Ⅰ 如何通過細胞實驗計算動物實驗的用葯濃度
陽性葯要看你的需要了，小鼠用葯劑量應該按人鼠計量公式（人：70kg，臨床用量1mg)小鼠（20g）=1×0.0026×50＝0.13mg／kg換算下就可以了！一般都是以人的臨床最大劑量為實驗動物的低劑量，然後按(1:2)以此類推確定中劑量、高劑量
Ⅱ 如何通過細胞實驗計算動物實驗的用葯濃度
IC50是半抑制率，意思是抑制率50%的時候葯物的濃度。把葯品稀釋成不同的濃度，然後計算各自的抑制率，以葯品的濃度為橫坐標，抑制率為縱坐標作圖，然後得到50%抑制率時候的葯品濃度，就是IC50。要點：葯品2倍稀釋，多做梯度，做點線圖即可!
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Ⅲ 細胞加葯的換算，請幫忙
2.389nmol/ml=2389nmol/l.根據原始濃度x原始葯物體積＝目標濃度x目標體積
原始葯物體積＝50x100/2389ml=2.093ml
如果葯物溶解在有機溶液里， 加入細胞最好稀釋一千倍以上以防溶液毒性。這就需要你濃縮原始葯物。 如果葯物溶解在水或水溶液里則沒有此問題。
Ⅳ mtt和western blot加葯濃度是以細胞量計算嗎
mtt和western blot加葯濃度是以細胞量計算
做western blot需要多少細胞並不是一個固定的值
這主要取決於蛋白的表達量，沒有一個絕對的量
如果做細胞總蛋白的話，至少10的4次方細胞每微升蛋白裂解液。一般可以每泳道取10的5次方細胞每微升蛋白裂解液（即10微升上樣）
根據這個數量級，結合western blot結果進行調整即可確認做western blot需要多少細胞
做western blot需要多少細胞並不是一個固定的值 這主要取決於蛋白的表達量，沒有一個絕對的量 如果做細胞總蛋白的話，至少10的4次方細胞每微升蛋白裂解液。一般可以每泳道取10的5次方細胞每微升蛋白裂解液（即10微升上樣） 根據這個數量級，結合western blot結果進行調整即可確認做western blot需要多少細胞
Ⅳ MTT實驗前期細胞密度如何確定，怎麼計算葯物濃度
⒈選擇適當的細胞接種濃度。一般情況下，96孔培養板的一內貼壁細胞長滿時約有105個細胞。但由於不同細胞貼壁後面積差異很大，因此，在進行MTT試驗前，要進行預實驗檢測其貼壁率、倍增時間以及不同接種細胞數條件下的生長曲線，確定試驗中每孔的接種細胞數和培養時間，以保證培養終止致細胞過滿。這樣，才能保證MTT結晶形成數量與細胞數呈的線性關系。否則細胞數太多敏感性降低，太少觀察不到差異。
⒉葯物濃度的設定。一定要多看文獻，參考別人的結果再定個比較大的范圍先初篩。根據自己初篩的結果縮小濃度和時間范圍再細篩。切記！否則，可能你用的時間和濃度根本不是葯物的有效濃度和時間。
⒊ 時間點的設定。在不同時間點的測定OD值，輸入excel表，最後得到不同時間點的抑制率變化情況，畫出變化的曲線，曲線什麼時候變得平坦了（到了平台期）那個時間點應該就是最好的時間點（因為這個時候的細胞增殖抑製表現的最明顯）。
⒋培養時間。200ul的培養液對於10的4～5次方的增殖期細胞來說，很難維持68h，如果營養不夠的話，細胞會由增殖期漸漸趨向G0期而趨於靜止，影響結果，我們是在48h換液的。
⒌MTT法只能測定細胞相對數和相對活力，不能測定細胞絕對數。做MTT時，盡量無菌操作，因為細菌也可以導致MTT比色OD值的升高。
⒍理論未必都是對的。要根據自己的實際情況調整。
⒎實驗時應設置調零孔，對照孔，加葯孔。調零孔加培養基、MTT、二甲基亞碸。對照孔和加葯孔都要加細胞、培養液、MTT、二甲基亞碸，不同的是對照孔加溶解葯物的介質，而加葯組加入不同濃度的葯物。
⒏避免血清干擾。用含15%胎牛血清培養液培養細胞時，高的血清物質會影響試驗孔的光吸收值。由於試驗本底增加，會試驗敏感性。因此，一般選小於10%胎牛血清的培養液進行。在呈色後，盡量吸凈培養孔內殘余培養液。 MTT 溶液的配製方法
通常，此法中的MTT 濃度為5mg/ml。因此，可以稱取MTT 0.5克，溶於100 ml的磷酸緩沖液（PBS）或無酚紅的培養基中，用0.22μm濾膜過濾以除去溶液里的細菌，放4℃ 避光保存即可。在配製和保存的過程中，容器最好用鋁箔紙包住。
需要注意的是，MTT法只能用來檢測細胞相對數和相對活力，但不能測定細胞絕對數。在用酶標儀檢測結果的時候，為了保證實驗結果的線性，MTT 吸光度最好在0-0.7 范圍內。
MTT一般最好現用現配，過濾後4℃避光保存兩周內有效，或配製成5mg/ml保存在-20度長期保存，避免反復凍融，最好小劑量分裝，用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光以免分解。我一般都把MTT粉分裝在EP管里，用的時候現配，直接往培養板中加，沒必要一下子配那麼多，尤其當MTT變為灰綠色時就絕對不能再用了。
MTT有致癌性，用的時候小心，有條件最好帶那種透明的簿膜手套.配成的MTT需要無菌，MTT對菌很敏感；往96孔板加時不避光也沒有關系，畢竟時間較短，或者你不放心的時候可以把操作台上的照明燈關掉.
配製MTT時用用PBS溶解，也有人用生理鹽水配，60℃水浴助溶。
Ⅵ 細胞培養液里的細胞怎麼計算細胞個數
實驗原理：當待測細胞懸液中細胞均勻分布時，通過測定一定體積懸液中的細胞的數目，即可換算出每毫升細胞懸液中細胞的細胞數目。
具體操作：
1. 將計數板及蓋片擦拭乾凈，並將蓋片蓋在計數板。
2. 將細胞懸液吸出少許，滴加在蓋片邊緣，使懸液充滿蓋片和計數板之間，靜置3min，注意蓋片下不要有氣泡，也不能讓懸液流入旁邊槽中。
3. 計算板四大格細胞總數，壓線細胞只計左側和上方的。然後按公式計算：
細胞數/mL=四大格細胞總數/4×104
說明：公式中除以4，因為計數了4個大格的細胞數。
公式中乘以104因為計數板中每一個大格的體積為：
1.0mm（長）×1.0mm（寬）×0.1mm（高）=0.1mm3 而 1ml=1000mm3
（注意：鏡下偶見有兩個以上細胞組成的細胞團，應按單個細胞計算，若細胞團10%以上，說明分散不好，需重新制備細胞懸液）
Ⅶ 細胞實驗新手，請問細胞種板時怎麼計算細胞濃度和要加
直徑3.5厘米皿2ml培養基
6厘米3ml
10厘米6ml
6孔板每個孔2ml,12孔板1ml,往後依次減半
細胞濃度一般要看你細胞的增殖能力,一般細胞系的話傳代按照1傳4的比例種板就可以了,傳同一大小的皿,不同大小的按比例推算
Ⅷ 怎麼確定培養的細胞的給葯計量和時間
每個細胞都不一樣,一般是細胞長到80%的時候可以鋪板你可以先做個生長曲線,確定最佳的鋪板密度和生長時間,比如PC12就加葯6小時就行,而Sao-2需要48小時,一般你可以試試培養12小時
Ⅸ 如何計算細胞50%生存率的葯物濃度
葯物體外實驗濃度很難根據臨床上用葯的濃度換算，因為這和葯物的吸收利用度，肝臟的代謝、葯物與載體蛋白的結合等因素的影響有關。
如果有葯代動力學的資料好一些，血葯濃度對體外濃度有一些參考價值，根據臨床用葯量來推算體外濃度是不太可靠的。
有人總結了一個大概的公式：試驗葯物濃度（ug/ml)=60×臨床用葯劑量（/kg.d）×2×10的3次方÷5000
這只能做參考，還是要做一做MTT，算一下抑制率，再最後確定濃度。
Ⅹ 到底怎樣計數細胞呢稀釋倍數怎麼算
一般來說，細胞的計數方法是：細胞數/mL=4個大格細胞總數/4×10000×稀釋倍
數
操作步驟：
1.取10ul細胞懸液與10ul台盼蘭混合均勻於1.5ml離心管中。
2.蓋上蓋玻片，取10ul混合液自血球計數盤上方加入，於10倍生物顯微鏡下觀察，活細胞不染色，死細胞被染成藍色。
3.分別計數四個大方格，得到細胞總數，再除以4，乘以稀釋倍數（本實驗為2），最後乘以104，即為每ml細胞懸液中細胞數。若細胞位於線上，只計上線與左線（計上不計下，計左不計右）。
註：
1.細胞數/ml＝4大格細胞總數×稀釋倍數×104/4；每一大格的體積為＝0.1cm×0.1cm×0.01cm＝10-4ml
2.計數板計數時，最適細胞濃度為5～10×105個/ml，此范圍外計數誤差偏大。
3.高濃度細胞懸液，可取出部分作稀釋或連續稀釋後計數。
例
活細胞數/方格：55，62，49，59；死細胞數/方格：5，3，4，6；細胞總數＝243
平均細胞數/方格＝60.75；稀釋倍數＝2；
細胞數/ml：60.75×104×2＝1.22×106；
細胞數/flask（10ml）：1.22×106×10ml＝12.2×106
存活率：225/243﹦92.6%