1. 快速分辨活細胞和死細胞的技巧是什麼謝謝
死活細胞的鑒定方法有很多種，常用的有染色法和儀器分析法。染色法是常用的細胞死活鑒定方法，簡便，易於操作。但是通過直接的形態觀察來鑒別細胞死活，實驗結果很容易受操作者的主觀因素的影響，存在一定的誤差，所以，在實際操作中也常採用一些儀器來進行精確的批量檢測。不同的死活細胞鑒定方法有各自不同具體的反應機理，但無論採用何種辦法，都是利用了死活細胞在生理機能和性質上的差異。常用的方法包括染色法和儀器分析法。死活細胞在生理機能和性質上的差異主要包括：死活細胞細胞膜通透性的差異：活細胞的細胞膜是一種選擇透性膜，對細胞起保護和屏障作用，只允許物質選擇性的通過；而細胞死亡之後，細胞膜受損，通透性增加。常用的以台盼藍鑒別細胞死活的方法就是利用了這一性質。台盼藍，又稱錐藍，是一種陰離子型染料，不能透過完整的細胞膜。所以經台盼藍染色後只能使死細胞著色，而活細胞不被著色。甲基藍有類似的染色機理。死活細胞在代謝上的差異：是採用美藍染料鑒定酵母細胞死活的依據。美藍是一種無毒染料，氧化型為藍色，還原型為無色。由於活細胞中新陳代謝的作用，使細胞內具有較強的還原能力，能使美藍從藍色的氧化性變為無色的還原型，因此美藍染色後活的酵母細胞無色；而死細胞或代謝緩慢的老細胞，則因它們的無還原能力或還原能力極弱，使美藍處於氧化態，從而被染成藍色或淡藍色。中性紅是一種低毒性染料，為常用的活體染料之一，可以使活細胞液泡著紅色，而細胞質和細胞核不被著色；死細胞的液泡不被著色或淺染，染料彌散於整個細胞中，細胞核和細胞質被染成紅色。中性紅是一種弱鹼性 pH 指示劑，變色范圍 pH6.4～8.0 之間（由紅變黃）。在中性或微鹼性環境中，植物的活細胞能大量吸收中性紅並向液泡中排泌，由於液泡在一般情況下呈酸性反應，因此，進入液泡的中性紅便解離出大量陽離子而呈現櫻桃紅色，在這種情況下，原生質和細胞壁一般不著色；死細胞由於原生質變性凝固，細胞液不能維持在液泡內，因此，用中性紅染色後，不產生液泡著色現象，相反，中性紅的陽離子，卻與帶有一定負電荷的原生質及細胞核結合，而使原生質與細胞核染色。
用PI（碘化丙啶）染一下，然後用熒光顯微鏡檢測（UV通道），如果細胞被PI染上，則說明細胞膜不完整，原理是PI是一種核酸結合染料，在UV激發下發射紅色熒光，PI不能透過正常的完整細胞膜，當細胞膜破損時，PI進入胞漿繼而與核DNA結合，繼而可以被UV激發被檢測到，所以PI是一種快速有效檢測細胞膜完整性的方法
3. 請教檢測細胞膜完整性的方法
流式分選細胞前標本的處理以及注意事項
流式檢測的是單個細胞，所以你的樣本要是單個細胞懸液。如果是來源於組織或者貼壁培養的，需要注意在分離細胞時避免破壞細胞。保持細胞膜表面的完整性。不要過度消化。
還有你處理的細胞要保持你所需要檢測的本來面目。比如檢測凋亡，貼壁細胞不宜用annexin方法，因為會導致大量的假陽性。還有，死細胞會非特異性吸附抗體，導致假陽性也要盡量減少死細胞，或者使用死細胞染料以排除在分析之外。