血吸蟲基因研究方法

① 對血吸蟲的了解，詳細一點

血吸蟲一般在沿海沿江一些城市的發病率高些，對血吸蟲的研究一直不停，在轉染上可以使用RFECT進行更具體的研究，先把細胞株激活再轉染,這樣應該不能提高轉染效率。我們實驗室用24孔板做，每孔2ulRFECT，設置siRNA終濃度10nM,30nM,50nM,100nM四個梯度，每個梯度做2個復孔,做轉染前一天鋪板,細胞密度在45%。

② 血吸蟲如何傳染人與人之間能傳染嗎如何預防

在什麼情況下才會傳染得上血吸蟲病？
大家知道，血吸蟲病的流行鏈主要由5個環節組成：一是患者、病畜糞便中的蟲卵進入水中，在適宜的溫度下孵化為毛蚴。二是毛蚴鑽入釘螺體內，發育成尾蚴。三是尾蚴從釘螺體內釋放出後，在水面漂浮，如遇到人或牛、羊等可寄生的動物，迅即鑽入其體內，隨血流到達腸系膜血管，發育為成蟲並在此寄生。四是成蟲每天排出大量蟲卵（1000-3500個）。人經過反復多次、多數量感染後，大量蟲卵集聚引起肝臟纖維化、門靜脈高壓，造成晚期血吸蟲病（晚血）。五是部分蟲卵隨患者、病畜的糞便排出體外，引起新的感染循環。
人和人在什麼情況下會傳染？
我們已經了解到以下一些特點：血吸蟲病病人、病畜不會直接傳染人、畜，必須通過釘螺這一中間環節；釘螺也是「受害者」，是被血吸蟲毛蚴感染和寄生的對象；所有的感染環節都與水有明確的關系：即沒有水，蟲卵不能孵化；沒有水，毛蚴不能鑽入釘螺體內；沒有水，釘螺體內的尾蚴不能逸出，人、畜也就不會感染。另外，還有一個非常值得我們重視的特點，就是釘螺的平均壽命只有1年；寄生有血吸蟲幼蟲的感染性釘螺的平均壽命僅為214天。

自尾蚴鑽入皮膚，經童蟲移行並發育為成蟲，成蟲成熟後交配產卵，蟲卵沉積於腸道與肝臟等處組織內，蟲卵沉積於組織內所誘發的蟲卵肉芽腫反應乃是本病的基本病理改變。
(1)尾蚴性皮炎：一般發生於感染後6～8小時，長者2～3天。局部皮膚毛細血管擴張、充血、出血及水腫，皮膚出現紅色丘疹，成為「尾蚴性皮炎」。持續1～2天後，丘疹自行消退。
(2)童蟲移行所致病變：肺部病變明顯，局部可見點狀出血，嚴重感染者可發生出血性肺炎，出現咳嗽、發熱、蕁麻疹等表現，
(3)成蟲寄生引起的病變：產生局部輕微的靜脈內膜炎、輕度貧血。輕微血管壁壞死和肝內門靜脈分支栓塞性脈管炎。某些初次重度感染者可出現重度發熱、全身不適、蕁麻疹、腹痛、腹瀉、肝脾腫大等急性血吸蟲病表現，
(4)蟲卵肉芽腫：有急性和慢性之分。
急性期臨床上出現腹痛、腹瀉、便血等症狀，糞便中可檢出蟲卵。
至慢性期，輕度感染者，臨床上通常無症狀。感染較重者，病變部位的腸系膜纖維增厚形成腫塊。
在纖維增厚、慢性潰瘍、息肉形成基礎上有發生癌變的可能。
血吸蟲病引起肝病變，為早期肝腫大。晚期肝變硬、縮小，形成血吸蟲性肝硬化和脾功能亢進。
血吸蟲引起的異位損害以肺和腦部最多見，

預防
1. 不要觸有血吸蟲病的水
2. 積極治療病人、病畜、減少傳染源。
3. 消滅釘螺。
4. 管好水源，不喝生水。

血吸蟲通過接觸疫區的水，水中尾蚴通過皮膚侵入體內，治療血吸蟲首選吡喹酮，可以10mg/kg/體重，每日3次，連用4日，在服首劑1小時後可出現頭昏，頭痛，乏力，腥痛，關節痛，腹瀉，惡心等，一般不需處理，於停葯數小時至一二天即消失，服葯後可心率減慢，偶見心電圖改變，肝酶升高等，應醫生復查，嚴重心，肝，腎患者慎用。
治療貧血、月經量少、老年血虛頭暈等症均有較好的療效；近年來還發現黃花根具有抗結核和治療吸血蟲的作用。黃花的食用方法很多，蒸、煮、燉、炒、褒湯、做羹等均可，因其具有豐富的營養價值和清香可口的美味，逐漸成為家庭餐桌和高級宴席上大的名珍佳餚，用它製成風味別具的葯膳及飲料、罐頭等保健食品則更是風靡國內外。

本文就幾種黃花葯膳的家庭製作方法作一介紹，供讀者選用。

黃花銀耳羹 黃花50克、銀耳30克、紅棗20克、櫻桃克、桂花草10克，冰糖適量，先將黃花切細，紅棗去核，銀耳浸泡漲後與桂花、櫻桃一同放入沙鍋內燉煮直黃花爛熟，印數耳成根裝時加入冰糖在食用。此方具有補合氣血、養心安神、潤肺清熱、美容之功效。長期食用可使人面色紅潤、皮膚柔嫩、細滑光潔。

黃花百合粥 黃花費30克、百合30克、糯米100克、冰糖適量，先將黃花切段，百合去皮洗凈切碎與糯米同放入沙鍋，加入適量以火熬煮至米粥濃稠時加入冰糖攪均即可食用。此方具有健皮盒氣、寧心安神之功效，適用於失眠症以及各種更年期綜合症等。

黃花豆腐肉片湯 黃花50克、豆腐一塊（約法三章250克切塊）瘦肉類150克切片，將黃花同豆瓣放入鍋內，加水適量煮20分鍾後，再放入瘦豬肉片稍煮片刻，用生薑、鹽、味精、蔥花調味既可食用，此方具有補腎、養血、通乳之功效。適用於腎虛腰痛、耳鳴耳聾、記憶力。

不可獻血!!!!

③ 血吸蟲怎樣檢查

診斷標准
疑似病例
在流行區有疫水接觸史並有下列臨床表現： ①急性血吸蟲病：疫水接觸部位皮炎，發熱，肝腫大伴肝區壓痛，腹瀉，嗜酸粒細胞顯著增多。 ②慢性血吸蟲病：無症狀或慢性腸道感染症狀，肝脾腫大，嗜酸粒細胞高於正常。 ③晚期血吸蟲病：不能用其他原因解釋的肝硬化，生長發育障礙，或腹部肉芽腫。
確診病例
疑似病例加下列任何一項： ①糞便發現血吸蟲卵或孵化檢出毛蚴。 ②直腸粘膜或肝組織活檢找到血吸蟲卵或蟲卵肉芽腫。
病原診斷
從糞便內檢查蟲卵或孵化毛蚴以及直腸粘膜活體組織檢查蟲卵。有：⑴直接塗片法：重感染地區病人糞便或急性血吸蟲病人的粘液血便中常可檢查到血吸蟲蟲卵，方法簡便，但蟲卵檢出率低。⑵毛蚴孵化法：可以提高陽性檢出率。⑶定量透明法：用作血吸蟲蟲卵計數。⑷直腸粘膜活體組織檢查：慢性及晚期血吸蟲病人腸壁組織增厚，蟲卵排出受阻，故糞便中不易查獲蟲卵，可應用直腸鏡檢查。
免疫診斷
⑴皮內試驗（intradermaltest，IDT）：一般皮內試驗與糞檢蟲卵陽性的符合率為90％左右，但可出現假陽性或假陰性反應，與其他吸蟲病可產生較高的交叉反應；並且病人治癒後多年仍可為陽性反應。此法簡便、快速、通常用於現場篩選可疑病例。 ⑵檢測抗體：血吸病人血清中存在特異性抗體，包括IgM、IgG、IgE等，如受檢者未經病原治療，而特異性抗體呈陽性反應，對於確定診斷意義較大；如已經病原治療，特異性抗體陽性，並不能確定受檢者體內仍有成蟲寄生，因治癒後，特異性抗體在體內仍可維持較長時間。目前檢測抗體的血吸蟲病血清學診斷方法很多，常用的有以下幾種：1）環卵沉澱試驗（circunovalprecipitintest，COPT）：通常檢查100個蟲卵，陽性反應蟲卵數（環沉率）等於或大於5％時，即為陽性。糞檢血吸蟲卵陽性者，COPT陽性率平均為97.3％（94.1%～100%）。2）間接紅細胞凝集試驗（indirecthaemagglutinationtest，IHA）：糞檢血吸蟲蟲卵陽性者與IHA陽性符合率為92.3%～100%，正常人假陽性率在2％左右，與肺吸蟲、華支睾吸蟲、旋毛蟲感染者可出現假陽性反應。IHA操作簡便，用血量少，判讀結果快，目前國內已廣泛應用。3）酶聯免疫吸附試驗（enzyme-linkedimmunosorbentassay，ELISA）：此試驗具有較高的敏感性和特異性，並且可反應抗體水平，陽性檢出率在95％～100％，假陽性率為2.6％，病人在吡喹酮治療後半年至一年有50％至70％轉為陰性。4）免疫酶染色試驗（immunoenzymicstainingtest，IEST）。
殺蟲治療
：以吡喹酮為首選葯物。吡喹酮為一廣譜抗蠕蟲葯，治療血吸蟲病療效卓著。急性血吸蟲病患者，吡喹酮治療後，6～12個月糞便檢查陰轉率為90%左右，慢性與晚期患者為91%～100%，具體用葯方法如下： ①急性血吸蟲病：總劑量按120mg/kg計算，分12次、4天服完，體重超過60kg者，仍按60kg計算，應以住院治療為宜。 ②慢性血吸蟲病：一般可採用總劑量60mg/kg，分6次、2天服完，或40mg/kg頓服。個別年老體弱者，總劑量可減至35～40mg/kg，兩次分服。 ③慢性血吸蟲病：晚期患者多數患夾雜症，葯代動力學研究表明慢性與晚期患者服用吡喹酮後，葯物吸收慢、排泄差，血葯濃度明顯增高，並維持較長時間，晚期患者血液濃度更高。因此，葯物劑量應適當減少和個體化。一般可按總劑量40mg/kg計，一次服完，或分兩次1天服完。服葯期間應加強觀察，服葯前後應暫時停用利尿劑。

④ 血吸蟲的致病機理是什麼

致病
血吸蟲發育的不同階段，尾蚴、童蟲、成蟲和蟲卵均可對宿主引起不同的損害和復雜的免疫病理反應。由於各期致病因子的不同，宿主受累的組織、器官和機體反應性也有所不同，引起的病變和臨床表現亦具有相應的特點和階段性。根據病因的免疫病理學性質，有人主張將血吸蟲病歸入免疫性疾病范疇內。據研究，在1973年湖南長沙馬王堆出土的漢墓女屍和1975年湖北江陵紀南鳳凰山出土的西漢墓男屍中，均發現直腸和肝組織內有典型的日本血吸蟲卵，這證實2000多年前，長江流域已有日本血吸蟲病的流行
1．尾蚴及童蟲所致損害
尾蚴穿過皮膚可引起皮炎，局部出現丘疹和瘙癢，是一種速發型和遲發型變態反應。病理變化為毛細血管擴張充血，伴有出血、水腫，周圍有中性粒細胞和單核細胞浸潤。實驗證明，感染小鼠的血清和淋巴細胞被動轉移到正常小鼠，再用尾蚴接種（初次接觸尾蚴），也可產生尾蚴性皮炎。說明這種免疫應答在早期是抗體介導的。 童蟲在宿主體內移行時，所經過的器官（特別是肺）出現血管炎，毛細血管栓塞、破裂，產生局部細胞浸潤和點狀出血。當大量童蟲在人體移行時，患者可出現發熱、咳嗽、痰中帶血、嗜酸性粒細胞增多，這可能是局部炎症及蟲體代謝產物引起的變態反應。
2．成蟲所致損害
成蟲一般無明顯致病作用，少數可引起輕微的機械性損害，如靜脈內膜炎等。可是，它的代謝產物、蟲體分泌物、排泄物、蟲體外皮層更新脫落的表質膜等，在機體內可形成免疫復合物，對宿主產生損害。
3．蟲卵所致的損害
血吸蟲病的病變主要由蟲卵引起。蟲卵主要是沉著在宿主的肝及結腸腸壁等組織，所引起的肉芽腫和纖維化是血吸蟲病的主要病變。 肉芽腫形成和發展的病理過程與蟲卵的發育有密切關系。蟲卵尚未成熟時，其周圍的宿主組織無反應或輕微的反應。當蟲卵內毛蚴成熟後，其分泌的酶、蛋白質及糖等物質稱可溶性蟲卵抗原（soluble egg antigen，sea），可誘發肉芽腫反應。sea透過卵殼微孔緩慢釋放，致敏t細胞，當再次遇到相同抗原後，刺激致敏的t細胞產生各種淋巴因子。研究結果表明：巨噬細胞吞噬sea，然後將處理過的抗原呈遞給輔助性t細胞（th），同時分泌白細胞介素1（il－1），激活th，使產生各種淋巴因子，其中白細胞介素2（il－2）促進t細胞各亞群的增生； γ－干擾素增進巨噬細胞的吞噬功能。除上述釋放的淋巴因子外，還有嗜酸性粒細胞刺激素（esp）、成纖維細胞刺激因子（fsf）、巨噬細胞移動抑制因子（mif）等吸引巨噬細胞、嗜酸性粒細胞及成纖維細胞等匯集到蟲卵周圍，形成肉芽腫，又稱蟲卵結節。 日本血吸蟲產出蟲卵常成簇沉積於組織內，所以蟲卵肉芽腫的體積大，其細胞成分中，嗜酸性粒細胞數量多，並有漿細胞。肉芽腫常出現中心壞死，稱嗜酸性膿腫。在蟲卵周圍常常可見到抗原抗體復合物反應，稱何博禮現象（hoeppli phenomen )。用蘇木素伊紅染色的肝切片標本中，在蟲卵周圍有紅色放射狀物質。日本血吸蟲蟲卵肉芽腫的形成機制在動物研究的結果表明，是t細胞介導的ⅳ型變態反應。 隨著病程發展，卵內毛蚴死亡，其毒素作用逐漸消失，壞死物質被吸收，蟲卵破裂或鈣化，其周圍繞以類上皮細胞、淋巴細胞、異物巨細胞，最後類上皮細胞變為成纖維細胞，並產生膠原纖維，肉芽腫逐漸發生纖維化，形成疤痕組織。 蟲卵肉芽腫的形成是宿主對致病因子的一種免疫應答。一方面通過肉芽腫反應將蟲卵破壞清除，並能隔離和清除蟲卵釋放的抗原，減少血液循環中抗原抗體復合物的形成和對機體的損害；另一方面，肉芽腫反應破壞了宿主正常組織，不斷生成的蟲卵肉芽腫形成相互連接的疤痕，導致干線型肝硬變及腸壁纖維化等一系列病變。 血吸蟲蟲卵肉芽腫在組織血管內形成，堵塞血管，破壞血管結構，導致組織纖維化，這類病變主要見於蟲卵沉積較多的器官，如肝和結腸。在肝內，蟲卵肉芽腫位於門脈分支終端，竇前靜脈，故肝的結構和功能一般不受影響。在重度感染患者，門脈周圍出現廣泛的纖維化，肝切面上，圍繞在門靜脈周圍長而白色的纖維束從不同角度插入肝內，稱干線型纖維化（pipestem fibrosis），是晚期血吸蟲病特徵性病變。由於竇前靜脈的廣泛阻塞，導致門靜脈高壓，出現肝、脾腫大，側支循環，腹壁、食管及胃底靜脈曲張，以及上消化道出血與腹水等症狀，稱為肝脾性血吸蟲病（hepatosplenic schistosomiasis）。所以日本血吸蟲病晚期產生因門脈血流障礙所致的連鎖性病理生理變化。
4．循環抗原及免疫復合物
血吸蟲寄生在宿主靜脈內，童蟲、成蟲和蟲卵的代謝產物、分泌物和排泄物，以及蟲體表皮更新的脫落物排入到血液中，並隨血液循環至各組織，成為循環抗原。在血吸蟲感染宿主血內可檢出主要的循環抗原有：腸相關抗原（associated antigens，gaa）、表膜相關抗原（membrane associated antigens，maa）和可溶性蟲卵抗原（soluble egg antigens，sea）。迄今，研究得最多的是腸相關抗原。血吸蟲gaa的兩個主要成分，即循環陽極抗原（circulating anodie antigens，caa），為腸相關血吸蟲蛋白多糖抗原和循環陰極抗原（circulating anodie antigens，caa ），為不均一的糖蛋白抗原。應用間接熒光抗體技術證明，caa和cca均來源於成蟲腸道襯細胞，隨蟲體吐出物排到宿主血流中。宿主對這些循環抗原產生相應的抗體，抗原抗體結合，形成免疫復合物。通常免疫復合物可被單核細胞或巨噬細胞吞噬、清除。當免疫復合物形成過多，或不能被有效清除時，則可在組織（血管、關節等）內沉積，引起損傷組織的炎症反應。即 ⅲ型變態反應。 免疫復合物沉積血管內可激活補體，補體中的c3a和c5a具有促使肥大細胞和嗜鹼性粒細胞釋放組織胺等血管活性物質的作用，以致血管通誘性增加。另外，c5a的化學趨向性作用，可吸引中性粒細胞集聚於復合物沉積的血管，中性粒細胞吞噬復合物，並釋放蛋白溶解酶，損傷包括血管在內的局部組織。血吸蟲病人合並腎損害時，常出現蛋白尿，水腫及腎功能減退。實驗研究認為血吸蟲病的腎小球病變與免疫復合物的沉積有關。
5．臨床表現
根據患者的感染度、免疫狀態、營養狀況、治療是否及時等因素不同而異。日本血吸蟲病可分為急性、慢性和晚期三期。當尾蚴侵入皮膚後，部分患者局部出現丘疹或蕁麻疹，稱尾蚴性皮炎。當雌蟲開始大量產卵時，少數患者出現以發熱為主的急性變態反應性症狀，常在接觸疫水後1～2月出現，除發熱外，伴有腹痛、腹瀉、肝脾腫大及嗜酸性粒細胞增多，糞便檢查血吸蟲卵或毛蚴孵化結果陽性，稱急性血吸蟲病。然後病情逐步轉向慢性期，在流行區，90％的血吸蟲病人為慢性血吸蟲病，此時，多數患者無明顯症狀和不適，也可能不定期處於亞臨床狀態，表現腹瀉、糞中帶有粘液及膿血、肝脾腫大、貧血和消瘦等。一般在感染後5年左右，部分重感染患者開始發生晚期病變。根據主要臨床表現，晚期血吸蟲病可分為巨脾、腹水及侏儒三型。一個病人可兼有兩種或兩種以上表現。在臨床上常見是以肝脾腫大、腹水、門脈高壓，以及因側支循環形成所致的食管下端及胃底靜脈曲張為主的綜合征。晚期病人可並發上消化道出血，肝性昏迷等嚴重症狀而致死。兒童和青少年如感染嚴重，使垂體前葉功能減退，及其他因素可影響生長發育和生殖而致侏儒症。因肝纖維化病變在晚期常是不可逆的，並且對治療反應甚差，從而導致臨床上難治的晚期血吸蟲病。
6．異位寄生與異位損害
日本血吸蟲成蟲在門脈系統以外的靜脈內寄生稱異位寄生，而見於門脈系統以外的器官或組織的血吸蟲蟲卵肉芽腫則稱異位損害（ectopic lesion）或異位血吸蟲病。人體常見的異位損害在腦和肺。血吸蟲卵進入腦和脊髓產生異位損害，可致嚴重的神經系統並發症；經側支循環進入肺的蟲卵可引起肺動脈炎，甚至肺源性心臟病；罕見的異位損害可見於皮膚、甲狀腺、心包、腎等處。 異位寄生與損害多發生在大量尾蚴感染的急性期，而慢性期及晚期患者也可出現。經動物試驗結果初步分析，急性血吸蟲病患者合並腦或肺的異位損害可能由於感染大量尾蚴，蟲數過多，發生異位寄生和損害。晚期因肝纖維化，發生側支循環，門腔系統吻合支擴大，腸系膜靜脈的蟲卵可被血流帶到肺、腦或其他組織引起病變。

⑤ 如何運用幼蟲巨大致死基因對血吸蟲病的控制

科學家確定一種可能成為治療血吸蟲病新方法的化合物。

來自美國伊利諾斯州立大學和美國國立衛生研究院的科學家，通過高通量葯物篩選的方法確定了一種能有效對付血吸蟲酶TGR的化合物。這是一種比標准方法能更准確地在巨大化學物庫里進行化合物分性的篩選辦法。有關研究成果於3月16日在線發表於《自然—醫學》（Nature Medicine）上。

科學家將化合物直接對TGR酶、帶有血吸蟲病的蠕蟲及感染曼氏血吸蟲的老鼠身上進行實驗。實驗表明，該化合物能最有效地殺死處於各個不同階段的血吸蟲，同時能有效應對人類感染的三種主要血吸蟲病。

目前，血吸蟲病的治療主要依靠吡喹酮（PZQ）葯物。

「由於吡喹酮非常廉價，同時也非常有效，這讓研製新的、能與之媲美的葯物面臨巨大的挑戰。」來自伊利諾斯州立大學生物學教授、論文作者之一David Williams說。

然而，Williams說，「在血吸蟲病治療上，對吡喹酮的廣泛依賴將會加速抗葯性寄生蟲的出現，」這使得研發應對該寄生蟲的葯物變得更加有必要。

中國疾病預防控制中心寄生蟲病防預控制所的肖樹華教授對此項研究表示歡迎。他指出，「吡喹酮雖然是一個好葯，但其不足處是它僅對血吸蟲成蟲有效，對血吸蟲童蟲則無效。因此，血吸蟲病患者經吡喹酮治癒後，經過一個傳播季節，接觸疫水感染尾蚴後仍可重新感染。故重復感染是吡喹酮應用中的一個問題。」

如果將具有不同葯理的新化合物與吡喹酮結合使用，那麼將能更有效地防治血吸蟲病，並且可以防止抗葯性寄生蟲的產生。

⑥ 誰知道用於檢測血吸蟲的dipstick法又叫什麼方法

三．「試紙條」法（dipsticktest）

美國Illinois大學的YiLu研究組，研製出一種以金納米粒子為信號指示劑，使用像「試紙條」一樣方便的分析檢測方法[6]。該方法的主要原理是，分散的金納米粒子可以隨溶液的毛細作用在試紙上遷移，而聚集的金納米粒子由於質量、體積太大幾乎不能遷移（如圖2所示）。他們合成了適配子功能化的金納米粒子聚集體。適配子前面簡單介紹過，是一種能特異性結合目標分子的單鏈DNA片段。在這里適配子修飾的金納米粒子是通過與適配子互補的DNA鏈進行「耦聯」聚集在一起，被滴加在試紙條的底端。將試紙條底端浸泡於含有待檢測物分子的溶液中約20秒，此時試紙條底端充分吸收了溶液，溶液通過毛細作用沿試紙條遷移。溶液中待檢測物分子遇到金納米粒子聚集體，會與其表面修飾的適配子結合，而使互補的DNA鏈脫離，導致金納米粒子聚集體分散。此時，分散開的金納米粒子便可以隨溶液向試紙條另一端遷移。溶液中待檢測物分子越多，金納米粒子聚集體解離越多，能夠遷移到試紙條另一端的金納米粒子也就越多。如果溶液中沒有待檢測物分子，金納米粒子聚集體不會解離，也就不能隨著溶液遷移到試紙條另一端。

因此，根據遷移到試紙條另一端金納米粒子的量，可以定量檢測出待檢測物分子的濃度。只要預先生產出「試紙條」，使用時幾乎不用任何復雜操作，僅僅浸泡在溶液中幾十秒取出，在幾分鍾內即可得到檢測結果。而這種方法整合了「結合－分離－檢測」步驟（binding，separationanddetection），在白色試紙條上很容易辨別出信號，完全沒有背景干擾，靈敏度也較溶液相中比色法有了很大提高。這種利用金納米粒子作為信號指示劑的「試紙條」法可以擴展到很多物質的檢測，只要構建適當體系，使金納米粒子在檢測前後發生聚集和分散。