紫外分析方法

㈠ 紫外吸收光譜分析法的定性和定量分析的依據是什麼

物質吸收波長范圍在200～760nm區間的電磁輻射能而產生的分子吸收光譜稱為該物質的紫外可見吸收光譜，利用紫外可見吸收光譜進行物質的定性、定量分析的方法稱為紫外可見分光光度法。其光譜是由於分子之中價電子的躍進而產生的，因此這種吸收光譜決定於分子中價電子的分布和結合情況。

其在飼料加工分析領域應用相當廣泛，特別是在測定飼料中的鉛、鐵、鉛、銅、鋅等離子的含量中的應用。熒光分析也是近年來發展迅速的痕量分析方法，該方法操作簡單、快速、靈敏度高、精密度和准確度好，並且線形范圍寬，檢出限低。

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紫外光譜

准確測定有機化合物的分子結構，對從分子水平去認識物質世界，推動近代有機化學的發展是十分重要的。採用現代儀器分析方法，可以快速、准確地測定有機化合物的分子結構。在有機化學中應用最廣泛的測定分子結構的方法是四大光譜法：紫外光譜、紅外光譜、核磁共振和質譜。紫外和可見光譜，簡寫為UV。

㈡ 紫外分析的原理

1、基礎：葯物中的雙鍵（尤其是共軛雙鍵），苯環對紫外光具有響應；
2、原理：比爾-蘭博定律；
3、儀器；紫外分光光度計；
4、參考書：《分析化學手冊.分光光度法分冊》、《葯物波譜分析》。

㈢ 紫外可見分光光度計定量分析的原理和方法是怎樣的

分光光度計的基本原理是溶液中的物質在光的照射下，產生了對光吸收的效應，物質對光的吸收是具有選擇性的。各種不同的物質都具有其各自的吸收光譜，因此當某單色光通過溶液時，其能量就會被吸收而減弱，光能量減弱的程度和物質的濃度有一定的比例關系，也即符合比色原理——比耳定律

㈣ 紫外吸收光譜定量分析的依據是

分析的依據是：根據物質對不同波長的紫外線吸收程度不同而對物質組成進行分析的方法。此法所用儀器為紫外吸收分光光度計或紫外-可見吸收分光光度計。

光源發出的紫外光經光柵或棱鏡分光後，分別通過樣品溶液及參比溶液，再投射到光電倍增管上，經光電轉換並放大後，由繪制的紫外吸收光譜可對物質進行定性分析。

由於紫外線能量較高，故紫外吸收光譜法靈敏度較高；同時，本法對不飽和烯烴、芳烴、多環及雜環化合物具有較好的選擇性，故一般用於這些類別化合物的分析及相關污染物的監測。

如，水和廢水統一檢測分析法中，紫外分光光度法測定礦物油、硝酸鹽氮；以可變波長紫外檢測器作為檢測器的高壓液相色譜法測多環芳烴等。

(4)紫外分析方法擴展閱讀

紫外可見吸收光譜應用廣泛，不僅可進行定量分析，還可利用吸收峰的特性進行定性分析和簡單的結構分析，測定一些平衡常數、配合物配位比等；也可用於無機化合物和有機化合物的分析，對於常量、微量、多組分都可測定。

物質的紫外吸收光譜基本上是其分子中生色團及助色團的特徵，而不是整個分子的特徵。如果物質組成的變化不影響生色團和助色團，就不會顯著地影響其吸收光譜。

如甲苯和乙苯具有相同的紫外吸收光譜。另外，外界因素如溶劑的改變也會影響吸收光譜，在極性溶劑中某些化合物吸收光譜的精細結構會消失，成為一個寬頻。

所以，只根據紫外光譜是不能完全確定物質的分子結構，還必須與紅外吸收光譜、核磁共振波譜、質譜以及其他化學、物理方法共同配合才能得出可靠的結論。

㈤ 紫外—可見吸收光譜分析方法

4.3.1.1 定性分析

無機元素的定性分析應用紫外—可見分光光度法比較少，主要採用原子發射光譜法或化學分析法。在有機化合物的定性分析鑒定及結構分析方面，由於紫外-可見吸收光譜較為簡單，光譜信息少，特徵性不強，並且不少簡單官能團在近紫外光區及可見光區沒有吸收或吸收很弱，在應用時也有較大的局限性。但是，這種方法可適用於不飽和有機化合物，尤其是共軛體系的鑒定，以此推斷未知物的骨架結構。此外，還可配合紅外光譜法、核磁共振波譜法和質譜法等常用的結構分析法進行定性鑒定和結構分析，不失為一種有利的輔助方法。

吸收光譜的形狀、吸收峰的數目和位置及相應的摩爾吸光系數，是定性分析的光譜依據，而最大吸收波長λ_max及相應的ε_max是定性分析的最主要參數。比較法有標准物質比較法和標准譜圖比較法兩種。利用標准物質比較，在相同的測量條件下，測定和比較未知物與已知標准物的吸收光譜曲線，如果兩者的光譜完全一致，則可以初步認為它們是同一類化合物；利用標准譜圖或光譜數據比較，對於沒有標准物質或標准物質難於得到的物質，此方法適用。

4.3.1.2 結構分析

紫外—可見分光光度法可以進行化合物某些基團的判別，共軛體系及構型、構象的判斷。

(1)某些特徵基團的判別

有機物的不少基團(生色團)，如羰基、苯環、硝基、共軛體系等，都有其特徵的紫外或可見光吸收帶，紫外-可見分光光度法在判別這些基團時，有時是十分有用的。如在270～300nm處有弱的吸收帶，且隨溶劑極性增大而發生藍移，就是羰基產生吸收帶的有力證據；在184nm附近有強吸收帶、204nm附近有中強吸收帶、260nm附近有弱吸收帶且有精細結構，則是苯環的特徵吸收，等等。

(2)共軛體系的判斷

共軛體系會產生很強的K吸收帶，通過繪制吸收光譜，可以判斷化合物是否存在共軛體系或共軛的程度。如果一化合物在210nm以上無強吸收帶，可以認定該化合物不存在共軛體系；若215～250nm區域有強吸收帶，則該化合物可能有兩至三個雙鍵的共軛體系，如1，3-丁二烯，λ_max為217nm，ε_max為21000；若260～350nm區域有很強的吸收帶，則可能有三至五個雙鍵的共軛體系，如癸五烯有五個共軛雙鍵，λ_max為335nm，ε_max為118000。

(3)異構體的判斷

包括順反異構及互變異構兩種情況的判斷。

順反異構體的判斷：生色團和助色團處於同一平面時，會產生最大的共軛效應。由於反式異構體的空間位阻效應小，分子的平面性較好，共軛效應強，因此λ_max及ε_max都大於順式異構體。

互變異構體的判斷：某些有機化合物在溶液中可能有兩種以上的互變異構體處於動態平衡中，這種異構體的互變過程常伴隨有雙鍵的移動及共軛體系的變化，因此會產生吸收光譜的變化。最常見的是某些含氧化合物的酮式與烯醇式異構體之間的互變。例如，乙醯乙酸乙酯就是酮式和烯醇式兩種互變異構體，它們的吸收特性不同，酮式異構體在近紫外光區時λ_max為272nm(ε_max為16000)；烯醇式異構體的λ_max則為243nm(ε_max為16000)。兩種異構體的互變平衡與溶劑有密切關系，在像水這樣的極性溶劑中，由於羰基可能與H₂O形成氫鍵以降低能量達到穩定狀態，所以酮式異構體占優勢；而在像乙烷這樣的非極性溶劑中，則形成分子內的氫鍵且形成共軛體系，以使能量降低達到穩定狀態，所以烯醇式異構體比率上升。

此外，紫外—可見分光光度法還可以判斷某些化合物的構象(如取代基是平伏鍵還是直立鍵)及旋光異構體等。

4.3.1.3 定量分析

紫外—可見分光光度法定量分析的常見方法有以下幾種。

(1)單組分的定量分析

如果在一個試樣中只要測定一種組分，且在選定的測量波長下，試樣中其他組分對該組分不幹擾，那麼進行單組分的定量分析較為簡單。一般有標准對照法和標准曲線法兩種。

標准對照法：在相同條件下，平行測定試樣溶液和某一濃度c_S(應與試液濃度接近)的標准溶液的吸光度A_x和A_S，則由c_S可計算出試樣溶液中被測物質的濃度c_x。

A_S=Kc_S，A_x=Kc_x，c_x=c_SA_x/A_S

由於標准對照法僅使用單個標准，引起誤差的偶然因素較多，故結果往往較不可靠。

標准曲線法：是實際分析工作中最常用的一種方法。配製一系列不同濃度的標准溶液，以不含被測組分的空白溶液作為參比，測定標准系列溶液的吸光度，繪制吸光度-濃度曲線，稱為校準曲線(包括標准曲線或工作曲線)。在相同條件下測定試樣溶液的吸光度，從校準曲線上找出與之對應的未知組分的濃度。

此外，有時還可以採用標准加入法(做法與原子吸收光譜法相同)。

(2)多組分的定量分析

根據吸光度具有加和性的特點，在同一試樣中可以同時測定兩種或兩種以上的組分。假設要測定試樣中的兩種組分為A、B，如果分別繪制A、B兩純物質的吸收光譜，可能有三種情況，如圖4.12所示。圖4.12 a表明兩組分互不幹擾，可以用測定單組分的方法分別在λ₁、λ₂測定A、B兩種組分；圖4.12 b表明A組分對B組分的測定有干擾，而B組分對A組分的測定無干擾，則可以在λ₁處單獨測量A組分，求得A組分的濃度c_A，然後在λ₂處測量溶液的吸光度及A、B純物質的和，根據吸光度的加和性則可以求出c_B；圖4.12c表明兩組分彼此互相干擾，此時在λ₁、λ₂處分別測定溶液的吸光度

及

，而且同時測定A、B純物質的

、

及

、

，然後列出聯立方程，解得c_A、c_B。

現代岩礦分析實驗教程

式中：M_r為衍生物的相對分子質量，扣除生色團的相對分子質量後得到該化合物的相對分子質量；l為吸收介質厚度(cm)。

(2)氫鍵強度的測定

溶劑效應對吸收光譜的影響表明，溶劑極性增大，會引起吸收帶的藍移和紅移，主要是由於溶質分子與溶劑分子的相互作用而引起的，如果它們之間具有可形成氫鍵的基團，則是由於形成氫鍵所引起的，因而可以通過吸收波長的移動程度來測定氫鍵的強度。

(3)在電化學研究方面的應用

分光光度法與電化學結合，構成了一個嶄新的研究領域——光譜電化學。光譜電化學技術包括透射技術、鏡反射技術和內反射技術三種。以分光光度法為測量手段，研究某些無機物、有機物和生物物質在電極上的電化學行為，可以同時獲得氧化還原體系的吸收光譜和氧化還原電位，以此研究所發生的電化學反應的歷程及動力學；還可以測定發生電化學反應所轉移的電子數、標准電位、摩爾吸光系數以及反應中間產物或最終產物的擴散系數等。光譜電化學發展很快，在研究無機、有機和生物化學氧化還原機理和均相反應動力學等方面將會發揮極大的作用。

㈥ 紫外可見分光光度法特點和適用范圍

一、紫外可見分光光度法的特點

1、與其它光譜分析方法相比，紫外可見分光光度法事物儀器設備和操作都比較簡單，費用少，分析速度快。

2、紫外可見分光光度法的靈敏度高。

3、紫外可見分光光度法的選擇性好。

4、紫外可見分光光度法的精密度和准確度較高。

二、紫外可見分光光度法的適用范圍

紫外可見分光光度法可適用於定性定量分析、純度分析、結構分析。特別在定量分析和純度檢查方面，在許多領域更是必備的分析方法，例如食品等行業中的產品質量控制。

(6)紫外分析方法擴展閱讀

紫外可見分光光度法的注意點：

1、准備操作儀器前，需要先查看一下指針儀器在斷電的情況下，表面指針是否指向零刻度。如若不是，理應先調零然後才能連接電源。

2、在使用的過程中，操作員應該盡量避免對鏡燈的觸碰，放大器使用過後，一定需要把檔位歸置到零。

3、在操作紫外可見分光光度計時，操作人員需要留意一下機器的乾燥劑。

4、紫外可見分光光度計在開機前將樣品室內的乾燥劑取出，儀器自檢過程中禁止打開樣品室蓋。

㈦ 紫外分光光度法和熒光分析法的區別和各自的優缺點

1、原理不同：

（1）紫外分光光度計，就是根據物質的吸收光譜研究物質的成分、結構和物質間相互作用的有效手段。

（2）熒光分光光度法是根據物質的熒光譜線位置及其強度進行物質鑒定和含量測定。可根據不同的物質其組成與結構調整所吸收的紫外-可見光波長和發射光的波長。

2、應用范圍不同：

（1）紫外分光光度計主要用於實驗室。例如：鑒定物質：根據吸收光譜圖上的一些特徵吸收，特別是最大吸收波長λmax和摩爾吸收系數ε是檢定物質的常用物理參數。這在葯物分析上就有著很廣泛的應用。與標准物及標准圖譜對照等。

（2）熒光分光光度法的靈敏度通常比分光光度法高2〜3個數量級。在衛生檢驗、環境及食品分析、葯物分析、生化和臨床檢測等方面有著廣泛的應用。

3、所用燈不同：

（1）紫外光區通常用氫燈或氘燈。

（2）熒光分光光度法通常用鎢燈或鹵鎢燈。

4、優缺點：

（1）紫外分光光度計高自動化程度，維護方便、操作簡便、效率高。

（2）熒光分光光度法具有檢測靈敏度高、專屬性較強和使用簡便等特點，常用於微量甚至痕量毒物的定量分析。

(7)紫外分析方法擴展閱讀

紫外-可見分光光度計的結構與功能：

由光源、單色器、吸收池、檢測器和信號顯示系統五大部分組成。

（1）光源：是提供符合要求的入射光的裝置，有熱輻射光源和氣體放電光源兩類。熱輻射光源用於可見光區，一般為鎢燈和鹵鎢燈，波長范圍是350~1000nm；氣體放電光源用於紫外光區，一般為氫燈和氘燈，連續波長范圍是180~360nm。

（2）單色器：功能是將光源產生的復合光分解為單色光和分出所需的單色光束，它是分光光度計的心臟部分。

（3）吸收池：又稱比色皿，供盛放試液進行吸光度測量之用，其底及兩側為毛玻璃，另兩面為光學透光面，為減少光的反射損失，吸收池的光學面必須完全垂直於光束方向。根據材質可分為玻璃池和石英池兩種，前者用於可見光光區測定，後者用於紫外光區。

（4）檢測器：是將光信號轉變為電信號的裝置，測量吸光度時，並非直接測量透過吸收池的光強度，而是將光強度轉換為電流信號進行測試，這種光電轉換器件稱為檢測器。

（5）信號顯示系統：是將檢測器輸出的信號放大，並顯示出來的裝置。

㈧ 紫外分光光度法

在實際測量中，採用在另一等同的吸收池中放入溶劑與被分析溶液的透射強度進行比較，即：A = lg( I溶劑/ I溶液) ≈ lg ( I 0/ I )吸光度具有加和性：A總λ= A1λ+ A2λ+ …Anλ比爾定律應用的局限性：只適用於稀溶液、化學偏離、儀器偏離
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4.2 紫外一可見分光光度計
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1. 光源功能：提供能量激發被測物質分子，使之產生電子光譜譜帶（提供寬頻輻射）。連續光源：廣泛應用在吸收和熒光光譜中(氣體放電光源) 氘燈、氫燈紫外可見氬燈真空紫外氙燈真空紫外、紫外、可見(熱輻射光源) 鎢絲燈、鹵鎢燈可見光區
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2. 單色器功能：從光源輻射的復合光中分出單色光。3. 吸收池功能：盛放分析試樣（一般是液體）
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4. 檢測器功能：檢測光信號，測量單色光透過溶液後光強度變化的一種裝置。5. 信號顯示系統
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6. 紫外一可見分光光度計的類型(1) 單波長單光束分光光度計缺點：測量結果受電源波動的影響較大，誤差較大。
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(2) 單波長雙光束分光光度計優點：除了能自動掃描吸收光譜外，還可自動消除電源電壓波動的影響，減小放大器增益的漂移。
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(3) 雙波長分光光度計優點：在有背景干擾或共存組分的吸收干擾的情況下，可以對某組分進行定量測定。還可以獲得微分光譜和進行系數倍率法測定。
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(4) 多道分光光度計具有快速掃描的特點
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4.3 化合物電子光譜的產生4.3.1 有機化合物的紫外一可見吸收光譜（一） 躍遷類型在紫外可見光區范圍內，有機化合物的吸收帶主要由σ→σ*、n→σ*、π→π*和n→π*躍遷產生，其相對能量大小次序為：σ→σ*>n→σ*>π→π*>n→π*。
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σ∗π∗nπσσ σ∗σ π∗π σ∗n σ∗π π∗n π∗有機化合物分子中電子躍遷的能量
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σ→σ*躍遷：分子中的成鍵σ電子躍遷到σ*反鍵軌道上去，這是一切飽和有機化合物都可能產生的電子躍遷類型。n→σ*躍遷：分子中未成鍵的n電子激發到σ*軌道上去，所有含有雜原子的飽和烴衍生物都可發生這種躍遷。含有σ→σ*、n→σ*躍遷的化合物，如：飽和烷烴、鹵代烷烴、醇、醚等是紫外可見吸收光譜測定時的良好溶劑。
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•π→π*躍遷：可以發生在任何具有不飽和鍵的有機化合物分子中，其最大摩爾吸光系數εmax很大。•n→π*躍遷：發生在含有雜原子的不飽和化合物中，其最大摩爾吸光系數εmax比較小。•電荷遷移躍遷：當外來輻射照射某些化合物時，電子從體系具有給予體特性的部分轉移到該體系具有電子接受體特性的部分所發生的躍遷。其譜帶較寬，吸收強度大，εmax> 104。
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NR1R2NR1R2+-hυ電子接受體電子給予體CC+hυ電子接受體電子給予體OROR-
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（二）常用術語1. 生色團：分子中可以吸收光子而產生電子躍遷的原子基團。（含有π鍵的不飽和基團）2. 助色團：有些基團本身沒有生色作用，但卻能增強生色團的生色能力，即它們與生色團相連時，會使其吸收帶是最大吸收波長發生紅移，並且增加其強度。通常是帶有非鍵電子對的基團。3. 紅移和紫移：吸收帶的最大吸收波長發生移動，向長波方向移動稱為紅移，向短波方向移動稱為紫移。
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（三）有機化合物的紫外、可見光譜1. 飽和烴及其取代衍生物σ→σ*、n→σ*2. 不飽和烴及共軛烯烴σ→σ*、π→π*3. 羰基化合物n→σ*、π→π*和n→π*4. 苯及其衍生物 E1帶、 E2帶、 B帶5. 稠環和雜環
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4.3.2 無機化合物的紫外一可見吸收光譜（一）電荷遷移躍遷某些分子同時具有電子給體特性的部分和電子受體特性的部分。當電子從給體外展軌道向受體躍遷時就會產生較強的吸收，這樣產生的光譜稱為電荷遷移光譜。如在金屬絡合物中配位體具有電子給體的性質，金屬離子為電子受體。電子從配位體軌道躍遷到中心原子的外層軌道，就可以產生電荷遷移光譜。
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（二）配位場躍遷1. f-f躍遷鑭系和銅系元素的離子對紫外和可見光的吸收是基於內層f電子躍遷而產生的，其吸收光譜是由一些狹窄的特徵吸收峰組成，且這些吸收峰不易受金屬離子所處的配位環境的影響。2. d-d躍遷過渡金屬離子的d軌道在受到配位體場的作用時產生分裂。d電子在能級不同的d軌道間躍遷，吸收紫外或可見光產生吸收光譜。這種光譜的吸收帶比較寬，吸收峰強烈地受配位環境的影響。
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4.3.3 影響吸收譜帶的因素1. 分子結構的變化：（1）飽和化合物中引入生色團和助色團（2）配位體場的改變：八面體、四面體、正方平面等等
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（3）共軛效應和超共軛效應由於共軛後的電子的運動范圍增大，躍遷所需的能量變小，所以由共軛作用產生的吸收峰波長值較大，同時吸收強度增大。共軛的不飽和健越多，紅移現象就越顯著。1,3—丁二烯在己烷中的λmax= 217nm，εmax = 21,000；1,3,5—己三烯在異辛烷中的λmax= 268nm，εmax = 43,000；1,3,5,7,9—癸五烯在異辛烷中的λmax= 334nm，εmax = 121,000。
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（4）空間位阻CH3CH3CH3H3C（a）（b）λmax(b) > λmax(a) 通常情況下，反式異構空間位阻小於順式異構，其共軛體系共平面性比順式結構好，躍遷能量較低，λmax較大。
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2. 溶劑效應溶劑的極性由非極性改變到極性時，精細結構消失，吸收帶變向平滑。
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改變溶劑的極性還會使最大吸收波長發生變化：當溶劑極性增大時，由n→π*躍遷產生的吸收帶發生紫移，而由π→π*躍遷產生的吸收帶發生紅移。
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3. 溫度溫度增高，分子碰撞頻率增加，譜帶變寬，譜帶精細結構消失(熱變色效應)。
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4.4 分析方法及其應用4.4.1 定性分析吸收光譜比較簡單，特徵性不強，並且大多數簡單官能團在近紫外光區只有微弱吸收或無吸收，所以應用有一定局限性。但可用於鑒定共軛生色團，以此推斷未知物的結構骨架，在配合其它結構分析方法時，是有用的輔助方法。
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（一）定性方法1. 比較吸收光譜曲線：形狀、峰數、λmax位置與相應的εmax。2. 用經驗規則計算λmax，然後與實測值比較。
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（二）經驗規則Woodward規則：計算共軛二烯、多烯烴、共軛烯酮類化合物π→π*躍遷最大波長。
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Oαβδδ+1γδ+2母體環己酮215nm 同環二烯39nm 增加兩個共軛雙鍵60nm 一個β烷基 12nm一個環外雙鍵5nm 三個γ+烷基54nm共計385nm
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AcOABCR母體同環二烯253nm增加兩個共軛雙鍵60nm三個環外雙鍵15nm五個取代烷基25nm共計353nm
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4.4.2 定量分析（一）單組分定量方法1．校正曲線法2．標准對比法AS= k CSb AX= k CXb CX = CS AX/ AS
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（二）多組分定量方法A1A+ B= ε1Abc1A+ ε1Bb c2BA2A+ B= ε2Ab c1A+ ε2Bbc2B
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【例】以分光光度法測定合金鋼中的錳和鉻。稱取1.000g鋼樣，溶解後稀釋至50.00mL，將其中的Cr氧化成Cr2O72-，Mn氧化成MnO4-，然後在440nm和545nm用1.0cm吸收池測得吸光度值分別為0.204和0.860。已知ε440Mn= 95.0 L.mol-1cm-1，ε440Cr= 369.0 L.mol-1cm-1，ε545Mn= 2.35×103L.mol-1cm-1， ε545Cr= 11.0 L.mol-1cm-1。求此合金鋼中Mn，Cr的質量分數。(MMn=54.94 g.mol-1MCr=52.00 g.mol-1)
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【解】 根據吸光度的加合性列出聯立方程：A440 = A440Mn+ A440Cr=ε440Mnb cMn+ ε440Crb cCrA545= A545Mn+ A545Cr=ε545Mnb cMn+ ε545Crb cCr即0.204 = 95.0 × 1 × cMn+ 369.0 × 1 × cCr0.860 = 2.35×103 × 1 ×cMn+ 11.0 × 1 ×cCr解得cMn= 3.64×10-4 mol.L-1cCr= 4.59×10-4mol.L-10.10%100%1.00054.941050103.64(Mn)－3－4=×××××=ϖ0.24%100%1.000252.001050104.59(Cr)－3－4=××××××=ϖ
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（三）雙波長法1. 等吸收波長法A1 = A1A+ A1BA2= A2A+ A2BΔA = A2 - A1= (A2A- A1A) + (A2B-A1B) 由於A2B= A1BΔA = A2A- A1A= (ε2A- ε1A) bc
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2. 系數倍率法該式表明，信號S只與被測組分的吸光度值有關。λλλλλλλλλλ−==−==−−+=−=λλ用差分放大器可獲得混和試樣在波長λ2和λ1處的差示信號S
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3. 測定渾濁試樣在雙波長法測定中，若將λ2設在試樣的吸收峰上， λ1設在試樣無特徵吸收的波長上，此時， λ1和λ2的背景吸收應相等。用雙波長法測得兩處吸光度的差值即可消除背景吸收，進行定量分析。
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（四）導數分光光度法對吸收光譜曲線進行一階或高階求導，即可得到各種導數光譜曲線。優點：1. 能夠分辨兩個或兩個以上完全重疊或以很小波長差重疊的吸收峰2. 能夠分辨吸光度隨波長急劇上升時所掩蓋的弱吸收峰3. 能夠確認寬闊吸收帶的最大吸收波長，解析度隨導數階數的增加而增加，信噪比隨著導數階數的增加而減小。
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定量分析：（可提高檢測的靈敏度）Aλ= ελbc，對波長λ 進行n次求導，只有Aλ和ελ是波長λ的函數，於是有：可見n次求導後，吸光度值仍與吸收物的濃度成正比。bcdddAdnnnnλλλλε=
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4.4.3 紫外一可見吸收光譜的應用1. 相對分子質量的測定M = εmb/A m：樣品重量在紫外、可見吸收光譜法中，只要化合物具有相同生色骨架，其吸收峰的λmax和εmax 幾乎相同。因此，只要求出與待測物有相同生色骨架的已知化合物的ε值，就能求出欲測化合物的相對分子質量。
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2. 測定平衡常數例 用分光光度法測定以下反應的平衡常數ZnL22-的λmax為480nm，該處的εmax＝3.00×103 L.mol-1.cm-1， Zn2＋和L2－在480nm處無吸收。用1.00cm的吸收池測得含2.30×10－4mol L－1 Zn2＋和5.00×10-4mol L－1 L2－溶液的吸光度為0.540。試計算平衡常數。−−+⇔+22222ZnLLZn
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解[][ ][][ ][][][ ][ ]().11040.11000.51080.1K1040.11080.121000.521000.51080.11030.21080.100.11000.3540.022×=××××=⋅×=××−×=+=⋅×=×−×=−=⋅×=××=ε=−−−−+−−−−−−−−−−−−+−−−−+＝則平衡常數為
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3. 結構分析例如，乙醯丙酮存在酮式和烯醇式兩種異構體在極性溶劑水中，以酮式異構體為主，形成分子間氫鍵，λmax為277nm；在非極性溶劑己烷中，以烯醇式異構體為主，形成分子內氫鍵，λmax為269nm。
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4. 氫鍵強度的測定[例] 丙酮 n→π* 的吸收帶水（極性）265.4 nm 即452.96 kJ.mol-1己烷 (非極性) 279.0 nm 即429.40 kJ.mol-氫鍵強度452.96 - 429.40 = 23.56kJ.mol-1
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思考題1.簡述紫外可見吸收光譜的產生。2.朗伯－比爾定律及其數學表達。3.光源的主要作用是什麼？4.各種類型紫外可見分光光度計的特點。5.有機化合物的吸收帶主要由哪幾類躍遷產生？6.影響吸收譜帶的因素有哪些？7.用Woodward規則計算計算共軛二烯、多烯烴、共軛烯酮類化合物π→π*躍遷最大波長。8.多組分定量方法以及雙波長法，導數法的特點9.紫外可見吸收光譜法的應用

㈨ 紫外分光光度法的原理是什麼

分光光度法是光譜法的重要組成部分，是通過測定被測物質在特定波長處或一定波長范圍內的吸光度或發光強度，對該物質進行定性和定量分析的方法。

常用的技術包括紫外-可見分光光度法、紅外分光光度法、熒光分光光度法和原子吸收分光光度法等。紫外-可見分光光度法是在190～800nm波長范圍內測定物質的吸光度，用於鑒別、雜質檢查和定量測定的方法。

(9)紫外分析方法擴展閱讀

物質對光的選擇性吸收波長，以及相應的吸收系數是該物質的物理常數。在一定條件下，物質的吸收系數是恆定的，且與入射光的強度、吸收池厚度及樣品濃度無關。

當已知某純物質在一定條件下的吸收系數後，可用同樣條件將該供試品配成溶液，測定其吸光度，即可由上式計算出供試品中該物質的含量。在可見光區，除某些物質對光有吸收外，很多物質本身並沒有吸收，但可在一定條件下加入顯色試劑或經過處理使其顯色後再測定。

參考資料來源：網路-紫外-可見分光光度法

㈩ 紫外分光光度法的分析方法有哪些

不知道你想問的是什麼