化學實驗的生活化[2]。
新課標「注重從學生已有的經驗出發，讓他們在熟悉的生活情景中學化學」，幫助學生「從科學、技術和社會相互聯系的視角認識化學」，從歷史和現實的結合上了解化學。此外，新課標還列出若干可供選擇的學習情景素材，這有助於教師落實「貼近生活，聯系實際」的教學要求，加深學生對「科學——技術——社會」觀念的理解，增強學生的社會責任感，啟發教師不斷地從社會生活和新的科技發展中吸取新鮮的信息，學生在體驗中逐步認識化學在促進社會可持續發展中的重要作用。通過化學實驗來解釋和解決日常生活和社會實際問題，對於拓展化學實驗的功能，提高學生的科學素養，具有十分重要的意義和價值。化學實驗的內容選取於日常生活和社會生活中的許多化學現象，實驗葯品取用於學生身邊常見的化學物質，這樣可使學生有一種親切感，感到化學並不神秘，就在我們身邊，有利於調動學生學習的積極性和激發他們對實驗探究的興趣。在新課程的教材中就有很多這樣的實驗素材。諸如必修2中「用生活中的材料製作簡易電池」實驗；選修1中「鮮果中維生素C的還原性」實驗；選修2中「用澱粉自製吸水材料，並進行模擬保水試驗」；選修4中「溫度對加酶洗衣粉的洗滌效果的影響」實驗；選修5中「自製肥皂與肥皂的洗滌作用」實驗；選修6中「用氧化還原滴定法或電化學分析法測定污水中化學耗氧量」實驗等等。
3、從只應用近代實驗方法向適當應用現代實驗方法和儀器，重視中學實驗向現代化轉變，這就是所謂的化學實驗的現代化[2]。
化學實驗的現代化科學手段的發明與使用，是和人類對物質的組成和結構的探索分不開的。鑒定物質的化學成分需要定性分析，測定物質的各組分的含量需要定量分析，確定物質的結構需要結構分析。高中化學新課程在化學分析方法的定量化和實驗手段的現代化方面，跟以往的化學課程相比有了很大的改進。在高中化學新課程中引入了現代儀器分析的四大類儀器或方法（光譜類、色譜類、質譜類、電化學類）。例如：選修5中，「用質譜法測定相對分子質量」，「用紅外光譜、核磁共振氫譜等方法鑒定分子結構」；選修6中「用化學方法或紅外光譜法檢驗鹵代烷中的鹵素」實驗，「用中和滴定法或氣相色譜法測定醋酸中醋酸的含量」實驗等。值得注意的是，對於這些現代實驗分析儀器和方法的學習並不是要求學生都要掌握它們的具體的原理和應用技術，不同的實驗技術所要求的程度是有區別的。有的只是屬於介紹性質，只要求學生掌握其最基本的原理，達到拓展科學視野的目的就可以了。
4、重視綠色化學思想與可持續發展觀念在實驗中的體現，這就是所謂的化學實驗的綠色化[2]。高中化學新課程在設計上十分注重「體現綠色化學思想」。例如：選修6（實驗化學課程模塊）中，將「形成綠色化學的觀念」作為一項重要目標；將「樹立綠色化學思想，形成環境保護的意識」單獨作為一條「內容標准」；將「查閱資料：符合『綠色化學』思想的化工產品的生產」 作為「活動與探究建議」中的一項學習活動。
二、開展化學實驗教學要注意的問題
在新課程標准下，化學實驗教學有了更為突出的作用和意義。因此，抓好實驗教學是化學教學中十分重要的教學內容。那麼，在開展化學實驗教學過程中要注意哪些問題呢？筆者認為可以從以下幾個方面去考慮：
(一)、加強思想認識，重視實驗教育功能的發揮
激發學習興趣、體驗科學探究、訓練可行方法、學習化學知識、學會團結協作是化學實驗的主要教育功能。對此教師首先要有深刻的思想認識，同時要通過具體的教學實踐發揮好這些化學實驗教育功能。
具體而言，教師在實驗內容的設計和選擇上，需要注意從學生已有的經驗和將要經歷的社會生活實際出發，以激發學生學習化學興趣，幫助學生認識化學與人類生活的密切關系，關注人類所面臨的與化學相關的社會問題，培養學生的社會責任感、參與意識和決策能力。通過化學實驗教學，可以讓學生學習化學知識，在學習過程中，會得到大量的感性認識，將感性認識轉化為理性認識，並運用已有知識和相關資料解決問題。同時，學會團結協作是當前社會分工日益完善、細致所導致的對人才自身素質的要求，在實驗內容的選擇中要重視選擇一些需要通過小組協作方式才能完成的試驗探索，讓學生在實驗探索的過程中根據要求，進行分工協作，共同完成實驗，在實驗探究中學會合作與分享。
新課程在必修1的第一章《從實驗學化學》里就已經明確了「化學是一門以實驗為基礎的自然科學」並強調了掌握好實驗方法的重要意義。我們可以利用好第一節《化學實驗基本方法》的教材，先對學生進行化學學科特點和化學學習方法的教育，這包括了實驗安全教育和實驗規范教育。實驗安全教育可以通過學生分組進行思考與交流再由學生小結，使學生認識到化學實驗的操作應該規范，應該仔細檢查安全措施，確保實驗的安全和成功。然後，利用小組合作做實驗可以兩人一組，有大致的分工，職責基本明確，緊密配合的形式完成「粗鹽的提純」實驗。學生完成實驗後要做好總結和相互評價，老師最後結合自己觀察的情況點評學生們的表現，表揚一些組或個人。通過這樣的實驗教學，既培養了學生的實驗安全意識，又樹立了學生的團結協作意識。
(二)、提高動手能力，關注學生實驗技能的培養
進行化學實驗的基礎是實驗者必須對化學實驗基本方法和技能有一定的了解。新課程標準的課程目標中將「獲得有關化學實驗的基礎知識和基本技能，學習實驗研究的方法，能設計並完成一些化學實驗」列作「知識與技能」目標之一。在新課程里增加了大量的學生實驗探究的內容，在實驗探究中的每一個實驗，必須由學生親自動手做實驗才能完成，因此，提高學生的實驗動手能力是完成好化學實驗教學的基礎。同時，要十分重視學生解決問題的能力培養，特別是觀察、實驗、假說、推理、收集資料、分析資料、處理數據等。要重視通過實驗發展學生思維的敏捷性、靈活性、深刻性、獨創性和批判性等良好的品質，培養學生的實踐精神和創新能力。
值得注意的是，教材編寫時由於考慮到各種條件的限制，往往是演示實驗多，學生實驗少，如果教師教學是按照「教師演示實驗→學生觀察實驗→教師引導學生得出結論→例題→課堂訓練→課後鞏固練習」，其效果是學生會應試而沒有得到發展。因此，教師要創造條件，根據實際情況，靈活處理教材，盡可能做到演示實驗學生化，讓每個學生都有動手的機會。其學生操作流程是：根據要解決的問題→設計實驗原理→選實驗器材→動手實驗→記錄現象及數據→處理數據得出結論。
例如：在必修1的第一章第一節《化學實驗基本方法》中，教材並沒有硬性區分演示實驗和學生實驗，為了更好的提高學生的實驗能力，提倡教師多採用邊講邊實驗的教學方式。這樣有利於學生掌握實驗技能，培養觀察、思維、獨立操作等能力，容易獲得成功感。建議實驗1「粗鹽的提純」、實驗2「硫酸根離子的檢驗」作為邊講邊進行學生實驗，實驗3「實驗室製取蒸餾水」作為演示實驗，實驗4「萃取和分液」即需在老師的指導或示範下學生完成實驗。
(三)、培養問題意識，提高學生問題解決的能力
增強培養學生的問題意識，將問題轉化為課題的能力是提高學生設計問題、解決問題能力的前提。問題意識是指學生在認識活動中意識到的一些懷疑、焦慮、探究的心理狀態，這種心理狀態驅使學生積極思維，不斷提出和解決問題。心理學研究表明，意識到問題的存在是思維的起點，沒有問題的思維是膚淺的思維、被動的思維。在化學實驗教學中，能用於實驗探究的問題可能來自自然現象、社會生活和生產實踐，也可能來自學習的過程中，還有可能來自教師精心設計的問題情境，無論是什麼情況，始終要讓學生產生發現問題和解決問題的渴求和慾望。對於教材中某些驗證性的實驗如果改為探究性的實驗，可將學生帶入科學探究的情境中，從而不斷增強他們發現問題和解決問題意識和能力。
例如，對於必修1中的「Fe(OH)2的制備和性質」探究實驗，教師先講清楚Fe(OH)2的顏色、狀態及溶解性，然後演示新制的FeSO4與NaOH溶液反應，結果學生未能觀察到白色絮狀沉澱，而看到的卻是灰綠色沉澱。這一現象會立即引起了學生的注意，教師要及時引導學生提出問題：①為什麼要用新制的FeSO4溶液？②為何將滴管插入試管里溶液的底部，慢慢擠出NaOH溶液？③久置的NaOH溶液中溶解了什麼物質？當學生通過分析認識到FeSO4、Fe(OH)2易被空氣中的氧氣所氧化時，換一瓶已煮沸過的NaOH溶液，以除去溶解的氧氣，再進行實驗，先得到了白色沉澱，但過一會兒就轉變成灰綠色，然後逐漸變為紅褐色，這一現象又引起了學生的疑問。教師進一步引導討論：採取什麼方法能使生成的Fe(OH)2氧化速率減慢？經過一系列的思考、討論、比較，最後選用在新制FeSO4液面上，滴加幾滴苯作保護層，將滴管伸入試管底部；滴加煮沸過的NaOH溶液終於得到了白色Fe(OH)2沉澱，並保持了較長的時間。通過類似的實驗教學，最終會使學生發現問題和解決問題變成一種習慣，成為一種需要。
三、開展化學實驗教學的點滴經驗
實驗是培養學生解決問題能力的重要途徑。實驗教學中的問題發現和形成、實驗設計、操作、觀察、思維、表達和交流等科學實踐活動，可以有效地培養學生的實驗意識、課題發現能力、實驗設計能力、實驗觀察能力和實驗操作能力，可以有效地培養學生的思維習慣和思維能力，這是其他活動形式難以代替的。
新教材為學生創造了許多動手的機會，怎樣才能調動好學生的積極性？我在擔任新課程高一化學的教學過程中，嘗試通過不同的教學活動提高學生的實驗能力，積累了一點經驗與大家分享。我藉助於學生手頭上的一本教輔書《化學活動與探究》組織學生開展課外實驗教學。該書的活動項目取材於教材中的典型，並設計成活動卡片。每個卡片上包括了6個欄目：問題思考、活動探究目的、活動探究用品、活動探究內容、交流與討論、收獲與體會。以下是一些具體的做法：在開始活動前，讓全班學生自願分成8個小組，實行組長負責制。每個星期輪排1個小組進行實驗，各組自由選題，實驗的內容可以從活動卡片中30個活動項目中選取。組長負責組織，在課余時間內完成實驗，包括實驗預習、分工、活動記錄（包括實驗內容、實驗討論、實驗收獲等，以上內容在實驗報告中反映）及活動評價（包括自評、他評，他評中包括組長對組員的評議和組員對組長的評議）。整個小組的實驗活動在1個星期內完成，並由組長在下周的化學課上用15分鍾進行「結案陳詞」（告知同學他們的實驗課題、實驗過程、實驗結果、實驗收獲、活動評價的得分等）。累計每個星期不同小組的實驗報告，定期進行展示，讓大家進行投票選出最佳合作小組等。在各組活動過程中，老師也會參與到其中，小組做得好的地方，要及時地表揚，對於存在的問題要及時予以點撥、疏通，起到指點迷津的作用；並對他們實驗過程進行評價，並納入學分制的計算范疇。通過這些實驗活動有利於培養學生實事求是、尊重科學、勇於探索的思想品質；培養學生團結協作、求實的科學態度，同時也激發了學生學習化學的興趣。在實驗教學中不僅要求學生認真對待實驗，作為教師更要認真對待每一個實驗，通過實驗啟發引導學生關注實驗過程，突出學生在實驗教學中的主體地位，增強實驗的探索性，培養學生的科學探究和實驗設計、評價能力。
總而言之，化學實驗是中學化學教學內容的重要組成部分，新課程實驗教學改革在高中化學課程改革中的地位舉足輕重。廣大的化學教師要在新的教學理念的指導下，認真、細致地學習研究新課程，提高認識，明確目標。圍繞實驗展開學習是中學化學教學特色的充分體現，化學實驗教學只要真正得到落實，對激發學生學習化學的興趣，培養學生的創造性思維，開發學生潛能，發展學生的個性將會產生積極的作用，也為化學教育走素質教育之路發揮出獨特的功能[3]。新理念、新課標、新教材迫切要求實驗教學理念的更新，這是一次挑戰，讓我們有所准備，勇於面對這一挑戰。
❼ 誰有組織切片的製作過程
一、制備顯微標本的切片法
一石蠟包埋切片製作法
這是最常用的切片法。以石蠟作為組織的填充支持介質，將整塊組織加以包埋，最後凝固成均勻一致的固態結構。用切片機製取極薄的切片。為了讓石蠟能浸入組織內部，需將組織經過脫水等處理。過程大致如下：
⑴固定：生物標本脫離機體或培養環境，細胞會發生自溶，腐敗分解。因此，需用固定劑處理，使蛋白質凝固停止瀕死或死後變化。凡供永久保存的標本都需經固定處理。
常用的固定劑是甲醛、乙醇等，能使蛋白質凝固。還有由幾種試劑配成的固定液，例如Carnoy固定液，由無水酒精、氯仿、冰醋酸配成，固定力更快更強，不含水分，可避免水溶性物質如糖原等在固定過程中損失。
⑵脫水：是將組織細胞所含水分除去。通常用乙醇（Alcohol，酒精），濃度遞升到 100%。此過程還使組織塊進一步硬化。
⑶透明：是用既能溶於純酒精又能融解石蠟的有機溶劑，將組織中的酒精取代，以便石蠟浸入。通常用二甲苯（xylene）為透明劑。
⑷浸蠟：在溫箱內進行。已透明的組織塊放入加熱融解的石蠟中，讓石蠟浸透組織，作為支持介質。
⑸包埋：將已浸蠟的組織塊放入熱融的包埋石蠟中，迅速冷凝，組織決便被蠟包埋。
⑹切片：用切片機。常用的切片機有輪轉式、平推式的。用輪轉式的易於切出連續切片。切片厚度隨製片目的而調整。教學標本厚度多是5~6μm。
⑺貼片烤乾：石蠟切片在溫水上展平後，移在玻片上，烤乾，即可供染色處理。染色後用樹膠、蓋坡片封固，可永久保存。
二冷凍切片法
冷凍切片法是借組織在低溫下，凍結變硬而達到符合切片要求。冷凍切片法需有冷凍切片機，或在普通切片上配製冷設施。恆冷切片機是高級冷凍切片設備。它有一個恆冷箱，標本致冷台和切片機都裝在箱內。恆冷箱的作用類似冰箱，可在一定范圍內調整溫度，其結構有利於保持箱內恆定低溫，減少箱門打開時環境溫度的干擾。切片機的輪轉把手裝在箱外，便於操縱切片。
冷凍切片法的優點是：在處理得當時，它可以最大限度地保持組織的新鮮狀態。並且，由於不需經脫水、透明、浸蠟等過程中有機溶劑的處理，及濕箱浸蠟熱的影響，甚至可不經固定。所以能很好地保存組織細胞的各種成分和酶的活性，因此在酶的組織化學研究中常用此切片法。
二、顯示標本結構成分的染色法
一蘇木素伊紅染色法（HE染色法）
為最常用的染色法。該法應用於各種組織的染色，是組織學技術的基本方法，對任何液體固定的組織和各種包埋的切片均可使用，只是對不同包埋的切片法處理略有不同。下面簡介石蠟包埋切片的HE染色法。
1、脫蠟：石蠟切片的組織內部充滿石蠟，不能使水溶性染液著色，因此在染色前必須首先用二甲苯將石蠟脫掉，共兩次。
2、下行入水：將已脫蠟的標本浸入無水酒精及各級酒精，使組織逐步接近水。3、蒸餾水略洗。
4、蘇木素溶液染色約5—15分鍾
5、自來水洗去多餘染料。
6、入稀釋的鹽酸酒精溶液中分色，邊分色邊鏡檢，至核呈紅紫色，細胞質無
色為合適。
7、分色後用自來水或加數滴氨水鹼化，直至細胞核變成藍色。這一步驟也可稱為「藍化」。
8、入蒸餾水洗去鹼性水分。
9、入70%酒精→80%酒精各5分鍾。
10、入伊紅染液染色30秒至數分鍾。
11、以95%酒精對伊紅分色，至胞漿，結締組織等呈桃紅色。
12、上行脫水：染色後的切片，因組織內含水而不透明，不能清晰地觀察其微細結構。因此，須將組織內的水分經各級酒精→無水酒精逐步置換，最後進入不含水份的透明劑內。
13、透明：入二甲苯透明劑，二次（各數分鍾）。
14、取出切片：將組織周圍多餘的二甲苯擦去，滴樹膠後加蓋玻片封固。
結果：細胞核藍紫色，胞漿、膠原纖維、肌纖維為桃紅色，嗜酸性顆粒為鮮紅色，彈性纖維呈明亮桃紅色。
二組織化學和細胞化學染色法
組織化學和細胞化學，是將物理和化學的技術運用到組織標本，用顯微鏡和化學分析方法來研究組織和細胞內的化學成分，並觀察該化學成分在組織、細胞內的定位、含量及其變化規律。這些化學成分借著化學反應所產生的不溶性著色物質來顯示。對於某些化學成分，例如：Fe++糖原、核酸等，可以用直接或間接的化學反應產生著色沉澱而顯示其部位和相對含量。對於酶類，顯示它的活性，須有該種酶的底物（被該種酶作用的物質），由酶對底物的分解，直接或間接地生成著色物質而被顯示。凡是在光學顯微鏡下觀察細胞原位顯示的化學物質，稱組織化學，若用電鏡觀察細胞原位化學成分的著色部位，則稱電鏡細胞化學，下面從原理方面簡要介紹幾種常用的組織化學染色技術：
1、顯示琥珀酸脫氫酶（SDH）活性的硝基-BT法：
（Succinate dehydrogenase）
⑴酶的定位及生物學意義：
琥珀酸脫氫酶是線粒體標志酶，其存在於所有有氧呼吸的細胞，和線粒體內膜緊密結合。該酶不需輔酶而自身有黃素蛋白（FP,Flavoprotein）為輔基。在組化反應中常用來反映三羧酸循環的情況。其催化過程如下：
弱-單甲（紫紅色）
HOOC-CH2-CH2-COOHFPH2四唑（甲）↓
（有色）強-雙甲（深紫藍色）
（琥珀酸）（黃素蛋白）
HOOC-CH=CH=COOHFPH2四唑（無色）
（延胡索酸）
⑵原理：上述的反應最後一步的原理是，硝基-BT（Nitro-blue tetrozolyum，四唑氮藍）系異環族化合物四唑鹽，當它接受氫時，本身被還原為有色沉澱產物（甲
）（Formazan）。
⑶孵育液配製：
A液（貯備液）
0.2M磷酸緩沖液（PH7.6）10ml等量混合
0.2M琥珀酸鈉（S01.succinate） 10ml備用
B液：
硝基四唑（Nitro-Br）2mg
2ml
0.2M磷酸緩沖液（PH7.6） 2ml
取：A液2ml
B液2ml孵育液
聚乙烯吡烷酮（PVP） 300mg
⑷方法：
①新鮮恆冷箱冷凍切片，厚6~8μm，平貼在蓋玻片上。
②滴染法：將有冷凍切片的蓋玻片（標本面朝上）平放於預熱好的培養皿中（底部墊一濕濾紙），滴加孵育液至全部覆蓋組織，於37℃溫箱中孵育45~60分鍾（肝，心肌組織15分鍾即可）。
③於生理鹽水中沖洗二次（輕晃，以防脫片）。
④10%福爾馬林生理鹽水固定10分鍾。
⑤15%酒精浸洗5分鍾（換二次）。
⑥甘油明膠封片。
⑸結果：酶活性強處呈藍色顆粒（雙甲沉澱），酶活性較低時形成紫紅色單甲。在光鏡下，該酶活性於肝小葉內分布呈明顯分帶現象，周邊帶強於中央帶。在心肌細胞縱切面，酶活性顆粒沿心肌細胞長軸整齊排列，相鄰心肌細胞的空白處為閏盤。
2、顯示葡萄糖-6-磷酸酶（G-6-Pase）活性的鉛法：
（Glucosel-phosphate phosphohydrolase）
①酶的定位及其生物學意義：
該酶主要位於內質網，是內質網的標志酶。G-6-Pase參與糖代謝，能水解葡萄糖-6-磷酸而釋放出葡萄糖和磷酸。
⑵原理：G-6-Pase將底物（葡萄糖-6-磷酸鉀鹽）水解產生磷酸離子，後者被孵育液中的硝酸鉛所捕獲，最終反應物為顆粒狀的硫化鉛沉澱，其反應式如下：
酶Pb(NO3)2
葡萄糖-6-磷酸鉀+H2O葡萄糖+磷酸
(NH4)2S
Pb2(PO4)2PbS↓
(無色)（棕色）
（試劑配製及方法詳見組織學技術專著）
⑶結果：酶活性部位呈棕色硫化鉛顆粒沉澱。在光鏡下G-6-Pase活性顆粒較均勻地分布於胞質中。
3、顯示鹼性磷酸酶（APL）的鈣鈷法（Alkaline phosphohydrolase）
⑴酶的定位及其生物學意義：
ALP在鹼性環境下能催化各種醇和酚的磷酸酯水解，參與磷酸根的跨膜轉運過程，並有磷酸轉移的作用，故在細胞膜上運輸較活躍，如毛細血管內皮細胞，腎近曲小管刷狀緣，腸上皮紋狀緣等處，該酶的活性較高。
⑵原理：ALP將磷酸鹽底物（如β-甘油磷酸鈉等）分解產生磷酸根離子，後者為孵育液中的氯化鈣捕獲生成磷酸鈣沉澱，但該沉澱為非金屬鹽，需加入硝酸鈷，使其生成磷酸鈷沉澱，因無色，再需通過硫化銨處理，形成棕黑色硫化鈷沉澱而被顯示。在PH9.2—9.4環境中表現最大活性。反應式如下：
ALPCa++
β-甘油磷酸鈉磷酸離子Ca2(PO4)2
Co(NO3)2(NH4)2S
CO2（PO4）2CoS↓
（無色）（棕黑色）
⑶結果：酶活性部位為棕黑色CoS沉澱。
4、顯示核酸的甲綠一派喏寧（Methyl green-pyronln）染色：
⑴原理：甲綠和派喏寧都是鹼性染料，對兩種核酸（DNA和RNA）能分別染色，其機制可能在於兩種核酸分子都是多聚體，但聚合程度有所不同。甲綠具有兩個帶電荷的氨基，而派喏寧只有一個。因此在混合的染液中，二者競爭的結果是甲綠易與聚合程度較高的DNA結合呈現藍綠色，而派喏寧則與聚合程度較低的RNA結合呈現紅色。
（試劑制備及方法詳見組織學技術專著）
⑶結果：核內DNA呈藍綠色，核仁及胞質內RNA呈桃紅色。
5、顯示糖原的過碘酸雪夫氏（PAS）反應：
⑴原理：糖原是一種動物多糖，無色，富含於肝細胞和肌細胞胞質中。PAS反應（Periodic acid schiff Reaction）能在糖原所在部位生成紫紅色物質，從而將之顯示。RAS反應分為兩步：首先是強氧化劑過碘酸（Periodic acid,分子式為HIO4），將糖原中的葡萄糖分子的C-C鍵打開，將CHOH-CHOH氧化，生成二醛基，然後Schiff試劑中的無色亞硫酸品紅分子與糖的醛基結合，生成新的紫紅色復合物。
HIO4schiff試劑
多糖醛基紫紅色反應產物
（氧化）
（試劑配製及方法詳見組織學技術專著）
⑵結果：糖原呈紫紅色顆粒狀。
❽ 環氧當量 測定方法
鹽酸丙酮法、溴化氫—冰乙酸法和高氯酸法
環氧當量是環氧樹脂的重要當量，但檢測較為麻煩。有沒有一種快速、准確、簡便實用的環氧當量測定方法？專家日前介紹的「溴化氫-冰乙酸非水滴定法」，就是可資業界的一種科學方法。這種方法在冰乙酸非水介質中，以結晶紫為指示劑、溴化氫與環氧基團迅速等摩爾反應，關鍵試劑是0.1mol的HBr-HOAe，有色樣品、高填料樣品或難以脫色的深色樣品不同的測試也多有訣竅，溴化氫/冰乙酸電位滴定方法不乏秘密。常用的其他環氧分析方法相比，該方法具有簡單、可靠、更准確的優點。
環氧當量(環氧值)是環氧樹脂類膠粘劑、灌封料、復合材料等使用和質量控制的一項十分重要的指標(環氧當量=100/環氧值)，因而長期以來受到廣泛關注並開展了大量研究，形成多種化學分析方法[1]。這些方法主要基於鹵化氫、硫代硫酸鹽(酯)和硫醇類能與環氧基進行計量的加成反應或進行離子化反應而用於環氧化合物分析。Budvak等早在1969年，Sorokina等在1978年就對環氧化合物的分析方法進行了詳細報道和論述。以往國內多採用鹽酸-丙酮返滴定法(HG2-741)並沿用至今，但當樣品並非純樹脂而摻混有一定量的填料或有深色物質干擾終點判別時(如膠粘劑或灌封材料)常常難以測定。
1984年以來許多進口的環氧材料，要求採用一種「溴化氫-冰乙酸非水滴定法」進行質量控制。這種方法比國內長期普遍採用的鹽酸一丙酮返滴定法快速、准確、靈敏，不僅能測定常用環氧樹脂且適用於有填料或深色環氧材料的快速測定。與鹽酸丙酮法相比，檢測時間短、終點易判定、數據更准確集中、適用范圍廣。與國家標准GB/T 4612規定的高氯酸法[4]效果相當。但溴化氫-冰乙酸非水滴定法使用更加安全、價廉、簡便。溴化氫-冰乙酸法在國內未被廣泛採用的主要原因，在於其使用的標准滴定液國內無供應。中科院蘭州化物所、西北工大材料院科研人員，通過測試方法的研究與試驗自製了專用試劑，使該方法得以完善並建立了企業標准。經幾家有關單位試用反映良好，解決了多種進口環氧材料長期質量控制的需要。
在生產實踐中專家將鹽酸丙酮法、溴化氫—冰乙酸法和高氯酸法對比測試。國標GB/T 13657-1992(雙酚A環氧樹脂)的附加說明表明，國標制訂時參照採用了ASTM1763-198l(環氧樹脂標准規范)，而該ASTM標准則規定採用ASTM D1652(溴化氫—冰乙酸法)測定環氧當量。其主要原因是因為鹽酸丙酮法採用返滴定，僅滴定前就需要將試樣放置1小時，且試劑需要現配現用；其二由於溴化氫-冰乙酸法和高氯酸法採用非水滴定，試樣和試劑溶解好、反應迅速、終點容易判斷，而鹽酸丙酮法的部分試樣在反應終點前後可能因溶樣效果稍差出現混濁，影響終點判斷。
此外在對進口和國產環氧膠、多種灌封料等分析測試實踐中，大部分樣品不像E-51(EP0144l-310或CYD-128)之類透明樹脂，而是摻有大量填料、有色添加劑或有深色產物的樣品，為此在實際應用溴化氫—冰乙酸法時，針對不同環氧樣品分作3類處理。與高氯酸法相比，其原理都是通過溴化氫與環氧官能團進行加成反應。所不同的是高氯酸法是通過高氯酸與溴化四乙胺反應，轉化出的溴化氫再與環氧官能團反應。兩種方法使用的滴定劑使用前均需要進行標定，計算方法和操作也很相似(溴化氫-冰乙酸法通常不考慮溫度/體積校正)、誤差較小。而溴化氫一冰乙酸法因使用試劑更簡單易得，實用性更好。
關於溴化氫—冰乙酸電位滴定，各種環氧材料均可以通過電位滴定進行環氧當量測定。
在通常情況下，可直接採用試劑直接滴定。但由於溴化氫的揮發和氧化等因素，ASTMD1052標准規定，採用高氯酸與溴化四乙胺反應進行電位滴定，對於低活性的環氧材料採用碘化四丁胺(與國標GB/T 4610高氯酸法完全相同)。其實這種高氯酸法是溴化氫-冰乙酸法的另一種應用形式。因為測試原理是利用高氯酸與溴化四乙胺反應原位合成初生態的溴化氫，而生成的溴化氫立即等當量與環氧基團反應，計算和測試方法相同。
在測試過程中由於易揮發氧化，可使用密封自動上液式滴定管。測試結果比較發現，自製試劑與進口試劑相當，偏差≤±1.5%，可滿足使用要求。在對3個單位實驗室不同測試人員的分析使用後認為，該方法和試劑可以滿足產品質量控制使用要求。總之，溴化氫—冰乙酸法與鹽酸丙酮法測試結果比較，具有數據集中、准確、經濟安全、簡便易行的優點，與高氯酸法應用效果相當。但溴化氫-冰乙酸非水滴定法使用更加安全、價廉、簡便。採用氫溴酸與乙酸酐反應可以簡便有效地制備HBr-HOAc 0.1mol/滴定劑。專家強調，由於溴化氫—冰乙酸法用標准滴定液可自製，可以在國內推廣應用，尤其適用於進口環氧材料的測試分析。
❾ 自製薄層板鞋簡述點樣點位置及大小
影響可定會有的,最終的影響就是刺破的那個層析的結果不準確,也可能影響很小,因為這個是定性分析。色譜又稱色層法或層析法，是一種物理化學分析方法，它利用不同溶質（樣品）與固定相和流動相之間的作用力（分配、吸附、離子交換等）的差別，當兩相做相對移動時，各溶質在兩相間進行多次平衡，使各溶質達到相互分離。