菌種鑒定方法視頻

① 食用菌菌種質量鑒定的內容和方法有哪些

1、外觀直接觀察鑒定
外觀菌種，菌絲濃白、粗壯、富有彈性，則生命力強；如果菌種菌絲萎縮，乾燥無色澤，或菌絲體自溶產生了多量紅褐色液體，則生活力已變弱，不宜再用；木塊菌種如仍保持硬實，則屬於生活力強的菌種，如若木塊變得軟化鬆散，則已老化，不宜使用。
2、培養觀察鑒定
對於分離、選育和引進的菌種，通過培養，觀察菌絲體對干、濕度和溫度等方面的適應特性。如將菌絲體置於偏干、偏濕和干濕相宜的條件下培養，若菌絲在前兩種條件下能良好生長，而在干濕相宜的條件下生長最佳，則說明是好菌種。
3、液體培養鑒定

配製2％糖水溶液，經常規滅菌消毒，挑取黃豆(4165, 7.00, 0.17%)粒大的菌塊，放入100毫升上述溶液中，置於25——28℃溫度下培養3——7天後，若液面出現氣泡，產生「油皮」，發生渾濁現象，說明菌種本身有雜菌；如果苗塊下沉，或遲遲才長出很薄的菌絲層，則說明菌種生活力弱；如若液面四周的菌絲生長快，且濃白呈棉絮狀，則表明菌種生命力強。
4、鋸木屑瓶栽鑒定和周期產量鑒定
瓶栽鑒定的做法與培育栽培的方法相似，把鋸木屑培養料裝得松一些，適當加大濕度，把需要鑒定的菌種接種於培養基中，做好記錄，在26℃恆溫下培養15天。然後使溫度降至15——20℃，並給予較好的散射光條件，再培育半個月左右，在瓶壁和料面上就會出現子實體原基和少量子實體。若未發現雜菌和異常現象，再把菌種接在木段上，做周期產量鑒定。如果子實體生長旺盛，高產優質，具備優良品種特性，並且沒有雜菌混生，說明菌種可靠，可以保存並投入大面積生產。實踐證明，以上菌種質量的鑒定方法是比較科學的，可以篩選出優良菌種，為廣大用戶服務。

② 菌種鑒別的步驟是怎麼樣的

第一步,分離純化,觀察純種菌種的菌落形態,包括菌落大小,粘稠程度,顏色,濕度,邊緣等等.
第二步.菌株生理生化特性的鑒定,如發酵試驗,耐鹽,最適PH,溫度,甲基紅,吲哚,檸檬酸等試驗
第三步,16或18sDNA的序列鑒定
第四步：根據上述結果,鑒定目的菌株

③ 如何鑒定菌種

在杏鮑菇、白靈菇生產中，只有具備優良的菌種，通過科學的培育管理，才能實現優質、高產、高效。因此菌種的優劣是事關千家萬戶的切身利益和菌種生產廠家信譽的大事。在現實生產中，也常發現有的菌種廠以贏利為目的，粗製濫造。加之有些菇農對菌種質量缺乏識別能力，致使在生產中減產、絕收，造成巨大的經濟損失。因此嚴格菌種質量，加強對菌種的鑒定和識別是當前食用菌發展中的首要任務，也是最主要的技術環節和要求。
菌種質量的鑒定，嚴格地講，應從形態、生理、栽培和經濟效益等方面進行綜合檢測和評價。但要完成各種指標，除了需掌握一定的基礎知識和基本技術外，還需具備一定的儀器設備及人力物力和時間。因此，一般生產者是很難完成的。這里僅將幾種常用、簡便、易行的方法予以介紹，供生產者參考。
（1）直接觀察。
對引進的母種，首先要用肉眼觀察包裝是否符合要求，棉塞有無松動，試管有無破損，棉塞中有無雜菌和病蟲害侵染，菌絲色澤是否正常、有無老化等現象。購進或自製的原種，瓶內菌絲應粗壯整齊、分枝濃密、色濃白呈絨毛狀，說明生長旺盛。如瓶底出現黃水、菌絲萎縮與瓶壁脫離，或出現原基扭結，說明菌種老化應淘汰。（2）菌種純度檢查。
杏鮑菇菌絲是純白色的，白靈菇菌絲較杏鮑菇菌絲稍淺些。如在菌種管或菌種瓶中出現其他顏色的菌絲或孢子（綠色、黃色、黑色等），則說明菌種不純，被雜菌污染不能使用。如果在接菌時發現菌種有異味也說明菌種被雜菌污染，不能使用。（3）吃料能力鑒定。
將母種接入最佳配方的原種培養基中，或將原種接入栽培袋中觀察菌絲生長情況。經1周的培養，如果菌種塊能很快萌發並迅速向四周的培養料中生長伸展，說明菌種的吃料能力強。反之，菌種塊萌發後生長緩慢，遲遲不向四周和料層深處伸展，則表明菌種對培養料的適應能力差。（4）觀察菌絲長勢。
可先將供測的菌種接入其適宜的試管培養基上進行培養，如果菌絲生長整齊濃密、健壯有力，則表明為優良菌種。若菌絲生長緩慢或長速太快，稀疏無力，參差不齊，容易衰老，則表明菌種質劣。（5）栽培試驗觀察。
這是菌種質量鑒定最可靠的方法。通過一定的栽培試驗，凡具備優質高產、抗雜能力強和遺傳性穩定的菌株，才是優良和可推廣應用的品種。

④ 野生菌的菌株鑒定主要有哪些方法基本的過程是什麼

毒菌的顏色比較鮮艷，有疣，毒菌的帽子上會有疙瘩，有的有紅斑、溝托、溝裂，有的菌子上有菌托、菌環，一般的毒菌摘斷以後有漿汁流出來，味道刺鼻。
此外，還可以從以下幾方面加以識別：
一是觀外形。一般的毒菌的顏色較可食用菌鮮艷，菌傘上呈紅紫、黃色或雜色斑點。柄上有環和托。
二是聞氣味。毒菌往往有辛辣、惡臭及苦味，可食用菌則有菌菇固有的香味。
三是變色試驗。用蔥白在菌蓋上擦一下，如果蔥白變成青褐色，說明有毒，反之無毒；毒菌煮熟後遇上銀器往往變成黑色或褐色。
四是牛奶試驗。將少量鮮牛奶灑在菌表面，如果牛奶在其表面發生結塊現象，則可能有毒。
五 看分泌物
將採摘的新鮮野蘑菇撕斷菌株，無毒的分泌物清亮如水（個別為白色），菌面撕斷不變色；有毒的分泌物稠濃，呈赤褐色，撕斷後在空氣中易變色。

⑤ 請問一下菌種鑒定的方法和實驗步驟

實驗步驟：菌種鑒定工作是各類微生物學實驗室都經常遇到的基礎性工作。不論鑒定對象屬哪一類，其工作步驟都離不開以下三步：①獲得該微生物的純種培養物；②測定一系例必要的鑒定指標；③查找權威性的鑒定手冊。 一、經典分類鑒定方法 群體：菌落形態，在半固體或液體培養基中的生長狀態等
* 形態 個體：細胞形態，染色反應，各種特殊構造等
* 營養要求：能源，碳源，氮源，生長因子等
* 生理、生化反應 酶；產酶種類和反應物性等
* 代謝產物：種類，產量，顯色反應等
* 經典指標 生態特性：生長溫度，對氧的需要，宿主種類等
* 生活史特點
* 血清學反應
* 噬菌體的敏感性
* 其它
經典分類法
經典分類法是一百多年來進行微生物分類的傳統方法。其特點是人為地選擇幾種形態生理生化特徵進行分類，並在分類中將表型特徵分為主、次。一般在科以上分類單位以形態特徵、科以下分類單位以形態結合生理生化特徵加以區分。 * A. 能在 60 o C 以上生長
* B. 細胞大，寬度 1.3~1.8mm ………………… 1. 熱微菌屬 ( Thermomicrobium )
* B. 細胞小，寬度 0.4~0.8mm
* C. 能以葡萄糖為碳源生長
* D. 能在 pH4.5 生長 …………………………… 2. 熱酸菌屬 ( Acidothermus )
* DD. 不能在 pH4.5 生長 …………………………………… 3. 棲熱菌屬 ( Thermus )
* CC. 不能以葡萄糖為唯一碳源 ……………… 4. 棲熱嗜油菌屬 ( 棲熱嗜獅菌屬 Thermoleophilum )
* AA. 不能在 60 o C 以上生長
二、現代分類鑒定方法
* 近年來，隨著分子生物學的發展和各項新技術的廣泛應用，促使微生物分類鑒定工作有了飛速發展。對微生物鑒定工作來說，已從經典的表型特徵的鑒定深入到現代的遺傳學特性的鑒定、細胞化學組分的精確分析以及利用電子計算機進行數值分類研究等新的層次上。
* （一）微生物遺傳型的鑒定
* DNA是除少數RNA病毒以外的一切微生物的遺傳信息載體。每一種微生物均有其自己特有的、穩定的DNA成分和結構，不同微生物間DNA成分和結構的差異程度代表著它們間新緣關系的遠近。因此，測定每種微生物DNA的若乾重要數據，是微生物鑒定中極其重要的指標：
1. DNA的鹼基組成(G+Cmol%)* 每一個微生物種的 DNA 中 GC mol% 的數值是恆定的，不會隨著環境條件、培養條件等的變化而變化，而且在同一個屬不同種之間， DNA 中 GCmol% 的數值不會差異太大，可以某個數值為中心成簇分布，顯示同屬微生物種的 GC mol% 范圍。 DNA 中 GC mol% 分析主要用於區分細菌的屬和種，因為細菌 DNA 中 GC 含量的變化范圍一般在 25 ％～ 75 ％；而放線菌 DNA 中的 GC 比例范圍非常窄 (37 ％～ 51%) 。一般認為任何兩種微生物在 GC 含量上的差別超過了 10 ％，這兩種微生物就肯定不是同一個種。因此可利用 G+C mol ％來鑒別各種微生物種屬間的親緣關系及其遠近程度。值得注意的是，親緣關系相近的菌，其 G+C mol ％含量相同或者近似，但 G+C mol ％相同或近似的細菌，其親緣關系並不一定相似，這是因為這一數據還不能反映出鹼基對的排列序列，而且如放線菌的 DNA 的 GC mol% 在 37 ～ 51 之間，企圖在這么小的范圍內區分放線菌的幾十個屬顯然是不現實的。要比較兩種細菌的 DNA 鹼基對排列序列是否相同，以及相同的程度如何，就需做核酸雜交試驗。
1. DNA的鹼基組成(G+Cmol%)* 1）每個生物種都有特定的GC%范圍，因此後者可以作為分類鑒定的指標。細菌的GC%范圍為25--75%，變化范圍最大，因此更適合於細菌的分類鑒定。
* 2）GC%測定主要用於對表型特徵難區分的細菌作出鑒定，並可檢驗表型特徵分類的合理性，從分子水平上判斷物種的親緣關系。
* 3）使用原則：
* G+C含量的比較主要用於分類鑒定中的否定每一種生物都有一定的鹼基組成，親緣關系近的生物，它們應該具有相似的G+C含量，若不同生物之間G+C含量差別大表明它們關系遠。但具有相似G+C含量的生物並不一定表明它們之間具有近的親緣關系。
1. DNA的鹼基組成(G+Cmol%)* 同一個種內的不同菌株G+C含量差別應在4～5%以下；同屬不同種的差別應低於10～15%。所以G+C含量已經作為建立新的微生物分類單元的一項基本特徵，它對於種、屬甚至科的分類鑒定有重要意義。
* 若二個在形態及生理生化特性方面及其相似的菌株，如果其G+C含量的差別大於5%，則肯定不是同一個種，大於15%則肯定不是同一個屬。
* 在疑難菌株鑒定、新種命名、建立一個新的分類單位時，G+C含量是一項重要的，必不可少的鑒定指標。其分類學意義主要是作為建立新分類單元的一項基本特徵和把那些G+C含量差別大的種類排除出某一分類單元。
2.核酸的鹼基組成和分子雜交：* 與形態及生理生化特性的比較不同，對DNA的鹼基組成的比較和進行核酸分子雜交是直接比較不同微生物之間基因組的差異，因此結果更加可信。
DNA-DNA 雜交
* DNA 雜交法的基本原理是用 DNA 解鏈的可逆性和鹼基配對的專一性，將不同來源的 DNA 在體外加熱解鏈，並在合適的條件下，使互補的鹼基重新配對結合成雙鏈 DNA ，然後根據能生成雙鏈的情況，檢測雜合百分數。如果兩條單鏈 DNA 的鹼基順序全部相同，則它們能生成完整的雙鏈，即雜合率為 100% 。如果兩條單鏈 DNA 的鹼基序列只有部分相同，則它們能生成的「雙鏈」僅含有局部單鏈，其雜合率小於 100% 。由此；雜合率越高，表示兩個 DNA 之間鹼基序列的相似性越高，它們之間的親緣關系也就越近。如兩株大腸埃希氏菌的 DNA 雜合率可高達 100 ％，而大腸埃希氏菌與沙門氏菌的 DNA 雜合率較低，約有 70 ％。 G+Cmol ％的測定和 DNA 雜交實驗為細菌種和屬的分類研究開辟了新的途徑，解決了以表觀特徵為依據所無法解決的一些疑難問題，但對於許多屬以上分類單元間的親緣關系及細菌的進化問題仍不能解決。
DNA — rRNA 雜交
* 目前研究 RNA 鹼基序列的方法有兩種。一是 DNA 與 rRNA 雜交，二是 16S rRNA 寡核苷酸的序列分析。 DNA 與 rRNA 雜交的基本原理、實驗方法同 DNA 雜交一樣，不同的是① 是 DNA 雜交中同位素標記的部分是 DNA ，而 DNA 與 rRNA 雜交中同位素標記的部分是 rRNA 。② DNA 雜交結果用同源性百分數表示，而 DNA 與 rRNA 雜交結果用 Tm(e) 和 RNA 結合數表示。 Tm(e) 值是 DNA 與 rRNA 雜交物解鏈一半時所需要的溫度。 RNA 結合數是 100 m gDNA 所結合的 rRNA 的 m g 數。根據這個參數可以作出 RNA 相似性圖。在 rRNA 相似性圖上，關系較近的菌就集中到一起。關系較遠的菌在圖上占據不同的位置。用 rRNA 同性試驗和 16SrRNA 寡核苷酸編目的相似性比較 rRNA 順反子的實驗數據可得到屬以上細菌分類單元的較一致的系統發育概念，並導致了古細菌的建立。
3.建立16 S r RNA系統發育樹
* a）使生物進化的研究范圍真正覆蓋所有生物類群；
* 傳統的生物進化研究，主要基於復雜的形態學和化石記載，因此多限於研究後生生物（metazoa），而後者僅占整個生物進化歷程的1/5
* b）提出了一種全新的正確衡量生物間系統發育關系的方法；
* c）對探索生命起源及原始生命的發育進程提供了線索和理論依據；
* d）突破了細菌分類僅靠形態學和生理生化特性的限制，建立了全新的微生物分類、鑒定理論；
* e）為微生物生物多樣性和微生物生態學研究建立了全新的研究理論和研究方法，特別是不經培養直接對生態環境中的微生物進行研究。
3、 16S rRNA(16S rDNA) 寡核苷酸的序列分析
* 首先， 16S rRNA 普遍存在於原核生物（真核生物中其同源分子是 18S rRNA ）中。 rRNA 參與生物蛋白質的合成過程，其功能是任何生物都必不可少的，而且在生物進化的漫長歷程中保持不變，可看作為生物演變的時間鍾。其次，在 16S rRNA 分子中，既含有高度保守的序列區域，又有中度保守和高度變化的序列區域，因而它適用於進化距離不同的各類生物親緣關系的研究。第三， 16S rRNA 的相對分子量大小適中，約 1 540 個核苷酸，便於序列分析。因此，它可以作為測量各類生物進化和親緣關系的良好工具。
分離菌株 16S rRNA 基因
* 。從平板中直接挑取一環分離菌株細胞 , 加入 100μL 無菌重蒸 H 2 O 中 , 旋渦混勻後 , 沸水浴 2min, 12 000r min -1 離心 5min, 上清液中即含 16S rRNA 基因，可直接用於 PCR 擴增。分離菌株 16S rRNA 基因的 PCR 擴增和序列測定的一般步驟為： 16S rRNA 基因的 PCR 引物： 5'-AGAGT TTGAT CCTGG CTCAG-3' ； 5'-AAGGA GGTGA TCCAG CCGCA-3' 。擴增反應體積 50 m L ，反應條件為 95 ℃預變性 5min ， 94 ℃變性 1min ， 55 ℃退火 1min ， 72 ℃延伸 2min ，共進行 29 個循環， PCR 反應在 PTC-200 型熱循環儀上進行。取 5 m L 反應液在 10g L -1 的瓊脂糖凝膠上進行電泳檢測。 PCR 產物測序可由專門技術公司完成。
比對分析
* 測序得到 分離菌株 16S rDNA 部分序列，此序列一般以 *.f.seq 形式保存，可以用寫字板或 Editsequence 軟體打開，將所得序列通過 Blast 程序與 GenBank 中核酸數據進行比對分析 ( http://www.ncbi.nlm.nih.gov/blast ) ，具體步驟如下：點擊網站中 Nucleotide BLAST 下 Nucleotide-nucleotide BLAST [blastn] 選項，將測序所得序列粘貼在「 search 」網頁空白處，或輸入測序結果所在文件夾目錄，點擊核酸比對選項，即「 blast 」，然後點擊「 format 」，計算機自動開始搜索核苷酸資料庫中序列並進行序列比較，根據同源性高低列出相近序列及其所屬種或屬，以及菌株相關信息，從而初步判斷 16S rDNA 鑒定結果。
比對分析
* 遺傳距離矩陣與系統發育樹構建，可採用 DNAStar 軟體包中的 MegAlign 程序計算樣本間的遺傳距離。由 GenBank 中得到相關菌株的序列，與本研究分離菌株所測得序列一起輸入 Clustalx1.8 程序進行 DNA 同源序列排列，並經人工仔細核查。在此基礎上，序列輸入 Phylip3.6 軟體包，以簡約法構建系統發育樹。使用 Kimura 2-parameter 法，系統樹各分枝的置信度經重抽樣法（ Bootstrap ） 500 次重復檢測， DNA 序列變異中的轉換和顛換賦於相同的加權值。
（二）細胞化學成分的鑒定* 除上述核酸成分外的其它化學成分的測定，是微生物化學分類法的重要內容，主要包括：1.細胞壁的化學成分。2.全細胞水解液的糖型。3.磷酸類脂成分的分析。4.枝菌酸的分析。5. 醌類的分析。6.氣相色譜技術的應用。
（二）細胞化學成分的鑒定
* 微生物分類中，根據微生物細胞的特徵性化學組分對微生物進行分類的方法稱化學分類法 (chemotaxonomy) 。在近二十多年中，採用化學和物理技術采研究細菌細胞的化學組成，已獲得很有價值的分類和鑒定資料，各種化學組分在原核微生物分類中的意義見表
細菌的化學組分分析及其在分類水平上的應用
細胞化學成分鑒定的意義
* 隨著分子生物學的發展，細胞化學組分分析用於微生物分類日趨顯示出重要性。細胞壁的氨基酸種類和數量現己被接受為細菌屬的水平的重要分類學標准。在放線菌分類中，細胞壁成分和細胞特徵性糖的分析作為分屬的依據，已被廣泛應用。脂質是區別細菌還是古菌的標准之一，細菌具有醯基脂 ( 脂鍵 ) ，而古菌具有醚鍵脂，因此醚鍵脂的存在可用以區分古菌。黴菌酸的分析測定己成為諾卡氏菌形放線菌分類鑒定中的常規方法之一。鞘氨醇單胞菌和鞘氨醇桿菌等細胞膜都含有鞘氨醇，因此鞘氨醇的有無可作為此類細菌的一個重要標志。此外某些細菌原生質膜中的異戊間二烯醌，細胞色素，以及紅外光譜等分析對於細菌、放線菌中某些科、屬、種的鑒定也都十分有價值。
（三）數值分類法
* 數值分類法亦稱統計分類法，是在約200年前與林奈同代人M.Adanson (1727 ~1806，法國植物學家)發展的分類原理基礎上藉助於現代的電子計算機技術而發展起來的。數值分類的基本步驟為：（1）計算兩菌株間的相似系數；（2）列出相似度矩陣；（3）將矩陣圖轉換成樹狀譜。
數值分類的基本步驟
數值分類法
* 又稱阿德遜氏分類法 。它的特點是根據較多的特徵進行分類，一般為 50 ～ 60 個，多者可達 100 個以上，在分類上，每一個特性的地位都是均等重要。通常是以形態、生理生化特徵，對環境的反應和忍受性以及生態特性為依據。最後，將所測菌株兩兩進行比較，並借用電子計算機計算出菌株間的總相似值，列出相似值矩陣 ( 圖 14-5) 。為便於觀察，應將矩陣重新安排，使相似度高的菌株列在一起，然後將矩陣圖轉換成樹狀譜 (dendrogram) ，再結合主觀上的判斷 ( 如劃分類似程度大於 85 ％者為同種，大於 65 ％者為同屬等 ) ，排列出—個個分類群。
數值分類法的優越性
* 數值分類法的優越性在於它是以分析大量分類特徵為基礎，對於類群的劃分比較客觀和穩定；而且促進對細菌類群的全面考查和觀察，為細菌的分類鑒定積累大量資料。但在使用數值分類法對細菌菌株分群歸類定種或定屬時，還應做有關菌株的 DNA 鹼基的 G + Cmol% 和 DNA 雜交，以進一步加以確證。

⑥ 微生物的菌種鑒定方法與步驟（鑒定到「株」一級）

基本上認可的方法就是隨機擴增多態性RAPD

⑦ 怎樣鑒定菌種真假

在杏鮑菇、白靈菇生產中，只有具備優良的菌種，通過科學的培育管理，才能實現優質、高產、高效。因此菌種的優劣是事關千家萬戶的切身利益和菌種生產廠家信譽的大事。在現實生產中，也常發現有的菌種廠以贏利為目的，粗製濫造。加之有些菇農對菌種質量缺乏識別能力，致使在生產中減產、絕收，造成巨大的經濟損失。因此嚴格菌種質量，加強對菌種的鑒定和識別是當前食用菌發展中的首要任務，也是最主要的技術環節和要求。
菌種質量的鑒定，嚴格地講，應從形態、生理、栽培和經濟效益等方面進行綜合檢測和評價。但要完成各種指標，除了需掌握一定的基礎知識和基本技術外，還需具備一定的儀器設備及人力物力和時間。因此，一般生產者是很難完成的。這里僅將幾種常用、簡便、易行的方法予以介紹，供生產者參考。
（1）直接觀察。
對引進的母種，首先要用肉眼觀察包裝是否符合要求，棉塞有無松動，試管有無破損，棉塞中有無雜菌和病蟲害侵染，菌絲色澤是否正常、有無老化等現象。購進或自製的原種，瓶內菌絲應粗壯整齊、分枝濃密、色濃白呈絨毛狀，說明生長旺盛。如瓶底出現黃水、菌絲萎縮與瓶壁脫離，或出現原基扭結，說明菌種老化應淘汰。（2）菌種純度檢查。
杏鮑菇菌絲是純白色的，白靈菇菌絲較杏鮑菇菌絲稍淺些。如在菌種管或菌種瓶中出現其他顏色的菌絲或孢子（綠色、黃色、黑色等），則說明菌種不純，被雜菌污染不能使用。如果在接菌時發現菌種有異味也說明菌種被雜菌污染，不能使用。（3）吃料能力鑒定。
將母種接入最佳配方的原種培養基中，或將原種接入栽培袋中觀察菌絲生長情況。經1周的培養，如果菌種塊能很快萌發並迅速向四周的培養料中生長伸展，說明菌種的吃料能力強。反之，菌種塊萌發後生長緩慢，遲遲不向四周和料層深處伸展，則表明菌種對培養料的適應能力差。（4）觀察菌絲長勢。
可先將供測的菌種接入其適宜的試管培養基上進行培養，如果菌絲生長整齊濃密、健壯有力，則表明為優良菌種。若菌絲生長緩慢或長速太快，稀疏無力，參差不齊，容易衰老，則表明菌種質劣。（5）栽培試驗觀察。
這是菌種質量鑒定最可靠的方法。通過一定的栽培試驗，凡具備優質高產、抗雜能力強和遺傳性穩定的菌株，才是優良和可推廣應用的品種。

⑧ 菌種鑒定的方法

傳統方法細菌做革蘭氏染色 運動性試驗 各種代謝 然後查伯傑氏細菌手冊；用分子做的話提總DNA，pcr擴增16srDNA全長片段，上NCBI資料庫比對，選擇近緣序列構建系統發育樹鑒定。
真菌的話主要根據形態，特別是有性型生殖形態鑒定；分子的話一般擴增ITS區域，比對，建樹鑒定。

⑨ 菌種鑒定的一般步驟(常規普通實驗室 不需高端設備的方法)

你問的問題確實太大了，不好詳細描述，我只能簡要地說一下：
首先要判斷你的菌種需要在什麼條件下生長，厭氧還是需氧等等，然後選擇合適的培養基進行分離培養（如果細菌含量少，那麼還需要增菌）。然後挑選在平板上的可疑菌落進行生化鑒定，此時就需要根據菌落形態、革蘭氏染色等方面對其進行判斷，然後根據生化反應的結果判斷你挑取的菌落是什麼細菌。
很顯然，最難的是最後一步，現在一般使用細菌鑒定板條（手工或儀器的）來鑒定是什麼細菌，一塊板條有很多生化項目，根據所有生化項目的結果得出一組編碼，通過編碼進行查詢。