疏水分析柱的清洗方法

⑴ 如何清洗氣相柱中殘留物清除

如果不是非常必要，可以通過截取柱子進樣口前端半米後進行程序升溫老化的方法來解決。

只有柱子的確受到污染，或柱效已經下降到影響正常分析時，再用清洗的方法來解決。

具體清洗方法及要求：毛細管GC色譜柱必須具有鍵合和交聯的固定相才可以使用溶劑進行清洗。使用溶劑清洗非鍵合的固定相會嚴重損壞色譜柱。。溶劑清洗裝置會連接到有壓力的氣源（N2或He），並把色譜柱插入到清洗裝置中。把溶劑加入樣品瓶中，然後使用氣源對溶劑瓶加壓。壓力會強制溶劑流過色譜柱。殘留物將溶解到溶劑中，並隨溶劑反沖出色譜柱。然後將溶劑吹掃出色譜柱，並對色譜柱進行適當的老化。清洗色譜柱前，從色譜柱的前端將其切去半米（即靠近進樣器的一端）。將色譜柱連接檢測器的一端插入清洗裝置中。通常使用多種溶劑來清洗色譜柱。後面繼續使用的溶劑必須要與前一種溶劑互溶。一定不要使用高沸點溶劑，特別是不要用作最後使用的溶劑。溶解樣品的溶劑通常是不錯的選擇。

建議使用甲醇、二氯甲烷和己烷，它們在大多數情況下效果不錯。可使用丙酮替代二氯甲烷，以避免使用含氯溶劑，但是二氯甲烷是最好的清洗溶劑之一。如果注射的是水性樣品（例如生理體液和組織），則請在使用甲醇以前先使用水來沖洗。某些自於水性樣品殘留物只能溶於水中而不溶於有機溶劑。應使用水和醇類（例如甲醇、乙醇和異丙醇）來清洗鍵合的聚乙二醇基固定相（例如DB-WAX、DB-WAXetr、DB-FFAP、HP-Innowax），但一般不建議採用該方法。

象安捷倫就提供了專門的清洗工具。見圖片

⑵ 如何反向沖洗液相色譜柱

轉載」《分析測試網路網》實用資料！色譜柱沖洗一點意見！！

主要針對的反向色譜柱而講！

1.色譜柱簡介

最常用的色譜柱填充劑為化學鍵合硅膠。反相色譜系統使用非極性添充劑，以十八烷基硅烷鍵合硅膠最為常用，辛基硅烷鍵合硅膠和其他類型的硅烷鍵合硅膠(如氰基硅烷鍵合相和氨基硅烷鍵合相等)也有使用,正相色譜系統使用極性填充劑，常用的填充劑有硅膠等。離子交換填充劑用於離子交換色譜;凝膠或高分子多孔微球等填充劑用於分子排阻色譜;手性鍵合填充劑用於對映異構體的拆分分析。

填充劑的性能(如載體的形狀、粒徑、孔徑、表面積、鍵合基團的表面覆蓋度、含炭量和鍵合類型等)以及色譜柱的填充，直接影響待測物的保留行為和分離效果。孔徑在15nm(1nm=10埃)以下的填料適合於分析分子量小於 2000的化合物，分子量大於2000的化合物則應選擇孔徑在30nm以上的填料。以硅膠為載體的一般鍵合固定相填充劑適用PH2~8的流動相。當PH大於8時，可使載體硅膠溶解;當PH小於2時，與硅膠相連的化學鍵合相易水解脫落。當色譜系統中需使用PH大於8的流動相時，應選用耐鹼的填充劑，如採用高純硅膠為載體並具有高表面覆蓋度的鍵合硅膠、包裹聚合物填充劑、有機-無機雜化填充劑或非硅膠填充劑等;當需使用PH小於2的流動相時，應選用耐酸的填充劑，如具有大體積側鏈能產生空間位阻保護作用的二異丙基或二異丁基取代十八烷基硅烷鍵合硅膠、有機-無機雜化填充劑等。

2.色譜柱的沖洗體積確定

一般情況都是沖洗色譜柱10-20倍柱體積，具體可以這樣計算，根據柱內徑和柱長算出色譜柱內體積。短柱一般時間就是30分鍾、長柱一般沖洗60分鍾就可以了。舉例：內經為4.6mm、長250mm，其柱內體積=3.14*4.6*4.6/4*250=4.153毫升，流速是1.0毫升每分鍾，折中取15被柱內體積，則沖洗時間就出來了。

3.色譜柱沖洗

沖洗色譜柱最好在分析結束後，用流動相沖洗到基線平穩，然後用10%左右的有機溶劑沖洗色譜柱，主要是沖洗干凈流動相中的緩沖鹽。然後用100有機溶劑沖洗。最好是梯度變化沖洗。分析物可能為一些能溶解在水中，有些需要用純溶劑才能完全去除。如果分析時間緊迫一定要把鹽分沖洗干凈，一般情況不要用純水沖洗色譜柱，特別是反向柱的填料的鍵合集團容易折斷，對色譜柱造成損傷。色譜柱被使用在某種程度上就是開始被污染了，所以色譜柱的壽命和我們使用的情況有很大的關系。雖然被污染但是對我們分析目標物沒有造成影響我們也就是認為還能用。

4.色譜柱維護沖洗

常見故障篩板阻塞，解決辦法是：a、過濾流動相;b、過濾樣品;c、運用在線過濾或保護柱。

柱頭塌陷解決方法是：：a、避免使用PH>8的流動相(針對大部分硅膠的柱子);b、使用保護柱 ;c、使用預柱(飽和色譜柱)。

前面談到的不管用什麼溶劑一定要加入一定比例的用機溶劑，主要是考慮到一些疏水基團在有機溶劑裡面容易伸展利於沖洗其包藏的雜質等。當我們的色譜柱在壓力和柱效下降時，我可以拆開泵近端柱頭的螺絲取出篩板，清洗篩板以及觀察裡面的填料，如填料污染嚴重，就要進行挖取一部分被污染的填料然後用其他廢棄的柱子相同填料來填補，用新的篩板或清洗好的篩板擰好螺絲。然後沖洗觀察柱壓變化和測試柱效等。

5.特殊沖洗
強保留物質和大分子化合物在色譜柱中累積，對樣品中的化合物產生額外的保留行為，不僅引起峰形變寬、拖尾，使柱效下降，同時也會引起保留時間的變化，累積到一定程度時還會導致柱壓升高。由於強保留物質和大分子化合物對色譜分離的影響是一個累積效應，需要一定的時間才會體現出來，但對許多樣品特別是復雜樣品而言，很難判斷其是否含有強保留物質，因此要防止強保留物質的累積，需要在每天的日常維護中用純甲醇或乙腈清洗色譜柱。

清洗方法：

1.未使用緩沖鹽：每天分析完成後，用純甲醇或純乙腈反向沖洗色譜柱60min。

2. 使用過緩沖鹽：分析完成後，先用上述方法除去緩沖鹽，然後再用純甲醇或乙腈反向沖洗色譜柱 60min。

3.補救方法：

水——乙腈——氯仿(或異丙醇)——乙腈——水

每一步以 1.0ml/min 流速反向沖洗色譜柱 60min。

希望大家提出更好的建議和辦法。

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⑶ 色譜柱篩板如何清洗

色譜柱篩板用甲醇超聲清洗，擰緊色譜柱，用甲醇低流速沖洗（20倍柱體積），就可以清洗的很乾凈。

對於色譜柱塌陷部分，找一根廢棄的C18柱在出口處擰開，將靠近篩板的填料挖去一部分，再取干凈的填料。再將要填修復的色譜柱入口擰開，除去污染的填料，將干凈的填料用適宜的工具小心填充到色譜柱頭，最好突出一部分），將過濾後的甲醇用微量進樣針將填料濕潤。

下面我們來了解一下色譜柱的保存方法：

1. 短時間內色譜柱的保存。

如果使用時間間隔不超過四天，則色譜柱無需特別的維護，只需根據最後一次測試使用的流動相或樣品的性質，在使用後用純甲醇、純水或甲醇與水的混合溶液進行淋洗，直至基線走平約半小時即可。

2. 長時間色譜柱的保存

如色譜柱長時間不用，則最好將其從HPLC儀中取下保存，取下前用合適的溶劑淋洗，洗去不適與保存色譜柱的洗脫液，如C18反相柱可以用純甲醇或乙腈作為保存的介質，然後用塑料塞頭將其塞緊，以免色譜柱內完全乾燥。

⑷ 安捷倫高效液相色譜柱的洗柱方法

1、色譜柱清洗要看你的色譜柱是孔徑是多少微米，適合的流速是多少。
2、以4.6微米的為例，先用純水清洗2小時，再用甲醇清洗1小時。用的時候直接換上流動相。

3、高效液相色譜柱的系統由儲液器、泵、進樣器、色譜柱、檢測器、記錄儀等幾部分組成。儲液器中的流動相被高壓泵打入系統,樣品溶液經進樣器進入流動相,被流動相載入色譜柱(固定相) 內, 由於樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數, 在兩相中作相對運動時, 經過反復多次的吸附- 解吸的分配過程, 各組分在移動速度上產生較大的差別, 被分離成單個組分依次從柱內流出, 通過檢測器時, 樣品濃度被轉換成電信號傳送到記錄儀,數據以圖譜形式列印出來。

⑸ DIKMA色譜柱 Inertsil ODS-3怎麼沖洗才能沖干凈

Inertsil ODS-3 不是dikma的色譜柱，而是島津的色譜柱，沖洗方法和普通C18色譜柱無異，建議你上「色譜世界」網站看看，這個網站在色譜方面非常專業，對你會有很大的幫助。

⑹ 安捷倫高效液相色譜c18柱的洗柱方法

第一、安捷倫的色譜柱有很多種，所以要分清類型去沖洗。
第二、作為普通C18柱，尤其是硅膠基質的普通C18柱，對酸鹼鹽以及水，都是造成柱子的損壞的流動相構成。水不能過多（除了帶AQ的純水柱，一般各家品牌都有這款防水柱）我個人認為只要超過80%的水的流動相，都會造成C18的壽命縮短。所以做高水相的流動相分析時請注意選合適的柱子。酸對柱子的損傷是不可逆的，一定要控制PH，我個人認為PH在2以下的都要做好費柱子的准備。鹼性條件是對於硅膠基質的C18的弱項，一般的硅膠基質的C18鹼性條件都不太耐用，但現在也有鹼性PH11的柱子，但比較貴。鹽對色譜柱的影響主要是鹽析造成的，而且是致命。
第三沖洗方法的問題。沖洗方法根據使用的流動相和樣品的不同沖洗方法要加以區分。一般不加酸鹼鹽，水相也不高的情況（如甲醇水60:40），無需太過沖洗，沖洗的目的就是為了把樣品的雜質沖出即可。保存流動相保存即可。酸和鹼的條件下，原則上是將酸鹼沖出色譜柱，保存在甲醇水即可（如60:40比例可根據要使用的流動相，只要水相不高即可）。鹽的條件比較麻煩，處理不好，不僅僅色譜柱出問題而且儀器也比較麻煩。常用的就是高水相流動相甲醇-水（10：90）將鹽沖出（注意壓力），然後用純甲醇沖洗（這一步是恢復高水相對色譜柱的損傷），最後保存在一般的甲醇水體系即可。
第四點，沖洗的時候注意是壓力，最好是從小流速開始慢慢提升流速到壓力許可的范圍。沖洗的時間，准確的是流量一般色譜柱的沖洗都要達到10-20倍的柱體積。

⑺ 高效液相色譜柱第一次使用時應如何清洗

用水/有機相（10/90～5/95），以0.3-0.6ml/min流速沖洗2h以上，再用100%有機溶劑，以0.3-0.6 ml/min流速沖洗1h以上，最後用100%有機溶劑，以1.0 ml/min流速沖洗1h以上。

⑻ 液相色譜柱應該怎樣清洗

1．高效液相色譜柱柱子的清洗

即使樣品和流動相已做過前處理，也仍難以完成避免柱子受到污染，因此必須對柱子行清洗。清洗應定期進行，如果在短期內分析許多樣品，則以每日清洗一次為宜，至少也應一周一次，防止有太多的雜質在柱上堆積。

反相柱的常規洗滌辦法是：分別取甲醇、三氯甲烷、甲醇-水各20倍柱體積（既對於一根4.6mmX25cm的柱來說，通常是50-60ml，而對於9.4mm內經X50cm的柱來說，通常是500-600ml） ，使之通過柱子。然後用流動相平衡（通常仍用20倍柱體積），柱一般將恢復正常。如果選擇性仍和以前不一樣，則表明還有其他雜質留在柱子里，這時應考慮更加嚴格的清洗：先用20倍柱體積的水，再用相同體積0.05mol/L硫酸，最後用流動相溶劑。酸洗常能洗下有機溶劑所不能洗下的剩餘雜質。在低pH值下做長期（一天或更長）清洗是不適宜的，但50ml洗液以2ml/min的速度清洗25min，一般對健合相沒有損害。注意，強鹼不能用來清洗任何微粒硅膠柱（不論是健合相還是非健合相），因為硅膠骨架會溶解。對於嚴重污染的反相柱，只能採用再生的方法。


2．高效液相色譜柱柱頭空隙的處理

拆下不銹鋼燒結過濾器後，檢查柱床，常可見柱頭塌陷，此時先剔掉無規則床層和帶色填料，使柱床呈白色並完全水平，再使甲醇作糊狀填料勻漿液，將填料勻漿液滴在柱上靠重力從勻漿液中排出甲醇液，重復數次，直到水平，完成了柱的再生。此時，如果柱頭孔隙深度小於1cm，可以採用下述局部重裝的辦法，否則，柱應當完全重裝或更換。

⑼ 每次使用之後的高效液相色譜柱都要清洗嗎，如何沖洗

這個是不是需要清洗的問題，需要看你的流動相是什麼。
一般反相色譜，經常會用到緩沖鹽。而鹽對於色譜柱傷害比較大。如果鹽堵在色譜柱裡面那柱子就廢了。所以需要把它沖掉。最好是每次都沖掉。
如果你的柱子流動相裡面沒有鹽，那就沒必要沖洗了。

沖洗方法：反相柱子最好保存在純甲醇或者純乙腈裡面，但是鹽不溶於純有機相。所以中間過渡甲醇水或者乙腈水。
究竟用什麼，要看你的流動相。
比如，我用的是磷酸鹽緩沖液-乙腈（70：30）的流動相，那麼沖洗的時候最好選用10%-15%乙腈水，沖洗1.0ml/min，至少30min，最好40min。

如果第二天接著使用的話可以不必用純甲醇或者純乙腈封存了。如果第二天不用，最好用純的有機相封上柱子，同樣是1.0ml/min流速沖洗30min。

另，也不是說不清洗就會壞。我們研發有的時候為了趕項目，來不及沖洗色譜柱。柱子不會怎麼樣。就是壽命會短一點而已。