農葯敏感性測試計算方法

『壹』 農葯細度測定方法

農葯粉劑的細度測定方法有兩種：一種為干篩法．適用於粉劑；另一種為濕篩法，適用於可濕性粉劑。干篩法是將烘箱中乾燥至恆重的樣品，自然冷卻至室溫，並在樣品與大氣達到濕度平衡後，稱取試樣，用適當孔徑的試驗篩篩分至終點，稱量篩中殘余物，計算細度。濕篩法是較常用的一種方法。在此僅介紹濕篩法。
(1)測定原理
將稱量好的試樣放入燒杯中潤濕、稀釋，然後倒入濕潤的試驗篩中，用平緩的自來水直接沖洗，再將試驗篩置於盛水的盆中繼續洗滌，將篩中殘余物轉移至燒杯中，乾燥殘余物，稱重，計算細度。
(2)儀器
①試驗篩：適當孔徑，並具有配套的接收盤和蓋子。
②燒杯：250 mL,100 mL。
③帶有橡皮罩的玻璃棒。
④乾燥器。
⑤烘箱：在100℃以內控溫精度為±2℃。
(3)測定步驟
①試樣的潤濕。稱取試樣20 g(准確至0.1g)，置於250 mL燒杯中，加入80 mL自來水，用玻璃棒攪動，使其完全潤濕。如果試樣抗潤濕，可加入適量非極性潤濕劑。
②試驗篩的潤濕。將試驗篩浸入自來水中，使金屬絲布完全潤濕。必要時可在自來水中加入適量非極性潤濕劑。
③測定。將燒杯中潤濕的試樣用自來水稀釋至約150 mL，攪拌均勻後全部倒入潤濕的標准篩中，用自來水沖洗燒杯，洗滌水並入篩中，直至燒杯中粗顆粒完全移至篩中為止。用直徑為9～10 mm的橡皮管導出的平緩的自來水沖洗篩中試樣，水速控制在4～5L/min,橡皮管末端出水口保持與篩緣平齊為度。在篩洗過程中，保持水流對准篩上的試樣，使其充分洗滌(如果試樣中有軟團塊，可用具有橡皮罩的玻璃棒輕壓，使其分散)，一直洗到通過試驗篩的水清亮透明為止。再將試驗篩移至盛有自來水的盆中，上下移動洗滌篩緣(始終保持在水面之上)，重復至2 min內無物料過篩為止。棄去過篩物，將篩中的殘余物沖洗至一角，再轉移至已在100℃恆重的燒杯中。靜置，待燒杯中顆粒沉降至底部後，傾去大部分水，加熱，將殘余物蒸發近干，於100℃(或根據產品的物化性能，採用其他適當溫度)的烘箱中烘至恆重，取出燒杯置於乾燥器中冷卻至室溫，稱重。
(4)結果計算
式中，m1為粉劑(或可濕性粉劑)試樣的質量，g；m2為燒杯中殘余物的質量，g。
兩次平行測定結果之差應在0.8％內。
14.2.6懸乳液分散穩定性的測定
懸浮劑的分散相主要為粒徑0.5～5um的固體農葯原葯，加工時將原葯和濕潤劑、分散助懸劑、增黏劑、防凍劑等助劑和分散介質混合而成。當分散介質為水時，稱為水懸劑，以礦物油或有機溶劑為分散介質時稱為油懸劑。對於不含水或其他液體分散介質而又能在水或其他介質中很好分散，形成懸浮液的粉、粒或片狀物的劑型，稱為干懸浮劑。
懸浮劑的分散穩定性是懸浮劑產品質量好壞的重要檢測性能之一，對制劑葯效發揮有著重要的影響。通常影響分散穩定性的因素主要有粒子粒徑的大小和分散助劑的性能。
(1)測定原理
懸浮劑是固體原葯微粒均勻地分散在連續相中所組成的固一液分散體系，此體系為熱力學不穩定體系，懸浮的粒子會很快發生顆粒凝聚，導致顆粒變大而沉降。在農葯加工中，通過粒徑大小的改變和分散助懸劑的加入，能有效地降低這一現象的發生。因此，在加工成制劑後，需觀察懸浮劑稀釋液在最初、放置一定時間和重新分散後該分散液的分散性。
(2)操作步驟
在室溫下，分別向兩個刻度量筒(量筒是否具塞？)中加標准硬水，用移液管向每個量筒，中滴加試樣(按規定數量)，滴加時移液管尖端盡量貼近水面，但不要在水面之下。最後加標准硬水至刻度。戴布手套，以量筒中部為軸心，重復上下顛倒，確保量筒中液體溫和地流動，不發生反沖，用其中一個量筒做沉澱和乳膏試驗，另一個量筒做再分散試驗。
①最初分散性。觀察分散液的分散情況，記錄沉澱、乳膏或浮油的體積。
②放置一定時間後的分散性：
沉澱體積的測定：
分散液制備好後，立即將分散液轉移至乳化管中，蓋上塞子，在室溫下直立，用燈照亮乳化管，調整光線角度和位置，達到對兩相界面的最佳觀察，如果有沉澱(通常反射光比透射光更易觀察到沉澱)，記錄沉澱體積。
頂部油膏(或浮油)體積的測定：
分散液制備好後，立即將其倒入乳化管中，至離管頂端附近，戴好保護手套，塞上帶有排氣管的橡膠塞，排除乳化管中所有空氣，去掉溢出的分散液，將乳化管倒置，在室溫下保持一段時間，沒有液體從乳化管排出就不必密封玻璃管的開口端，記錄已形成的乳膏或浮油的體積。測定乳化管總體積，並以下式校正測量出的乳膏或浮油的體積

『貳』 農葯殘留的檢測方法有幾種

農葯殘留檢測方法，總的來說可以分為常規檢測方法和速測方法。常規的檢測方法有氣象色譜、凝膠色譜及薄層色譜法。這些方法都是利用農葯在不同載體中的分配系數不同而得到分離，從而定性和定量來檢測農葯的種類及含量。速測方法主要有速測卡法和酶抑制率法兩種。無論是速測卡法還是酶抑制率法，其都是利用酶活性被抑制原理。

使用農葯殘留檢測儀器：生化分析受溫度影響極大，要求在恆溫下進行預反應，農葯殘留速測儀從功能上來看，它不但具有測試功能，而且還有恆溫水浴，定時等功能。保證預反應條件、提高精確度;另外，使用儀器很方便，不用調整波長，只需按鍵就能選擇自己所需的測試波長。

『叄』 誰知道敏感基線

答：敏感基線確定。是指對某種葯劑對害蟲敏感品系毒力回歸線的測定，敏感基線是比較抗葯性有無和抗葯性水平高低的標准。

害蟲抗葯性監測一般程序害蟲抗葯性監測一般可分為敏感基線確定、抗葯性定性診斷和定量抗性水平測定三個步驟：

（l）敏感基線確定。是指對某種葯劑對害蟲敏感品系毒力回歸線的測定，敏感基線是比較抗葯性有無和抗葯性水平高低的標准。目前採用的抗葯性指標，無論是抗性倍數或存活率，都是依據敏感基線得出的LD50或LD99作為基礎。抗性倍數是被測群體的反應中值與敏感品系反應中值的比值，一般廣泛接受的指標是：5倍以下為敏感，5－10倍為低抗，IO－4O倍為中抗；40倍以上為高抗。在一個地區，對於新開發、引進使用的農葯，一開始就測定某種害蟲對它的毒力回歸線，這雖然不能完全以此作為敏感基線（考慮到交互抗性問題）。但是，有此數據對於監測害蟲今後抗葯性的發展無疑是有用的。

（2）抗葯性定性診斷。是指為了初步判明田間害蟲群體中是否已出現抗葯性個體及其變化情況，以敏感基線求得的LD99作為「診斷劑量」處理被測害蟲群體。這個劑量對於敏感種群來講，幾乎可以引起百分之百的死亡（即存活率為O），而用這個劑量去處理其他被測種群，則可能有相當比例的個體存活。一般用診斷劑量（亦稱區分劑量）處理被測害蟲，其成活率超過5％或10％則表明該種群已產生抗性。

（3）定量抗葯性水平測定。是指將初步診斷為有抗葯性的蟲種採回實驗室，採用與敏感基線測定完全相同的方法，測出毒力回歸線，計算LD50，以第一步驟所述方法與敏感基線LD50相比，求抗性倍數。

『肆』 怎樣監測病原物抗葯性

因為大多數植物病原菌的致病階段處於單倍體時期，且繁殖系數大、周期短，所以植物病原菌抗葯性是發生速度最快、為害最嚴重的農業有害生物。同時，病原菌抗葯性不容易被農民肉眼識別，必須通過實驗室精密測定才能鑒別和診斷，因此，世界各國投入殺菌劑抗性監測研究的人力和財力也最多。

病原物抗葯性監測是指測定自然界病原物群體對使用葯劑敏感性的變化。包括在各地定點連年系統測定和對有抗葯性懷疑的地方臨時採集標本測定。最常用的監測方法是測定病原物生長量與葯劑的效應關系。常見方法有菌落直徑法，即在含有系列濃度殺菌劑培養基上測量葯劑對菌落線性增長速率的抑制效應。採用乾重法測量在含葯的液體培養基中培養的菌體乾重增長速率與葯劑的效應，更能夠准確反映殺菌劑對菌體生長的抑製作用。不過這種方法比較繁瑣，工作量大。當病菌以孢子繁殖生長時，亦可採用濁度法測定細胞生長量與葯劑的效應。

採用臨界劑量或鑒別劑量是檢測和測量抗葯性廣度的常用方法。如在含有完全能抑制野生敏感菌生長的殺菌劑濃度的培養基平板上，塗抹病原物混合孢子或其他繁殖體，進行適當培養後，檢查病菌的生長情況，計算抗葯性菌株的出現頻率。

採用孢子萌發法也可測定葯劑對不同菌株孢子萌發的抑制來鑒別抗葯性。但是，許多內吸性殺菌劑並不阻止孢子萌發，這時應該考慮對芽管形態和菌體發育的作用。

活體測定法是指把病菌接種到經殺菌劑處理過的植株或部分組織上，評估葯劑處理劑量與發病程度間的效應關系。這種活體測定方法不僅是測定專性寄生菌抗葯性的唯一方法，而且是驗證病菌在培養基上對葯劑敏感性差異是否與在寄主上的反應差異一致必不可少的方法。例如，麥角甾醇生物合成抑制劑和二甲醯亞胺類殺菌劑在離體條件下，很容易引起真菌的抗性突變，但是，這些突變體對寄主的致病性也常隨之降低。此外，在培養基上能對葉枯唑表現抗葯性的稻白葉枯病菌，則失去了致病能力，而在經葉枯唑、敵枯唑等處理的水稻上表現抗性的菌株，在培養基上反而不表現抗性。

已知有些殺菌劑對菌體的呼吸作用或生物合成過程等生命過程有顯著抑製作用，可以用生化測定法，測定不同殺菌劑濃度對這些過程影響程度的差異來比較不同菌株的敏感性。或者基於靶標蛋白三維結構變化而喪失與葯劑的親和性抗葯性機制，制備和利用單克隆抗體進行免疫檢測。最近，也有根據單核苷酸變異而產生抗葯性的機制使用DNA探針雜交和PCR指紋圖譜等分子生物技術進行病原物抗葯性監測的成功例子。定量PCR檢測技術的開發和應用，使病原菌的抗葯性早期監測和預警成為可能。

一種病原物對某一農葯的敏感性還常隨著個體的遺傳差異、培養基組分、瓊脂的質量、溫度、pH、測試環境和方法的不一致而有變化。如在含乙磷鋁的PDA培養基上，疫霉的生長不受影響，但是在不含磷酸鹽的合成培養基上，這種真菌對葯劑則變得敏感。因此，某種葯劑—病原物組合的抗葯性測定，不但要選用適當的方法和條件進行，而且被懷疑有抗葯性的菌株也必須用測得敏感基線同樣的方法和條件進行各種測試，最好在所有抗葯性測定中均包含有一個已知敏感的參考系。

在測定某種病原物各個個體對農葯不同濃度的效應後，如何進一步鑒別和評估它們的抗葯性，常用的標准有3種：第一種是用同一濃度測定各個體對葯劑的反應；第二種是測定最低抑制濃度；第三種是測定產生相同效應的濃度，如抑制菌體生長發育或致病50%的有效濃度（EC50）。

第一種標准常會過高地評估抗葯性水平或抗性程度。因為病菌對同一劑量的效應有時差異很大。第二種標准也有缺陷。因為有的菌株抗葯性水平很高，如灰黴菌（Botrytiscinerea）對多菌靈的抗葯性，難以用最低抑制濃度來評估抗葯性水平，有些殺菌劑即使在很高濃度下也不能完全抑制菌體生長，同樣不能採用這種分析標准。但灰霉野生敏感菌株對多菌靈特別敏感，亦可用最低抑制濃度作為鑒別抗性和敏感菌株的標准。採用第三種分析標准，根據殺菌劑的劑量與抑制菌體生長發育的效應關系，得出劑量與生長抑制率之間的回歸方程，然後根據對測定菌株和標准野生敏感菌株的相同抑制生長發育百分率的葯劑濃度的比較，鑒別抗性菌株並分析抗性水平。有些病菌對某些葯劑的敏感性是由多個微效基因決定的，表現出數量遺傳性狀，雖很難評估某一菌株的抗性水平，但可以通過測定某地區用葯前病原群體（一般需測100個菌株）對葯劑的敏感性分布，用葯後再測定病原群體的敏感性，由此可根據平均EC50之比來評估某一地區病原群體的抗性水平。

『伍』 農葯的葯效與防效是怎樣計算的

在葯效測試中，常根據病、蟲、草等不同的測試對象而採用不同的指標和葯效計算公式，但基本原則是一致的。有幾個基本參數在計算葯劑防治病、蟲、草的防效時是必須了解的。如殺蟲劑的死亡率、殺菌劑的發病率、病情指數等。

死亡率常為反映殺蟲劑葯效的一個最基本的指標，是指葯劑處理後，在一個種群中被殺死個體的數量占群體（供試總蟲數）的百分數。但在不用葯劑處理的對照組中，往往出現自然死亡的個體，因此需要校正。一般採用Abbott氏校正公式

這個公式的基本根據是假定自然死亡率及被葯劑處理而產生的死亡率是完全獨立而不相關的，並且自然死亡率在20%以下才適合此公式，而將自然死亡率所造成的影響予以校正。如果自然死亡率過低（5%以下），一般情況下可不校正。

殺菌劑葯效表示方法則常以病害種類及為害性質而定。如發病率、病情嚴重度、作物產品的產量、質量等，但最常用的是發病率和病情指數等。

病害分級的標准可根據病害種類及症狀、為害特點而靈活確定。

對殺蟲劑、殺菌劑以及除草劑防效的計算，可用HendersonTilton公式進行統一，只是參數代表不同的意義。

殺蟲劑

式中：Ta為處理區防治後存活的個體數量；Tb為處理區防治前存活的個體數量；Ca為對照區防治後存活的個體數量；Cb為對照區防治前存活的個體數量。

殺菌劑

式中：Ta為處理區防治後的病情指數；Tb為處理區防治前的病情指數；Ca為對照區防治後的病情指數；Cb為對照區防治前的病情指數。

如果葯前均不發病，即Cb=Tb

除草劑

式中：Ta為處理區防治後的株數；Tb為處理區防治前的株數；Ca為對照區防治後的株數；Cb為對照區防治前的株數。

『陸』 簡述農葯殘留檢測前處理步驟及檢測方法

檢測前處理程序

經典的農葯殘留分析步驟通常是:水溶性溶劑提取- 非水溶性溶劑再分配- 固相吸附柱凈化- 氣相或液相色譜檢測。其中提取和凈化是前處理部分,樣品前處理不僅要求盡可能完全提取其中的待測組分,還要盡可能除去與目標物同時存在的雜質,避免對色譜柱和檢測器等的污染,減少對檢測結果的干擾,提高檢測的靈敏度和准確性。

農葯殘留檢測技術

農葯殘留量檢測是微量或痕量分析,必須採用高靈敏度的檢測技術才能實現。自20世紀50年代,各國科學家就開始研究農葯殘留的檢測方法。常規檢測的分析方法有光譜法、酶抑製法和色譜法。

1、光譜法

光譜法是根據有機磷農葯中的某些官能團或水解、還原產物與特殊的顯色劑在特定的環境下發生氧化、磺酸化、絡合等化學反應,產生特定波長的顏色反應來進行定性或定量測定。檢出限在微克級。它可直接檢測固體、液體及氣體樣品,對樣品前處理要求低、環境污染小,分析速度快。

但是,光譜法只能檢測一種或具有相同基團的一類有機磷農葯,靈敏度不高,一般只能作為定性方法。

2、酶抑製法

酶抑製法是根據有機磷和氨基甲酸酯類農葯能抑制昆蟲中樞和周圍神經系統中乙醯膽鹼的活性,造成神經傳導介質乙醯膽鹼的積累,影響正常神經傳導,使昆蟲中毒致死這一昆蟲毒理學原理進行檢測的。

3、色譜法

色譜法是農葯殘留分析的常用方法之一,它根據分析物質在固定相和流動相之間的分配系數的不同達到分離目的,並將分析物質的濃度轉換成易被測量的電信號(電壓、電流等) ,然後送到記錄儀記錄下來的方法。主要有薄層色譜法、氣相色譜法和高效液相色譜法。

4、快速檢測技術

常見的有化學速測法、免疫分析法、酶抑製法和活體檢測法等。

化學速測法，主要根據氧化還原反應，水解產物與檢測液作用變色，用於有機磷農葯的快速檢測，但是靈敏度低，使用局限性，且易受還原性物質干擾。

免疫分析法，主要有放射免疫分析和酶免疫分析，最常用的是酶聯免疫分析（ELISA），基於抗原和抗體的特異性識別和結合反應，對於小分子量農葯需要制備人工抗原，才能進行免疫分析。

酶抑製法，是研究最成熟、應用最廣泛的快速農殘檢測技術，主要根據有機磷和氨基甲酸酯類農葯對乙醯膽鹼酶的特異性抑制反應。

活體檢測法，主要利用活體生物對農葯殘留的敏感反應，例如給家蠅餵食樣品，觀察死亡率來判定農殘量。該方法操作簡單，但定性粗糙、准確度低，對農葯的適用范圍窄。

『柒』 農葯殘留檢測的方法及原理

攜帶型農葯殘留速測儀及卡片的檢測原理和使用方法
攜帶型農葯殘留速測儀是根據國家標准方法GB/T5009.199 — 2003 )速測卡法(紙片法)而專門設計的儀器.主要用於果,蔬,茶,糧食,水及土壤中有機磷和氨基甲酸酯類農葯的快速檢測,特別適用於農產品質量檢測站的快速檢測,果蔬生產基地和專業戶採摘前田間地頭檢測,農貿批發銷售市場現場檢測,酒樓,食堂,家庭果蔬茶加工前安全檢測.
檢測原理:
儀器的檢測原理是利用速測卡中的膽鹼酯酶(卡②)可催化靛酚乙酸酯(卡①)水解為乙酸和靛酚,由於有機磷和氨基甲酸酯類農葯對膽鹼酯酶的活性有強烈的抑製作用,因此,根據顯色的不同,即可判斷樣品中含有機磷或氨基甲酸酯類農葯的殘留情況.①②
使用方法:
(1)開機 按住面板上的"開 / 關"鍵約2秒鍾,儀器開機(開機後再次按次鍵可關機):按[模式]鍵切換至"溫度",當溫達到40℃時,儀器發出一聲提示音,預熱完成,可以開始測試.
(2)裝片 將速測卡撕去上蓋膜對折後再展開,插入壓紙條下的各通道加熱板上(注意卡①一端在上方,卡②一端在下方),檢查速測卡放置位置是否正確,速測卡中間的虛線應與壓條對齊,不要歪斜.
(3)取樣 選擇有代表性的蔬菜或瓜果皮 ,擦去表面泥土,剪成一平方厘米左右碎片,取5克放入帶蓋瓶中,加入10毫升純凈水或緩沖溶液震盪50次(有條件擁護可配備超聲波清洗器攪拌),靜置2分鍾以上,每批最好做9個檢樣,同時做一個純凈水或緩沖液的空白對照,每剪完一個樣品,尖刀要洗凈後方可處.理另一個樣品,以免交駐污染.用移液搶取80微升樣品液加到白色葯片上. 如果檢測是在采樣現場或條件簡陋的情況下進行,可直接在待檢蔬菜葉尖部位滴2-3滴洗脫液,用另一片菜葉尖部在滴液處輕輕摩擦,使蔬菜表面的殘留農葯充分溶入洗液中.然後滴一滴在(卡②)上.
(4)測試 按〈啟動〉鍵,反應開始倒計時10分鍾("反應"指示符亮)當聽到儀器發出急促的蜂鳴提示音時關閉上蓋,顯色開始倒計時3分鍾("顯色"指示符亮):待儀器出緩和的蜂鳴提示音時,打開儀器上蓋,進行結果判定.結果判定與空白對照卡比較,若(卡②)不變色或略有淡黃色均為陽性結果,不變黃為強陽性結果,說明農葯殘留量較高,顯黃色色為弱陽性結果,說明農葯殘留量機對較低.(卡②)變為橘黃色或與空白對照卡相同,為陰性結果.附加說明本方法是生物化學反應,應盡可能避免一些物理和化學因素對酶活性的影響.反應最適酸鹼度為PH7.5左右,檢樣偏酸或偏鹼時應改用磷酸緩沖液浸提處理. 反應中,葯片表面應保持濕潤,最好將每一批樣品處理好後統一加樣,以免是過長蒸發干. 蔥,蒜,蘿卜,芹菜,茭白,蘑菇及番茄汁液中含有對酶活性有影響的植物次生物質,容易產生假陽性.處理這類樣品時,不宣剪切過碎,浸提時間不宜過長,以免液汁過多釋放影響檢測檢測結果.必要時可採用整株(體)蔬菜浸提的方法進行測定.農葯速測卡在常溫條件下有效期為壹年,貯存時要求放在陰涼,乾燥和避光處,有條件者放於4℃冰箱中最佳.農葯速測卡開封後最好在三天內用完,如一次用不完可存放在乾燥器中.農葯速測卡果蔬農葯殘留快速檢測卡是用對農葯高度敏感的膽鹼酯酶和顯色劑做成的酶試紙,可以快速檢測蔬菜中有機磷和氨基甲酸酯這兩大類用量較大,毒性較高的殺蟲劑的殘留情況,選用的酶對甲胺磷敏感,抗干擾性強,操作簡便,不需要配製試劑,不需要專業的技術培訓,可以不需要任何儀器設備單獨使用,也可配套農葯殘留快速檢測儀使用,提高檢測效率.產品容易貯存,攜帶方便,是現場檢測的最佳方法.

『捌』 怎樣評判葯害程度

測定的目的是了解一種農葯對某種或某些種類的作物或某種作物的某些品種易產生葯害，以及在何種情況下易出現葯害，以指導合理用葯，防止葯害的產生。這要進行一些試驗。
(1)植株施葯試驗 選擇田間或溫室盆栽生長一致的幼苗或成株，分成若干組，每組至少有20株苗。模擬田間使用的不同農葯濃度或劑量，至少有一個常用量、一個倍用量，再設一個對供試作物無影響對照葯(也可不設)及不用葯對照。採用噴霧法、浸液法、滴塗法或滴塗針刺法施葯。浸液法是選帶葉片的整枝或整株，在葯液中浸2～3秒鍾。滴塗法是將葯液定量滴在葉片表面；也可將葉片沿主脈分為兩半，一邊滴塗葯液，另一邊滴塗清水作對照。滴塗針刺法是在滴葯後，用細針輕輕刺一下，經一定時間後，按題114方法評判有無葯害或葯害程度。
(2)種子處理試驗 在田間或溫室進行，至少選一個常用量及一個倍用量，再設不用葯對照。採用拌種、浸種或土壤混葯後讓種子接觸葯土等方法施葯，測定是否影響種子萌發、出苗情況、幼苗生長情況、根系生長發育情況等。
(3)田間小區試驗 在大田使用農葯，作物產生葯害後，組織考察並分析原因，再進行專門條件的模擬試驗，判斷造成葯害的原因。小區設計同田間葯效試驗(參見第106題)。
(4)後茬作物影響試驗 若在田間使用或葯效試驗中，除草劑顯示出持效跡象時，應進行後茬作物影響試驗。通常包括持效性試驗和作物傷害性試驗。
持效性試驗，即保留前茬作物用葯或試驗的各處理區，進行不同耕作處理(翻耕、免耕、少耕、直播等)，播種下茬可輪作的作物，觀察其影響，與對照比較評價。
作物傷害性試驗，是將除草劑(或其他農葯)用於某一作物，使之早期受到嚴重傷害，在土壤中可能有積累作用。在此地塊進行不同耕作條件下，播種生產中常種作物來代替受傷害作物，觀察作物葯害，與對照比較評價，得出前茬作物用葯後，對何種作物是安全的，何種作物是敏感的。
(5)選擇性試驗是為了得出除草劑的選擇性指數。即求抑製作物生長10％的劑量或濃度，與抑制雜草生長90％的劑量或濃度的比值，來比較某種除草劑對作物的安全性。
選擇性指數= 抑製作物生長10%的劑量或濃度
抑制雜草生長90%的劑量或濃度

此比值越大，表示選擇性強度越高，即對作物愈安全，除草效果愈好，一般要求選擇性指數大於3。
同理，可測定其他類型農葯對作物的安全性，即
安全性系數= 防治病蟲的有效使用劑量
對農作物產生葯害的劑量

(6)品種敏感性試驗 為了解某種作物的多個栽培品種對農葯的敏感性。設幾個不同環境條件下，進行多個栽培品種選擇性比較試驗。小區面積與田間葯效試驗相同，不同品種平行播種1～2行。設推薦用葯量、倍量，有時還設三倍量。對照葯劑選用在生產中證明葯效好、對作物安全的葯劑。用目測百分率法(參見第114題)調查，3級為可接受的界限。准確評價不同作物品種的相對敏感性，判定某些品種更具耐葯性。

『玖』 在農葯殘留分析時，怎樣用比較法計算未知樣品的殘留量

農葯殘留分析屬於痕量分析范疇，分析的農葯及樣品基質種類多，成份復雜，分析中投入的成本高。分析的結果經常用於政府管理部門作為貿易、生產等活動的決定性依據，具有極大的責任和權威性。如果沒有嚴格、科學的質量保證和質量控製程序，難免出現分析結果不準確而造成決策失誤和花費大量投入建設的殘留分析實驗室不能合格有效運行的浪費等現象。因此，做好殘留分析的質量控制是產生准確、可靠的殘留分析數據的重要前提和保證。
農葯殘留分析質量控制的目的是使分析結果達到預定的准確和精密程度。為了達到這一預定目的所應採取的措施和工作步驟都是事先規劃好的，通過一系列的規約加以確定，並要求有關分析人員按照規約操作，由此使分析過程處於受檢狀態。
7.1 農葯殘留分析實驗室的基礎條件
實驗室是獲得殘留分析結果的關鍵場所，要使殘留分析質量達到規定水平，必須要有合格的實驗室和合格的分析操作人員。包括儀器的正確使用和定期校正；玻璃儀器的選用和校正；化學試劑和溶劑的選用；溶液的配製和標定、試劑的提純；實驗室的清潔度和安全工作；分析人員的操作技術等。
7.1.1 試劑要求
1. 蒸餾水
蒸餾水是殘留分析實驗室最常用的水之一，通過蒸餾可以大大減少水中所含有的農葯或其它雜質，有效減少對殘留分析的干擾。但是，蒸餾水中常含有可溶性氣體和揮發性物質。殘留分析實驗室一般不用金屬蒸餾器。也不採用離子交換法制備的去離子水，因為去離子水中仍然含有影響殘留農葯分析的雜質。最好採用石英玻璃蒸餾器蒸出的重蒸餾水。
2. 試劑
一般化學試劑分為四級，其規格見表7-1。
表7-1 化學試劑的規格
級 別 名 稱 代號 標志顏色
特級 基準試劑、光譜純 S•P 白色
一級 保證試劑、優級純 G•R 綠色
二級 分析試劑、分析純 A•R 紅色
三級 化學純 C•P 藍色
殘留分析中所用試劑均應為二級或二級以上，高效液相色譜儀流動相則應使用一級（或稱色譜純）。
由於市售的試劑往往達不到殘留分析的要求，需要進行凈化處理。
為了確定溶劑的純度是否滿足農葯殘留分析的要求，對市售的溶劑按下法檢驗：
取300mL溶劑，放入旋轉蒸發器中，濃縮至5mL。取5μL，在准備應用的色譜條件下，注入氣相色譜儀內，在色譜圖上於2~60min內，不應有1mm以上的雜質峰。
某溶劑在整個分析方法過程中使用一定數量，取總量的2倍量，濃縮並定容到最小體積，取最大進樣量進樣，不出現雜質峰或產生小於噪音兩倍或小於1～2mm的峰為標准。
達到上述檢驗要求的溶劑，可以直接供農葯殘留分析使用。達不到要求的溶劑，根據溶劑的性質和所含的雜質，分別選擇提純方法。
常用試劑的處理方法如下：
⑴. 氧化鋁（層析用）：在550℃灼燒4小時。用前於130℃烘5小時，儲存於乾燥器內備用。
⑵. 弗羅里硅土（florisil）：在600~650℃灼燒3小時。用前於130℃烘5小時，儲存於乾燥器內備用。
⑶. 無水硫酸鈉（分析純，乾燥脫水用）：在700℃灼燒4小時，用前於130℃烘5小時，儲存於乾燥器內備用。
⑷. 活性炭：分為兩種，第一，層析用活性炭：20~40目；第二，化學純級活性炭：黑色無定型顆粒物或粉末。處理方法：將活性炭放入濃鹽酸中，加熱煮沸1小時，用蒸餾水洗至中性，烘乾後，放入帶蓋瓷皿內、蓋上皿蓋，在600℃灼燒2小時，用前在105℃烘4小時，儲存於乾燥器內備用。
⑸. 脫脂棉及玻璃棉：放入索氏提取器中，加4%丙酮-正己烷溶劑，在水浴上迴流4小時後，在通風櫥內讓其自行揮發干。
⑹. 石油醚或正己烷：石油醚通常用沸程60~90℃。其主要成分是脂肪族烴類的混合物，雜質主要為芳香族不飽和化合物。提純方法有：
①. 將石油醚通過中性的氧化鋁柱吸附後，再經全玻璃系統蒸餾器蒸餾。收集其標程范圍內的餾出部分（60～75℃）。
②. 取1000mL石油醚，加4gNaOH(A.R)，於水浴上迴流2小時，再經全玻璃系統蒸餾器蒸餾。收集其標程范圍內的餾出部分（60～75℃）。
③. 將1000mL石油醚置於分液漏斗中，加入100mL濃硫酸（石油醚與硫酸的比例為10:1）充分混勻後，讓其分層，放去硫酸層。重復上述操作2~3次，然後用水洗，再用無水硫酸鈉乾燥，過濾後，經全玻璃系統蒸餾器蒸餾。收集其標程范圍內的餾出部分（以下各種溶劑提純中，所說的蒸餾，均指全玻璃系統蒸餾器蒸餾）。
⑺. 丙酮：一般，市售的丙酮均能達到要求。其中含有大量水分，通常不超過0.5%。如果含水量較大，直接通過3A或4A分子篩層析柱脫水後，即可使用。如果丙酮中含有醛類和其他雜質時，可向丙酮中逐次加入少量高錳酸鉀進行迴流，直至紫色不褪為止。然後蒸餾，收集沸程為55~57℃的餾分，置於棕色瓶中保存。
⑻. 醋酸乙酯：醋酸乙酯中通常含有少量的游離酸（醋酸）、乙醇和水等雜質。提純時，將醋酸乙酯置於分液漏斗中，用同等體積的5%Na2CO3水溶液充分洗滌後，棄去水層。然後，無水碳酸鉀進行乾燥，過濾後，蒸餾。收集沸程為76.5~77.5℃的餾分。或1000mL乙酸乙酯，加入100 mL乙酸酐和10滴濃硫酸，加熱迴流4小時，蒸出後，再用碳酸鉀乾燥，過濾，再蒸餾，收集沸程為76.5~77.5℃的餾分。
⑼. 乙腈：該溶劑由於毒性非常大，使用時應特別注意。在國內殘留分析方法中使用較少，國外使用較多。乙腈是一種非常惰性的試劑，可與水、醇和醚任意混合。其提純方法如下：
①. 向乙腈中加入數克無水碳酸鈉，至不溶為止。再加入少量高錳酸鉀，加熱迴流至紫色不褪為止。然後進行蒸餾。蒸餾液用硫酸調至微酸性後，再進行精餾，收集81~82℃的餾分。
②. 取1L乙腈，加入1mL磷酸，再加入30g五氧化二磷，加沸石進行蒸餾。收集81~82℃的餾分（不超過82℃）。
③. 如果乙腈中所含雜質較少，可直接通過硅膠或分子篩層析柱脫水後，蒸餾。收集81~82℃的餾分。
⑽. 三氯甲烷：三氯甲烷遇陽光照射後在空氣中氧的作用下，逐漸分解，生成極毒的光氣（碳醯氯）。為了防止生成光氣，一般市售的三氯甲烷加有0.5～1%的乙醇作為穩定劑。如果乙醇不影響分析，可直接重蒸餾。收集沸點61.2℃的餾分。置於棕色試劑瓶中避光保存。如果需要除去乙醇，可按下法處理：取500mL三氯甲烷於1000mL分液漏斗中，加入25mL濃硫酸，振搖數分鍾，靜置分層後，棄去酸層，重復上述操作2~3次。然後用100mL2%的硫酸鈉溶液洗兩次，再經無水硫酸鈉乾燥，蒸餾，收集沸點61.2℃的餾分。置於棕色試劑瓶中避光保存。
⑾. 二氯甲烷：是常用溶劑，特別在液——液分配凈化中。一般二氯甲烷可直接重蒸餾後使用。如果需要進一步提純，可按三氯甲烷的提純方法進行處理。收集沸程39~41℃的餾分。置於棕色試劑瓶中避光保存。
⑿. 甲醇：一般甲醇進行重蒸餾，收集65±1℃的餾分，即可使用。如果需要除去甲醇中的微量丙酮，可於500mL甲醇中加入25mL呋喃甲醛和60mL10%NaOH溶液，加熱迴流8小時後，蒸餾。收集65±1℃的餾分。再加入無水氯化鈣進行脫水，過濾。最後採用高效分餾柱進行重蒸餾，收集65℃的餾分。
7.1.2實驗室的環境條件
實驗室空氣中如含有固體、液體的氣溶膠和污染氣體，對痕量分析和超痕量分析會導致較大誤差。實驗室應按照樣品存貯、天平稱量、樣品制備、儀器分析等劃分功能區。農葯殘留分析中常用的高靈敏度儀器（GC，HPLC等），應在潔凈的、單獨的實驗室中使用，不能和樣品制備實驗室混在一起。
樣品制備操作應在專門的通風櫥內進行，幾種分析同時進行時應注意防止相互交叉污染。實驗室內需設各種必備的安全設施（通風櫥、防塵罩、排氣管道及消防滅火器材等），並應定期檢查，保證隨時可供使用。使用電、氣、水、火時，應按有關使用規則進行操作，保證安全。
7.1.3人員要求
1. 殘留分析人員應具有大專以上的文化水平，經培訓、考試合格後才能承擔殘留分析工作。
2. 熟練地掌握本崗位的殘留分析技術，對承擔的殘留分析項目要做到理解原理、操作正確、嚴守規程、准確無誤。
3. 接受新項目前，應在測試工作中達到規定的各種質量控制實驗要求，才能進行項目的殘留分析。
4. 認真做好分析測試前的各項技術准備工作，實驗用水、試劑、標准溶液、器皿、儀器等均應符合要求，方能進行分析測試。
5. 負責填報殘留分析結果，做到書寫清晰、記錄完整、校對嚴格、實事求是。
6. 及時地完成分析測試後的實驗室清理工作，做到現場環境整潔，工作交接清楚，做好安全檢查。
另外，農葯殘留分析實驗室內要有質量保證專職或兼職人員，負責殘留分析的質量保證工作。殘留分析質量保證人員應熟悉質量保證的內容、程序和方法，了解殘留分析環節中的技術關鍵，具有有關的數理統計知識等。
7.1.4 管理制度
1. 樣品管理
由於殘留分析樣品的特殊性，要求樣品的採集、運送和保存等各環節都必須嚴格遵守有關規定，以保證其真實性和代表性。
殘留分析實驗室的技術負責人應和采樣人員、測試人員共同議定詳細的工作計劃，周密地安排采樣和實驗室測試間的銜接、協調，以保證自采樣開始至結果報告的全過程中，樣品都具有合格的代表性。
樣品的登記、驗收和保存要按以下規定執行：
⑴. 採好的樣品應及時貼好樣品標簽，填寫采樣記錄。將樣品連同樣品登記表、送樣單在規定的時間內送交指定的實驗室。填寫樣品標簽和采樣記錄需使用防水墨汁，最好用鉛筆填寫。
⑵. 如需對採集的樣品進行分裝，分樣的容器應和樣品容器材質相同，並填寫同樣的樣品標簽，註明「分樣」字樣，同時對「空白」和「副樣」也都要分別註明。
⑶. 實驗室應有專人負責樣品的登記、驗收，其內容如下：樣品名稱和編號；樣品採集點的詳細地址和現場特徵；樣品的採集方式，是單獨樣品還是混合樣；采樣日期和時間；采樣人、送樣人及登記驗收人簽名。
2. 葯品管理
⑴. 實驗室使用的化學試劑應有專人負責管理，分類存放，定期檢查使用和管理情況。
⑵. 易燃、易爆物品應存放在陰涼通風的地方，並有相應安全保障措施。易燃、易爆試劑要隨用隨領，不得在實驗室內大量積存。保存在實驗室內的少量易燃品和危險品應嚴格控制、加強管理。
⑶. 劇毒試劑應有專人負責管理，加雙鎖存放，批准使用，兩人共同稱量，登記用量。
⑷. 取用化學試劑的器皿（如葯匙、量杯等）必須分開，每種試劑用一件器皿，至少洗凈後再用，不得混用。
⑸. 使用有機溶劑和揮發性強的試劑，操作應在通風良好的地方或在通風櫥內進行。任何情況下，都不允許用明火直接加熱有機溶劑。
3. 儀器管理
⑴. 各種精密貴重儀器以及貴重器皿要有專人管理，分別登記造冊、建卡立檔。儀器檔案應包括儀器說明書、驗收和調試記錄、儀器的各種初始參數，定期保養維修、檢定、校準以及使用情況的登記記錄等。
⑵. 精密儀器的安裝、調試、使用和保養維修均應嚴格遵照儀器說明書的要求。上機人員應該考核。考核合格方可上機操作。
⑶. 使用儀器前應先檢查儀器是否正常。儀器發生故障時，應立即查清原因，排除故障後方可繼續使用，嚴禁儀器帶病運轉。
⑷. 儀器用完之後，應將各部件恢復到所要求的位置，及時做好清理工作，蓋好防塵罩。
⑸. 儀器的附屬設備應妥善安放，並經常進行安全檢查。
應保存每一台儀器設備的檔案，其內容包括：①.儀器設備名稱；②.製造商名稱、型號。序號或其他唯一性標識；③.接收日期和啟用日期；④.目前放置地點（如果適用）；⑤.接收時的狀態及驗收記錄（例如全新的，用過的，經改裝的）；⑥.儀器設備使用說明書（或復製件）；⑦.校準和／或檢定（驗證）的日期和結果以及下次校準和／或檢定(驗證)的日期；⑧.迄今所進行維護的記錄和今後維護的計劃；⑨.損壞、故障、改裝或修理的歷史記錄。
7.2 農葯標准物質
農葯殘留量的檢測，絕大多數是採用大型精密儀器實現的。這些定量方法通常為比較法，即用農葯標准物質校準分析儀器，以其峰面積或峰高值為基準，在獲得未知樣品峰面積或峰高值後，就可計算出未知樣品中某種農葯的殘留量。因此，農葯標准物質是開展農葯殘留分析工作的先決條件，也是測定結果准確與否的質量保證。
農葯標准物質既然是一個基準尺度，分析工作者對它的要求就非常嚴格。如果它不符合要求，就會在分析檢測過程中將不準確的信息傳遞到被測定的樣品中去。本來農葯殘留量不超標的樣品，由於農葯標准物質標定值偏低，最後的檢驗結果可能是不合格，反之亦然。所以從這一點講農葯標准物質不在於純度有多麼高，而在於它的標定值必須准確無誤。由於農葯殘留分析為痕量分析，對不確定度的要求相對不高，因此用於農葯殘留分析的標准物質不象農葯制劑分析標准物質那樣苛刻，但也必須定值准確，無干擾組分。
農葯標准物質在農葯殘留分析中的主要作用是測定方法的建立或驗證已有方法的不確定度和精密度。另外，對於中介的授權質檢機構必須採用有證農葯標准物質，才能開展農葯殘留的檢驗工作，對農產品中的農葯殘留指標進行判定。農葯標准物質是實現農葯殘留准確一致的測定、保證量值傳遞的計量標准。採用標准物質開展檢驗工作還可以保證測定結果的可比性，達到量值的統一。