『壹』 常見的色譜分離方法有哪些
常用的蛋白質純化方法有離子交換色譜、親和色譜、電泳、疏水色譜等等 離子交換色譜:蛋白質和氨基酸一樣會兩性解離,所帶電荷決定於溶液pH。pH小於pI時蛋白質帶正電,pH大於pI時蛋白質帶負電。不同蛋白質等電點的蛋白質在同一個溶液中,表面電荷情況不同。離子交換就是利用不同蛋白質在同一溶液中表面電荷的差異來實現分離的。 親和色譜:生物大分子有一個特性,某些分子或基因對它們有特異性很強的吸附作用。如鎳柱中Ni可以與His標簽的蛋白結合,這種只針對一種或一類物質的吸附就是親和色譜的原理。 電泳:SDS-聚丙烯醯胺凝膠電泳,SDS能斷裂分子內和分子間氫鍵,破壞蛋白質的二級和三級結構,強還原劑能使半胱氨酸之間的二硫鍵斷裂,蛋白質在一定濃度的含有強還原劑的SDS溶液中, 與SDS分子按比例結合,形成帶負電荷的SDS-蛋白質復合物,這種復合物由於結合大量的SDS,使蛋白質喪失了原有的電荷狀態形成僅保持原有分子大小為特徵的負離子團塊,從而降低或消除了各種蛋白質分子之間天然的電荷差異,由於SDS與蛋白質的結合是按重量成比例的,因此在進行電泳時,蛋白質分子的遷移速度取決於分子大小。 疏水色譜:疏水色譜基於蛋白質表面的疏水區與介質疏水配體間的相互作用...
『貳』 什麼是色譜分析法色譜分離的原理是什麼
色譜分析法
chromatography
基於 混合 物 各組 分在體系中 兩相 的物 理化學性能差異(如吸附、分配差異等)而進行分離和分析的方法。國際公認俄國M.C.茨維特為色譜法的創始人。
色譜法體系中的兩相作相對運動時,通常其中一個相是固定不動的 ,稱為固定相 ;另一相是移動的 , 稱為流動相。在色譜分析過程中,物質的遷移速度取決於它們與固定相和流動相的相對作用力。溶質和兩相的吸引力是分子間的作用力,包括色散力、誘導效應、場間效應、氫鍵力和路易斯酸鹼相互作用。對於離子,還有離子間的靜電吸引力。被較強吸引在固定相上的溶質相對滯後於較強地吸引在流動相中的溶質,隨著移動的反復進行與多次分配,使混合物中的各組分得到分離。
色譜分析法的分類比較復雜。根據流動相和固定相的不同,色譜法分為氣相色譜法和液相色譜法。①氣相色譜法的流動相是氣體 ,又可分為 : 氣固色譜法 ,其流動相是氣體,固定相為固體;氣液色譜法,其流動相是氣體,固定相是塗在惰性固體上的液體。②液相色譜法的流動相是液體,又可分為?液固色譜法,其流動相是液體,固定相是固體;②液液色譜法,其流動相和固定相均是液體。按吸附劑及其使用形式可分為柱色譜、紙色譜和薄層色譜。按吸附力可分為吸附色譜、離子交換色譜、分配色譜和凝膠滲透色譜。按色譜操作終止的方法可分為展開色譜和洗脫色譜。按進樣方法可分為區帶色譜、迎頭色譜和頂替色譜。
經色譜分離出的各組分,與已知標准樣品對照進行定性分析。現代化的色譜-質譜聯用或色譜-光譜聯用儀器,配備有豐富的譜圖庫和微處理機。色譜柱流出的組分直接送入質譜和光譜儀進行定性鑒定和數據的定量處理。開發智能化色譜分析是發展的主要方向。
色譜法的特點是?①分離效率高。可分離性質十分相近的物質,可將含有上百種組分的復雜混合物進行分離。②分離速度快。幾分鍾到幾十分鍾就能完成一次復雜物質的分離操作。③靈敏度高。能檢測含量在10-12克以下的物質。④可進行大規模的純物質制備。
色譜法在化工、石油、生物化學、醫葯衛生、環境保護、食品檢驗、法醫檢驗、農業等各個領域都有廣泛的應用。在各種色譜法中,以氣液色譜法和液固色譜法應用最廣。氣相色譜法分離中、小分子化合物比較理想。中等大小的分子可用液液色譜和液固色譜分離。離子交換色譜一般用於有離子基團的物質。分子尺寸再大時,用凝膠滲透色譜分離。薄層色譜和紙色譜法的分析速度快、方便、成本低,柱色譜比薄層色譜和紙色譜具有更高的分辨能力。
『叄』 11種化學物質分離方法
沒有11種分離方法,大多數都是在萃取、膜分離、過濾、層析、鹽析等分離方法的分支。
1、萃取
萃取,又稱溶劑萃取或液液萃取,亦稱抽提,是利用系統中組分在溶劑中有不同的溶解度來分離混合物的單元操作。即,是利用物質在兩種互不相溶(或微溶)的溶劑中溶解度或分配系數的不同,使溶質物質從一種溶劑內轉移到另外一種溶劑中的方法。
萃取是有機化學實驗室中用來提純和純化化合物的手段之一。通過萃取,能從固體或液體混合物中提取出所需要的物質。
2、膜分離方法
一種利用薄膜的半滲透性而分離溶液混合物的化學分離方法,能從氣態或液態混合物中分離出某些組分。
所用的膜既可以是具有一定規格的微孔,有如分子篩,讓小分子通過微孔,而大分子則截流,從而使混合物得以分離;也可以是無微孔的高分子膜,混合物中的一些組分首先溶解在膜表面,然後擴散通過膜層,最後在另一側蒸發,從而達到分離的目的。
3、過濾
在推動力或者其他外力作用下懸浮液(或含固體顆粒發熱氣體)中的液體(或氣體)透過介質,固體顆粒及其他物質被過濾介質截留,從而使固體及其他物質與液體(或氣體)分離的操作。
4、層析
利用各組分物理性質的不同,將多組分混合物進行分離及測定的方法。有吸附層析、分配層析兩種。一般用於有機化合物、金屬離子、氨基酸等的分析。層析利用物質在固定相與流動相之間不同的分配比例,達到分離目的的技術。
層析對生物大分子如蛋白質和核酸等復雜的有機物的混合物的分離分析有極高的分辨力。
5、鹽析
向某些蛋白質溶液中加入某些無機鹽溶液後,可以降低蛋白質的溶解度,使蛋白質凝聚而從溶液中析出,這種作用叫作鹽析,是物理變化,可復原。
向某些蛋白質溶液中加入某些重金屬鹽,可以使蛋白質性質發生改變而凝聚,進而從溶液中析出,這種作用叫作變性,性質改變,是化學反應,無法復原。
利用高濃度中性鹽使蛋白質發生沉澱;蛋白質的溶解度(S)不同,用於沉澱的鹽濃度不同。
『肆』 分離分析化學 用一種或一種以上的分離分析方法設計一種樣品的分離分析方案
固相萃取法分離:採用選擇性吸附、選擇性洗脫的方式對樣品進行富集、分離、凈化,是一種包括液相和固相的物理萃取過程;也可以將其近似地看作一種簡單的色譜過程。
液液萃取法分離:根據相似相溶原理,將被測物從另一個液相中提取出來,比如用正己烷從水相中提取揮發性有機物。
『伍』 分析化學中常用的分離和富集方法有哪些
通常分離和富集方法在分析化學中是共生的,如果要分開的話,就會有重復。
常用的經典分離方法有:沉澱分離、溶劑萃取分離、離子交換分離、層析分離、揮發分離、蒸餾分離等,新型分離方法有固相萃取分離、膜分離等。
常見的富集方法有:沉澱富集、液液萃取富集、交換富集、濃縮蒸發富集等,新型的富集方法有固相萃取富集、固相微萃取富集、分散萃取富集等。
『陸』 分析化學中常用的分離方法,除儀器分離法外,還有哪些這些方法本質都是%
萃取是根據液體不同的溶劑中溶解度不同,紙層析法(虹吸)也是根據物質在同一溶劑中溶劑度不同,流動的快慢分離,還有就是傾析法,適用於大塊物質不溶於某溶劑.
『柒』 什麼是體內葯物分析中多組分混合物最重要的分離分析方法
什麼是體內葯物分析中多組分混合物最重要的分離分析方法
體內葯物分析是由葯物分析學派生出來的一門學科。它是通過分析人或動物體液及各組織器官中葯物及其代謝物濃度,了解葯物在體內數量和質量的變化,獲得葯物代謝動力學的各種參數和轉變,以及代謝的方式、途徑等信息,從而有助於葯物的研究、臨床合理應用等。
『捌』 基因的分離定律的分析方法
通常採用「棋盤法」。例如讓基因型都為Dd的兩顆豌豆植株親本雜交,那麼這兩個親本產生的後代出現的基因型的概率分布如下圖所示:
『玖』 氨基酸的分離分析方法常有有哪些
如果是兩個氨基酸的保留時間距離太近,那麼只能調整液相條件了。
比如調整流動相比例,或者是梯度比例,把兩個氨基酸拉開。
也可以適當調整衍生程序。
雖然衍生程序不會對氨基酸的保留時間有影響,不過會對它的信號產生影響。
如果這兩種氨基酸的峰高有所下降,或許分離度也可以達到要求。
還有就是注意峰型。
衍生化程序很容易損壞色譜柱,超高效色譜的壓力又高,色譜柱很容易損毀。
如果峰型不好,建議用純乙腈低流速反沖色譜柱。
或者是更換新色譜柱。
『拾』 化學中分析和分離兩個概念的區別與聯系
分離是利用混合物中各組分在物理性質或化學性質上的差異,通過適當的裝置或方法,使各組分分配至不同的空間區域或在不同的時間依次分配至同一空間區域的過程。分析化學是開發分析物質成分、結構的方法,使化學成分得以定性和定量,化學結構得以確定。
區別:
1、目的不同
化學分析是確定物質的結構,分離是從物質中分離相關物質。
2、特點不同
化學分析是確定成分的含量,分離是將成分分離,不用確定含量。
3、方法不同
分析法常使用如電泳、色譜法、場流分級等方法。分離:鹽析、萃取分離法(包括溶劑萃取、膠團萃取、雙水相萃取。