生物化學甘油三酯計算方法

❶ 甘油三酯的測定方法

血清甘油三酯/三醯甘油（TG）是一項重要的臨床血脂常規測定指標，特別是隨著對其致動脈粥樣硬化（AS）作用研究的深入，TG作為冠心病的一項獨立的危險因素日益受到重視。但是血清TG測定及其臨床應用尚存在很多問題，如生物學變異、游離甘油對測定的影響、測定的標准化系統不完善等等。本文僅對TG的生物化學、測定方法與標准化、臨床意義等方面的近況作一簡述。 血清TG測定方法一般可分為化學法、酶法和色譜法3大類。早期測定方法是以總脂質與膽固醇和磷脂之差估算。化學法用有機溶劑抽提標本中的TG，去除抽提液中磷脂等干擾物後，用鹼水解（皂化）TG，以過碘酸氧化甘油生成甲醛，然後用顯色反應測甲醛。比較准確的是二氯甲烷-硅酸-變色酸法（Van Handel-Caslson法），此法抽提完全、能去除磷脂及甘油干擾、變色酸顯色靈敏度高、顯色穩定，至今還是美國疾病控制與預防中心（CDC）的內部參考方法。但因操作步驟繁多、技術要求高而不適於常規工作應用。核素稀釋/氣相色譜/質譜技術（ID/GC/MS）主要用作參考系統中決定性方法的建立及參考物質的制備與定值，此法費用昂貴，樣品處理復雜，難以推廣應用。
所有的臨床實驗室都用酶法檢測血清TG水平，雖然方法各異，但一般都包括3個基本步驟[3,5～7]：用最合適的LPL水解TG生成甘油和FFA；接著是轉化，該步驟一般只用一種酶，例如甘油激酶，將甘油磷酸化以進行下一步反應，或者生成中間待測物；最後是有色染料（常為醌亞胺等）或者紫外吸收物質的形成，再通過分光光度法計算相應的TG濃度。如脂蛋白脂肪酶-甘油磷酸氧化酶- 過氧化物酶-4-氨基安替比林和酚法（GPO-PAP 法）等。此法具有簡便快速、微量、精密度高的優點，且特異性強，易於達到終點，線性范圍寬。用一步法測定的是血清總甘油酯（定義為TG和FG及少量甘油二酯、甘油一酯之和，習慣統稱為TG）。為了消除FG的干擾，中華醫學會檢驗分會曾推薦GPO-PAP 法的兩步酶法作為血清TG常規測定方法[7]，該法不增加試劑成本和工作量，適合自動化分析，由於試劑分成兩部分加入，對正確設置分析測定參數有較高要求。對此法能否去凈游離甘油方面有人提出質疑。針對這一情況，中華醫學會檢驗分會在《關於臨床血脂測定的建議》文件中建議酶法如GPO-PAP 法作為臨床實驗室測定血清TG的常規方法。普通臨床常規實驗室可採用一步GPO-PAP法，有條件的實驗室（如三級以上醫院）應考慮開展游離甘油的測定。
血清FG對TG測定結果的影響一直是臨床十分關注的問題。國外資料顯示，正常人體血清FG含量為0.06～0.22mmol/L，約占總TG的6%～14%[3]。國內的研究結果與此相近，中國正常人血清FG 水平平均約為0.08mmol/L（0.02～ 0.33mmol/L），約占總TG7.19%（0.81% ～21.64%）。雖然臨床標本中FG顯著升高者很少見，但有些異常或病理情況下如應激反應（腎上腺素激活LPL促進體內脂肪水解），劇烈運動，服用含甘油的葯物如硝酸甘油，靜脈輸入含甘油的營養液，肝素治療，某些嚴重的糖尿病、肝病與腎病，取血器材或試管塞上帶有甘油等時，可見血清FG顯著升高，並給臨床決策帶來誤導[3]。因此，可採取測定「真」TG的方法減少其影響：一種是同時測定總甘油和FG，兩個結果的差值反應了真TG濃度（外空白法），另一種是用上文所述的兩步酶法直接測定TG（內空白法）。前者國內外應用較少，後者國外（如日本）使用較多，已有許多臨床實驗室開展。
對於FG空白的設置建議採取如下措施：
⑴臨床實驗室應備有可以做FG空白的檢測系統，在任何情況下都可以做FG空白；
⑵TG報告單中應標明是否為FG空白結果，實驗室應告知臨床醫生FG空白的意義；
⑶臨床及基礎研究、參加CDC脂質標准化計劃的實驗室都要做FG空白；
⑷住院病人中內源性甘油過高群體的標本都應做FG空白；
⑸體檢及門診患者可以不做FG空白，但糖尿病或其他特殊門診例外；
⑹FG>2.3mmol/L者最好做FG空白；
⑺對某些可疑情況，如TG高而血清不混濁應排除高FG的可能。
此外，一些物質如抗氧化物質（維生素C等）、黃疸、溶血、脂血等對酶法測定TG有干擾，可採用設置血清空白予以消除。
在應用自動生化分析儀進行臨床常規TG測定時，還要特別注意交叉污染和基質效應。最易對TG測定產生交叉污染的是總蛋白和鐵試劑，因其還原物質濃度可影響Trinder反應。如果接著TG測定直接膽紅素，也會因表面活性劑的導入產生誤差。鐵測定對TG的影響與亞鐵氰化鉀的量有關。此外，還要注意常規酶法測定TG對制備物的基質效應。Halani等用24份新鮮血清為對照，對5份CAP制備的凍干血清及9份CDC冰凍混合血清進行了評價。以3種商品TG酶試劑測定，以CDC參考方法為對比方法，校正游離甘油後，2種商品試劑對CAP及CDC血清均無基質效應，另一種商品試劑對4份CAP血清有基質效應。也有資料表明，各種質控血清中FG佔TG的12%～85%。我們的研究也發現，臨床使用的各種TG檢測試劑盒、不同的測定/校準系統、質控血清之間存在明顯的基質效應，因此對於不同方法/試劑的選擇，如選用兩步酶法試劑和質控物時要注意其反應的通用性與適用性。 TG測定的結果受取樣時個體生物學變異（CVb）和分析不精密度（CVa）的影響[3]。一般情況下，CVa相對較小（約為3%），而CVb占總變異的90%多[6]。即使嚴格按美國膽固醇教育計劃（NCEP）要求控制的個體，在2周內2次所測的TG結果差異百分比約為膽固醇的5倍，75%以上的個體在兩周內的變異大於10%。李健齋等[9]研究發現，中國人群血清TG個體間變異為28%，居所有血脂項目之首。國外資料表明，空腹2.5月的人群TG變異約25%，非空腹狀態的變異更大，日間約為6.3%～65%，月內為12.9%～34.8%，一年為12.9% ～39.9%，以上數據均為正常個體穩定飲食狀態的結果，某些病理狀態下的波動會更大。
為減少上述變異對TG測定的影響，NCEP建議受試者在兩月內分次測定，兩次間至少間隔一周，測定結果取均值。但當血脂水平遠離醫學決定水平時，則無需多次取樣。標本採集要求受檢者在前三周內不改變飲食習慣，采血前至少12h不進食，72h不飲酒。抽血後應盡快檢測，某些含有高活性LPL的標本，如用肝素治療的病人標本，TG常會過度水解。標本最好放在冰浴中，2h內分離血清。室溫放置1天TG下降達34%。Eberly等研究發現非空腹高TG血症的發生明顯多於空腹，而兩種狀態高TG血症所致冠心病的危險基本相同，因此測非空腹TG更有利於冠心病危險預測。
臨床上常見到肉眼脂血標本，這常與一些潛在的錯誤有關。其中之一是LPL水解TG時產生的「清除效應」。在用血清而非試劑作空白時，大顆粒TRL散射引起假性高基線吸收。隨著反應的進行，TG被水解，脂蛋白顆粒變小，濁度也減小，總的效應是在吸光度上升（產生NADH）的反應中，結果輕微偏低。這種誤差所佔比率較小，且只發生於高濃度TG標本中，其誤差通常是可接受的。另外，肉眼脂血標本特別是CM含量過高者，由於CM漂到樣品杯上層使標本成為多相。因此對於肉眼脂血標本，應充分混勻且盡快檢測。TG水解產生大量脂肪酸，特別是脂血標本，由於其濁度和產物的抑製作用，對分析也有影響。在反應的緩沖液中加入牛血清白蛋白或α-環式糊精可以避免上述情況。 美國的TG測定的參考系統較為完善，其推薦的決定性方法是由美國國家標准與技術研究所（NIST）建立的ID/GC/MS法，以13C3甘油三軟脂酸酯為內標，可測總甘油酯和「凈」TG，一級參考物質為NIST的SRM1595（三軟脂酸甘油酯）；參考方法為CDC的二氯甲烷-硅酸-變色酸法，一直被用作美國CDC-NHLBI血脂標准化計劃中的參考方法，該法用Supelco的三油酸酯和NIST的三軟脂酸甘油酯標准物質SRM 1595的2：1混合物作標准，測定值不僅是TG，還包括（或部分包括）甘油二酯和甘油一酯。二級參考物質有NIST的SRM1951a、CAP RM026及CDC的多種冰凍血清。此法此參考方法步驟繁瑣，實驗室間進行方法學轉移比較困難，CDC擬對其進行改進，以期在膽固醇參考方法實驗室網路（CRMLN）建立一個結合提取、水解步驟的酶法作為「指定參考方法」。
國內陳文祥等建立了高效液相色譜（HPLC）測定總甘油和游離甘油的方法，測定總甘油酯的相對不精密度小於2%，游離甘油小於4%，總甘油平均回收率100.0%，游離甘油99.7%，與ID/GC/MS法相對偏差不大於±2%。此法擬推薦為中國TG測定的參考方法。
血脂測定標准化並非要求統一測定方法，而是要求實驗室測定結果達到所制定的技術目標。對於TG測定，國內外要求不精密度（用CV表示）應不大於5%，不準確度（用偏差表示）應不大於±5%，總誤差應不大於15%。總誤差=偏差%+1.96CV（與參考血清的靶值比較）。特別值得一提的是衛生部北京老年醫學研究所血脂實驗室已於2002年3月被接納CDC的CRMLN成員（全球共12家），在血脂測定的標准化方面積累了豐富的經驗，中國TG測定的參考系統正在建立之中。

❷ 生物化學，甘油三酯分子中脂肪酸平均含碳原子數目，最後一步R基所含碳原子數公式是什麼意思呢

根據題意，圖中的脂肪分子中的脂肪酸是完全相同的而且是飽和的，所以圖中的R基都是亞甲基CH₂連接而成的長鏈，碳鏈的末端則是一個甲基。因此在計算R基中的碳原子數時，-1是除掉甲基中的一個氫原子，這樣R基中就只有亞甲基了，除以14是因為每個亞甲基的相對分子質量都是14。

❸ WS/T 463—2015 血清低密度脂蛋白膽固醇檢測簡介

目錄

• 1 拼音
• 2 英文參考
• 3 前言
• 4 1范圍
• 5 2術語和定義
• 6 3 LDLC的生物學特性和臨床意義
• 7 4分析原理
• 7.1 4.1概述
• 7.2 4.2勻相法
• 7.3 4.3間接法
• 8 5樣品採集與處理
• 8.1 5.1採用血清進行LDLC分析。
• 9 5.3樣品處理與存放應滿足以下要求：
• 10 6分析系統
• 10.1 6.1分析系統選擇
• 10.2 6.2分析系統使用
• 10.3 6.3分析系統性能指標
• 10.4 6.4分析系統性能驗證
• 11 7質量控制和保證
• 12 8結果報告
• 13 附錄A（資料性附錄）LDLC參考體系
• 13.1 A.1參考方法
• 13.2 A.2參考物質
• 13.3 A.3參考系統的應用方式及應用范圍
• 14 附錄B（資料性附錄）LDLC分析系統性能驗證
• 14.1 B.1特異性、精密度和測量范圍評價
• 14.1.1 B.1.1概述
• 14.1.2 B.1.2樣品
• 14.1.3 B.1.3對比方法
• 14.1.4 B.1.4實驗過程
• 14.1.5 B.1.5計算
• 14.1.6 B.1.6性能判斷
• 14.2 B.2正確度評價
• 15 參考文獻

1 拼音

WS/T 463—2015 xuè qīng dī mì dù zhī dàn bái dǎn gù chún jiǎn cè

2 英文參考

Measurement of serum low density lipoprotein cholesterol

ICS 11.100 C 50

中華人民共和國衛生行業標准 WS/T 463—2015《血清低密度脂蛋白膽固醇檢測》（Measurement of serum low density lipoprotein cholesterol）由中華人民共和國國家衛生和計劃生育委員會於2015年06月23日發布，自2015年12月31日起實施。

3 前言

本標准按照GB/T 1.1—2009給出的規則起草。

本標准主要起草單位：武漢大學中南醫院、北京醫院老年醫學研究所、北京醫院。本標准起草人：周新、鄭芳、陳永梅、陳文祥、王抒、董軍。

血清低密度脂蛋白膽固醇檢測

4 1范圍

本標准規定了血清低密度脂蛋白膽固醇測定及其質量保證的基本原則。

本標准適用於實配吵亂驗室的血清低密度脂蛋白膽固醇測定，也供有關體外診斷廠商參照使用。

5 2術語和定義

下列術語和定義適用於本文件。

2.1

分析系統 *** ytical system

適合對某檢驗項目在規定濃度范圍內給出分析結果的一組按規定條件使用的儀器和裝置，包括試劑和物品。

注1：對於臨床生培檔物化學檢驗，分析系統主要由按規定條件使用的儀器、試劑和校準物組成。

注2：其他標准（如GB/T 22576—2008）中的類似概念為「檢驗程序」，但檢驗程序包括更廣泛內容，對於本文件，分析系統相當於檢驗碰瞎程序的分析部分。

注3：改寫ISO/IEC導則99：2007，定義3.2。

2.2

驗證verification

提供客觀證據，考慮任何測定不確定度，說明給定事物滿足規定要求。

[ISO/IEC導則99：2007，定義2.44]

注1：本標准主要是指分析系統的驗證，即某分析系統在本實驗室的性能是否與規定性能指標或廠商提供的性能指標一致。

注2：有關概念是「確認」（validation），即「規定要求」滿足指定用途的驗證，本標準的驗證包含確認的含義。

2.3

低密度脂蛋白膽固醇Low density lipoprotein cholesterol; LDLC

應用經典的分離和定義脂蛋白的超速離心法，按密度從低到高將脂蛋白分為乳糜微粒（CM）、極低密度脂蛋白（VLDL）、中間密度脂蛋白（IDL）、低密度脂蛋白（LDL）和高密度脂蛋白（HDL）等。血清LDL是指密度1.019 kg/L～1.063 kg/L的脂蛋白，以LDL中的膽固醇（LDLC）物質的量濃度（mmol/L）表示。血清LDLC濃度的傳統單位是mg/dL，mg/dL換算為mmol/L的換算系數為0.0259（1 mmol/L1 mg/dL×0.0259）。

6 3 LDLC的生物學特性和臨床意義

我國人群血清LDLC第5百分位數和95百分位數分別約1.5 mmol/L和4.3 mmol/L。LDLC個體內生物學變異約8%，個體間生物學變異約26%。

LDLC主要用於動脈粥樣硬化性心血管病危險分析。LDLC升高是心血管病危險因素。國內外成人血脂異常防治指南都以降LDLC作為心血管病患者降脂治療的第一目標。劃分LDLC採用固定切點，LDLC<3.37mmol/L為合適水平，LDLC 3.37mmol/L～4.12mmol/L為邊緣升高，LDLC≥4.14 mmol/L為升高。

7 4分析原理

7.1 4.1概述

LDLC分析原理有多種，包括超速離心法、電泳法、色譜法，勻相法（直接法）、沉澱法、間接法（Friedewald公式計演算法）等。LDLC常規檢驗目前主要採用勻相法和間接法。

注1：我國LDLC常規檢驗日前推薦採用勻相法。

注2：本文件針對勻相法等實驗方法，間接法適用范圍見4.3。

7.2 4.2勻相法

勻相法又稱直接法，有多種方法，常見的有選擇性遮蔽法、清除法等。選擇性遮蔽法採用硫酸α環糊精和鎂離子等遮蔽CM和VLDL，用聚氧乙烯聚氧丙烯多聚醚遮蔽HDL，膽固醇酶試劑只作用於LDLC產生顯色物質。清除法先用一種表面活性劑使膽固醇酶試劑只作用於CM、VLDL、HDL的膽固醇，但不顯色，隨後用另一種表面活性劑使膽固醇酶試劑作用於LDLC產生顯色物質而被檢測。

7.3 4.3間接法

間接法又稱為Friedewald公式計演算法，Friedewald公式以VLDL組成恆定[VLDL的膽固醇（VLDLC）除以甘油三酯（TG）0.2]的假設為前提，計算公式為：LDLC總膽固醇（TC）高密度脂蛋白膽固醇（HDLC）TG/5（TG/5為按mg/dL計，以mmol/L計則為TG/2.2）。應用Friedewald公式計演算法的條件是：

a）空腹血清不含乳糜微粒；

b） TG濃度在4.52 mmol/L以下；

c）無Ⅲ型高脂血症。

Friedewald公式計演算法在TG低於250 mg/dl。（2.82 mmol/L）的情況下有一定的可靠性，但TG高於250 mg/dl。（2.82 mmol/L）時可靠性下降，TG高於400 mg/dl。（4.52mmol/L）時失去可靠性。此外由於CM含TG的比例較VLDL高，所以CM的存在也會造成LDLC的測定偏差。此法最大的優點是低成本、簡便，但不能用於TG>400 mg/dL（4.52 mmol/L）或某些異常脂蛋白血症的標本。顯然，用此公式計算LDLC的可靠性受TC、TG、HDLC三項指標測定質量的影響。

8 5樣品採集與處理

8.1 5.1採用血清進行LDLC分析。

5.2患者准備和血液樣品採集應滿足以下要求：

a）患者在採集樣品前應處於穩定代謝狀態；

b）患者在採集樣品前至少2周內保持通常飲食習慣，保持體重穩定；

c）患者在採集樣品前24 h內不進行劇烈體育運動；

d）患者在採集樣品前禁食約12 h；

e）患者在採集樣品前坐位休息至少5 min；

f）靜脈穿刺過程中止血帶使用不超過1 min。

9 5.3樣品處理與存放應滿足以下要求：

a）血液樣品保持密封，樣品管處垂直狀態，封口朝上；

b）血液樣品管輕取輕放，避免劇烈震盪，防止引起溶血；

c）血液樣品在采血後1 h～2 h內離心，分離血清，含促凝劑采血管可在更短時間內離心（參照采血管說明書）；

d）分離的血清樣品在分析前保持密封；

e）血清在室溫下的存放時間不大於4h，若需貯存4 h～48 h，應存於4℃環境，若需更長時間貯存，應置於70℃以下環境；血清不可反復凍融。

10 6分析系統

10.1 6.1分析系統選擇

6.1.1根據實驗室實際情況選擇適宜類型分析系統，主要包括儀器、試劑和校準物，若採用半自動儀器，還包括適宜的移液設備和溫育設備等。

注1：儀器主要分白動和半自動儀器，日前多數實驗室採用自動生化分析儀，小型實驗室可能採用半自動分析儀。

注2：可見下列類型分析系統：

——封閉系統，儀器、試劑和校準物來自同一廠商，供配套使用，見於部分使用白動分析儀的情況；

——開放系統，試劑和校準物來自同一廠商，供配套使用，儀器另選，見於部分使用自動分析儀的情況和使用半自動分析儀的情況；

——組合系統，儀器、試劑和校準物來自不同廠商或機構，由實驗室自己組合，見於部分使用自動和半自動分析儀的情況。

6.1.2宜盡量選用封閉系統或開放系統，必要時，可使用組合系統。

註：使用組合系統的理由，可能是有證據表明配套校準物缺乏可靠性，也可能是其他合理原因。

6.1.3宜盡量選用分析結果可溯源至公認參考系統（參見附錄A）的分析系統。

注1：美國疾病控制預防中心（CDC）膽固醇參考方法實驗室網路（CRMLN）運行LDLC分析系統溯源認證計劃，該計劃用多份（>40）患者血清將常規方法直接與參考測定程序或指定比對方法對比。CDC在其網站保持有效期內的通過認證的分析系統列表。

注2：還可以有其他溯源方式，GB/T 21415—2008對臨床檢驗量值溯源原理及要求做出說明。

10.2 6.2分析系統使用

封閉系統和開放系統，應按廠商說明使用；使用組合系統，或對分析系統做其他改變（如各種分析參數、條件或方式等），需有充足理由，並需對分析系統性能進行充分驗證（見6.4）。

10.3 6.3分析系統性能指標

分析系統應達到下列性能指標：

a）所測的分析物與LDLC定義（見2.3）一致，一般情況下不受其他血清成分的明顯干擾（特異性）；

b）分析結果的總變異系數小於4%（精密度）；

c）分析結果的偏倚在±4%范圍內（正確度）；

d）測定范圍1.2 mmol/L～9.0 mmol/L。

10.4 6.4分析系統性能驗證

任何新選用的分析系統，在用於患者樣品檢驗前，應進行性能驗證。可採用的驗證程序參見附錄B。

下列情況應驗證6.3所列全部性能：

a）採用封閉系統或開放系統，廠商未給出6.3所列之性能指標；

b）採用封閉系統或開放系統，廠商給出的性能指標不滿足6.3之要求；

c）採用組合系統或做過改變的分析系統；

d）採用封閉系統或開放系統，廠商給出6.3所列之性能指標且符合要求時，可僅驗證正確度。

11 7質量控制和保證

7.1應根據工作經驗、行業交流、科學文獻等選用性能可靠的分析系統（主要是試劑和校準物品牌）。應盡量保持使用同種分析系統，不宜隨意、經常更換分析系統。

7.2應進行內部質量控制。質控品應適宜用於脂蛋白分析，足夠均勻、穩定，濃度在醫學決定水平附近，至少兩個水平；應盡量長期保持使用同種質控品，不宜經常更換質控品；每批檢驗至少分析一次質控品。

註：有些商品生化質控品由於來源、組成、性質等原因，可能不適宜用作LDLC質控品。白制、足量、70℃以下溫度保存的新鮮冰凍血清是LDLC的良好質控品。

7.3應參加經衛生行政管理部門認定的室間質量評價機構組織的臨床檢驗室間質量評價。

12 8結果報告

應以我國法定計量單位mmol/L報告LDLC測定結果，需要時，另外給出傳統單位mg/dL結果。以mmol/L為單位的結果保留小數點後2位有效數字。檢驗報告應註明醫學決定水平，需要時，另外註明參考區間。LDLC升高的判斷，需考慮分析變異、個體內生物學變異及檢驗次數等因素。

13 附錄A（資料性附錄）LDLC參考體系

13.1 A.1參考方法

LDLC尚無國際公認的參考方法。國際影響較大的LDLC參考方法是美國疾病控制與預防中心（CDC）的超速離心／肝素錳沉澱/AK膽固醇測定法（β定量法）。此法用5 mL血清在1.006 kg/L的密度下超速離心[離心條件：40000 r/min（離心力105000g），4℃，18.5 h]，切割中部離心管，去除血清中密度小於1.006 kg/L的組分（頂部組分，主要為極低密度脂蛋白VLDL和乳糜微粒CM），將底部組分（主要為HDL和LDL，簡稱LHDL）完全轉移到5 mL容量瓶中，定容。准確吸取2 mL底部組分到試管中，用80μL肝素（5000 U/mL）和100μL氯化錳（1.0 mol/L）選擇性沉澱LHDL中的LDL，離心分離上清中的HDL。用CDC的膽固醇參考方法AK法測定LHDL和HDL中的膽固醇（LHDLC和HDLC），白LHDLC中減去HDLC得LDLC。

13.2 A.2參考物質

LDLC沒有國際公認的參考物質。美國國家標准與技術研究所（NIST）的參考物質1951b有LDLC的參考定值，定值方法為美國CDC的β定量法。我國有國家質量監督檢驗檢疫總局批準的3種冰凍人血清LDLC國家一級標准物質（GBW 09178，GBW 09179，GBW 09180）。

13.3 A.3參考系統的應用方式及應用范圍

參考系統的應用方式包括應用參考物質或應用參考測定程序。LDLC參考系統主要應用於以下方面：

a）分析系統的溯源和質量評價；

b）試劑的制備及質量評價；

c）校準物質的制備、定值及質量評價；

d）新常規方法的發展及評價；

e）室間質評計劃中的靶值確定；

f）協作研究中血脂分析的質量保證。

14 附錄B（資料性附錄）LDLC分析系統性能驗證

14.1 B.1特異性、精密度和測量范圍評價

14.1.1 B.1.1概述

採用分割樣品對比評價特異性、精密度和測量范圍，收集合適樣品，用待驗證分析系統和另一分析方法（對比方法）同時分析樣品，比較分析結果。

14.1.2 B.1.2樣品

收集至少10份病人血清樣品，濃度在測量范圍內基本均勻分布，每份血清分裝3份，形成3套樣品，密封70℃保存。

14.1.3 B.1.3對比方法

首選參考方法或指定比對方法，不可行時，可選用另種常規方法，最好是不同原理的方法，且有證據證明是性能可靠的方法，如經CRMLN認證的方法。

14.1.4 B.1.4實驗過程

上述3套樣品，分3次獨立實驗，用待驗證方法和對比方法分析LDLC。

14.1.5 B.1.5計算

B.1.5.1計算每份病人樣品待驗證方法3次分析結果的變異系數（CV），計算所有病人血清結果的平均CV。

B.1.5.2計算每份病人樣品兩種方法3次分析結果的平均值，計算每份病人血清待驗證方法結果的偏倚和絕對偏倚，計算所有病人血清結果的平均偏倚和平均絕對偏倚。

14.1.6 B.1.6性能判斷

若平均CV小於4%，平均偏倚在±4%內，則分析系統精密度、特異性和測量范圍符合要求。

14.2 B.2正確度評價

B.2.1若B.1實驗中的對比方法為參考方法或指定比對方法，B.1.6結果同時說明正確度符合要求。

B.2.2若B.1實驗中的對比方法是常規方法，用待驗證方法分析有證參考物質或其他符合要求的參考物質至少3次，計算分析結果平均值與參考物質定值的差值（偏倚），若在±4%內，正確度符合要求。

15 參考文獻

[1]WS/T 225—2002臨床化學檢驗血液標本的收集與處理

[2]GB/T 22576—2008醫學實驗室質量和能力的專用要求

[3]GB/T 21415—2008體外診斷醫療器械生物樣品中量的測量校準品和控制物質賦值的計量學溯源性

[4]Bachorik PS,Ross JW.National Cholesterol Ecation Program remendations for meas urement of lowdensity lipoprotein cholesterol:executive summary. Clin Chem,1995,41 （10）:14141420

[5]National Cholesterol Ecation Program Expert Panel. Executive summary of the third report of the National Cholesterol Ecation Program （NCEP）expert Panel on detection,evaluation, and treatment of high blood cholesterol in *** s （Alt Treatment PanelⅢ）.JAMA,2001,285:24862497

[6]中華醫學會檢驗分會血脂專家委員會，關於臨床血脂測定的建議．中華檢驗醫學雜志，2003,26:182184

[7]《中國成人血脂異常防治指南》制訂聯合委員會，中國成人血脂異常防治指南．1版．北京：人民衛生出版社，2007年

[8]王抒，陳文祥，血脂和脂蛋白及載脂蛋白檢測的標准化．中華檢驗醫學雜志，2006,29:574576

[9] Miller WG, Waymack PP, Anderson FP, et al.Performance of four homogeneous direct methods for LDLcholesterol.Clin Chem ,2002,48（3）:489498

[10]Nauck M,Warnick GR,Rifai N.Methods for measurement of LDLcholesterol:a critical asses *** ent of direct measurement by homogeneous assays versus calculation.Clin Chem,2002,48（2）:236254

[11] Friedewald WT,Levy RI,Fredrickson DS.Estimation of the concentration of lowdensity lipoprotein cholesterol in pla *** a,without use of the preparative ultracentrifuge.Clin Chem 1972;18:499502

[12]Rifai N,Warnick GR,McNamara JR,Belcher JD,Grinstead GF,Frantz ID,Jr.Measurement of lowdensitylipoprotein cholesterol in serum:a status report.Clin Chem 1992; 38:150160

[13]董軍，國漢邦，王抒，等，超速離心一高效液相色譜測定血清高密度脂蛋白和低密度脂蛋白膽固醇，中華檢驗醫學雜志，2006,29（8）: 742746

[14]Smith SJ ,Cooper GR,Myers GL,Sampson EJ.Biological variability in concentrations of se rum lipids: sources of variation among results from published studies and posite predicted values. Clin Chem.1993 J un; 39（6）:101222

[15]Carmen R.Desirable Specifications for Total Error,lmprecision, and Bias, derived from intraand interindivial biologic variation[DB/OL].Madison: Westgard QC,1999 （2008）[20091130]westgard/biodatabasel.

[16]國漢邦，李紅霞，趙海艦，等．低密度脂蛋白膽固醇測定勻相法試劑評價．臨床檢驗雜志.2009，27（6）:427430

[17] 李紅霞，國漢邦，周偉燕，等，血清高、低密度脂蛋白膽固醇標准物質的研究．現代檢驗醫學雜志.2011,26（4）:1013

• 人體體表面積計算器
• BMI指數計算及評價
• 女性安全期計算器
• 預產期計算器
• 孕期體重增長正常值
• 孕期用葯安全性分級（FDA）
• 五行八字
• 成人血壓評價
• 體溫水平評價
• 糖尿病飲食建議
• 臨床生化常用單位換算
• 基礎代謝率計算
• 補鈉計算器
• 補鐵計算器
• 處方常用拉丁文縮寫速查
• 葯代動力學常用符號速查
• 有效血漿滲透壓計算器
• 乙醇攝入量計算器

❹ 總膽固醇的計算方法

公式的具體內容為：低密度脂蛋白膽固醇（mg/dl）=總膽固醇-高密度脂蛋白膽固醇-甘油三酯/5，其中「甘油三酯/5」指的是極低密度脂蛋白膽固醇的含量。

由於直接測量低密度脂蛋白膽固醇的含量的成本過高，而總膽固醇、高密度脂蛋白膽固醇和甘油三酯這三者的檢測更為經濟實惠、簡便可行，所以該公式是根據總膽固醇、高密度脂蛋白膽固醇和甘油三酯的水平推算低密度脂蛋白膽固醇的水平，其中默認甘油三酯和極低密度脂蛋白膽固醇的比例固定為5:1。

但臨床實踐證實，該方法在低密度脂蛋白膽固醇水平較低或是甘油三酯水平較高時容易產生較大誤差，檢測結果不夠准確，常常低於真實水平。並且由於進食會影響極低密度脂蛋白膽固醇的代謝過程，代謝相關的酶的活性會發生變化，因此為了提高結果的准確性，要根據Friedewald公式法估算低密度脂蛋白膽固醇水平應要求在患者在空腹的情況下抽血。

(4)生物化學甘油三酯計算方法擴展閱讀：

總膽固醇的測定在常規的檢查中主要是以生化檢查為主，生化檢查內部包括血脂的測定，也包括總膽固醇的測定，建議患者可以在清晨空腹的狀態下體檢，一般是抽靜脈血來檢查就可以了。

膽固醇的正常指數是在3.5至6.1mmol/l之間，最為完美的指數是5.2mmol/l左右，甘油三酯則是最好在1.7mmol/l左右。如果是檢查發現體內總膽固醇水平升高了，要建議在生活中盡可能地減少膽固醇含量高的食物的攝入，比如說雞蛋黃，動物內臟等等。