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紫杉醇採用什麼表徵方法

發布時間:2022-08-04 06:47:03

1. 請問紫杉醇的檢測,一般用什麼色譜柱

紫杉醇及其注射液是2010版葯典的新增品種,規定在鑒別、相關物質、含量測定等項下均需採用液相色譜法。葯典規定的檢測方法:用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑,以乙腈-水為流動相進行梯度洗脫,檢測波長為227nm。
下圖為賽分科技的BR-C18 4.6×150mm色譜柱對紫杉醇提取物的分離圖譜,從圖中可以看出雜質與目標產物紫杉醇得到良好的分離。(無法提供,抱歉)

2. 紅豆杉樹怎樣提取紫杉醇

一、紫杉醇確實是一種對抑制癌症有效果的葯物,但是並不是什麼靈丹妙葯,目前它只能對癌症起到控制的作用,並不能治癒癌症。一般紫杉醇制劑都是配合化療使用。

二、你家附近有紅豆杉,但是那都是野生的,歸國家所有。紅豆杉屬於國家二級保護植物,私自採伐屬於違法行為,是要罰款的,嚴重的還要負刑事責任。如果有研究機構想要研究紅豆杉,也是需要向政府部門申請的,並不是你說能提供就提供的。

3. 從紅豆杉中提取紫杉醇有哪些方法

當前,人類獲得紫杉醇的方法有:1.天然提取. 2.人工合成. 3.半人工合成. 4.生物發酵. 後三種方法大都停留在實驗室階段。
(1) 紫杉醇的生物合成:
紫杉醇的分子式為:C47H51NO14是萜類環狀結構的天然次生代謝物。主要由紫杉烷環和側鏈組成。研究其生物合成,對於人為定向的提高合成效率及克隆組合,形成關鍵的酶的基因,提高紫杉醇的產量意義重大。目前的關鍵是能否找到一兩個關鍵酶的發現,並使得其基因純化和基因克隆。克隆紅豆杉基因能否突破還有待於觀察,不過人們已經找到的假想途徑,目前這些技術還處在實驗室階段。
(2).紫杉醇的化學合成
根據研究及報道:從紅豆杉植物中分離得到的10---去乙醯漿果赤黴素Ⅲ (巴卡亭Ⅲ),顯然活性低於紫杉醇,但可以從紅豆杉針葉中提取。該物質經過四步化學過程可合成紫杉醇。為解決紫杉醇新來源途徑,取得重大進展。以NICOLAOU博士為首的美國研究小組在1994年報道通過化學方法全合成紫杉醇的結果。但化學合成從實質意義上說還沒有取得徹底的突破,目前還不具備應用價值。
(2) 紫杉醇的微生物合成
STTERLE等從短葉紅豆杉韌皮部分, 分離得到一種寄生真菌(taxo myces an dreanae).可以在特定的培養基中產生紫杉醇及相關烴合物,但由於目前產量極低,所以還不能在生產中得到應用。重組DNA技術可望提高紫杉醇的產量。
通過研究還發現:根是除樹皮外紫杉醇含量最高的器官。人們利用發根農桿菌(agrobac terium rhizogenes )浸然紅豆杉植物外植體誘導生根。這一辦法不需外援激素,發根生長迅速,遺傳性狀穩定而受到重視。如能把尋找合成紫杉醇或其類似衍生物,從微生物合成途徑中,定向得到關鍵酶和克隆紅豆杉相關基因結合起來,可使這一方法得到突破
具第五界北京生物醫葯發展論壇介紹,從植物中提取紫杉醇的發展過程大體情況是:
從60年代起,抗癌新葯的發現主要是從原始植物的代謝產物中尋找,就是目前正在使用的幾種抗癌化療試劑,也不是從高等植物中提取的化合物。
比如:從長春花中分離出的「長春花類生物鹼」
從盾葉鬼臼中分離得到的「表鬼臼毒素」類衍生物。
從喜樹中分離得到的「喜樹鹼類衍生物」
以至到現在的從紅豆杉中分離得到的「紫杉二帖類」成份等。
提取紫杉醇所需的相關技術和設備:
1. 用紅豆杉提取紫杉醇的關健技術及相關資料.
2. 紫杉醇含量的精度測定方法及質量標准及相關資料.
3. 去雜超凈設備.
4. 高壓液相色譜儀及液相色譜分析拄等。

4. 紫杉醇提煉方法

色層分離提取紫杉醇紫杉醇呈白色結晶粉末,不溶於水,易溶於氯仿、丙酮等有機溶劑,是從紅豆杉樹中提
取的1種高效、低毒、廣譜、作用機制獨特的抗癌天然葯物,能夠治療卵巢癌、乳腺癌,也可用於治療肺癌、頭頸部癌、食管癌、生殖細胞腫瘤、子宮內膜癌、淋巴瘤及膀胱癌等。

國內多採用硅膠正相層析法,國外多採用大孔吸附樹脂或反相層析法。前者因負載純化量小,純化步驟多而使生產效率難以提高,且耗費大量溶劑;後者克服了前者的不足,但因大孔吸附樹脂或反相填料介質價格昂貴,且易被雜質污染,導致使用壽命很短,再生十分困難,且耗費大量溶劑,很難在大規摸生產中重復使用。
而我國採用的技術利用特殊色層分離介質,不僅回收率提高,且可使得部分非紫杉醇結構物轉化為紫杉醇。
該技術具以下優點:
1.分離純化量大;
2.載體可反復使用,並且有良好的重復性;
3.綜合成本降低40%以上;
4.整個生產純化工序僅2-3步;
5.提高了紫杉醇與其類似物(尤其是三尖杉寧鹼)的分離效率;
6.用同樣規摸的設施可使紫杉醇的生產量比用其它方法高3-5倍之多。

還有:樹皮>根>其他組織含量

1,單純去雜超凈設備
2,高壓液相色譜儀及液相色譜分析拄

5. 什麼植物中含有紫杉醇即如何提取

紅豆杉樹的樹皮里含有微量的紫杉醇。
從紫杉植物中提取紫杉醇的簡化方法
紅豆杉Taxus又名紫杉,也稱赤柏松,生於海拔1000~1200m處的山地,是世界上公認的瀕臨滅絕天然珍稀植物,從其根、皮、莖、葉中提取的紫杉醇taxol是目前世界上最有效的抗癌葯物之一。全球每年大約需要1500~2500kg紫杉醇,而1 kg樹皮僅能提取50~100mg。 10-脫乙醯巴卡亭Ⅲ又稱10-脫乙醯基漿果赤黴素Ⅲ,10-deacetylbaccatinⅢ,10-DABⅢ為有抑制腫瘤作用的紫杉烷二萜類化合物。Bissery等報道,可利用10-DABⅢ合成具有比紫杉醇更高抗癌活性的多烯他賽docetaxel。紫杉醇主要存在於樹桿和樹皮中,10-DABⅢ主要存在於樹葉中,其含量大大高於紫杉醇的含量。 紅豆杉是國家珍稀保護植物,生長緩慢,如果直接從紅豆杉樹皮中提取紫杉醇,不僅資源有限,而且不利於資源保護。以10-DABⅢ為原料採用酶催化半合成工藝方法來制備紫杉醇,可大大簡化合成過程,使紫杉醇骨架修飾所需步驟更少,操作更簡單,提高了紫杉醇合成的選擇性和生產率,進而為在更大規模上進行紫杉醇生產提供了技術支持,最終使紫杉醇的化學合成半合成的產業化有了實現的可能。
目前文獻報道從各種紫杉植物中提取紫杉醇的方法,均需經過繁冗的分離過程。本實驗採用了一種適合於以各種紫杉植物樹葉或樹枝做原料,通過極性梯度溶劑萃取的方法逐步脫除大量不相干雜質,得到合成紫杉醇的前體10-DABⅢ的方法,然後通過反相層析柱加成,即可獲得抗癌活性成分紫杉醇; 材料與方法 1 材料與儀器
南方紅豆杉Taxus mairei枝葉取自浙江寧海紅豆杉種植基地,8年樹齡。10-DABⅢ對照品為Sigma公司產品,純度98%;所用甲醇;乙醇、乙酸乙酯、乙酸丁酯、二氯甲烷、氯仿、正己烷、石油醚、乙腈等均為分析純試劑。JJ一1精密增力電動攪拌儀,江蘇金壇市江南儀器廠;SENCO R一201旋轉蒸發儀,上海申順生物科技有限公司;玻璃硅膠柱為2cm×40cm,杭州常盛科教器具廠;UV一2802PC/PCS型分光光度計,UNICO上海儀器有限公司;Sigma一3K18低溫離心機4℃,轉速18000rmin;LabAlliance高效液相色譜儀美國SSI公司。
2 實驗方法
取南方紅豆杉枝葉研磨成細粉,於燥保存。稱取100g紅豆杉細粉,45℃烘乾,石油醚預處理,5L甲醇冷浸,輔以攪拌,超聲40min,反復2次。浸漬液過濾,減壓濃縮至100mL。加入75 mL正己烷萃取分液,重復操作2~3次。棄去正己烷層,萃余液旋干溶劑,製成浸膏。加入氯仿與水的混合液1:1反復提取。氯仿層減壓濃縮至10~15mL上柱,用硅膠正相色譜柱分離。分段收集洗脫液,紫外監測,收集有效段合並濃縮,在甲醇/水中重結晶。 3 分析測試方法
採用反相高效液相色譜RP―HPLC方法檢測。分析柱為Kromasil C18柱250mm×4.6 mm,5μm,流動相為乙腈-水30:70,流速為2.0 mLmin,每次進樣體積為10μl,進樣間隙用純乙腈對柱子進行梯度沖洗。紫杉醇最大吸收波長為227nm,檢測器測定波長為232nm,溫度30℃,相關數據計算均採用峰面積歸一化法。
結 果 1 預處理
由於紅豆杉枝葉中含有大量蠟質、植物色素諸如葉綠素等低極性雜質,故在提取前應首先加入低極性溶劑如正己烷、石油醚浸泡脫脂,以除去大量存在的此類非極性雜質,簡化後續操作。該法可除去紅豆杉枝葉中多達72%的極性比10-DABⅢ小且可溶於正己烷的雜質。
2 有機溶劑粗提
目前用於紫杉烷類物質提取的最普通的初級萃取劑是乙醇甲醇和水,Xu等採用的是體積比95:5的甲醇和二氯甲烷的混合物,萃取時間為35~60min;而Hoke等和Powell等都選擇的是純甲醇,所需萃取時間為16~48h。將南方紅豆杉枝葉的細粉在45℃烘乾,甲醇浸漬,攪拌過夜。在攪拌的不同時間內其提取出的10-DABⅢ的含量。可以看出,有機溶劑粗提時的浸漬攪拌時間應以12h左右為佳。
3 初級萃取

將甲醇萃取液減壓旋蒸至干,得浸膏。用10倍體積以甲醇浸膏的量為基準的純凈水分幾次全部溶解,因目標產物10-DABⅢ不溶於水,故而形成懸浮液。用石油醚或正己烷反復萃取,因目標產物不溶於非極性溶劑正己烷中,經此可基本去除極性比10-DABⅢ小的雜質。
在大多數情況下,還須對甲醇粗提物進行萃取操作。一般是在初級萃取物中加入二氯甲烷和水的混合物,即液液萃取,該方法可有效除去萃取液中50%質量比的非紫杉烷類物質。但實驗發現要嚴格掌握好甲醇、二氯甲烷、水三者的比例,否則會出現提取不徹底,在兩相中均含有目標產物,且還會有乳化現象發生。
本實驗中是採用加入氯仿/水的混合溶液 1:1將浸膏完全溶解然後進行液液萃取。操作中 應按照每次向水相中加入4~5倍體積的氯仿來進行,並輕輕振盪分頁漏斗,以避免出現嚴重的乳化現象。因實驗中發現二氯甲烷在用鹼液和水洗時不可避免嚴重乳化,造成目標產物損失難以回收,而氯仿因與目標產物極性相匹,對10-DABⅢ的溶解性更高,與水相分層界面明顯,可在更大程度上實現目標產物10-DABⅢ與極性水溶性雜質的分離。
4 重結晶
將已檢測確認的洗脫液收集,濃縮,製成浸膏。在少量乙腈中重結晶。濾出的殘渣再用甲醇/水洗滌2~3次,即可得到10-DABⅢ的晶體,烘乾,稱重,共計79.16mg。10-DABⅢ純度達到91%,該步收率可達72%。
由於單一萜類化合物在植物中含量低,需要較多分離步驟才能純化出來。因此,採用有效的提取方法和縮短分離步驟提高每步的收率是成功的關鍵。本研究利用萃取和層析方法相結合,使繁瑣的分離步驟大為縮減,工藝路線為:紅豆杉枝葉採集、粉碎,45℃烘於,石油醚預處理後用甲醇浸漬,同時輔以攪拌、超聲。然後過濾,濾液旋蒸以縮小體積,濃縮液用正己烷反復萃取之後再蒸干製成浸膏。浸膏用氯仿/水反復抽提,萃取分液,得到氯仿的抽提物再上柱細分。收集含有10-DABⅢ的洗脫段,旋蒸去除溶劑,適量乙腈溶解,進行重結晶,再用乙醇/水反復洗滌晶體,得到10-DABⅢ的純品。
本工藝中採用的南方紅豆杉樹葉中10-DABⅢ的含量經測定為在1‰,得到的紫杉醇合成的前體物10-DABⅢ純度大於90%,總收率達到7.9%,與文獻相比較說明實驗採用的原料及分離和純化工藝都是可行的。但由於本實驗目前還處於實驗室研究階段,在重結晶操作環節中尚存在一些問題,如怎樣去除殘留溶劑對重結晶的影響及晶形的改善等還都需要進一步的研究。

6. 紫杉醇是什麼

你好;紫杉醇是由短葉紫杉樹皮或者紅豆杉樹皮提取的抗癌葯物,對卵巢癌和乳腺癌有獨特的療效。對肺癌、食道癌、大腸癌、黑色素瘤、頭頸部癌也有不錯的療效,相比於氮芥類和順鉑類而言,其不良反應相對較少。

7. 紫杉醇最新的合成方法

多烯紫杉醇的合成方法。包括如下步驟:將結構通式 (B)所示的化合物與結構通式(C)所示的化合物在溶劑中,在鹼的作用下反應,得到帶保護基的多烯紫杉醇(D);(2)在步驟(1)的產物中,加入脫保護劑,脫保護,收集目標產物。本發明的方法,操作過程簡便,選擇性和收率高,得到的產物中(2』R,3』S)與(2』S,3』R)比例大於90∶1。具有很大的應用價值。
多烯紫杉醇(docetaxel)的合成方法,該方法是以保護的10-去乙醯基漿果赤黴素10-DAB和合成的手性的C-13側鏈進行縮合制備而成。該方法簡單,反應條件溫和,適合於工業化生產。
紫杉醇(Paclitaxel,Taxol)是一種有效的抗腫瘤葯物,此葯目前是由紅豆杉植物的樹皮樹葉提取的,但含量極低。紫杉醇分子母核四環雙萜10-脫乙醯巴卡亭III很容易從常見植物馬尾松或粗榧中提取,也可以從紫杉醇提取過程中的副產品中得到。本發明是以10-脫乙醯巴卡亭III為起始材料半合成紫杉醇。即採用合成的側鏈前體順-1-苯基-3-(1-乙氧乙氧基)-4-苯基氮雜環丁-2-酮與10-脫乙醯巴卡亭III衍生物進行縮合制備紫杉醇。所得紫杉醇與來源於紅豆杉是紫杉醇化學結構完全一致。

以助人為快樂之本。

8. 紫杉醇是什麼

紫杉醇是紅豆杉屬植物中的一種復雜的次生代謝產物, 也是目前所了解的惟一一種可以促進微管聚合和穩定已聚合微管的葯物。同位素示蹤表明, 紫杉醇只結合到聚合的微管上, 不與未聚合的微管蛋白二聚體反應。細胞接觸紫杉醇後會在細胞內積累大量的微管,這些微管的積累干擾了細胞的各種功能,特別是使細胞分裂停止於有絲分裂期,阻斷了細胞的正常分裂。 通過Ⅱ-Ⅲ臨床研究,紫杉醇主要適用於卵巢癌和乳腺癌,對肺癌、大腸癌、黑色素瘤、頭頸部癌、淋巴瘤、腦瘤也都有一定療效

9. 紫杉醇是從紅豆杉屬植物中提取的最有效的抗癌制劑之一,目前生產紫杉醇的主要原料是天然生長的紅豆杉樹皮

(1)形成重組質粒時需要限制酶和DNA連接酶.由於導入目的基因時將氨苄青黴素抗性基因破壞,沒有破壞四環素抗性基因,因此培養基中需添加四環素,以便於篩選出導入了目的基因的頂芽細胞,這種培養基為選擇性培養基.
(2)利用植物組織培養技術將導入目的基因的紅豆衫頂芽離體細胞培養發育為幼苗,其原理為植物細胞的全能性.形成愈傷組織後,由於遺傳信息的執行情況不同,經再分化可形成各種組織細胞.
(3)配製的MS培養基在接種前需採用高壓蒸汽滅菌進行滅菌處理,避免雜菌在上面迅速生長消耗營養,且有些雜菌會危害培養物的生長.生長素和細胞分裂素的協同作用在組織培養過程中非常重要,該培養基中還需添加這兩種植物激素,添加激素時還需控制好兩種激素的濃度和使用順序及用量比例.
(4)將紅豆杉頂芽切段分離成單個的頂芽離體細胞時,常用方法是酶解法,所需酶為果膠酶.
故答案為:
(1)限制酶和DNA連接酶 四環素 篩選導入了目的基因的頂芽細胞 選擇
(2)全能 遺傳信息的執行情況不同
(3)高壓蒸汽滅菌 生長素和細胞分裂素 濃度和使用順序及用量比例
(4)果膠酶

10. 紫杉醇的理化性質,特別是化學結構是什麼

Taxol (紫杉醇)

紫杉醇系美國布邁施貴寶公司(BMS)從太平洋紫杉樹皮中提取分離並開發的一種天然抗腫瘤新葯。其作用機制是在細胞分裂時能與細胞微管蛋白結合,使細胞內形成穩定的微管束,以干擾細胞周期的G-2有絲分裂,從而抑制腫瘤細胞的生長。美國1992年來將該葯開始應用於卵巢癌的治療後,又應用於乳腺癌的治療,收到良好的效果。故有人認為紫杉醇的第一適應症是轉移性卵巢癌,而第二適應症是難治性的轉移性乳腺癌。

我國是由中國醫學科學院葯物研究所首先從雲南紅豆杉樹的枝葉中提取分離得到了紫杉醇,經Ⅱ期臨床試驗證實,國產紫杉醇不但對乳腺癌、卵巢癌有良好的療效,對其它惡性腫瘤也有一定的效果。本組治療的9例惡性腫瘤,病人所用紫杉醇均為國產,其中有4例轉移性乳腺癌,1例轉移性卵巢癌和1例復發的小細胞肺癌,經2-3周期的單葯或聯合化療,療效均PR,顯示出該葯對轉移性乳腺癌等惡性腫瘤的抗腫瘤活性。1994年5月在達拉斯召開的第三十屆美國臨床腫瘤學會和1994年10月在北京召開的泰素(紫杉醇)化療中的新進展研討會,也充分證實了紫杉醇對乳腺癌的治療作用。會上有作者報告採用135 mg/m2和175 mg/m2兩種不同劑量3小時靜滴單葯治療乳腺癌,結果前者有效率20%,後者為29%。同時經24小時持續靜滴同等劑量紫杉醇對比,發現療效相似。也有作者報告以200-250 mg/m2劑量持續24小時給葯時療效明顯提高,達56%。本組病例1、2、4、5均為乳腺癌術後復發,廣泛轉移,經予紫素用量在135-150 mg/m2,有單葯或聯合化療的,療效均PR,全部有效,生存期得到明顯延長,生存質量得以提高,說明紫素是治療復發轉移性乳腺癌最有效的葯物之一。但本組中無一例CR,考慮與復治有關。

紫杉醇與阿黴素或順鉑聯合用葯,可明顯提高療效已被證實。有作者在紫杉醇3小時滴注聯合阿黴素治療初治的轉移性乳腺癌的最佳劑量和最好耐受給葯順序的研究中證實,紫杉醇的最大劑量200 mg/m2靜脈注射3小時與固定劑量的阿黴素(60mg/m2)聯合使用,有效率達95%,並證明對所有轉移部位者有效〔3〕。也有人報告紫杉醇90 mg/m2,順鉑60 mg/m2治療轉移性乳腺癌,16例病人,CR4例,PR11例,有效率94%。本文有4例聯合用葯,其中一例應用阿黴素(mg/m2),另3例聯合PDD(60-80 mg/m2),療效均達PR,證實聯合化療有效,並減少了紫素的用量,在一定程度上可減輕其毒副反應,並可減輕病人的經濟負擔。 紫杉醇單葯治療非小細胞肺癌,有效率一般為20-25%,聯合用葯療效進一步提高,高者可達56%〔3〕。本組4例肺癌患者中,除1例小細胞肺癌術後復發患者,經紫素聯合順鉑化療有效外,餘3例非小細胞肺癌,雖經紫杉醇單葯化療2周期,均無效。其中病例8化療後病灶增大24%,例9化療後病灶無變化,僅病例7肺腺癌,骨轉移劇痛難忍,化療後第2天疼痛基本消失,原肺不張不全復張,但緩解期短,待第2周期化療前,很快重新出現肺葉的完全不張,待第2周期結束,再無復張。但因病例少,尚不能說明紫素對肺癌的治療效果。

一般認為紫杉醇的劑量限制毒性主要為神經毒性和骨髓抑制,本組中有6例出現肌肉、關節痛或皮膚的麻木感,其關節痛主要表現在下肢,經口服B族維生素和對症處理,約在一周內消失,未見任何後遺效應:本組9例,有7例出現不同程度的骨髓抑制,主要為Ⅱ°抑制,並伴有輕微的心臟毒性(傳導阻滯),這與文獻報導相符合〔4〕。另外紫杉醇與其它抗腫瘤葯相比,較少出現胃腸道反應,我們所治9例病人,僅3例出現Ⅰ°胃腸道反應,而其中2例為聯合應用PDD病例,進一步證實紫素所致胃腸道反應較輕。

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