Ⅰ 什麼叫標准曲線,繪制標准曲線有何實用意義
標准曲線是標准物質的物理/化學屬性跟儀器響應之間的函數關系。建立標准曲線可以推導待測物質的理化屬性。
在分析化學實驗中,常用標准曲線法進行定量分析,通常情況下的標准工作曲線是一條直線。
標准曲線的橫坐標(X)表示可以精確測量的變數(如標准溶液的濃度),稱為普通變數,縱坐標(Y)表示儀器的響應值(也稱測量值,如吸光度、電極電位等),稱為隨機變數。當X取值為X1, X2,…… Xn時,儀器測得的Y值分別為Y1, Y2, …… Yn。
將這些測量點Xi, Yi描繪在坐標系中,用直尺繪出一條表示X與Y之間的直線線性關系,這就是常用的標准曲線法。用作繪制標准曲線的標准物質,它的含量范圍應包括試祥中被測物質的含量,標准曲線不能任意延長。用作繪制標准曲線的繪圖紙
的橫坐標和縱坐標的標度以及實驗點的大小均不能太大或太小,應能近似地反映測量的精度。
從不確定度理論推算樣本的不確定度時,有二個重要的結論:一、標准曲線的重心點處,所查出來的樣品不確定度最小。二、標準的點數越多,樣品的不確定度越小。基於這兩個結論的標准曲線的做法應該是:在樣品濃度的附近盡量的多布標准點。
點做多做少,點分布如何,影響的是標准曲線所查出來的樣品的理化屬性的不確定度。好的測量應該是不確定度小的測量,這在判斷樣品的結果是否超標或符合限值的時候至關重要。
現有方法趨向於標准曲線適用於較寬的樣品濃度范圍。在較寬的濃度跨度和有限的標准點的情況下,均勻的分布濃度點是最佳選擇,這樣對該標准曲線覆蓋的濃度范圍內,對於所有的濃度所提供的信息量都是相同的。
奇數點的設置來源於已知信息,先確定濃度的范圍,在該濃度范圍先確定中間點,然後在中間點左右分布對稱的標准曲線點,所以出來的總是奇數個點。
Ⅱ 生化實驗:什麼叫標准曲線
標准曲線(英文為 standard curve)是指通過測定一系列已知組分的標准物質的某理化性質,而得到的性質的數值曲線。 標准曲線是標准物質的物理/化學屬性跟儀器響應之間的函數關系。建立標准曲線的目的是推導待測物質的理化屬性。 在分析化學實驗中,常用標准曲線法進行定量分析,通常情況下的標准工作曲線是一條直線。 與校正曲線不同,它是以標准溶液及介質組成的標准系列,標繪出來的曲線。校正曲線的標准系列的伴生組分必須與試樣相匹配,以便測量結果的准確。只有標准曲線與校正曲線相重合的條件下,才可以用標准曲線來代替校正曲線。
標准曲線的橫坐標(X)表示可以精確測量的變數(如標准溶液的濃度),稱為普通變數,縱坐標(Y)表示儀器的響應值(也稱測量值,如吸光度、電極電位等),稱為隨機變數。當X取值為X1, X2,…… Xn時,儀器測得的Y值分別為Y1, Y2, …… Yn。將這些測量點Xi, Yi描繪在坐標系中,用直尺繪出一條表示X與Y之間的直線線性關系,這就是常用的標准曲線法。用作繪制標准曲線的標准物質,它的含量范圍應包括試祥中被測物質的含量,標准曲線不能任意延長。用作繪制標准曲線的繪圖紙的橫坐標和縱坐標的標度以及實驗點的大小均不能太大或太小,應能近似地反映測量的精度。
標准曲線的實用性
這是做標准曲線的重要前提,這個問題實際很簡單,就是這樣一個問題:我的樣品的儀器響應能否用我們所建立的標准曲線來推導其理化屬性?答案建立在儀器響應的特異性和標准系列和樣品的匹配性上面。一方面我們總是力求儀器的響應對於標准和樣品是一視同仁;同時我們也要求我的樣本跟標准基體匹配。所以最好的標準是基體匹配標准,最好的標准曲線是工作曲線。這樣,我們也很好理解為什麼大多數分析要求標准曲線和樣品同批測定(除非經過實驗,標准曲線的變化不大),同樣的道理也可以理解為什麼我們在做大批量檢測的時候要插入QC檢驗樣本,以考察儀器的穩定性。即使在任何信息未知的情況下,我們還是要做我們的分析測試的(要不,我們都失業了),因為大家都是用同樣的方法做,要錯大家一起錯;同時也因為我們相信伴隨科學的進步,我們所測試的結果的准確性就越接近真理。
標准曲線的點的分布
從不確定度理論推算樣本的不確定度時,有二個重要的結論:一、標准曲線的重心點處,所查出來的樣品不確定度最小。二、標準的點數越多,樣品的不確定度越小。基於這兩個結論的標准曲線的做法應該是:在樣品濃度的附近盡量的多布標准點。點做多做少,點分布如何,影響的是標准曲線所查出來的樣品的理化屬性的不確定度。好的測量應該是不確定度小的測量,這在判斷樣品的結果是否超標或符合限值的時候至關重要。
編輯本段簡單的標准曲線——單點校正
對於分析成本高的測試,單點校正是不得以的選擇。現在應用最多的是色譜分析,很多國家標准或國際標准都採用單點校正,實際是建立在色譜分析的高選擇性上面:我們的空白一般都很小,我們的線性一般都很好。在有這么多驗前概率的支撐下,色譜分析中大量的單點校正不失為一個合理的選擇。但單點校正要丟失很多的信息量,這個信息量就是不確定度。
實際的標准曲線
現有方法趨向於標准曲線適用於較寬的樣品濃度范圍。在較寬的濃度跨度和有限的標准點的情況下,均勻的分布濃度點是最佳選擇,這樣對該標准曲線覆蓋的濃度范圍內,對於所有的濃度所提供的信息量都是相同的。奇數點的設置來源於我們的信息,我們總是先知道濃度的范圍,在該濃度范圍先確定中間點,然後在中間點左右分布對稱的標准曲線點,所以出來的總是奇數個點。正如前面強調的是,點多點少,最後影響的是標准曲線所查出樣品理化屬性的不確定度,到底多大的不確定度是符合要求呢,這就是你在判斷樣品的結果是否超標或符合限值的時候有重要意義了。
標准曲線的評價
一般認為標准曲線用相關系數來評價好壞,其實最科學的方法是檢驗直線方程剩餘殘差的隨機性,統計學上採用F檢驗。英國的RSC下AMC專委對此有專門的TN。
Ⅲ 光度分析的標准曲線,有幾種求法
顏色是由亮度和色度共同表示的,而色度則是不包括亮度在內的顏色的性質,它反映的是顏色的色調和飽和度。
色度是水質的外觀指標,水的的顏色分為表色和真色。真色是指去除懸浮物後水的顏色,沒有去除的水具有的顏色稱表色。對於清潔的或濁度很低的水,真色和表色相近,對於著色深的工業廢水和污水,真色和表色差別較大。而水的色度一般指真色,水的顏色常用以下方法測定:1.鉑鈷標准比色法(常用於天然水和飲用水,單位 度) 2.稀釋倍數法(常用於工業廢水,單位 倍)。
吸光度,absorbance,是指光線通過溶液或某一物質前的入射光強度 與該光線通過溶液或物質後的透射光強度比值的對數,影響它的因素有溶劑、濃度、溫度等等
吸光系數與入射光的波長以及被光通過的物質有關。只要光的波長被固定下來,同一種物質,吸光系數就不變。
當一束光通過一個吸光物質(通常為溶液)時,溶質吸收了光能,光的強度減弱。吸光度就是用來衡量光被吸收程度的一個物理量。
吸光度用A表示。
Ⅳ 氣相色譜如何繪制標准曲線
第四節 校準曲線
校準曲線包括標准曲線和工作曲線,前者用標准溶液系列直接測量,沒有經過預處理過程,這對於樣品往往造成較大誤差;而後者所使用的標准溶液經過了與樣品相同的消解、凈化、測量等全過程。
凡應用校準曲線的分析方法,都是在樣品測得信號值後,從校準曲線上查得其含量(或濃度)。因此,繪制准確的校準曲線,直接影響到樣品分析結果的准確與否。此外,校準曲線也確定了方法的測定范圍。
1.校準曲線的繪制
用一系列被測物標准溶液,按照標准方法規定的步驟,將被測物轉變為有色溶液。制備好的標准系列和空白,在方法選定的波長下,測定吸光度。已被測物濃度為橫坐標,吸光度為縱坐標,繪制校準曲線。
1)對標准系列,溶液以純溶劑為參比進行測量後,應先作空白校正,然後繪制標准曲線;
2)標准溶液一般可直接測定,但如試樣的預處理較復雜致使污染或損失不可忽略時,應和試樣同樣處理後再測定。
3)校準曲線的斜率常隨環境溫度、試劑批號和貯存時間等實驗條件的改變而變動。因此,在測定試樣的同時,繪制校準曲線最為理想,否則應在測定試樣的同時,平行測定零濃度和中等濃度標准溶液各兩份,取均值相減後與原校準曲線上的相應點核對,其相對差值根據方法精密度不得大於5%~10%,否則應重新繪制校準曲線。
2. 校準曲線的檢驗
1)線性檢驗: 即檢驗校準曲線的精密度。對於以4~6個濃度單位所獲得的測量信號值繪制的校準曲線,分光光度法一般要求其相關系數 | r | ≥0.9990,否則應找出原因並加以糾正,重新繪制合格的校準曲線。
2)截距檢驗:即檢驗校準曲線的准確度,在線性檢驗合格的基礎上,對其進行線性回歸,得出回歸方程 y= a+bx ,然後將所得截距a與0作t檢驗,當取95%置信水平,經檢驗無顯著性差異時,a可做0處理,方程簡化為y= bx,移項得x=y/b。在線性范圍內,可代替查閱校準曲線,直接將樣品測量信號值經空白校正後,計算出試樣濃度。
當a與0有顯著性差異時,表示校準曲線的回歸方程計算結果准確度不高,應找出原因予以校正後,重新繪制校準曲線並經線性檢驗合格。在計算回歸方程,經截距檢驗合格後投入使用。
回歸方程如不經上述檢驗和處理,就直接投入使用,必將給測定結果引入差值相當於解決a的系統誤差。
3) 斜率檢驗: 即檢驗分析方法的靈敏度,方法靈敏度是隨實驗條件的變化而改變的。在完全相同的分析條件下,僅由於操作中的隨機誤差導致的斜率變化不應超出一定的允許范圍,此范圍因分析方法的精度不同而異。例如,一般而言,分子吸收分光光度法要求其相對差值小於5%,而原子吸收分光光度法則要求其相對差值小於10%等等。
3. 校準曲線的控制
被測物轉變為有色溶液的反應稱為顯色反應或發色反應。顯色反應的介質PH條件、顯色劑用量、顯色反應的時間和溫度、為消除共存物干擾而加入的掩蔽劑、甚至加試劑的順序,都要按照方法步驟的要求執行。有時,標准系列雖然不像實際試樣那樣組成復雜,但仍要求與試樣進行同樣的處理步驟,以便控制校準曲線上的數據點的空白、回收率等因素。
建立校準曲線時,測量吸光度的參比有兩種選擇。
第一種方法用純溶劑作參比,兩個比色皿都放溶劑時,「樣品比色皿」 的吸光度測定值為比色皿成對性校正值,此後所有樣品吸光度測定值都須扣除此值,進行校正。然後,以純溶劑為參比,測定空白及標准系列的吸光度,繪制校準曲線。
第二種方法直接用空白為參比。當兩個比色皿都放空白時,測定比色皿成對性校正值,然後測定標准系列的吸光度,繪制校準曲線。兩種方法得到的兩條校準曲線互相平行,但第一種方法可測定空白的水平,後一種方法不能測定空白,理論上校準曲線通過原點。若空白為零,兩條校準曲線重合。無論用什麼作參比,實樣測定時應該使用與建立校準曲線相同的比色皿和同樣的參比。
比色皿的成對性校正對於使用已久的比色皿是必要的,尤其是測量吸光度很小的樣品時,校正可保證測量值的可靠性和重復性。
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Ⅳ 標准曲線的繪制是什麼
標准曲線是標准物質的物理/化學屬性跟儀器響應之間的函數關系,建立標准曲線可以推導待測物質的理化屬性。
在分析化學實驗中,常用標准曲線法進行定量分析,通常情況下的標准工作曲線是一條直線。
標准曲線的橫坐標(X)表示可以精確測量的變數(如標准溶液的濃度),稱為普通變數,縱坐標(Y)表示儀器的響應值(也稱測量值,如吸光度、電極電位等),稱為隨機變數。當X取值為X1, X2…… Xn時,儀器測得的Y值分別為Y1, Y2 …… Yn。
分光光度法中標准曲線的影響因素
1)分析法自身的精密度:
如顯色反應靈敏度不高時,被測物質低於某一濃度就不能顯色,當顯色溶液中的掩蔽劑或緩沖液能夠絡和少量被測離子,就會使標准曲線線性關系不好。如用鉻酸鋇分光光度法測定水中硫酸鹽、用雙硫腙分光光度法測水中鋅時,在標准曲線的低濃度區間就有可能有此現象。
2) 測定用儀器(包括量具)的精密度:
在分光光度法中要求在最大吸收峰處測定吸光度,分光光度計有效譜帶寬度越窄越好,有利於獲得純度高的單色光,當單色光的純度不夠時,測定的吸光度就會偏低。
3)易揮發溶劑所引起的測定溶液濃度改變:
如用亞甲藍分光光度法測定陰離子合成洗滌劑時用四氯化碳、氯仿溶劑,因溶劑揮發性及實驗時間的延長,會使測定的溶液濃度增大,導致吸光度重現性較差。
4) 污染:
製作標准曲線的操作步驟中,當存在損失或沾污時,會造成相關系數達不到實驗要求。
5) 空白值:
空白值影響測定方法的檢出限,也影響測定結果重現性,特別是對低濃度樣品的測定,因此應引起足夠重視,影響空白值主要因素有:純水的純度、操作過程中的沾污、實驗條件的異常變化等,這些因素對測定的影響程度經常變化,並非是一恆定的數值,但在同一組數據中,這些因素對每一測定結果的影響基本一致,因此在每一組測定中進行空白實驗是十分必要的。
由於空白值與諸多因素有關,且是影響測定結果准確度的重要指標,應對其嚴格控制,並可作為實驗室自我評價的重要依據,在測定工作中應設法降低空白值,當空白值過高時,應根據其主要影響因素,全面進行檢驗。
Ⅵ 標准曲線製作方法是什麼
標准曲線是標准物質的物理/化學屬性跟儀器響應之間的函數關系。建立標准曲線可以推導待測物質的理化屬性。
標准曲線的橫坐標(X)表示可以准確測量的變數(如標准溶液的濃度),稱為公共變數;縱坐標(Y)表示儀器的響應值(也稱被測值,如吸光度、電極電位等),稱為隨機變數。當X=X1X2…當Xn時,儀器測得的Y值分別為Y1,Y2...Yn。
將這些測量點X、Y在坐標系中描繪出來,用標尺畫出X、Y之間的直線線性關系。這是常用的標准曲線法。繪制標准曲線所用的標准品的含量范圍應包括試驗中待測物質的含量。標准曲線不能任意延伸。
(6)儀器分析標准曲線的表示方法擴展閱讀:
重要的是標准曲線所發現的樣品理化性質的不確定度。一個好的測量應該是不確定度小的測量,這對於判斷樣品的結果是否超標或滿足限是至關重要的。
現有的方法傾向於將標准曲線應用於大范圍的樣品濃度。在濃度跨度大、標准點有限的情況下,均勻分布的濃度點是最佳選擇,這樣標准曲線所涵蓋的濃度范圍內的所有濃度所提供的信息都是相同的。
奇點的設置來源於已知信息。先確定濃度范圍,在濃度范圍內確定中間點,然後在中間點周圍分布對稱的標准曲線點,所以總是出現奇數點。
Ⅶ 什麼是分光光度法的標准曲線繪制標准曲線的意義何在
分光光度法的標准曲線是一種定量方法,其意義是可以查出(得到)該樣品的相應濃度。
利用分光光度法對物質進行定量測定,主要有以下幾種方法:
1、標准管法
將待測溶液與已知濃度的標准溶液在相同條件下分別測定A值,然後按下式求得待測溶液中物質的含量。
CT=(AT/AS)*CS
2、標准曲線法
先配製一系列濃度由小到大的標准溶液,分別測定出它們的A值,以A值為橫坐標,濃度為縱坐標,作標准曲線(A~c工作曲線),可以求出標准曲線的回歸方程。在測定待測溶液時,操作條件應與製作標准曲線時相同,以待測液的A值從標准曲線上查出(得到)該樣品的相應濃度。
3、吸光系數法
當某物質溶液的濃度為1mol/L,厚度為1cm時,溶液對某波長的吸光度稱為該物質的摩爾吸光系數,以ε表示。ε值可通過實驗測得,也可由手冊中查出。例如亞鐵氮二雜菲配合物的ε值 等於11000 L/cm·mol
已知某物質ε值,只要測出其A值再根據下式便可求得樣品的濃度:c=A/ε。
基本原理—選擇吸收
物質與光作用,具有選擇吸收的特性。有色物質的顏色是該物質與光作用產生的。即有色溶液所呈現的顏色是由於溶液中的物質對光的選擇性吸收所致。
由於不同的物質其分子結構不同,對不同波長光的吸收能力也不同,因此具有特徵結構的結構集團,存在選擇吸收特性的最大實收波長,形成最大吸收峰,而產生特有的吸收光譜。即使是相同的物質由於其含量不同,對光的吸收程度也不同。
利用物質所特有的吸收光譜來鑒別物質的存在(定性分析),或利用物質對一定波長光的吸收程度來測定物質含量(定量分析)的方法,稱為分光光度法。
Ⅷ 什麼是分光光度法的標准曲線繪制標准曲線有什麼意義
分光光度法的標准曲線定義:
標准曲線是直接用標准溶液製作的曲線,是用來描述被測物質的濃度(或含量)在分析儀器響應信號值之間定量關系的曲線。
在分光光度法分析中,被測物質的濃度在儀器上的響應信號值在一定范圍內呈直線關系,水樣測定的結果可以從標准曲線上查出。因此標准曲線製作的好壞,將會影響測定結果的准確度。
繪制標准曲線意義:繪制標准曲線的實用意義就是只要測得其吸光度值即可在標准曲線上查出相應的濃度值。
通過測定被測物質在特定波長處或一定波長范圍內光的吸收度,對該物質進行定性和定量分析的方法。它具有靈敏度高、操作簡便、快速等優點,是生物化學實驗中最常用的實驗方法。
(8)儀器分析標准曲線的表示方法擴展閱讀:
在分析化學實驗中,常用標准曲線法進行定量分析,通常情況下的標准工作曲線是一條直線。
與校正曲線不同,它是以標准溶液及介質組成的標准系列,標繪出來的曲線。校正曲線的標准系列的伴生組分必須與試樣相匹配,以便測量結果的准確。只有標准曲線與校正曲線相重合的條件下,才可以用標准曲線來代替校正曲線。
物質與光作用,具有選擇吸收的特性。有色物質的顏色是該物質與光作用產生的。即有色溶液所呈現的顏色是由於溶液中的物質對光的選擇性吸收所致。
由於不同的物質其分子結構不同,對不同波長光的吸收能力也不同,因此具有特徵結構的結構集團,存在選擇吸收特性的最大實收波長,形成最大吸收峰,而產生特有的吸收光譜。
當溶液層厚度b和吸光系數a固定時,吸光度A與溶液的濃度成線性關系。在定量分析時,首先需要測定溶液對不同波長光的吸收情況(吸收光譜),從中確定最大吸收波長 ,然後以此波長 的光為光源(單色光),進行吸光度A的測定,這是朗伯比爾定律用於定量分析的首要條件。
Ⅸ 儀器分析:標准曲線法的定義
用於描述待測物質的濃度或量與測量儀器的響應量或其它指標之間定量關系的曲線
Ⅹ 何為標准曲線定量分析方法的適用條件及使用注意事項是什麼
儀器分析上的吧,標准曲線法是用分析物的純樣准確配製一系列已知濃度的標准試樣,測得每一濃度對應的凈響應S後,以S對濃度C作圖,得到線性工作曲線,測定時,找到S對應的C,即得試樣濃度。
適用范圍廣,是儀器分析中最基本的定量方法。
注意:為了提高測定準確度,繪制工作曲線的條件應與測定試樣的條件盡量保持一致,否則不宜用此法