㈠ 阿司匹林含量測定的方法及優缺點
（一）酸鹼滴定法1. 直接滴定法 阿司匹林結構中的游離羧基，可採用鹼滴定液直接滴定。各國葯典測定雙水楊酯的含量也採用直接滴定法。方法：取本品約0.4g，精密稱定，加中性乙醇（對酚酞指示液顯中性）20ml，溶解後，加酚酞指示液3滴，用氫氧化鈉滴定液（0.1mol/L）滴定。每1ml的氫氧化鈉滴定液（0.1mol/L）相當於18.02mg的C9H8O4。
2. 水解後剩餘滴定法利用阿司匹林酯結構在鹼性溶液中易於水解的性質，加入定量過量的氫氧化鈉滴定液，加熱使酯水解，剩餘的鹼用酸溶液回滴。USP(23)方法：取本品約1.5g，精密稱定，加入氫氧化鈉滴定液（0.5mol/L）50.0ml，混合，緩緩煮沸10min，放冷，加酚酞指示液，用硫酸滴定液（0.25mol/L）滴定剩餘的氫氧化鈉，並將滴定結果用空白試驗校正。每1ml的氫氧化鈉滴定液（0.5mol/L）相當於45.04mg的C9H8O4。
3. 兩步滴定法 用於阿司匹林片和阿司匹林腸溶片的含量測定。片劑中除了加入少量酒石酸或枸櫞酸穩定劑外，制劑工藝過程中又可能有水解產物（水楊酸、醋酸）產生，因此不能採用直接滴定法，而採用先中和與供試品共存的酸，再將阿司匹林在鹼性條件下水解後測定的兩步滴定法。中和 精密稱取片粉適量（約相當於阿司匹林0.3g），加入中性乙醇溶解後，以酚酞為指示劑，滴加氫氧化鈉滴定液（0.1mol/L）至溶液顯粉紅色。此時中和了存在的游離酸，阿司匹林也同時成為鈉鹽。水解與測定 在中和後的供試品溶液中，加入定量過量的氫氧化鈉滴定液（0.1mol/L）40 ml，置水浴上加熱使酯結構水解，迅速放冷至室溫，再用硫酸滴定液(0.05mol/L）滴定剩餘的鹼，並將滴定的結果用空白試驗校正。含量計算 ASA的標示量百分含量＝ 式中：V0為空白試驗消耗硫酸量（ml）；V為剩餘滴定時消耗硫酸量（ml）；M為硫酸滴定液的濃度（mol/L）；W為供試品片粉量（g）；為平均片重（g）。（二）亞硝酸鈉滴定法
（三）高效液相色譜法為了分離原料葯和制劑中的雜質、輔料以及穩定劑等，採用高效液相色譜法測定阿司匹林栓劑；USP(23)用於測定對氨基水楊酸鈉及其片劑，阿司匹林片劑，長效與緩沖片劑，緩釋膠囊等。
（四）柱分配色譜－紫外分光光度法阿司匹林制劑的含量測定方法除了兩步滴定法和高效液相色譜法外，USP(23)測定阿司匹林膠囊的含量採用柱分配色譜-紫外分光光度法，經柱色譜分離後，可同時定量測定阿司匹林和水楊酸。柱分配色譜法是一種簡便快速的色譜方法，盡管其解析度低於氣相色譜法、高效液相色譜法和薄層色譜法，但定量准確度較薄層色譜法要高，可以分離較大量的樣品，分離出的組分不僅可以用光譜法定量，有時也可用重量法等經典方法定量。柱分配色譜法也常用作分離凈化方法。1.水楊酸的限量測定原理：水楊酸與三氯化鐵-尿素試劑生成紫色水楊酸鐵配位化合物，保留於硅藻土色譜柱上，用氯仿洗脫阿司匹林，棄去洗脫液；再以冰醋酸-水飽和乙醚洗脫 ，紫色配位化合物解離，水楊酸游離出來，繼而被氯仿洗脫。於306nm波長處測定吸收度。方法：色譜柱的制備 於玻璃柱（20 cm×2.5cm）下端塞入少量玻棉，裝入兩種填充劑，下層為硅藻土1g和磷酸液（5mol/L）0.5ml的混合物，上層為硅藻土3g和新制三氯化鐵－尿素試劑 [取尿素60g溶於三氯化鐵液(6�0�3 10)8ml和鹽酸液(0.05mol/L)42ml混合液中，必要時用鹽酸液調節溶液至pH3.2。]2ml的混合物。對照品溶液的制備取水楊酸對照品配成75m g/ml氯仿溶液為貯備液。供試品溶液的制備 取膠囊內容物適量（相當於阿司匹林100mg），精密稱定，加入氯仿10ml，攪拌3分鍾後，轉移入色譜柱填充劑上，並用氯仿數毫升洗凈容器後，一並移入柱內。用氯仿50ml分數次洗脫，並棄去之。再用冰醋酸－水飽和乙醚（1�0�3 10）10ml洗脫水楊酸，收集洗脫液於已盛有甲醇10 ml，鹽酸2滴的50ml量瓶中，繼用氯仿30ml洗脫，並用氯仿稀釋至刻度。測定法於306nm波長處，1cm吸收池中，以配製對照品溶液的溶劑為空白，測定對照品溶液和供試品溶液的吸收度，後者不得超過前者的吸收度，即按阿司匹林標示量計,允許水楊酸限量為0.75％。
（1）洗脫時，若有三氯化鐵被洗下，則使洗脫液帶黃色，影響測定結果，故在色譜柱下層加入拌有磷酸的硅藻土，與Fe3+生成不溶於洗脫液的磷酸鐵而避免干擾。
（2）在洗脫SA時，可能有尿素被洗下，故接收液中加入適量鹽酸保持酸性。
（3）制備供試液以及整個操作宜快，避免ASA水解。
（4）若紫色環譜帶擴散，可能樣品量大，則應重新填裝色譜柱。
2. 含量測定原理：在硅藻土－碳酸氫鈉色譜柱中，阿司匹林及水楊酸成鈉鹽保留於柱上，先用氯仿洗脫除去中性或鹼性雜質，再用醋酸酸化，使阿司匹林游離，被氯仿洗脫後測得其含量。方法：色譜柱的制備 填充劑為硅藻土3g和新制碳酸氫鈉液（1�0�3 12）2ml的混合物。以下測定中所用氯仿均應在臨用前用水飽和。對照品溶液濃度為50m g/ml，冰醋酸－氯仿(1�0�3 100)液為溶劑。供試品溶液的制備 取膠囊20粒，盡可能完全傾出內容物，精密稱定，研細，混勻；取適量細粉（相當於阿司匹林50mg)，精密稱定，置於已盛有鹽酸甲醇液（1�0�3 50）1ml的50ml量瓶中，加氯仿至刻度，混勻。精密量取此液5ml轉入色譜柱填充劑上，用5ml、25ml氯仿相繼洗脫後棄去，立即用冰醋酸－氯仿（1�0�3 10）液10ml洗脫，再用冰醋酸－氯仿（1�0�3 100）液85ml洗脫，將洗脫液收集於100ml量瓶中，並用後者溶劑稀釋至刻度，混勻。測定法 於280nm波長處，1cm吸收池中，以氯仿為空白，立即測定對照品溶液和供試品溶液的吸收度，用下式計算所取膠囊內容物細粉中含有阿司匹林的量（mg）：所取膠囊細粉中C9H8O4(mg )＝C（AU/AS）式中C為阿司匹林對照品溶液濃度（m g/ml）；AU和AS分別為供試品溶液和對照品溶液的吸收度。柱分配色譜－紫外分光光度法不需特殊儀器，結果重現性較好，但操作較繁瑣。
五、血清中阿司匹林（ASA）和水楊酸（SA）濃度的HPLC測定法近年來，臨床上已經確認，低劑量服用阿司匹林可抑制血小板過度凝集的疾病，如心肌梗塞和手術後的深部靜脈血栓形成；並有預防缺血性腦血管病的作用，由於ASA的服用劑量小，而且易水解，因此可採用反相高效液相色譜法快速、靈敏地同時測定人血清中ASA和SA的濃度。
㈡ 化學設計實驗,測量阿斯匹林含量.
實驗原理
阿司匹林結構中有一個羧基，呈酸性。在25℃時Ka=3.27×10-4,可用NaOH標准溶液在乙醇溶液中直接滴定測其含量。計量點時，溶液呈微鹼性，可選用酚酞作指示劑。
器材和葯品
1.器材
天平(0.1mg)，鹼式滴定管(50mL)，錐形瓶(250mL)，燒杯等。
2.葯品
中性乙醇(取需要量的乙醇，加酚酞指示劑2滴，用0.1mol·L-1的NaOH滴定至剛顯粉紅色)，NaOH(A.R.)，鄰苯二甲酸氫鉀(基準試劑)，酚酞指示劑(0.2%乙醇溶液)、阿司匹林樣品。
實驗方法
一、NaOH標准溶液的配製與標定
二、阿司匹林含量測定
准確稱取約0.4g阿司匹林三份，分別置於250mL錐形瓶中，加約10℃的中性乙醇20mL，溶解後，加酚酞指示液2滴，在不超過10℃溫度下，用0.1mol·L-1的NaOH標准溶液滴定至溶液呈淺粉紅色即為終點。
阿司匹林含量計算:取三次測定的平均值
㈢ 阿司匹林片的分析
1 了解溶出度測定的方法與原理；
2 熟悉片劑分析的項目與方法;
3 掌握阿司匹林鑒定試驗的原理及與葯物結構的關系;
4 掌握本實驗中葯物特殊雜質的來源和檢查原理；
5 掌握兩步滴定法測定阿司匹林片含量的原理與操作，及容量分析法測定片劑含量的計算方法。
【實驗原理】
1. 葯物
本品為白色片；遇濕氣易變質。本品含阿司匹林應為標示量的95.0%~105.0%。
2.原理：
⑴ 鑒別
1 三氯化鐵反應：水楊酸及其鹽在中性或弱酸性條件下，與三氯化鐵試液反應，生成紫堇色配位化合物。阿司匹林加熱水解生成水楊酸，可用三氯化鐵反應鑒別。
2 水解反應：阿司匹林與碳酸鈉試液加熱，酯健水解，得水楊酸鈉和醋酸鈉，加過量稀硫酸酸化後，生成白色水楊酸沉澱，並發生醋酸的臭氣，因此可用水解反應鑒別。
⑵ 檢查
阿司匹林中游離水楊酸的檢查
a. 雜質來源 游離水楊酸為阿司匹林生產中未反應的原料或貯存過程中的水解產物。
b. 檢查方法 阿司匹林無游離酚羥基，不與高鐵鹽溶液作用，而水楊酸則可與之反應生成紫堇色，此種方法稱之對照法，極為靈敏，可檢出1ug的游離水楊酸。
⑵ 含量測定
阿司匹林分子結構中有酯健，易水解生成水楊酸和醋酸，片劑中為防止酯健水解加入少量酒石酸或枸櫞酸做穩定劑，因此在片劑中有酸性雜質，含量測定時為消除酸性雜質干擾，採用兩步滴定法。
第一步 中和，消除酸性雜質〔酸性附加劑和降解產物〕的干擾
第二步 水解後剩餘滴定
【實驗儀器與試劑】
一儀器
試管，納氏比色管，溶出度測定儀，紫外-可見分光光度計，10~25ml注射器，0.8um微孔濾膜，酸式滴定管，容量瓶，移液管，漏斗。
二試劑
1. 酚酞指示液
取酚酞1g，加乙醇100ml使溶解，既得。變色范圍：pH8.3~10.0〔無色紅色〕。
2. 稀硫酸鐵銨溶液
取鹽酸溶液〔9100〕1ml，加硫酸鐵銨指示液2ml後，再加水適量使成100ml，搖勻，既得。
3. 水楊酸標准溶液
精密稱取水楊酸0.1g，加水溶解後，加冰醋酸1ml，搖勻，再加水使成1000ml，搖勻，既得。
4. 中性乙醇
中性乙醇的「中性」是對中和法所用指示劑而言的。中和法用酚酞為指示劑時，中性乙醇的製取方法為：取適量乙醇，加入酚酞指示液3滴，用氫氧化鈉滴定液〔0.1mol/L〕滴定至淡紅色，既得。
5. 三氯化鐵試液
取三氯化鐵9g，加水使溶解成100ml，既得。
6.碳酸鈉試液
取一水合碳酸鈉12.5g或無水碳酸鈉10.5g，加水使溶解成100ml，既得。
7.稀硫酸
取硫酸57ml，加水稀釋至1000ml，既得。本液含硫酸應為9.5%~10.5%。
阿司匹林、三氯甲烷、無水乙醇
三滴定液的配製與標定
1.氫氧化鈉滴定液〔0.1mol/L〕
⑴配製 取氫氧化鈉適量，加水振搖使溶解成飽和溶液，冷卻後，置聚乙烯塑料瓶中，靜置數日使澄清。取澄清的氫氧化鈉飽和溶液5.6ml，加新沸過的冷水使成1000ml，搖勻。
⑵標定 取在105℃乾燥至恆重的基準鄰苯二甲酸氫鉀約0.6g，精密陳定，加新沸過的冷水50ml，振搖，使其盡量溶解；加酚酞指示液2滴，用本液滴定；在接近終點時，應使鄰苯二甲酸氫鉀完全溶解，滴定至溶液顯粉紅色。每1ml氫氧化鈉滴定液〔0.1mol/L〕相當於20.42mg的鄰苯二甲酸氫鉀。根據本液的消耗量與鄰苯二甲酸氫鉀的取用量，算出本液的濃度，既得。
2.硫酸滴定液〔0.05mol/L〕
⑴配製 取硫酸3.0ml，緩緩注入適量水中，冷卻至室溫，加水稀釋至1000ml，搖勻。
⑵標定 取在270~300℃乾燥至恆重的基準無水碳酸鈉約0.15g，精密稱定，加水50ml使溶解，加甲基-溴甲酚綠混合指示液10滴，用本液滴定至溶液由綠色轉變為紫紅色時，煮沸2min，冷卻至室溫，繼續滴定至溶液由綠色變為暗紫色。每1ml硫酸滴定液〔0.05mol/L〕相當於5.30mg的無水碳酸鈉。根據本液的消耗量與無水碳酸鈉的取用量，算出本液的濃度，既得。
㈣ 阿司匹林的含量怎麼測定
阿司匹林含量測定綜述 08葯學1班：冉賢飛
阿司匹林片為常用的解熱、鎮痛葯，收載於(中國葯典2000年版)二部。原含量測定方法為酸、鹼中和滴定法。目前市場上流通的解熱、鎮痛葯物中，含阿司匹林或以阿司匹林為主葯的較多。除了中國葯典的原含量測定方法以外，針對各個劑型有多種含量測定的方法。如採用高效液相法測定其含量，可消除其他含有酸、鹼的物質對其測定的干擾，可更有效的控制制劑的質量。方法操作簡便，專一性強，結果准確。也有用數學模型進行計算的如近紅外漫反射技術，其原理是根據標樣集中樣品的近紅外光譜運用化學計量學方法建立光譜特徵值(如吸光度)與待測成分之間的數學關系(簡稱數學模型)
1．阿司匹林及阿司匹林制劑的含量測定
阿司匹林及阿司匹林制劑的含量測定有多種方法，其中包括葯典所載的酸、鹼中和滴定法
及紫外分光光度法，高效液相法等。
1．1阿司匹林酸鹼滴定法：
直接滴定：方法：取本品0。4g，精密稱定，加中性乙醇20ml，溶解，加酚酞指示液3d，用氫氧化鈉滴定液（0.1mol/l）滴定。每1ml滴定液相當於18。02mg 的C9H8O4
水解後剩餘滴定：方法：取本品1.5g，精密稱定加氫氧化鈉滴定液（0.5mol/l）50.0ml，混合，緩緩煮沸10min，放冷，加酚酞指示液，用硫酸滴定液（0.25mol/l）滴定剩餘的氫氧化鈉。
兩步滴定法：取本品10片，精密稱定，研細，精密稱取片粉適量（約相當於阿司匹林），加中性乙醇20ml,振搖使阿司匹林溶解，加酚酞指示液3d，滴加氫氧化鈉滴定液（0.1mol/l）至溶液顯粉紅色。加定量過量的氫氧化鈉滴定液（0.1mol/l）40ml，置水浴上加熱15min並時時振搖，迅速放冷至室溫，用硫酸滴定液（0.05mol/l）滴定剩餘的鹼。根據消耗的滴定液體積及滴定度計算含量
1．2阿司匹林制劑的電極法測定
儀器與試劑：電極電位和溶液酸度測試均使用pHs—loC型數字式酸度離子計；參比電極為232型飽和甘汞電極；試劑均為分析純，實驗用水為去離子水經高錳酸鉀處理後蒸餾而得。
電極制備：將載體物質三苄基錫辛酸酯20mgl聚氯乙烯（PVC）0．33g和增塑劑鄰硝基苯基辛醚o．65g溶解於四氫呋喃（THF）3g中，攪拌澄清後將其傾倒於40 mm×40 mm的水平玻璃板上。待THF揮發完後(約需l 2h)即得到具有彈性的PVC膜。用打孔器切下直徑10 mm的圓片並用含5％PVC的THF溶液粘於PVC電極桿端,放置數小時,晾乾後電極桿內充以0.1mol／L的水楊酸鈉溶液作為內參比溶液並以Ag／AgCl絲作為內參比電極導出至離子計。電極使用前需於0.01mol／l水楊酸鈉溶液中浸泡2h進行活化處理。電極及備用膜長期不使用時可洗凈後．置於氮氣氛圍下保存。在此條件保存，電極的各項性能指標至少可於5個月內維持穩定。
阿司匹林制劑的分析：待測樣品的處理： 阿司匹林易水解得到水楊酸根離子，且反應定量。因此，通過對水楊酸根離子的測定即可得出樣品中的阿司匹林含量。阿司匹林片(A)和復方阿司匹林片（B）均處理如下：將適量葯品(10片)研製成粉狀，精密稱取1—1．5g．在0.5mol／L NaOH溶液25m1中加熱迴流1h後過濾，定容至250 ml。吸取lOm1濾液，用稀硫酸調至pH 5．5，再用PH 5．5的磷酸鹽緩沖液定容至100 mI作為待瀾液。使用所配電極通過標准溶液法和樣品加入法．分別測定葯品A和B經前述處理後所得試樣中的水楊酸根離子濃度，通過換算得出葯劑中阿司匹林的含量
1．3 HPLC法測定阿司匹林片的含量
儀器與試葯 儀器：高效液相色譜儀；CLASS—LC工作站。色譜柱：ODS C18色譜柱(150mm x 4．6mm，填料：Kromasil，粒度：5um)。 試葯 阿司匹林對照品，甲醇(色譜純試劑)，冰醋酸、鹽酸(分析純試劑)。
取本品20片，精密稱定，研細，精密稱取適量(約相當於阿司匹林10mg)，置100m1量瓶中，加0．1mol/l鹽酸溶液適量，超聲使阿司匹林溶解，放冷至室溫，加0．1mol/l鹽酸溶液稀釋至刻度，搖勻，濾過，精密量取續濾液5m1，置25m1量瓶中，加0．1mol/l鹽酸溶液稀釋至刻度，格勻，取20ul注入液相色譜儀，記錄色譜圖。另取阿司匹林對照品適量，加0．1mol/l鹽酸溶液溶解並稀釋製成每l m1中約含阿司匹林20ul的溶液，取20ul同法測定。按外標法以峰面積計算，即得。
1．4動力學光度法測定痕量乙醯水楊酸
原理：碘對Ce4+和As的氧化還原反應有明顯的催化作用，乙醯水楊酸和碘容易發生取代反應，使碘的濃度降低，導致碘的催化作用減弱，由此建立動力學光度法測定痕量乙配水楊酸的新方法。
儀器和試劑：721型分光光度計；PHS—3C酸度計；超級恆溫水浴。0．01mol/lCe(SO4)2 0．013mol/L AS2O3，5mol/l H2S04 , 5mg/l KI用時稀釋至0．25mg/l ;150mg/l乙醯水楊酸標准溶液用時稀釋至所需濃度；5％醋酸馬錢子鹼；實驗用水為二次蒸餾水。
實驗方法:於一系列25m1比色管中准確加入0．25mg/lKI溶液1．0m1，5mol/l H2S04溶液1．25m1，0．013mol/L AS2O3溶液1.0ml，乙酸水楊酸標准溶液(或樣品溶液)，加蒸餾水至25m1刻度線。搖勻並放人35土0．1度的水浴中，恆溫後加入0.01mol/l Ce〔S04)2 1.0ml，立即搖勻，迅速放回水浴中。反應10min後，加入0.5mol/l,0.5％的醋酸馬錢子鹼終止反應並與Ce4+—顯色，置於沸水浴中煮沸3min，取出冷卻至室溫。用1cm比色皿，在波長520nm處，以蒸餾水為參比，測定吸光度A。
2．以阿司匹林為主葯的含量測定
雖然其成分組成有差異，但大多仍是根據阿司匹林的化學或色譜性質加以分離並測定其含量。
2．1反相高效法相色譜法測定阿司匹林可待因片中阿司匹林含量
儀器和試劑：Hp-1050液相色譜儀及UV檢測器，HP3396積分儀。磷酸可待因對照品、阿司匹林對照品 。甲醇、醋酸鈉、冰醋酸均為分析純試劑，阿司匹林磷酸可待因復方制劑(試製品)。
液相色譜條件：色譜柱ODS C18(10mm，300mm×4mm) 流動相：甲醇—0．03mol/L—l醋酸鈉(冰醋酸調pH＝3．5)(1：2．5)；檢測波長：280nm；流速：1ml/min.
測定方法
混合對照品溶液配製 准確稱取在105℃乾燥至恆重的磷酸可待因對照品適量。用水溶解，配製成濃度為0.8mol/l的溶液。准確稱取阿司匹林對照品約40ml置10mL容量瓶中。加入甲醇2—3mL，溶解，精密加入上述磷酸可待因溶液1.0mL，用水定容至刻度，搖勻即得。
供試品溶液配製 精確稱取樣品細粉適量(約相當磷酸可待因8mg阿司匹林400mg)置100mL容量瓶中，加入25％甲醇溶液50mL，超聲溶解5min。用25％甲醇溶液稀釋至刻度，格勻。經0.45um微孔濾膜濾過，取續濾液為供試品溶液.
測定 精密吸取混合對照品溶液和供試品溶液各10uL，分別注入液相色譜儀中。記錄峰面積。根據混合對照品溶液中磷酸可待因和阿司匹林的峰面積，計算出供試品溶液中二者的含量.
2．2小兒退熱靈片紫外摺合光譜測定
原理：摺曲線分析法是一種數學變換方法(它的數學屬性是一種新的復合導數變換)。它根據諧波分析原理，將光譜吸收曲線看作是多個數學分量加權而成。由於它提供的信息量大，可以顯示吸收曲線的細微差異，以減少相似組分的數學相關性，所以在物質定性和混合物定量方面具有明顯的優點。
儀器與試葯：UV／VIS W型裙合光譜儀及裙合光譜軟體；阿司匹林(1)對照品(含量99．89％)、苯巴比妥(2)對照品(含量99．92％)和輔料(佳木斯化學制葯廠)；小兒退熱靈片
方法與結果：對照品溶液的配製：分別精密稱取1、2對照品適量，用0．1mol／LNaOH溶液(溶劑)溶解稀釋製成1mg／m1的儲備液。再用溶劑稀釋製成適當濃度的溶液(約120ug／m1，22．0ug／m1，使1和2的吸收度在0.2—0．8)，備用。模擬樣品的配製 按原黑龍江地方標准葯品處方比例稱取1、2與適量的輔料混勻後，精密稱取0．2g置小燒杯中，用溶劑溶解並定容至100m1，靜置10min，再取5m1稀釋至250m1。分別吸取16、17、18、19和20m1置各25m1量瓶中，用溶劑定容，得1濃度為20—25ug／m1、2濃度為2．0—2．5ug／m1的模擬樣品溶液(使1和2的吸收度在0．2—1．2)，共5份。
樣品測定：取本品12片，精密稱定，研細，精密稱取細粉適量(約相當於10．110g，20．011g)，用少量溶劑溶解後定容至50m1。按「2．3」項下方法選定的最佳摺合區間(245—295nm)，經摺合光譜自動採集該區間的光譜信息，以兩組分定量分析系統軟體進行裙合運算，並計算得含量
2．3近紅外漫反射技術測定精氨酸阿司匹林的含量
原理：近紅外定量分析需要一個待測成分已知的標准樣品集(簡稱標樣集)，根據標樣集中樣品的近紅外光譜運用化學計量學方法建立光譜特徵值(如吸光度)與待測成分之間的數學關系(簡稱數學模型)。當測定未知樣品時，只需測定該樣品的近紅外光譜，然後用已建好的數學模型預測出待測成分的含量。與常規的光譜定量分析不同之處是，近紅外光譜分析時所用樣品可以不經預處理，通過求解光譜矩陣與待測成分的濃度矩陣來建立數學模型，進行定量。檢測固體樣品一般採用漫反射技術，對於液體樣品的檢測用透射方法。建立數學模型的方法主要有：多元線性回歸、主成分法、偏最小二乘法等。貼演算法相對而言是一種較新的多元數據處理技術，它與逐步回歸、主成分回歸的顯著差異在於考慮全譜區各波長是光譜參數的同時，還兼顧了被分析樣品內部各成分之間的關系，因此在NIR分析中得到廣泛應用。
儀器：Bruker公司VECTOR22/N近紅外光譜儀,帶漫反射光纖探頭波長區間4000-11000cm-1
樣品: 精氨酸阿司匹林固體粉末含阿司匹林48．0％-53．0％, 蔗糖酯(片劑輔料，作為潤滑劑)
實驗方法：用1／1000扭力天平準確稱取不同比例的精氨酸阿司匹林與蔗糖酯，共10份，分別混合均勻，用壓片機壓片，得到精氨酸阿司匹林含量不同的片劑(以此含量做為精氨酸阿司匹林片的理論含量一真值)，每種各100片。從每種100片中隨機選取10片，用儀器的漫反射光纖探頭壓住葯片，每片正反面各測1次，取平均光譜做為樣品光譜。掃描區間為4000-11000cm-1，解析度為8cm-1。用Bruker公司Bruker公司quant/2軟體分析，光譜數據採用加性散射校正預處理，以消除葯片表面不同引起的誤差，即可得到測量值。
2．4阿司匹林精氨酸鹽注射液含量測定
儀器與試葯： 儀器 79—l電磁攪拌儀；紫外—可見分光光度計。精氨酸，阿司匹林，其餘試劑均為分析純。
標准曲線的繪制：精密稱取阿司匹林結晶250．0 mg，懸浮於250mL蒸餾水中，在40一50度水浴中不斷攪拌至溶解，冷卻後移入500 ml量瓶中，加蒸餾水至刻度，搖勻。精密吸取l，2，3，4，5mL分別置於50 mL量瓶中，加25mL蒸餾水，用o．1mol/LNaOH溶液調節pH至9一10，在沸水浴中加熱5min，冷卻後，用0.1mol/l鹽酸溶液調節pH至3.0一4.0，加5滴硫酸鐵銨指示液，再加蒸餾水至刻度，搖勻。在530 nm波長處測定吸收度A。線性回歸得方程.
測定含量：精密稱取阿司匹林精氨酸鹽400．0 mg置l00mL量瓶中，加蒸餾水溶解，稀釋至刻度，搖勻，過濾。取續濾液5mL，置50 mL量瓶中，在沸水浴中加熱數分鍾，冷卻，加25mL蒸餾水，以下同標准曲線項下處理，在530 nm波長處測定吸收度A，計算阿司匹林精氨酸鹽的含量。阿司匹林精氨酸鹽的含量＝(測定值／稱量值)×loo％，代入數據求得阿司匹林精氨酸鹽的含量.
3．阿司匹林體內葯物分析：
3．1反相高效波相色譜法測定阿司匹林血葯濃度
1 儀器與試葯：Waters2690高效液相色譜儀，配置有996二極體陣列檢測器及Millennium數據處理系統；旋渦混合器(上海青浦滬西儀器廠)；TGL—16高速離心機(上海醫用儀器廠)。 水楊酸、苯甲酸對照品(中國葯品生物製品檢定所)；磷酸為分析純，乙睛為色譜純；水為超純水。
色譜條件：色譜柱為Diamonsil C18柱(4．6mm×250mm，5um)，流動相為甲酵—乙睛—0．2％磷酸(18：32：50)，檢測波長為237nm，流速為1.0ml／min。
溶液配製： 精密稱取10．10mg水楊酸對照品，用甲酵溶解，並定容至10ml，得到1．010mg／L水楊酸的儲備液，並用甲醇稀釋成不同濃度的系列溶液。精密稱取10．44mg苯甲酸，用甲酵溶解，並定容至10ml，得到1．044mg/l苯甲酸的儲備液。取lml儲備液，用甲醇稀釋至loml，得到104．4ug／ml的內標工作液。
樣品處理與測定：精密量取血清樣品0．5nl，加入內標苯甲酸溶液(104．4ug／m1)50ul，乙睛2ml，旋渦振盪2min，15000r／min離心5min，取上清夜20ul，在上述色譜條件下進樣，分別記錄內標與樣品的色譜圖與峰面積。按外標法以峰面積計算，即得。
討論
阿司匹林及其制劑有多種分析方法，但有其共同點。HPLC分析中，檢測柱一般多採用C18柱，檢測波長為280左右。滴定法都是根據葯物中含游離羧酸的酸性進行滴定，或水解後用酸回滴。其他以數學模型等方法進行的測量，也都是基於阿司匹林的化學結構和性質。
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㈤ 阿司匹林含量的測定方法及適用對象
一，分光光度法測定阿司匹林腸溶片的含量
目的: 建立分光光度法阿司匹林含量的測定方法。方法: 在鹼性條件下, 乙醯水楊酸與羥胺反應生成羥肟酸; 在酸性溶液中, 後者與三氯化鐵形成紅色的羥肟酸鐵, 一定濃度范圍內, 吸光度呈線性關系。結果: 在520nm 波長下, 採用標准曲線法, 測得阿司匹林腸溶片中乙醯水楊酸的含量為25mg/ 片。結論: 方法操作簡便、快速、准確; 可用於阿司匹林含量的測定和產品質量控制。
阿司匹林( C9H8O4, 180.16) 又名: 2-(乙醯氧基) 苯甲酸,或乙醯水楊酸, 是常用的解熱鎮痛葯, 臨床上多用於治療心腦血管方面的疾病, 也可用於消化道腫瘤和老年性痴呆症的預防。
阿司匹林葯片中乙醯水楊酸的含量測定, 大多採用酸鹼滴定法測定和高效液相色譜法分析測定。本方法採用可見分光光度法測定阿司匹葯片中乙醯水楊酸的含量, 操作簡便、快速、准確, 實驗成本低, 可用於阿司匹林葯品的分析和產品質量控制。
1.儀器和材料
儀器: 722 型分光光度計( 上海) , 容量瓶( 25mL) , 吸量管( 5mL , 1mL) 。材料: 2mo l/L NaOH , 4mol/L H Cl, 10%FeCl3 , 7%鹽酸羥胺乙醇液; 0. 5 g / L乙醯水楊酸標准溶液; 阿司匹林樣品溶液( 阿司匹林腸溶片, 配製成20 片/L 乙醇液) 。
2方法和結果
阿司匹林腸溶片的主要成分為乙醯水楊酸,分子中酯基在鹼性溶液中可與羥胺反應生成羥肟酸;後者在酸性條件下與三氯化鐵形成酒紅色的羥肟酸鐵,最大吸收波長為520nm,在一定濃度范圍內,吸光度呈線性關系,可測出阿司匹林葯片中乙醯水楊酸的含量。
2•1標准溶液系列和樣品溶液的配製
分別取0.5g•L-1乙醯水楊酸標准溶液0.00mL(空白溶液),0.50mL,1.00mL,1.50mL,2.00mL和阿司匹林樣品溶液1.00mL置於25mL容量瓶中,分別加入7%鹽酸羥胺乙醇液1.00mL,2 mol•L-1NaOH 1.00mL,放置3分鍾,再分別加入4 mol•L-1HCl和10%FeCl3各1.00mL,加水至刻度,搖勻。
2•2標准曲線的繪制
標准溶液系列和樣品溶液放置10分鍾後,用空白溶液做對照,在520nm處測定吸光度。以吸光度為縱坐標,標准溶液濃度為橫坐標作圖,繪制出標准曲線表1。
二，阿司匹林制劑的電極法測定
摘要以三苄基錫辛酸酯為活性物質, 制備具有良好的電位響應性能和選擇性能的PVC 膜水楊酸根離子敏感電極。該電極應用於阿司匹林制劑的含量測定, 方法快速、方便、准確。標准曲線與樣品加入兩種電極測定法回收率分別為101. 1%和101. 3%。
1儀器與試劑
電極電位和溶液酸度測試均使用pHs-10C 型數字式酸度離子計( 浙江蕭山市科學儀器廠) ; 參比電極為232 型飽和甘汞電極( 上海光電器件廠) ; 鄰硝基苯基辛醚系本實驗室自製, 其餘試劑均為分析純, 實驗用水為去離子水經高錳酸鉀處理後蒸餾而得。
2電極制備與性能測試
將載體物質三苄基錫辛酸酯( 按文獻方法合成) 20 mg 、聚氯乙烯( PVC) 0. 33 g 和增塑劑鄰硝基苯基辛醚0. 65 g 溶解於四氫呋喃( THF) 3 g 中, 攪拌澄清後將其傾倒於40 mm×40 mm 的水平玻璃板上。待THF揮發完後( 約需12 h) 即得到具有彈性的PVC 膜。用打孔器切下直徑10 mm 的圓片並用含5%PVC 的THF 溶液粘於PVC 電極桿端, 放置數小時, 晾乾後電極桿內充以0. 1mo l/ L 的水楊酸鈉( NaSal) 溶液作為內參比溶液並以Ag/ AgCl 絲作為內參比電極導出至離子計。電極使用前需於10- 3 mol/ LNaSal 溶液中浸泡2 h 進行活化處理。電極及備用膜長期不使用時可洗凈後, 置於氮氣氛圍下保存。在此條件保存, 電極的各項性能指標至少可於5 個月內維持穩定。在pH5. 5 的磷酸鹽緩沖溶液中測試了電極的電位響應性能。結果表明, 該電極對於10-1～5×10-6 mo l/ L 濃度范圍內的水楊酸根離子具有線性響應, 斜率值為- 57.6 mV,表現出良好的穩定性與重視性。電極具有較快的電位響應: 對於各種濃度的待測樣品, 其穩態響應時間( t95%) 均小於30 s, 可以實現水楊酸根離子的快速測定。採用等活度分別溶液法測試了了電極的選擇性能, 得到其相對於NO3- 、Cl-、AcO-和SO2-4 的選擇性系數值分別為7.5×10-5、2.1×10-5、9. 0×10-4和< 10-5。該電極表現出對水楊酸根離子的高選擇性。
3阿司匹林制劑的分析
3. 1待測樣品的處理
阿司匹林易水解得到水楊酸根離子, 且反應定量。因此, 通過對水楊酸根離子的測定即可得出樣品中的阿司匹林含量。阿司匹林片( A) 和復方阿司匹林片( B) 均處理如下: 將適量葯品( 10 片) 研製成粉狀, 精密稱取1～1. 5 g , 在0. 5 mol/ L NaOH 溶液25 ml 中加熱迴流1 h 後過濾, 定容至250 ml。吸取10ml 濾液, 用稀硫酸調至pH 5. 5, 再用pH 5. 5的磷酸鹽緩沖液定容至100 ml 作為待測液。
3. 2測定結果
使用該電極通過標准溶液法和樣品加入法, 分別測定葯品A 和B 經前述處理後所得試樣中的水楊酸根離子濃度, 通過換算得出葯劑中阿司匹林的含量, 所得結果見表1。表1 中的參照值系對樣品採用葯典推薦方法進行測定得到的結果( 3 次測定平均值) 。
三 酸鹼滴定法
（1）直接滴定法
原理；阿司匹林與氫氧化鈉反應生成乙醯水楊酸鈉和水
pKa3～6都有游離羧基，顯酸性。
• 方法：取本品0。4g，精密稱定，加中性乙醇20ml，溶解，加酚酞指示液3d，用氫氧化鈉滴定液（0.1mol/l）滴定。每1ml滴定液相當於18.02mg 的C9H8O4。
• 優點：簡便、快速。
• 缺點：酯鍵水解干擾（不斷攪拌、快速滴定）。
• 酸性雜質干擾（如水楊酸 ）。
• 適用范圍：不能用於含水楊酸過高或制劑分析，只能用於合格原料葯的含量測定。
中性乙醇：取乙醇加入2滴酚酞指示液，用稀氫氧化鈉溶液滴至溶液剛好呈粉紅色，即可。PH值為8左右
（2）水解後剩餘滴定
• 原理；利用阿司匹林酯結構在鹼性溶液中易於水解的特性，加入過量的氫氧化鈉滴定液。加熱使酯鍵水解，剩餘的氫氧化鈉滴定液用硫酸滴定液回定
• 方法：取本品1.5g，精密稱定加氫氧化鈉滴（0.5mol/l） 50.0ml，混合，緩緩煮沸10min，放冷，加酚酞指示液，用硫酸滴定液（0.25mol/l）滴定剩餘的氫氧化鈉。
• 由反應式得知，硫酸標准液與阿司匹林的摩爾比為1∶1
•
• 優點：消除了酯鍵水解的干擾
• 缺點：酸性雜質干擾
四，高效液相色譜法
• 【儀器與試葯】儀器：高效液相色譜儀；CLASS—LC工作站。色譜柱：ODS C18色譜柱(150mm x 4．6mm，填料：Kromasil，粒度：5um)。
• 試葯: 阿司匹林對照品，甲醇(色譜純試劑)，冰醋酸、鹽酸(分析純試劑)。
【方法】取本品20片，精密稱定，研細，精密稱取適量(約相當於阿司匹林10mg)，置100m1量瓶中，加0．1mol/l鹽酸溶液適量，超聲使阿司匹林溶解，放冷至室溫，加0．1mol/l鹽酸溶液稀釋至刻度，搖勻，濾過，精密量取續濾液5m1，置25m1量瓶中，加0．1mol/l鹽酸溶液稀釋至刻度，格勻，取20ul注入液相色譜儀，記錄色譜圖。另取阿司匹林對照品適量，加0．1mol/l鹽酸溶液溶解並稀釋製成每l m1中約含阿司林20ul的溶液，取20ul同法測定。按外標法以峰面積計算，即得。