⑴ 請給一些測定葡萄糖含量辦法,越多越好!
1.向葡萄糖溶液中加入過量新制氫氧化銅加熱,使之充分反應,過濾後加入過量稀硫酸,洗滌乾燥後,稱量剩餘固體(銅)計算出葡萄糖,再除以總體積,就算出葡萄糖的含量。方程式如下:
1)CH2OH(CHOH)4CHO+2Cu(OH)2---加熱→CH2OH(CHOH)4COOH+Cu2O↓+2H2O
2) Cu2O+H2SO4=CuSO4+Cu+H2O
2.把新制氫氧化銅換成銀氨溶液步驟如上,方程式如下:
1)CH2OH-(CHOH)4-CHO+2[Ag(NH3)2]++2OH-==CH2OH-(CHOH)4-COONH4+2Ag↓+H2O+3NH3
不過,這里的固體是銀
3.條件好可以用專業儀器直接幫你測定葡萄糖含量
4.右旋糖酐40葡萄糖注射液—葡萄糖的測定—氧化還原滴定法
方法原理: 供試品精密加碘滴定液後,邊振搖邊滴加氫氧化鈉滴定液,在暗處放置30分鍾,加稀硫酸,用硫代硫酸鈉滴定液滴定,至近終點時,加澱粉指示液繼續滴定至藍色消失,並將滴定結果用右旋糖酐40作空白試驗校正,根據滴定液使用量,計算葡萄糖的含量。 試劑: 1. 碘化鉀 2. 碘滴定液(0.05mol/L) 3. 鹽酸 4. 氫氧化鈉滴定液(0.1mol/L) 5. 甲基橙指示液 6. 硫酸滴定液(0.5mol/L) 7. 硫代硫酸鈉滴定液(0.1mol/L) 8. 稀硫酸 9. 碳酸氫鈉 10. 澱粉指示液 11. 酚酞指示液 12. 甲基紅-溴甲酚綠混合指示液 13. 基準三氧化二砷 14. 基準鄰苯二甲酸氫鉀 15. 基準無水碳酸鈉 1.6 基準重鉻酸鉀 試樣制備: 1.)碘滴定液(0.05mol/L) 配製:取碘13.0g,加碘化鉀36g與水50mL溶解後,加鹽酸3滴與水適量使成1000mL,搖勻,用垂熔玻璃濾器濾過。 標定:取在105℃乾燥至恆重的基準三氧化二砷約0.15g,精密稱定,加氫氧化鈉滴定液(1mol/L)10mL,微熱使溶解,加水20mL與甲基橙指示液1滴,加硫酸滴定液(0.5mol/L)適量使黃色轉變為粉紅色,再加碳酸氫鈉2g、水50mL與澱粉指示液2mL,用本液滴定至溶液顯淺藍紫色。每1mL碘滴定液(0.05mol/L)相當於4.946mg的三氧化二砷。根據本液的消耗量與三氧化二砷的取用量,算出本液的濃度。 2.)氫氧化鈉滴定液(0.1mol/L) 配製:取氫氧化鈉適量,加水振搖使溶解成飽和溶液,冷卻後,置聚乙烯塑料瓶中,靜置數日,澄清後備用。取澄清的氫氧化鈉飽和溶液5.6mL,加新沸過的冷水使成1000mL,搖勻。 標定:取在105℃乾燥至恆重的基準鄰苯二甲酸氫鉀約0.6g,精密稱定,加新沸過的冷水50mL,振搖,使其盡量溶解,加酚酞指示液2滴,用本液滴定,在接近終點時,應使鄰苯二甲酸氫鉀完全溶解,滴定至溶液顯粉紅色。每1mL氫氧化鈉滴定液(0.1mol/L)相當於20.42mg的鄰苯二甲酸氫鉀。根據本液的消耗量與鄰苯二甲酸氫鉀的取用量,算出本液的濃度。 貯藏:置聚乙烯塑料瓶中,密封保存;塞中有2孔,孔內各插入玻璃管1支,1管與鈉石灰管相連,1管供吸出本液使用。 3). 甲基橙指示液 取甲基橙0.1g,加水100mL使溶解。 4.) 硫酸滴定液(0.5mol/L) 配製:取硫酸30mL,緩緩注入適量水中,冷卻至室溫,加水稀釋至1000mL,搖勻。 標定:取在270~300℃乾燥至恆重的基準無水碳酸鈉約1.5g,精密稱定,加水50mL使溶解,加甲基紅-溴甲酚綠混合指示液10滴,用本液滴定至溶液由綠色轉變為紫紅色時,煮沸2分鍾,冷卻至室溫,繼續滴定至溶液由綠色變為暗紫色。每1mL硫酸滴定液(0.5mol/L)相當於53.00mg的無水碳酸鈉。根據本液的消耗量與無水碳酸鈉的取用量,算出本液的濃度。 5). 硫代硫酸鈉滴定液(0.1mol/L) 配製:取硫代硫酸鈉26g與無水碳酸鈉0.20g,加新沸過的冷水適量使溶解成1000mL,搖勻,放置1個月後濾過。 標定:取在120℃乾燥至恆重的基準重鉻酸鉀0.15g,精密稱定,置碘瓶中,加水50mL使溶解,加碘化鉀2.0g,輕輕振搖使溶解,加稀硫酸40mL,搖勻,密塞,在暗處放置10分鍾後,加水250mL稀釋,用本液滴定至近終點時,加澱粉指示液3mL,繼續滴定至藍色消失而顯亮綠色,並將滴定結果用空白試驗校正。每1mL硫代硫酸鈉滴定液(0.1mol/L)相當於4.903mg的重鉻酸鉀。根據本液的消耗量與重鉻酸鉀的取用量,算出本液的濃度。 室溫在25℃以上時,應將反應液及稀釋用水降溫至約20℃。 6).稀硫酸 取硫酸57mL,加水稀釋至1000mL。 7. )澱粉指示液 取可溶性澱粉0.5g,加水5mL攪勻後,緩緩傾入100mL沸水中,隨加隨攪拌,繼續煮沸2分鍾,放冷,傾取上層清液,即得,本液應臨用新制。 8.) 酚酞指示液 取酚酞1g,加乙醇100mL使溶解。 9.)甲基紅-溴甲酚綠混合指示液 取0.1%甲基紅的乙醇溶液20mL,加0.2%溴甲酚綠的乙醇溶液30mL,搖勻。 操作步驟: 精密量取供試品2mL,置具塞錐形瓶中,精密加碘滴定液(0.05mol/L)25mL,邊振搖邊滴加氫氧化鈉滴定液(0.1mol/L)50mL,在暗處放置30分鍾,加稀硫酸5mL,用硫代硫酸鈉滴定液(0.1mol/L)滴定,至近終點時,加澱粉指示液2mL,繼續滴定至藍色消失,並將滴定結果用0.12g(6%規格)或0.20g(10%規格)的右旋糖酐40作用白試驗校正。每1mL碘滴定液(0.05mol/L)相當於9.909mg的C6H12O6·H2O。
⑵ 怎麼利用吸光度算多糖提取率
怎麼利用吸光度算多糖提取率?首先做一個葡萄糖標准曲線,把回歸方程用excel做出來,網上網路有做回歸方程的步驟,將你測出來的多糖吸光度代入回歸方程,注意吸光度是y值,求出x值就是你想要的多糖含量,一定不要把單位搞混,做後再換算成你所用香菇總量中的含糖量。多糖提取實驗設計流程
食用菌多糖的提取方法有水提法、鹼提法和酶提法等,其中酶提法是利用酶對細胞結構的破壞作用,使存在於細胞內部的多糖釋放出來,從而提高了多糖的得率。
本次實驗採用纖維素酶和果膠酶對紫蘑菇進行水解,研究香菇多糖的最佳提取工藝,並探討蘑菇粒度、蘑菇溶解方法以及酶法提取中多糖提取效果的評價方法。
可以同步做三組對比試驗:⑴採用水提,不加酶;⑵採用酶法提取;⑶採用酶空白(只加酶,不加蘑菇粉)。
由於酶中也含有少量的糖類成分,其存在將會對蘑菇多糖的提取產生影響。因此,在計算酶法提取多糖的效果時,要減去酶本身所引入的糖。在確定最佳酶濃度時更要考慮。
一、實驗流程:蘑菇乾燥→粉碎過篩→加水浸泡0.5h→調PH→加入纖維素酶→提取→離心過濾→測多糖提取率
式中: n一提取液稀釋倍數;
C一提取液中多糖的濃度(mg/mL);
V一提取液體積(mL);
m一蘑菇的質量(mg) 。
測定時取三個平行樣,結果數據為平行樣的平均數值。
二、具體實驗步驟:
1、多糖標准曲線的繪制
精密稱取105℃乾燥恆重的葡萄糖標准品100mg,置於100 mL容量瓶中,加蒸餾水至刻度,搖勻。精密吸取0.4、0.8、1.2、1.6、2.0、2.4、2.8 mL分別置於50 mL容量瓶中,加蒸餾水至刻度,搖勻。精密吸取上述各種溶液2.0 mL,分別加入5%苯酚溶液1.0 mL,搖勻,迅速加入5.0 mL濃硫酸,振搖5min,置沸水浴上加熱15 min,然後置冷水浴中冷卻30 min,隨行空白,在490 nm波長處測定吸光度。以標准溶液濃度為橫坐標,吸光度值為縱坐標繪制標准曲線,並計算其標准曲線回歸方程。
(1)精密度試驗:精密吸取1.0 ml供試液按「標准曲線的制備」項下操作,分別測定吸光度,求得RSD。
(2)重現性及多糖含量測定:精密稱取巴西蘑菇多糖0.1000g,按「供試液的配製」和「標准曲線的制備」項下操作,分別測定吸光度,求得多糖的平均含量,及RSD值