① 小鼠如何灌胃
小鼠的捉拿方法是對的,用食指和拇指捏住小鼠的頸部皮膚,把小鼠的尾巴壓在無名指下,捏緊就行。
1-2ml注射器和16號獸用針頭,針尖磨鈍,針頭長4-5cm
從鼠口角進入,緊貼上顎進入食管,進針 深度在體外測量,一般小鼠2-3cm
注意手法上有個技巧,灌胃針送到咽喉處手腕要大鼠的後腦方向壓一下,切記不可使用暴力。
② 小鼠的基本實驗操作
一、實驗目的: 通過實際操作,掌握小鼠的一般操作方法,包括小鼠的抓拿、標記、給葯(灌胃、腹腔注射、皮下、肌肉、尾靜脈注射)、取血(眶後靜脈叢,摘眼球)、脊椎脫臼法處死、大體解剖。
二、實驗動物: 昆明小鼠2隻(1雌1雄)
三、實驗步驟
1、抓取和固定,標記
2、去毛
3、給葯:消化道、腹腔往射、尾靜脈注射
4、取血:眼眶後靜脈叢、尾靜脈、眼球摘除法、斷頭法
5、麻醉:氯胺酮腹腔麻醉
6、處死:脊椎脫臼法
7、解剖:
雄性:睾丸、附睾、輸精管、鼠蹊腺(在膀胱下方,膠質狀,透明)
雌性:雙角子宮、卵巢
腎上腺、膽囊、甲狀腺、胃、肝臟、脾、肺、腎、心臟、甲狀腺
四、實驗結果
1、抓取和固定標記:
抓取:抓小鼠的尾根部
固定:抓住小鼠的尾根部,讓小鼠在粗糙平面上爬行,後拉尾跟部,右手的拇指和食指抓住小鼠兩耳及其間的頸部皮膚,小指和無名指將尾巴固定在手掌面。
2、灌胃法:左手抓取小鼠固定後,右手持特製灌胃針,沿一側口角進針,緊貼咽後壁,頭後仰以便伸直消化道,進針2/3後灌生理鹽水0.5ml
3、注射給葯:
腹腔注射:
從下腹部的兩側進針,進針時針與腹部成45°。進針後稍微晃動針,如無粘滯感則可注射葯物。
尾靜脈注射:一人固定小鼠,另一人用左手中指和拇指將尾拉直,食指托住尾部在尾動脈位置進針注射0.5ml生理鹽水。注射完畢拔出針頭,用無菌棉球壓迫止血。
4、采血
從眼角內側0.5cm處進針
眼球摘除法:左手抓取用固定小鼠,右手持彎頭鑷在眼球根部將眼球摘除,頭朝下,眼眶內血迅速流出。
5、麻醉:
0.5%氯胺酮腹腔麻醉:本小鼠重22g,按100mg/kg的葯量給葯,2分鍾麻醉成功
6、處死:
脊椎脫臼法:按住頭部,將尾根部向後上方以短促的力量拉即可致死
7、解剖:
雄性:尋找到睾丸、附睾、輸精管、鼠蹊腺
雌性:雙角子宮、卵巢3.7.2腎上腺:米粒大小
胰腺:位於胃下方,類似於脂肪組織,渾濁狀3.7.4, 膽囊:芝麻大小,淺綠色,半透明,甲狀腺:緊貼環狀軟骨,另可解剖出胃、肝臟、脾、肺、腎、心臟。
五、實驗討論
1、小鼠抓取的感受:
小鼠性情較溫順,一般不會咬人,比較容易抓取固定。通常用右手提起小鼠尾巴將其放在鼠籠蓋或其它粗糙表面上,在小鼠向前掙扎爬行時,用左手拇指和食指捏住其雙耳及頸部皮膚,將小鼠置於左手掌心、無名指和小指夾其背部皮膚和尾部,即可將小鼠完全固定。如要進行手術或心臟采血應先行麻醉再操作,如進行解剖實驗則必須先行無痛處死後再進行。
2、小鼠尾靜脈注射感受:
首先,注射前尾巴用稍熱的水浸泡幾分鍾,有利於注射;其次,先遠後盡,不要一開始就從尾根部,那樣失敗了不好辦;再次,進血管後注意保持穩定,針尖很容易刺穿血管的。尾靜脈就在尾巴的正左右兩邊,先用酒精用力擦,可以去掉部分角質,然後按住近心端讓充血,就很容易看到了。進針大概1~2厘米是最合適的。
尾靜脈注射時,可用45~50度的溫水浸潤半分鍾或用酒精擦拭,可使血管擴張,同時也可軟化表皮角質。以左手拇指和食指夾住鼠尾,使靜脈充盈,中指幫助無名指和小指捏住鼠尾末梢,右手持注射器(連5號細針頭),針頭與靜脈夾角一般小於30度,從距尾尖2 - 3厘米處進針,此處皮薄易進入,先抽回血,見到血後再緩慢注入少量葯液,如無阻力,表示針頭已進入靜脈,可繼續往入。一般推注速度為0.05 - 0.10m秒,一次注入量為0.05 - 0.25ml/10g體重。如反復注入,應盡可能從尾末端開始,以後向尾根部方向移動注射。
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③ 小鼠灌胃怎麼弄呢
小鼠專用灌胃針由注射器和喂管組成,喂管長約1nm,喂管尖端焊有一金屬小圓球,金屬球中空,用途是防止喂管插入時造成損傷。金屬球彎成20度角,以適應口腔與食道之間彎曲。將喂管插頭緊緊連接在注射器的介面上,吸入定量的葯液;左手捉住小鼠,右手拿起准備好的注射器。將喂管針頭尖端防放進小鼠口咽部,順咽後壁輕輕往下推,喂管會順著食管滑入小鼠的胃,插入深度約3cm。用中指與拇指捏住針筒,食指按著針竿的頭慢慢往下壓,即可將注射器忠的葯液灌入小鼠的胃中。在插入過程中如遇到阻力或可看見1/3的針管,則江喂管取出重新插入,因為這時灌胃並沒有插入胃中。
尾靜脈注射比較困難,很難把握。建議採用其他注射方式
④ 小鼠灌胃有什麼訣竅嗎
灌胃最重要的是要老鼠要固定好,手法比較重要。灌苦的中葯或者其他西葯,會掙扎,所以一定要保證食道是直線的狀態。 沿著嘴角進針,在口腔中間找到咽喉,使小鼠仰頭,然後貼著咽喉後壁插入,如果正確會十分順利的整根沒入。 垂直體位,深度3cm。
⑤ 小鼠灌胃 處死 解剖
目的:觀察「酒花素油劑」小鼠口服和大鼠皮膚用葯的毒性反應。方法:小鼠灌胃給予不同濃度的「酒花素油劑」(各劑量間比值為0.85),觀察死亡情況,用Bliss法計算LD 50 。大鼠背部脫毛,塗以不同濃度的「酒花素油劑」,塗葯面積約占體表面積的10%,破損皮膚組用針尖劃破表皮。給葯後觀察大鼠的體重及中毒反應。結果:小鼠口服「酒花素油劑」後的LD 50 為557.06 mg/kg,中毒表現主要為肢體抽搐和呼吸困難。大鼠完整皮膚對濃度為臨床用濃度10倍的「酒花素油劑」能較好耐受,破損皮膚對7倍於臨床用濃度的「酒花素油劑」亦能較好耐受。結論:「酒花素油劑」口服為低毒性物質,完整皮膚和破損皮膚用葯均較為安全。
「酒花素油劑」為上海華光啤酒廠生產的,用於促進慢性瘡瘍及燒傷創口等癒合的外用制劑。為了考察「酒花素油劑」的安全性,本文擬觀察「酒花素油劑」一次給予小鼠口服後所產生的毒性反應及死亡情況,並觀察完整皮膚及破損皮膚的大鼠在短期內接觸「酒花素油劑」後所產生的毒性反應。
1 材料
1.1 動物:昆明種小鼠,體重18~22 g,雌雄各半;SD大鼠,體重170~230 g,雌雄各半,由第二軍醫大學實驗動物中心提供。
1.2 葯品:「酒花素」及中性植物油(溶劑)由華光啤酒廠提供。根據實驗要求,將「酒花素」溶於中性植物油中,配製成不同濃度的「酒花素油劑」。
2 實驗方法
2.1 小鼠口服LD50〔1〕
根據預試結果,在葯物劑量為366~970 mg/kg的范圍內,將小鼠按體重均勻分為7組,每組10隻(�♀各5隻),各劑量間距為0.85,灌胃給葯體積為每10 g體重0.1 ml。另設一溶劑對照組,僅給中性植物油0.8 ml/只。
小鼠禁食12小時後灌胃給葯,給葯後即開始觀察動物的毒性反應情況,及時記錄死亡數。死亡動物立即進行解剖,觀察內臟器官的病變情況。未死動物連續觀察9天,9天後處死,解剖,觀察臟器變化。
用Bliss法計算LD 50 ,採用計算機「NDST程序」進行運算。
2.2 大鼠皮膚急性毒性實驗〔2〕
實驗動物分為完整皮膚和破損皮膚兩部分,每個部分又分為大、中、小三個劑量組,劑量間距為0.7,每組10隻大鼠。另設溶劑對照組,每組6隻大鼠。
大鼠在氯胺酮(90 mg/kg ip)麻醉下,進行背部脫毛(用剃刀仔細剪去背部的毛),脫毛范圍約為4.5 cm×7 cm(約占體表面的10%左右)。在此脫毛區內均勻塗以不同濃度的「酒花素油劑」及溶劑,約0.6 ml/只,塗完後用無毒塑料薄膜覆蓋,綳帶包紮。破損皮膚組大鼠在背部脫毛區用針尖劃破表皮,以滲血為度,然後再塗以不同濃度的「酒花素油劑」。給葯後即開始觀察動物的全身毒性反應,死亡動物立即進行屍體解剖,肉眼觀察各臟器的病變情況,10天後處死大鼠,大體解剖,肉眼觀察全身各器官的變化情況。
3 結果
3.1 小鼠口服LD 50
小鼠灌胃給葯後,死亡動物約在0.5~2小時內出現呼吸急促、煩躁等表現,隨後出現肢體抽搐,死亡前有明顯的驚厥表現。死亡一般發生在給葯後的1~6小時內,個別發生在12~48小是內。死後立即屍檢可見,小鼠因死前的肌肉強直而表現為屍體僵硬,心臟停跳於收縮狀態。內臟重要器官(心、肺、肝、脾、腎及消化道等)未見充血、水腫及明顯的器質性變化。存活動物多數有一過性的呼吸急促表現,24小時內活動稍差,食慾減少。24小時(個別48小時)後逐漸恢復活動和攝食,一般情況良好,無其他不良反應的表現發生。連續觀察9天後處死小鼠,大體解剖未見肉眼可見的病理變化。溶劑對照組10隻小鼠給葯後無明顯的毒性反應出現,觀察10天後處死,大體解剖亦無異常發現。
各劑量組的死亡情況見表1,死亡率無明顯的性別差異。
用Bliss法計算得LD 50 =577.06 mg/kg,95%可信限范圍為505.74~658.43 mg/kg。
3.2 大鼠皮膚急性毒性實驗
各劑量組大鼠的死亡情況及給葯前後的體重變化情況見表2。
表1 小鼠口服「酒花素油劑」後LD 50 計算(Bliss法)
劑量(mg/kg)
對數劑量(X)
動物數(只)
死亡動物數(只)
死亡率(%)
機率單位(Y)
970
2.987
10
10
100
6.75
824
2.916
10
8
80
6.20
701
2.846
10
7
70
5.66
596
2.775
10
6
60
5.11
506
2.704
10
4
40
4.56
430
2.633
10
2
20
4.01
366
2.563
10
0
0
3.46
表2 大鼠皮膚用「酒花素油劑」後的毒性反應
組
別
葯物濃度(%)
動物數(只)
死亡動物數(只)
體重 (g,x±s)
用葯前 用葯後
完
整
皮
膚
A
53.67
10
0
206±19
210±24
B
37.57
10
0
207±21
220±20
D
溶劑
6
0
198±19
206±22
破
損
皮
膚
A
53.67
10
2
200±20
204±23
B
37.57
10
0
202±18
207±21
C
26.30
10
0
198±19
199±24
D
溶劑
6
0
206±22
208±20
在完整皮膚的大鼠中,兩個用葯組及溶劑對照組均無明顯的毒性表現,用葯後飲食、活動無明顯變化。各組動物給葯局部均未發現明顯的紅、腫等刺激反應,1周後脫毛區開始長毛。連續觀察10天後處死大鼠,大體解剖未見明顯的臟器異常變化。
破損皮膚大鼠用葯後,大劑量組在4~24小時內有2隻死亡,死前出現明顯的呼吸困難及輕度肌肉抽搐,死後屍體解剖無明顯的異常發現。另有兩只大劑量組及1隻中劑量組的大鼠在用葯後8~12小時內出現一過性的呼吸困難。其餘各用葯組及溶劑對照組的大鼠均未見明顯的毒性反應,僅少數動物在用葯當天食慾稍差。連續觀察10天,大鼠飲食、活動均無異常,體重變化亦不明顯。大鼠皮膚破損區創口第二天開始結痂,無明顯的紅腫及潰爛表現,亦無感染發生。創口約1周左右癒合,無明顯疤痕。觀察10天,部分大鼠脫毛局部已開始長毛,10天後處死,大體解剖未發現肉眼可見的異常變化。
4 討論
酒花素是從啤酒花中提取的有效成分,主要由蛇麻酮、草酮等組成。已有的研究資料表明,酒花素有一定的抗菌和促進肉芽組織增生的作用。本實驗的結果顯示,大鼠在用葯面積占體表面積10%的情況下,破損皮膚對濃度為26.30%的「酒花素油劑」能較好耐受,對37.57%的濃度亦能耐受,且破損皮膚創口癒合較快,無感染發生。該兩濃度分別為臨床用葯濃度的5倍和7倍(臨床用葯濃度為5%)。完整皮膚對於臨床用葯濃度10倍劑量的「酒花素油劑」亦能耐受,不出現明顯的中毒反應。作為溶劑的中性植物油用在破損皮膚和完整皮膚上均無明顯的毒性反應。小鼠口服該葯的LD 50 為577.06 mg/kg,屬低毒物質。以上結果提示,「酒花素油劑」臨床應用較為安全。
⑥ 小鼠灌胃有沒有好的方法
左右大拇指和食指抓住小鼠耳朵那裡的皮,無名指和小拇指扣住後腿和尾巴。不要讓小鼠四處蹭。右手灌胃時,個人體會是針順著小鼠門牙旁邊插進去,彎的一面對著自己,順著針的曲線滑下去。中間老鼠掙扎不要把針取出來,可以停頓一下,觀察老鼠的反應,看是否插到氣管裡面。一般進針3到5CM,就可以打葯OVER了。一般注意2點就差不多了,抓老鼠要快,不然弄久了小鼠可以激怒,2是不要打葯打進氣管,假如是做亞慢性實驗的話你會很慘,第二天跑過去一看老鼠死了。