❶ 薄層色譜法的原理是什麼。是否和紙層析法的原理相同。急急急~~!
不相同,薄層色譜法是一種吸附薄層色譜分離法,它利用各成分對同一吸附劑吸附能力不同,使在流動相(溶劑)流過固定相(吸附劑)的過程中,連續的產生吸附、解吸附、再吸附、再解吸附,從而達到各成分的互相分離的目的。
紙層析法又稱紙色譜法,是用紙作為載體的一種色譜法,其應用的原理是相似相溶原理,是通過分裂系的在同一介質中分散速度不同來分析的。
(1)薄層色譜是不是儀器分析方法擴展閱讀
薄層色譜法(TLC)薄層色譜具有選用范圍廣,重現性好等優點,常用於中葯各種成分的鑒別。用固定波長對薄層展開的各斑點作薄層掃描圖譜比目測的層析圖譜更為客觀准確。
因而具有更好的指紋鑒別意義。但由於受薄層板的質量和開放式層析系統等外界因素的影響,易引起一定的實驗誤差。薄層色譜法與紙層析和紙層析比較TLC快速、分離效率高、靈敏度高、顯色方法多樣、圖像易保存。
❷ tlc薄層色譜原理
第一節 基本原理
薄層色譜法是色譜法中應用最廣泛的方法之一,是將細粉狀的吸附劑或載體塗布於玻璃板、塑料板或鋁箔上,形成一均勻薄層,經點樣、展開與顯色後,與適宜的對照物質在同一薄層板上所得的色譜斑點做比較,用於進行定性鑒別或含量測定的方法。
它具有以下特點:
①分離能力強,斑點集中;
②靈敏度高,數微克甚至數十納克的物質也能檢出;
③展開時間短,一般只需十至數十分鍾,一次可以同時展開多個試樣;
④試樣預處理簡單,對被分離物質性質沒有限制;
⑤上樣量比較大 ,可點成條狀;
⑥所用儀器簡單,操作方便等。
雖然薄層色譜法從儀器自動化程度、解析度、重現性方面不如氣相色譜法和高效液相法,但由於薄層色譜法具有上述特點,特別是儀器簡單,操作方便,用途廣泛,因此在實際工作中仍是一種極有用的分離分析技術,已廣泛應用於醫葯學各研究領域中,也適用於工廠、葯房等基層實驗室。
按分離效能,薄層色譜法可分為經典薄層色譜法和高效薄層色譜法;
按分離機制,薄層色譜法可分為吸附、分配、分子排阻色譜法和膠束薄層法。
薄層色譜法一般用於定性分析,也能用於定量分析和樣品的制備。
一、分離原理
在吸附薄層色譜法中,固定相主要是吸附劑,如硅膠、氧化鋁等。其色譜過程是將混合組分的試樣點在薄層板的一端,將薄板豎直放入一個盛有少量展開劑的封閉容器中。展開劑接觸到吸附劑塗層,流動相藉助毛細作用不斷向上移動,使得組分與流動相和固定相的吸附平衡被破壞,即吸附的組分不斷地被流動相解吸下來,解吸下來的組分立即溶解於流動相中並隨之向上移動,當遇到新的固定相表面時,又與流動相展開吸附競爭並再次建立瞬間平衡。由於吸附劑對各組分具有不同的吸附能力,展開劑對各組分的溶解、解吸能力也不相同。因此在不斷展開的過程中,各組分在兩相吸附-解吸過程中行進速度不同,而最終被分離開來。吸附色譜對影響吸附能的構型差別很敏感,因此很適合用於異構體的分離。
❸ 薄層色譜的原理
薄層色譜法的原理:薄層色譜法利用各成分對同一吸附劑吸附能力不同,使在流動相(溶劑)流過固定相(吸附劑)的過程中,連續的產生吸附、解吸附、再吸附、再解吸附,從而達到各成分的互相分離的目的。
薄層色譜法(TLC)系將適宜的固定相塗布於玻璃板、塑料或鋁基片上,成一均勻薄層。待點樣、展開後。
根據比移值(Rf)與適宜的對照物按同法所得的色譜圖的比移值(Rf)作對比,用以進行葯品的鑒別、雜質檢查或含量測定的方法。
薄層色譜法是快速分離和定性分析少量物質的一種很重要的實驗技術,也用於跟蹤反應進程。
❹ 薄層色譜法的用途,要詳細哦
薄層色譜是化學的一種分離和分析方法
⑴定性鑒別 化學上經典的定性鑒別,例如經典的有機定性分析或經典的毒物分析,是利用各種化合物的溶解度不同和所含功能基的不同,用溶劑提取或用試劑處理,把它們分組或分為單一組分,然後作試管反應或點滴反應(顏色反應),或根據它們衍生物的理化性質進行定性鑒別.這種方法的缺點是樣品用量叫大,分離手續麻煩,分析時間較長(幾小時或幾時個小時),並可能有雜質干擾.,現採用合適的展開劑和現色劑在薄層上作為分離和鑒別,根據樣品中組分的 值和現色情況,同時用標准作對照,一般即能卻證為某一化合物.用薄層色譜法定性,樣品用量小,分離方便,分離時間短(幾分鍾或幾時分鍾),檢出靈敏度高. 例如,再毒物分析中檢驗是否巴比妥安眠葯中毒時,取胃內容物或尿樣品,先用鹽酸酸化後,用乙醚提取,乙醚提取液脫水,過濾蒸干,溶於無水乙醇中,點在硅膠版上用氯仿 無水乙醇(36 1)展開,用硫酸汞二苯偶碳醯肼試劑顯色,並用標准品對照,意見出巴比妥,苯巴比妥,戊巴比妥和異巴比妥。鑒別速度快(1小時),這對於搶救中毒患者和及時為醫生提供治療方案極為重要
(2)葯品的質量控制和雜質檢查 葯品的純度,通常用熔點,吸光值等物理常數作為鑒定的指標。但是薄層檢查也是葯品質量控制和雜質檢查的一種有效方法,有時甚至比一般方法更有效。一些國家的葯典和葯品規范已經採用。方法是把一定量得樣品 溶液(例如,相當於 樣品)電在薄層上,用展開劑展開並顯色,同時用純品作對照,如果樣品只顯示出純品 值一致的一個斑點,則表示含有雜質.進一步可用薄層作雜質的限量檢查.再上例中,如果已經知道顯色劑對雜質的最小檢出量為 ,在薄層上點樣 後不顯出雜質斑點,則雜質的量低於 ,或低於 ,也就是樣品的純度不低於 . 例如鎦體葯物的合成和精緻工作中,常含結構類似的雜質,即按上述方法控制其質量和雜質的限量.
⑶化學反應進程的控制,反應副產物的檢出以及中間體的分析, 在化學反應進行到一定時間或反應終了時,把反應液取出作薄層分析,可以知道還剩下多少原料葯未起作用.方法是把反應液或其有機溶劑提取液點在薄層上,同時點原料作參比對照,看薄層上是否出現原料葯斑點.還可以用薄層檢查反應副產物.如果化學反應分步進行,則每一步反應的中間體的質量和產率也都可用薄層進行定性和定量. 例如在合成強力黴素的過程中,需要中間地甲烯土黴素氫化物為脫氧土黴素.氫化反應是否完全,可用薄層檢查,如果反應完全,則反應釜中幾乎沒有或只有極少量的甲烯土黴素存在,薄層板上只顯示出一個脫氧土黴素,如果薄層板上有上下二個明顯的斑點,表示反應還沒有完全,尚需繼續還原,直到只顯示出脫氧土黴素的一個斑點為止才能出料.
(4) 柱色譜法分離條件的探索 柱色普法的實驗條件,例如選用什麼吸附劑和洗脫劑較好各個組分按什麼順序從柱中洗脫出來,每一分洗脫液中是含單一組分或就含幾種沒有分開的組分等,都可以在薄層上進行探索和檢驗。薄層上所有的展開劑雖不完全照搬柱色普法上,但仍有參考價值。
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❺ 薄層色譜法起源及使用是什麼
薄層色譜法起源於60年代,至今,它已成為一般實驗室必不可少的分離分析手段,常常被首選成不可替代的方法。
薄層色譜又叫薄板層析,是色譜法中的一種,是快速分離和定性分析少量物質的一種很重要的實驗技術,屬固—液吸附色譜,它兼備了柱色譜和紙色譜的優點,一方面適用於少量樣品(幾到幾微克,甚至0.01微克)的分離;另一方面在製作薄層板時,把吸附層加厚加大,因此,又可用來精製樣品,此法特別適用於揮發性較小或較高溫度易發生變化而不能用氣相色譜分析的質。此外,薄層色譜法還可用來跟蹤有機反應及進行柱色譜之前的一種「預試」。
薄層色譜法,系將適宜的固定相塗布於玻璃板、塑料或鋁基片上,成一均勻薄層。待點樣、展開後,與適宜的對照物按同法所得的色譜圖作對比,用以進行葯品的鑒別、雜質檢查或含量測定的方法。
玻板 除另有規定外,用5cm×20cm,10cm×20cm或20cm×20cm的規格,要求光滑、平整,洗凈後不附水珠,晾乾。
固定相或載體 最常用的有硅膠G、硅膠GF<[254]> 、硅膠H、 硅膠HF<[254]>,其次有硅藻土、硅藻土G、氧化鋁、氧化鋁G、微晶纖維素、 微晶纖維素F<[254]>等。 其顆粒大小,一般要求直徑為10~40μm。薄層塗布,一般可分無粘合劑和含粘合劑兩種;前者系將固定相直接塗布於玻璃板上, 後者系在固定相中加入一定量的粘合劑,一般常用10~15%煅石膏(CaSO4.2H2O在140℃烘4小時),混勻後加水適量使用,或用羧甲基纖維素鈉水溶液(0.5~0.7%)適量調成糊狀,均勻塗布於玻璃板上。也有含一定固定相或緩沖液的薄層。
塗布器 應能使固定相或載體在玻璃板上塗成一層符合厚度要求的均勻薄層。
點樣器 同紙色譜法項下。
展開室 應使用適合薄層板大小的玻璃制薄層色譜展開缸,並有嚴密的蓋子,除另有規定外,底部應平整光滑,應便於觀察。
薄層板制備 除另有規定外,將1份固定相和3份水在研缽中向一方向研磨混合,去除表面的氣泡後,倒入塗布器中,在玻板上平穩地移動塗布器進行塗布(厚度為0.2~0.3mm),取下塗好薄層的玻板,置水平台上於室溫下晾乾,後在110℃烘30分鍾,即置有乾燥劑的乾燥箱中備用。使用前檢查其均勻度(可通過透射光和反射光檢視)。
點樣 除另有規定外,用點樣器點樣於薄層板上,一般為圓點,點樣基線距底邊2.0cm,樣點直徑及點間距離同紙色譜法,點間距離可視斑點擴散情況以不影響檢出為宜。點樣時必須注意勿損傷薄層表面。
展開 展開室如需預先用展開劑飽和,可在室中加入足夠量的展開劑,並在壁上貼二條與室一樣高、寬的濾紙條,一端浸入展開劑中,密封室頂的蓋,使系統平衡或按正文規定操作。 將點好樣品的薄層板放入展開室的展開劑中,浸入展開劑的深度為距薄層板底邊0.5~1.0cm(切勿將樣點浸入展開劑中),密封室蓋,待展開至規定距離(一般為10~15cm),取出薄層板,晾乾,按各品種項下的規定檢測。
如需用薄層掃描儀對色譜斑點作掃描檢出,或直接在薄層上對色譜斑點作掃描定量,則可用薄層掃描法。 薄層掃描的方法,除另有規定外,可根據各種薄層掃描儀的結構特點及使用說明,結合具體情況,選擇吸收法或熒光法,用雙波長或單波長掃描。由於影響薄層掃描結果的因素很多,故應在保證供試品的斑點在一定濃度范圍內呈線性的情況下,將供試品與對照品在同一塊薄層上展開後掃描,進行比較並計算定量,以減少誤差。各種供試品,只有得到分離度和重現性好的薄層色譜,才能獲得滿意的結果。希望能幫到您!
❻ 儀器分析的分析方法
發射光譜法:依據物質被激發發光而形成的光譜來分析其化學成分。使用不同的激發源而有不同名稱的光譜法。如用高頻電感耦合等離子體(ICP)作激發源,稱高頻電感耦合等離子體發射光譜法;如用激光作光源,稱激光探針顯微分析。
原子吸收光譜法:基於待測元素的特徵光譜,被蒸氣中待測元素的氣態原子所吸收,而測量譜線強度減弱程度(吸收度)求出樣品中待測元素含量。應用較廣的有火焰原子吸收法和非火焰原子吸收法,後者的靈敏度較前者高4~5個數量級。
原子熒光分光光度法:通過測量待測元素的原子蒸氣在輻射能激發下所產生的熒光發射強度來測定待測元素。
紅外吸收光譜法:主要用於鑒定有機化合物的組成,確定化學基團及定量分析,已用於無機化合物。
紫外可見分光光度法:適用於低含量組分測定,還可以進行多組分混合物的分析。利用催化反應可大大提高該法的靈敏度。
熒光分光光度法:對某些元素具有較高的靈敏度和選擇性。
紅外傅里葉變換光譜法:光信號以干涉圖形式輸入計算機進行傅里葉變換的數學處理,具有信噪比大、靈敏度高等特點。
核磁共振波譜法:利用有機分子的質子共振鑒定有機化合物和多組分混合物的組分以及無機成分的分子結構分析。
電子自旋共振法:以磁場對離子、分子或原子所含未成對電子的作用所引起的磁能級分裂為基礎的分析方法。
拉曼光譜法:可測定分子結構,使用可調激光器的曼光譜儀用於微量分析,也可用於無機物和單晶的結構分析。
射線熒光光譜法:具有譜線簡單,基體影響小,選擇性高,測定范圍寬等優點。可對原子序數大於9的所有元素作無損分析。電子探針微區分析可分析原子序數大於4的所有元素,應用於微粒礦物岩石分析,金屬材料中元素的分布,各種物相中元素的分配。
發射光譜法
電子能譜法:是測定電子結合能的一種方法,它是研究表面化學的有力工具,並可用於除H和He以外任何元素的定性分析。
俄歇電子能譜法:應用於分析無機及有機試樣的組成,價態及結構,一般為無損分析。放射化學分析,有中子活化法、光子活化法、帶電粒子活化分析法等。
穆斯堡爾譜法:所探測的對象是單個的原子核,可用於研究材料中的雜質原子和空位對材料性能的影響。質譜分析,具有高鑒別及檢測能力,可以分析所有元素。火花源質譜適於測定痕量元素。離子探針微區分析,微區直徑約1~5□m,深度約幾十埃,可進行掃描分析,幾乎可分析所有的元素。
極譜法:是利用陰極(或陽極)極化變化過程作為依據的一種方法。其特點是靈敏度高、試液用量少,可測定濃度極小的物質。
離子選擇性電極法:是一種使用電位法來測量溶液中某一離子活度的指示電極,能快速、連續、無損地對溶液中的某些離子活度進行選擇性地檢測。
庫侖分析法,其中有控制電位庫侖分析法和恆電流庫侖滴定法。
色譜法:是一種分離分析法,利用混合物中各組分在不同的兩相中溶解、解析、吸附、脫附或其他親和作用性能的差異,而互相分離。按流動相的物態,可分為氣相色譜法和液相色譜法,按固定相使用形式,可分為柱色譜法、紙色譜法和薄層色譜法。
❼ 儀器分析方法的分類
儀器分析法是使用較特殊儀器的分析方法,是以物質的物理或物理化學性質為基礎的分析方法。根據物質的某種物理性質,如相對密度、相變溫度、折射率、旋光度及光譜特徵等,不經化學反應,直接進行定性、定量、結構和形態分析的方法,稱為物理分析法,如光譜分析法等。根據物質在化學變化中的某種物理性質,進行定性或定量分析的方法稱為物理化學分析法,如電位分析法等。儀器分析法具有靈敏、快速、准確的特點,發展快,應用廣。主要包括電化學分析法、光學分析法、質譜分析法、色譜分析法、放射化學分析法等。法醫毒物分析工作中常用的儀器分析法有光譜分析、色譜分析和色/質聯用分析,後兩者有很好的分離和定性定量分析效能。
❽ HPLC、UV、GC、TLC是什麼檢測方法
TLC:薄層色譜法.系將適宜的固定相塗布於玻璃板、塑料或鋁基片上,成一均勻薄層。待點樣、展開後,根據比移值(Rf)與適宜的對照物按同法所得的色譜圖的比移值(Rf)作對比,用以進行葯品的鑒別、雜質檢查或含量測定的方法。薄層色譜法是快速分離和定性分析少量物質的一種很重要的實驗技術,也用於跟蹤反應進程。
PC:紙色譜法.是一種可以測試物質的純度與分離混合物的方法,因為它可以快速的完成分析,而且對材料的限制很少,所以是一種極方便而且有用的分析方法。紙色譜法用的分離原則跟薄層色譜法一樣,物質分布在一個固定相與流動相。固定相通常是濾紙,流動相會帶著物質在上面流動,這個裝置將會根據混合物中不同物質對固定相的附著力和對流動相的溶解度而分離出來。分析顏料時,如果顏料中含有不只一種物質,不同顏色的物質會就根據溶劑和不同溶質的極性分開,這是因為不同的分子結構極有可能有不同的極性。這些不同的極性造就對溶劑的不同溶解度,使各種溶質會在溶劑擴散的不同位置沉澱在固定相上以斑點呈現,就可以根據固定相上的斑位置及大小作分析。
HPLC:高效液相色譜法.是色譜法的一個重要分支,以液體為流動相,採用高壓輸液系統,將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動相泵入裝有固定相的色譜柱,在柱內各成分被分離後,進入檢測器進行檢測,從而實現對試樣的分析。
GC:氣相色譜.可分為氣固色譜和氣液色譜。氣固色譜指流動相是氣體,固定相是固體物質的色譜分離方法。例如活性炭、硅膠等作固定相;氣液色譜指流動相是氣體,固定相是液體的色譜分離方法。例如在惰性材料硅藻土塗上一層角鯊烷,可以分離、測定純乙烯中的微量甲烷、乙炔、丙烯、丙烷等雜質。
❾ 薄層色譜法的原理是什麼
薄層色譜法是一種吸附薄層色譜分離法,它利用各成分對同一吸附劑吸附能力不同,使在流動相(溶劑)流過固定相(吸附劑)的過程中,連續的產生吸附、解吸附、再吸附、再解吸附,從而達到各成分的互相分離的目的。
薄層層析可根據作為固定相的支持物不同,分為薄層吸附層析(吸附劑)、薄層分配層析(纖維素)、薄層離子交換層析(離子交換劑)、薄層凝膠層析(分子篩凝膠)等。一般實驗中應用較多的是以吸附劑為固定相的薄層吸附層析。
吸附是表面的一個重要性質。任何兩個相都可以形成表面,吸附就是其中一個相的物質或溶解於其中的溶質在此表面上的密集現象。在固體與氣體之間、固體與液體之間、吸附液體與氣體之間的表面上,都可能發生吸附現象。
薄層色譜法的應用:
1、葯物和葯物代謝
薄層色譜法在合成葯物和天然葯物中的應用很廣。有些文獻和內容偏重於合成葯物、化合物及其代謝產物,有文獻為在中草葯分析中的應用。
每一類葯物,例如磺胺、巴比妥、苯駢噻嗪、甾體激素、抗菌素、生物鹼、強心甙、黃酮、揮發油和萜等,都包括幾種或十幾種化學結構和性質非常相似的化合物,可以在上述文獻中找出一、二種全盤的展開劑,一次即能把每一類的多種化合物很好地分開。葯物代謝產物的樣品一般先經預處理後用薄層分析,應用也很廣,但有時因含量甚微,不用採用氣相和高效液相色譜法靈敏。
2、化學和化工
化工和化學方面的有機原料和產品都可用薄層色譜法分析。例如含各種功能基的有機物,石油產品,塑料單體,橡膠裂解產物,油漆原料,合成洗滌劑等,內容非常廣泛。
3、醫學和臨床
薄層色譜法的應用還滲透到醫學和臨床中去,例如它是一種快速的診斷方法可用於妊娠的早期診斷。方法是基於在孕婦的尿中能檢出比未媳婦婦女的尿中含更多的孕二醇,把兩者的尿提取後點在薄層上比較,即可作出判斷。這一方法可不用動物而在2~3小時內化驗出結果。
4、毒物分析和法醫化學
如前所述,經典的毒物分析有許多缺點,毒物分析和法醫化學採用薄層色譜法等新的手段,對麻醉葯、巴比妥、印度大麻、鴉片生物鹼等均可分析。
❿ 什麼是薄層色譜法
薄層色譜TLC又叫薄板層析,是色譜法中的一種,是快速分離和定性分析少量物質的一種很重要的實驗技術,屬固—液吸附色譜。
原理:利用待測物質在固定相(一般為硅膠)和流動相(展開劑)之間的吸附作用,將待測物與其他物質分離開。
方法:是將適宜的固定相塗布於玻璃板、塑料或鋁基片上,形成均勻的薄層。待點樣、展開後與適宜的對照物按同法所得的色譜圖做對比,通過比較Rf(比移值)用以進行化合物的鑒別、雜質檢查或含量測定。