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食品大蒜素計算方法國標

發布時間:2023-01-08 10:49:52

① 大蒜素的標准曲線該如何繪制

1 實驗材料、儀器及試劑

1.1 實驗材料
脫毒紫皮大蒜(取材於隴南成縣)。

1.2 實驗儀器
設備電子天平、高速冷凍離心機、紫外可見光分光光度計、熒光燈、水浴鍋、刻度試管、離心管、燒杯、容量瓶、刻度吸管、透析袋等。

1.3 實驗試劑
硫氨酸、磷酸二氫鈉、磷酸氫二鈉、聚乙烯吡咯烷酮(pvp)、甲硫氨酸(Met)、NBT、核黃素、蔗糖、蒽酮、乙酸乙酯、濃硫酸等。

2 實驗方法

2.1 大蒜中超氧化物歧化酶提取以及超氧化物歧化酶活性測定
2.1.1 粗提取方法取脫毒大蒜 10g 於預冷的研缽中,加適量提取介質在冰浴下研磨成勻漿,加入提取介質沖洗研缽,並使終體積為200ml。取100ml 於4℃下10000rmin-1 離心15min,上清液即為SOD 粗提液。
2.1.2 純化方法將硫酸銨研磨後加入SOD 提液中,使之達到50%飽和度,放置於4℃冰箱內30min,10000rmin-1 冷凍離心20min,除去雜蛋白,在上清液中再加入硫酸銨至90%飽和度,放置於4℃冰箱內2h,於10000 rmin-1 冷凍離心20min,收集沉澱,溶於最小量的0.5mol/L,pH7.8 磷酸緩沖液,透析。
2.1.3 顯色反應取透明度好、質地相同的試管4 支,2 支為測定、2 支為對照(見表1)。混勻後,給1支對照管罩上比試管稍長的雙層黑色硬紙套遮光,與其他各管同時置於4000xl 日光下反應20~30min(要求各管照光情況一致,反應溫度控制在25~35℃之間視酶活性高低適當調整反應時間)。
2.1.4 SOD 活性測定與計算至反應結束後,用黑布遮蓋上試管,終止反應。以遮光的對照管作為空白,分別在560nm波長下測定各管的吸光度,按下公式計算SOD 的活性:SOD 活性=(A0-AS)×VT/A0×0.5×FW×V1 ;SOD 比活力=SOD 總活性/蛋白質濃度。式中 SOD 總活性以每克鮮重酶單位表示;比活力單位以每毫克蛋白質單位、酶單位mg-1 表示;A0照管對照管的光度吸收值;AS樣品管的光吸收值;VT樣液總體積(ml);V1測定時樣品用量(ml);FW樣品鮮重(g);蛋白質濃度單位為每克鮮重含蛋白質毫克數(mgg-1)。

2.2 蒽酮比色法測定大蒜可溶性糖
2.2.1 標准曲線的製作
2.2.1.1 1%蔗糖標准液將分析純蔗糖在80℃下烘至恆重,精確稱取1.000g。加少量水溶解,然後加入0.5ml濃硫酸,轉入100ml 容量瓶中,用蒸餾水定容至刻度。
2.2.1.2 100μg/L 蔗糖標准液精確吸收 1%蔗糖標准液1ml 加入100ml 容量瓶中,加水至刻度。
2.2.1.3 蔗糖標准曲線製作取 20ml 刻度試管11 支,從0~10 分別編號,按表2 加入溶液和水。然後按順序向試管中加入0.5ml 蒽酮乙酸乙酯試劑和5ml 濃硫酸,充分振盪,立即將試管放入沸水浴中,逐管均准確保溫1min,取出後自然冷卻至室溫,以空白作參比,在630nm 波長下測其吸光度,以吸光度為縱坐標,以糖含量為橫坐標,繪制標准曲線,並求出標准線性方程。
2.2.2 可溶性糖的提取
取新鮮脫毒大蒜,擦凈表面污物,均稱取3.0g,共3 份,研磨。分別放入3 支刻度試管中,加入5~10ml 蒸餾水,塑料薄膜封口,於沸水中提取30min(提取2 次),提取液過濾入25ml 容量瓶中,反復漂洗試管及殘渣,定容至刻度。
2.2.3 顯色測定
吸取樣品提取液0.5ml 於20ml 刻度試管中(重復三次),加蒸餾水1.5ml,以下步驟與標准曲線測定相同,測定樣品的吸光度,計算可溶性糖的含量。
2.2.4 結果計算
由標准線性方程求出糖的含量(μg),按下式計算試樣品的含量。
可溶性糖含量=(從回歸方程求得糖的量/吸取樣品液的體積)×提取液量×稀釋倍數)/(樣品乾重×106)×100%。

2.3 大蒜素的提取分離及測定
2.3.1 實驗流程脫毒大蒜→去皮→洗凈→搗碎→酶解→溶劑萃取→固液分離→上清液→減壓濃縮→大蒜濃縮液。
2.3.2 實驗原理大蒜素是淺黃色油狀液體,微溶於水,易溶於乙醇、苯、乙醚等溶劑,利用這一性質可以用溶劑將大蒜油浸提出來。溶劑的選擇非常關鍵,要求該溶劑的溶解度充足,而且浸提結束後易於分離(沸點差異顯著),盡量不含其它的不良氣味和溶劑殘留。又由於大蒜油多用於食品領域,所以選易揮發且對人負作用小的乙醇作為萃取劑。
2.3.3 萃取條件不同的乙醇體積分數、乙醇加入量、萃取溫度、萃取時間對大蒜素產率的影響。
2.3.4 大蒜素的測定採用分光光度法。

3 實驗結果與分析

3.1 脫毒大蒜中超氧化物歧化酶的分離及活性測定
通過對脫毒大蒜SOD 的粗提,利用硫酸銨鹽析法對SOD 進行初步純化,並利用透析的方法進行SOD 的純化,最後利用分光光度法對SOD 活性進行活性測定。結果表明(見表3):通過多次重復實驗,對SOD 活性進行測定,在560nm 處吸光值A0(對照管的光度吸收值)的平均值為0.091;AS(樣品管的光吸收值)的平均值分別為0.0174、0.014、0.0157;經計算SOD 活性平均值為5.460,其SOD 比活力為546U/mg。

3.2 脫毒大蒜多糖含量的測定
3.2.1 蔗糖標准曲線的製作通過利用梯度濃度稀釋法,配製20ug/mL、40ug/mL、60ug/mL、80ug/mL 及100ug/mL的蔗糖溶液,然後在630nm 下分別測量其吸光值,再根據各自的吸光值繪制蔗糖的標准曲線。具體吸光值及標准曲線見表4 和圖1,根據標准曲線圖可知,標准曲線為Y(蔗糖濃度ug/mL)=0.0059x(吸光值A)-0.0238,相關性為R2=0.9975。說明此標准曲線在蔗糖濃度為0-100ug/mL 范圍可行。
3.2.2 脫毒大蒜中可溶性糖的含量通過採用蒽酮比色法測定脫毒大蒜中可溶性多糖的含量,結果表明(見表5):在630nm處進行分光光度檢測,經過測量6 個重復的大蒜可溶性糖的吸光值,其吸光值A 在2.67-2.992范圍之間,經計算脫毒大蒜中可溶性糖的平均含量為485.75ug/mL。

3.3 大蒜素的提取分離及測定
3.3.1 乙醇體積分數對大蒜素產率的影響取去皮鮮大蒜100g,平均分成5 份,加熱40℃下恆溫水浴1h,然後分別加入80 mL 體積分數95%、 90%、 85%、80%、75%的乙醇80mL 於30℃下萃取1.5h。減壓蒸餾後測產物中大蒜素含量,結果見表6。由表4 可以看出,隨著乙醇體積分數的提高,大蒜素的產率也在提高,這也說明了大蒜素易溶於有機溶劑而難溶於水,實驗證明:當乙醇體積分數為95%時,大蒜素產率最高,達到0.037g/20g。
3.3.2 乙醇加入量對大蒜素產率的影響將 100 g 脫毒大蒜加適量磷酸緩沖液搗成蒜泥,40℃水浴1 h,平均分成5 份然後按40、60、80、100 和120mL,分別加入體積分數95%乙醇30℃水浴1.5h, 50℃下減壓蒸餾,然後檢測獲得物中大蒜素的含量,結果見表7。從表5 可以看出,乙醇加入量對大蒜素產率有很大的影響,大蒜素的產率隨著料液比的增加而逐漸升高,可是從40mL 到100mL 大蒜素的提取率迅速增長,而從100mL 以後則增長比較緩慢了,這是因為隨著料液比的增加。大蒜素提取率最終會趨向於一個極限值,這符合大蒜素在水相與有機相的分配系數。考慮到原料與能耗多方面因素,100g 大蒜加入100mL 95%乙醇提取效率最好,大蒜素含量為0.039g/20g。
3.3.3 萃取溫度對大蒜素產率的影響取去皮新鮮脫毒大蒜100g,平均分成5 份。分別加入適量磷酸緩沖液研碎,40℃下水浴1h,然後分別加入100 mL 體積分數95%乙醇於25℃、30℃、35℃、40℃、45℃下萃取1.5h, 50℃下減壓蒸餾,測出餾出物中大蒜素的含量,結果見表8。從表6 可以看出,大蒜素的提取率隨萃取溫度的升高而成遞減的趨勢。這是因為溫度越高,大蒜素越不穩定,轉移到有機相的大蒜素也就越少。當萃取溫度為30℃時,大蒜素的提取率最高,含量達到0.038g/20g。
3.3.4 萃取時間對大蒜素產率的影響取去皮新鮮脫毒大蒜100g,平均分成5 份,分別加入適量磷酸緩沖液研碎,在40℃條件1h,再分別加入80 mL 95%乙醇於30℃下分別萃取1h, 1.5h, 2h, 2.5h 和3h,減壓蒸餾後測定萃取液中的大蒜素含量,結果見表9。從表7 可以看出,大蒜素的提取率隨萃取時間表現出先增後減的趨勢。這應當是萃取時間過短,生成的大蒜素不能完全轉移到有機相當中;而時間太長,大蒜素又易轉化為其它副產物。本實驗證明當萃取時間為1.5 h 時,大蒜素的提取率最高,達到0.038g/20g。
綜上所述:實驗證明搗碎的蒜泥在40℃下1 h,以100 mL 95%乙醇作為萃取劑、於30℃下萃取蒜泥1.5h,大蒜素的提取最高含量為0.038g/20g(0.190%)。

② 中國葯典中有沒有關於大蒜素的檢測

大蒜素化學葯品地標升國標1冊 大蒜素腸溶膠丸化學葯品地標升國標1冊 大蒜素注射液化學葯品地標升國標1冊 大蒜素腸溶膠囊化學葯品地標升國標12冊 大蒜素膠囊化學葯品地標升國標10冊 大蒜素腸溶膠丸《國家葯品標准(1~16)》葯品說明書勘誤表 大蒜素注射液國家標准化學葯品地標升國標第十六冊 大蒜素腸溶膠丸國家標准化學葯品地標升國標第十六冊

故,中國葯典並未有關於大蒜素的檢測
大蒜素 國家標准化學葯品地標升國標第十六冊

③ 蒜粒的國標

不知道你要的具體標准,多給你提供幾個。

標准編號:SN/T 0230.2-1993
標准名稱:出口脫水大蒜製品檢驗規程
標准狀態:現行
實施日期:1900-1-1

標准編號:SB/T 10348-2002
標准名稱:大蒜
標准狀態:現行
實施日期:2003-1-1

標准編號:NY/T 405-2000
標准名稱:脫毒大蒜種蒜(苗)病毒檢測技術規程
標准狀態:現行
實施日期:2000-12-1

標准編號:NY 5228-2004
標准名稱:無公害食品 大蒜生產技術規程
標准狀態:現行
實施日期:2004-3-1

標准編號:NY 5227-2004
標准名稱:無公害食品大蒜
標准狀態:現行
實施日期:2004-3-1

標准編號:GB/T 18527.2-2001
標准名稱:大蒜輻照抑制發芽工藝
標准狀態:現行
實施日期:2002-3-1
頒布部門:中華人民共和國國家質量監督檢驗檢疫總局
內容簡介:本標准規定了大蒜輻照抑制發芽的工藝參數和技術要求。本標准適用於白皮大蒜輻照抑制發芽。其他大蒜品種科參照執行。本標准不適用於殺滅大蒜的害蟲及微生物。

④ 大蒜油有沒有 國家標准或行業標准啊!大蒜油GB/T14156-93國家標准不對的根本沒有參數要求,

大蒜油還沒有國家標准和行業標准,但有一個地方標准: DB37/T 1475-2009大蒜油通用技術條件,生產企業可以編制食品安全企業標准,經備案後作為大蒜油的產品的執行標准。

⑤ 一瓣大蒜有多少大蒜素

一瓣大蒜有0.021毫克大蒜素。根據查詢相關公開資料顯示,一克大蒜裡面含有0.003毫克的大蒜素,一瓣蒜大約重7克左右,經過數學計算一瓣大蒜有0.021毫克大蒜素。

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