紫外分光光度計的計算方法

⑴ 紫外分光光度計計算方法同吸光度、濃度有什麼關系吸光度是計算出來的嗎計算方式是不是A=abc呢

• 朗伯—比耳定律（光吸收定律）A＝lg（I/I')= a b c 或者A＝lg（I/I『)= εb c（a：吸光系數，L · g－1 · cm－1，ε：摩爾吸光系數，L·mol－1·cm－1；）

⑵ 紫外_可見分光光度法，用吸收系數法定量，公式是什麼

一、原理可見光、紫外線照射某些物質，主要是由於物質分子中價電子能級躍遷對輻射的吸收，而產生化合物的可見紫外吸收光譜。基於物質對光的選擇性吸收的特性而建立分光光度法或稱吸收光譜法的分析方法。它是以朗伯──比耳定律為基礎。1朗伯—比耳定律A=lg—-=ECLT式中A為吸收度；T為透光率；E為吸收系數，採用的表示方法是（E1％1cm），其物理意義為當溶液濃度為1%（g/ml），液層厚度為1cm時的吸收度數值；C為100ml溶液中所含被測物質的重量（按乾燥品或無水物計算），g；L為液層厚度，cm。二、使用范圍凡具有芳香環或共軛雙鍵結構的有機化合物，根據在特定吸收波長處所測得的吸收度，可用於葯品的鑒別、純度檢查及含量測定。三、儀器可見-紫外分光光度計。其應用波長范圍為200～400nm的紫外光區、400～850nm的可見光區。主要由輻射源（光源）、色散系統、檢測系統、吸收池、數據處理機、自動記錄器及顯示器等部件組成。本儀器是根據相對測量的原理工作的，即先選定某一溶劑（或空氣、試樣）作為標准（空白或稱參比）溶液，並認為它的透光率為100％（或吸收度為0），而被測的試樣透光率（或吸收度）是相對於標准溶液而言，實際上就是由出射狹縫射出的單色光，分別通過被測試樣和標准溶液，這兩個光能量之比值，就是在一定波長下對於被測試樣的透光率（或吸收度）。本儀器可精密測定具有芳香環或共軛雙鍵結構的有機化合物、有色物質或在適當條件下能與某些試劑作用生成有色物的物質。使用前應校正測定波長並按儀器說明書進行操作。四、儀器的校正1.波長的准確度試驗以儀器顯示的波長數值與單色光的實際波長值之間誤差表示，應在±1.0nm范圍內。可用儀器中氘燈的486.02nm與656.10nm譜線進行校正。2.吸收度的准確度試驗3.雜散光的試驗4.波長重現性試驗5.解析度試驗五、測定方法1.對照品比較法（1）按各品種項下的方法，分別配製供試品溶液和對照品溶液，對照品溶液中所含被測成分的量應為供試品溶液中被測成分標示量的100±10%，所用溶劑也應完全一致，在規定的波長測定供試品溶液和對照品溶液的吸收度後，按下式計算含量，即得。（2）計算式A樣×G對/稀釋倍數×100×1含量（%）=————————————--×100%A對×G樣/稀釋倍數×100×12.吸收系數法（1）按各品種項下的方法配製供試品溶液，在規定的波長處測定其吸收度，再以該品種在規定條件下的吸收系數計算含量。用本法測定時，應注意儀器的校正和檢定。（2）計算式A樣含量（%）=——————————————-×100%G樣/稀釋倍數×(E1％1cm)對×100×13.計算分光光度法採用計算分光光度法應慎重。本法有多種，使用時均應按各品種項下規定的方法進行。當吸收度處在吸收曲線的陡然上升或下降的部位測定時，波長的微小變化可能對測定結果造成顯著影響，故對照品和供試品測試條件應盡可能一致。若測定時不用對照品，如維生素A測定法，則應在測定時對儀器作仔細的校正和檢定。六、注意事項1.空白溶液與供試品溶液必須澄清，不得有渾濁。如有渾濁，應預先過濾，並棄去初濾液。2.測定時，除另有規定外，應以配製供試品溶液的同瓶溶劑為空白對照，採用1cm的石英吸收池。3.在規定的吸收峰波長±2nm以內測試幾個點的吸收度，以核對供試品的吸收峰波長位置是否正確，除另有規定外，吸收峰波長應在該品種項下規定的波長±2nm以內；否則應考慮該試樣的真偽、純度以及儀器波長的准確度，並以吸收度最大的波長作為測定波長。4.一般供試品溶液的吸收度讀數，以在0.3～0.7之間的誤差較小。5.吸收池應選擇配對，否則要引入測定誤差。

⑶ 紫外光度法

方法提要

在紫外光譜區，硝酸根有強烈的吸收，其吸光度與硝酸根的濃度呈正比。在波長210～220nm處，可測量其吸光度。水中溶解的有機物在波長220nm及275nm處均有吸收，而硝酸根在275nm處沒有吸收。這樣，需在275nm處測定硝酸根的吸光度進行校正。

方法適用於地下水中硝酸根的測定。最佳測定范圍為0.2～20mg/L。

儀器和裝置

紫外分光光度計。

石英比色皿。

試劑

鹽酸。

氨基磺酸銨溶液(50g/L)取5g氨基磺酸銨溶於100mL蒸餾水中。

硝酸根標准儲備溶液ρ(NO^-₃)=100mg/L稱取0.1631g在105～110℃滾梁烘乾1h的硝酸鉀(KNO₃)溶於蒸餾水中，定容至1000mL。

硝酸根標准溶液ρ(NO^-₃)=10.0mg/L分取10.0mL硝酸根標准儲備溶液，以水稀釋至l00mL容量瓶中。

校準曲線

分取含硝酸根0μg、10μg、20μg、50μg、100μg、…1000μg的硝酸根標准溶液(10mg/L)於一系列100mL容量瓶中，用蒸餾水稀釋至50mL左右，加入1mLlmol/LHCl，搖勻。加入3～5mL氨基磺酸銨溶液，用蒸餾水稀釋至刻度，搖勻。在分光光度計上，於波長210nm處，用1cm石英比色杯，以試劑空白作參比，測量吸光度。殲掘以硝酸根含量為橫坐標，吸光度為縱坐標，繪制校準曲線。

分析步驟

取水樣50.0mL於100mL容量瓶中，按校準曲線操作步驟進行測定。於210nm處測定後，調整波長至275nm，仍以試劑空白作參比，再一次測量吸光度。

按下式計算水樣中硝酸根的質量濃度:

岩石礦物分析第四分冊資源與環境調查分析技術

以硝酸鹽氮表示的質量濃度:

岩石礦物分析第四分冊資源與環境調查分析技術

式中:ρ(NO^-₃)為水樣中硝酸根的質量濃度，mg/L;A_NO-3為減去有機物的吸收值後，從校準曲線(λ=210nm)上查得的硝酸根量，μg;V為所取水氏備核樣體積，mL。0.226為硝酸根換算為氮的系數。

⑷ 紫外-可見分光光度計

紫外——可見分光光度計用於定量分析的基本方法是：用選定波長的單色光照射被測物質的溶液，測量它的吸光度，再根據吸光度計算被測組分的含量。
測量的理論依據是「光吸收定律」，即朗伯——比耳定律，當一適當波長的單色光照射吸光物質的溶液時，其吸光度與吸光物質濃度和透光液層厚度的乘積成正比。稱為朗伯—比樂定律。可表示為：
A=Kbc
式中，A為吸光度，無單位。B為液層厚度，即通常所採用的吸收池厚度，單位常取cm。c為溶液濃度，單位也不固定，可為mol/L，也可為g/L、mg/mL等。K為比例常數，也稱吸收系數。K與多種因素有關，如入射光波長、溫度、溶劑性質及吸光物質的性質等，若這些因素中除吸光物質外，其它都固定不變，則K值就只與吸光物質有關。若溶液濃度以mol/L為單位，透光度層厚度以cm為單位，K就用符號「ξ」表示，稱為「摩爾吸收系數」。
以上公式可用於單組份測定。若測定多組分，可利用吸光度的加和性，但前提條件是，各吸光物質的吸光質點之間相互不發生化學反應。即：
A=A1+A2+……An
使用儀器時，根據所測定物質選擇適當的入射光波長，參比溶液，顯色劑、吸光度值范圍，濃度范圍等等，依具體情況而定。

⑸ 紫外-可見光分光光度計 原理，基本構造，使用方法，注意事項及應用

一、分光光度計的基本工作原理
隨著現代科技的不斷發展和進步，現代分光光度法的測試手段和方法都在不斷改進，但最根本的依據仍然建立在朗伯-比爾定律的基礎之上。

A=KLC

式中：
A-為被測物在給定波長的需光吸光度值
K-為一系數，稱為溶液的吸收系數（與入射光波長及被測物質的特性有關）
L-為被測物質的厚度（一般與比色池的厚度有關）
C-為被測物質的濃度
由上式可以看出，被測物質對單色光的吸光度與被測物質的濃度成正比。
實際測試時，單色光通過被測物質達到光電接收器，由光電倍增管或光電池轉換成光電流，而光電流的強弱決定了吸光度值A的大小。假定通過參比樣品的光電流為I。，而通過待測樣品的光電流為I，則兩者之比設定為τ，也稱透射比（或以T%表示，稱為透過率）。

則：τ=I/I。×100%

朗伯-比爾定律的貢獻就是發現了透射比的負對數值（也就是吸光度A）的變化與物質的濃度的變化呈正比關系。

即：A=-lgτ或lg（I/I。）=KCL

同時，不同的物質對不同波長的單色光呈現出不同的吸光度值，這一變化特徵也就是分光光度法用於物質的定性定量分析的理論基礎。
基於上述原理，你可以知道無論以往的儀器還是現代的儀器，其最基本的工作要求就是為了能准確獲得物質（或稱樣品）在某一波長的透射比或在某一個光譜波長范圍的吸光度變化特性（具體說光譜特性譜圖）。雙光束分光光度計，同時測量參比樣品和待測樣品。由於參比樣品和待測樣品是同時測量，所以任何由光源帶來的影響都被抵消扣除了，從方法上保
二、儀器的基本構造：不同檔次進口或國產的儀器由三大部分組成：1、微機系統（提供數據運算放大，信號處理、計算機連接，自動波長設定等等）2、光學分光系統（通過光路分光使氘燈鎢燈發出的復合光變為單色光）；3、穩壓穩定系統（為氘燈鎢燈和微機板提供穩壓電源）
三、儀器注意事項：
儀器的使用環境
在你了解儀器的工作原理和性能後，你可以安排開機使用的前期工作。首先，必須為儀器建立一個合適的工作環境。由於任何儀器自身的抗干擾能力是有限的，因此，必須注意儀器工作環境的具體要求，盡量不要讓儀器工作在環境條件的極限邊緣。

2.2.1 溫度與濕度
儀器應在5℃~35℃之間的環境溫度條件下工作，但溫度過低儀器的穩定時間較長，溫度偏高時必須注意儀器的通風條件，同時也考慮至樣品的揮發性所引起的測量誤差。而儀器的光學件對於環境濕度的敏感性較高，在潮濕地區或相對濕度>85%用戶必須考慮去濕措施，以確保儀器光學元器件的壽命。

2.2.2 工作電源
UV1901儀器可在220V±22V、50Hz±1Hz的電源條件下工作，也可在110V±11V、 60Hz±1Hz電源條件下工作。一般出廠設置在220V條件下，若你的地區電源為110V，請找到儀器後部，靠電源插座處有一個電壓變換開關，把開關撥向指示110V即可
由於外部電源的質量對儀器的工作穩定性有極大關系，所以如果你所屬地區的外部交流電壓不很穩定，或者電網上的大功率動力性電氣設備很多，建議你使用一個交流穩壓設備（功率1000W以上），以防止「電網污染」對儀器的影響。當然，電源插座也必須符合國家最新標准，接觸必須良好，否則儀器的工作無法正常。

2.2.3 接地線
由於變壓器的交流感應，若無接地良好的地線的話，儀器的金屬部位可能帶電。而且儀器接地不良就沒有良好的屏蔽電位，會造成儀器輸出信號不穩，數據顯示的跳動率較大。因此，建議你在使用前對電源的接地線很好的檢查一下，必須符合有關電工標准。

注意！ 電源中的零線不能與地線接在一起！
三、儀器的使用方法，每個廠家因為原件不同所以方法也不同

2-2
2.2.4 整機的放置
儀器必須放在平穩且周圍無明顯震動源的工作台上。儀器若靠牆放置注意離牆必須大於15cm，以保證通風散熱，同時儀器安放處也應避免強烈的陽光直

⑹ 紫外可見分光光度計怎麼由吸光度計算含量

根據朗伯比爾定律得出：當一束平行單色光通過一定液層厚度的有色溶液時，由於溶質吸收了光能，光的強度就會減弱。溶液濃度越大，液層越厚，入射光越強，光被吸收的就越多。

如果用公式表示的話，就可以表示為表示為：A=E*C*L（A為吸光度，C為溶液濃度，L為液層厚度）。E是物質在一定波長下的特徵

常數，與對光吸收的靈敏度呈正相關。該公式適用於有色溶液和均勻非散射的吸光物質（如：固、液、氣）。在進行含量測定的時候，我們往往選擇被測物質的最大吸收波長來作為使用波長，以防止外界干擾。於是，我們可以根據公式可以計算測定管中物質的含量，過程如下：

A1=E1*C1*L1 A2=E2*C2*L2

A1/(E1*C1)=A2/(E2*C2)

由於標准液和待測液中的物質相同，故E1=E2∴C2=(A2/A1)*C1因為標准液和待測液的體積相等，物質含量m=C*V*M（M為相對分子質量，V為體積）故m2=（A2/A1)*m1所以溶液中物質的含量m2。

(6)紫外分光光度計的計算方法擴展閱讀：

在分光光度分析中，比爾定律是一個有限的定律，其成立條件是待測物為均一的稀溶液、氣體等，無溶質、溶劑及懸濁物引起的散射；入射光為單色平行光。

導致偏離朗伯-比爾定律的原因很多，但基本上可分為物理和化學兩個方面。物理方面主要是入射光的單色性不純所造成的；化學方面主要是由於溶液本身化學變化造成的。

比爾定律在有化學因素影響時不成立。解離、締合、生成絡合物或溶劑化等會對比爾定律產生偏離。離解是偏離朗伯-比爾定律的主要化學因素。溶液濃度的改變，離解程度也會發生變化，吸光度與濃度的比例關系便發生變化，導致偏離朗伯-比爾定律。

溶液中有色質點的聚合與締合，形成新的化合物或互變異構等化學變化以及某些有色物質在光照下的化學分解、自身的氧化還原、干擾離子和顯色劑的作用等，都對遵守朗伯-比爾定律產生不良影響。

來自出射狹縫的光，其光譜帶寬度大於吸收光譜帶時，則投射在試樣上的光就有非吸收。這不僅會導致靈敏度的下降，而且使校正曲線彎向橫坐標軸，偏離朗伯-比爾定律。非吸收光越強，對測定靈敏度影響就越嚴重。並且隨著被測試樣濃度的增加，非吸收光的影響增大。當吸收很小時，非吸收光的影響可忽略不計。

⑺ 紫外可見分光光度計的用法

752紫外可見分光光度計
儀器的工作原理
分光光度計的基本原理是溶液中的物質在光的照射激發下，產生了對光的

吸收效應，物質對光的吸收是具有選擇性的。各種不同的物質都具有其各自的

吸收光譜，因此當某單色光通過溶液時，其能量就會被吸收而減弱，光能量減

弱的程度和物質的濃度有一定的比例關系，也即符合於比色原理—一比耳定律。
τ=I/Io
log I/Io=KCL
A= KCL
從以上公式可以看出，當入射光、吸收系數和溶液的光徑長度不變時．透過
的光是根據溶液的濃度而變化的，752紫外可見分光光度計的基本原理是根
據上述物理光學現象而設計的。
儀器的安裝、使用
安裝

1 儀器在安裝使用前應對儀器的安全性進行檢查，電源電壓是否正常，接

地線是否牢固可靠，在得到確認後方和接通電源使用。

2 儀器經過運輸和搬運等原因，會影響波長准確度，應進行儀器調校後使用。

使用：儀器使用前需開機預熱30min。

本儀器鍵盤共有4個鍵，分別為； 1 A /τ/C/F

1SD

2 ▽／0％

3∆／100％

4 A /τ/C/F鍵：每按此鍵來切換A、τ 、C、F之間的值。

A——吸光度（Absorbance）

T——透射比（Trans）

C——濃度（conc）

F——斜率（Factor）

(2)F值 通過按鍵輸入（後面介紹如何設置）

5SD鍵：該鍵具有2個功能

a)用於RS232串列口和計算機傳輸數據（單向傳輸數據，儀器發向計算

機）。

b)當處於F狀態時，具有確認的功能，即確認當前的F值，並自動轉到C，

計算當前的C值（C=F*A）。

6 ▽／0％鍵：該鍵具有2個功能

a）調零；只有在τ狀態時有效，打開樣品室蓋，按鍵後應顯示0.000。

b）下降鍵：只有在F狀態時有效，按本鍵F值會自動減1，如果按住本

鍵不放，目動減1會加快速度；如果F值為0後，再按鍵它會自動變為1999。

而按鍵開始自動減1。

7 ∆／100％鍵；該鍵具有2個功能

a）只有在A、τ狀態時有效，關閉樣品室蓋，按鍵後應顯示0.000、100.0。

b）上升鍵：只有在F狀態時有效，按本鍵F值會自動加1，如果按住本

鍵不放，自動加1會加快速度，如果F值為1999後，再按鍵它會自動

變為0，再往鍵開始自動加l。

例如：設置斜率為1500。

方法一

T）按 A／τ／C／F鍵切換到 F狀態。

b）如果當前F值為1000，則按∆／100%鍵，直到F值為1500。

C）再按 SD鍵，表示當前的 F值為 1500，然後自動回到 C狀態，假如所

測的 A值為 0．234，則此時顯示 C值為 0351。

方法二

a）按A／τ／C／F鍵切換到F狀態。

b）如果當前的 F值為 1000，則按∆／100%鍵，直到F值為 1500、再按 A／τ／C／F鍵切換到C狀態，假如所測的A值為0.224，則此時顯示C值為0351。