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asapod計算方法

發布時間:2022-07-15 07:46:10

❶ 各位大神,老式閃光燈上的的ASA,DIN是啥意思

  1. ASA是American Standards association的略語,即美國標准協會。ASA在1947年規定了感光材料標准,又在1960年改訂了以日光感光度進行表示的新ASA。即通過用統計學方法,來求得最佳照片的底片所需要的曝光量,作為評定感光度的基準。後來演化為ISO國際標准化組織(International Standard Organization)的標准。

  2. 計算公式為s=0.8/H(D0+0.1)
    式中:H(Do十0.1)是產生密度為灰霧Do加0.1所需要之曝光量

  3. DIN是Deutsche lnstric NOrm,德文的略語,即德國工業標准。DIN感光度系德國工業標準的膠片(卷)感光度,其計算公式為S=101gH1/(Do+0.1)

❷ SOD酶的活力的測定

SOD酶的活力的測定方法如下:
1.直接法 原理是根據O2 或產生O2 的物質本身的性質測定O2 的歧化量,從而確定SOD的活性。經典的直接法包括:脈沖輻射分解法、電子順磁共振波法(EPR)、核磁共振法。由於所需的儀器設備價格昂貴,一般較少應用。

2.一般化學法 這些方法的共同特點是要有一個O2 的產生體系和一個被O2 還原或氧化的可檢測體系。在SOD存在下,一部分O2 被SOD歧化,因而O2 還原或氧化檢測體系的反應受到抑制。根據反應受抑製程度,測定SOD的活性。一般化學法有鄰苯三酚自氧化法、細胞色素C還原法、羥胺法、黃嘌呤氧化酶-NBT法、腎上腺素法、沒食子酸法、6-羥多巴胺法、亞硝酸鹽形成法和鹼性二甲亞碸法。

❸ 丙二醛提取的原理

[原理]
植物組織中的丙二醛(MDA) 在酸性條件下加熱可與硫代巴比妥酸(TBA) 產生顯色反應,反應產物為粉紅色的3,5,5一三甲基惡唑2,4一二酮(Trimet—nine)。該物質在539nm波長下有吸收峰。由於硫代巴比妥酸也可與其它物質反應,並在該波長處有吸收,為消除硫代巴比妥酸與其它物質反應的影響,在丙二醛含量測定時,同時測定600nm下的吸光度,利用539nm與600nm下的吸光度的差值計算丙二醛的含量。
植物組織丙二醛含量測定
植物葉片在衰老過程中發生一系列生理生化變化,如核酸和蛋白質含量下降、葉綠素降解、光合作用降低及內源激素平衡失調等。這些指標在一定程度上反映衰老過程的變化。近來大量研究表明,植物在逆境脅迫或衰老過程中,細胞內活性氧代謝的平衡被破壞而有利於活性氧的積累。活性氧積累的危害之一是引發或加劇膜脂過氧化作用,造成細胞膜系統的損傷,嚴重時會導致植物細胞死亡。活性氧包括含氧自由基。自由基是具有未配對價電子的原子或原子團。生物體內產生的活性氧主要有超氧自由基(O-2)、羥自由基(OH·)、過氧自由基(ROO·)、烷氧自由基(RO·)、過氧化氫(H2O2)、單線態氧(O21)等。植物對活性氧產生有酶促和非酶促兩類防禦系統,超氧化物歧化酶(SOD)、過氧化氫酶(CAT)、過氧化物酶POD和抗壞血酸過氧化物酶(ASA—POD)等是酶促防禦系統的重要保護酶,抗壞血酸(ASA)和還原型谷胱甘肽(GSH)等是非酶促防禦系統中的重要抗氧化劑。
丙二醛(MDA)是細胞膜脂過氧化作用的產物之一,它的產生還能加劇膜的損傷。因此,丙二醛產生數量的多少能夠代表膜脂過氧化的程度,也可間接反映植物組織的抗氧化能力的強弱。所以在植物衰老生理和抗性生理研究中,丙二醛含量是一個常用指標。
[材料、儀器、葯品]
1.材料:植物抗逆性鑒定實驗中的四種菠菜樣品,即綠色和黃色葉片的高溫處理和室溫對照。
2.儀器:(1) 分光光度計;(2) 離心機;(3)水浴鍋:(4) 天平;(5) 研缽;(6) 剪刀;(7) 5ml刻度離心管;(9) 刻度試管(10ml);(10) 鑷子;(11) 移液管(5ml、2ml、1ml);(12)冰箱。
3.葯品:(1) 0.05mol/L pH7.8磷酸鈉緩沖液;(2) 石英砂;(3) 5%三氯乙酸溶液:稱取5g三氯乙酸,先用少量蒸餾水溶解,然後定容到100ml;(4) 0.5%硫代巴比妥酸溶液:稱取0.5g硫代巴比妥酸,用5%三氯乙酸溶解,定容至100ml,即為0.5%硫代巴比妥酸的5%三氯乙酸溶液。
[方法]
1.丙二醛的提取:取0.5g樣品,加入2ml預冷的0.05mol/L pH7.8的磷酸緩沖液,加入少量石英砂,在經過冰浴的研缽內研磨成勻漿,轉移到5ml刻度離心試管,將研缽用緩沖液洗凈,清洗也移入離心管中,最後用緩沖液定容至5ml。在4500轉/min離心10min。上清液即為丙二醛提取液。
2.丙二醛含量測定:吸取2 ml的提取液於刻度試管中,加入0.5%硫代巴比妥酸的5%三氯乙酸溶液3ml,於沸水浴上加熱10min,迅速冷卻。於4500轉/min離心10min。取上清液於532、600nm波長下,以蒸餾水為空白調透光率100%,測定吸光度。
3.結果計算:

(A532—A600) ×V1×V
1.55×10-1×W×V2


丙二醛含量(nmol/g)=

式中:A為吸光度;V1為反應液總量(5m1);V為提取液總量(5ml);V2為反應液中的提取液數量(2ml);W為植物樣品重量(0.5g);1.55×10-1為丙二醛的微摩爾吸光系數(在1升溶液中含有1µmol丙二醛時的吸光度)。

4.注意事項:
(1) 0.1~0.5%的三氯乙酸對MDA—TBA反應較合適,若高於此濃度,其反應液的非專一性吸收偏高;
(2) MDA—TBA顯色反應的加熱時間,最好控制沸水浴10~15min之間。時間太短或太長均會引起532nm下的光吸收值下降;
(3) 如用MDA作為植物衰老指標,首先應檢驗被測試材料提取液是否能與TBA反應形成532nm處的吸收峰。否則只測定532、600nm兩處A值,計算結果與實際情況不符,測得的高A值是一個假象;
(4) 在有糖類物質干擾條件下(如深度衰老時),吸光度的增大,不再是由於脂質過氧化產物MDA含量的升高,而是水溶性碳水化合物的增加,由此改變了提取液成分,不能再用532nm、600nm兩處A值計算MDA含量,可測定510、532、560nm處的A值,用A532一(A510—A560)/2的值來代表丙二醛與TBA反應液的吸光值。

❹ 三角形怎麼計算斜邊長度

不同的條件,算斜邊的方法也不同。

譬如:

一,已知直角三角形的兩條直角邊,求斜邊。

方法是:利用勾股定理:斜邊=根號(兩條直角邊的平方和)。

二,已知直角三角形的一個銳角a及其對邊,求斜邊。

方法是:利用正弦函數:斜邊=(角a的對邊)/sina。

三,已知直角三角形的一個銳角a及其鄰邊,求斜邊。

方法是:利用餘弦函數:斜邊=(角a的鄰邊)/cosa。

四.已知直角三角形的面積及斜邊上的高,求斜邊。

方法是:利用三角形的面積公式:斜邊=(2倍三角形的面積)/斜邊上的高。

常見的三角形按邊分有普通三角形(三條邊都不相等),等腰三角(腰與底不等的等腰三角形、腰與底相等的等腰三角形即等邊三角形);按角分有直角三角形、銳角三角形、鈍角三角形等,其中銳角三角形和鈍角三角形統稱斜三角形。

(4)asapod計算方法擴展閱讀:

判定:

1、兩個三角形對應的三條邊相等,兩個三角形全等,簡稱「邊邊邊」或「SSS";

2、兩個三角形對應的兩邊及其夾角相等,兩個三角形全等,簡稱「邊角邊」或「SAS」;

3、兩個三角形對應的兩角及其夾邊相等,兩個三角形全等,簡稱「角邊角」或「ASA」;

4、兩個三角形對應的兩角及其一角的對邊相等,兩個三角形全等,簡稱「角角邊」或「AAS」;

5、兩個直角三角形對應的一條斜邊和一條直角邊相等,兩個直角三角形全等,簡稱「斜邊、直角邊」或「HL」;

註:「邊邊角」即「SSA」和「角角角」即:"AAA"是錯誤的證明方法。

性質:

1 、在平面上三角形的內角和等於180°(內角和定理)。

2 、在平面上三角形的外角和等於360° (外角和定理)。

3、 在平面上三角形的外角等於與其不相鄰的兩個內角之和。

推論:三角形的一個外角大於任何一個和它不相鄰的內角。

4、 一個三角形的三個內角中最少有兩個銳角。

5、 在三角形中至少有一個角大於等於60度,也至少有一個角小於等於60度。

6 、三角形任意兩邊之和大於第三邊,任意兩邊之差小於第三邊。

7、 在一個直角三角形中,若一個角等於30度,則30度角所對的直角邊是斜邊的一半。

8、直角三角形的兩條直角邊的平方和等於斜邊的平方(勾股定理)。

*勾股定理逆定理:如果三角形的三邊長a,b,c滿足a²+b²=c² ,那麼這個三角形是直角三角形。

❺ 求初中一年級所有公式及其計算方法

常見的初一數學公式
1
過兩點有且只有一條直線
2
兩點之間線段最短
3
同角或等角的補角相等
4
同角或等角的餘角相等
5
過一點有且只有一條直線和已知直線垂直
6
直線外一點與直線上各點連接的所有線段中,垂線段最短
7
平行公理
經過直線外一點,有且只有一條直線與這條直線平行
8
如果兩條直線都和第三條直線平行,這兩條直線也互相平行
9
同位角相等,兩直線平行
10
內錯角相等,兩直線平行
11
同旁內角互補,兩直線平行
12兩直線平行,同位角相等
13
兩直線平行,內錯角相等
14
兩直線平行,同旁內角互補
15
定理
三角形兩邊的和大於第三邊
16
推論
三角形兩邊的差小於第三邊
17
三角形內角和定理
三角形三個內角的和等於180°
18
推論1
直角三角形的兩個銳角互余
19
推論2
三角形的一個外角等於和它不相鄰的兩個內角的和
20
推論3
三角形的一個外角大於任何一個和它不相鄰的內角
21
全等三角形的對應邊、對應角相等
22邊角邊公理(SAS)
有兩邊和它們的夾角對應相等的兩個三角形全等
23
角邊角公理(
ASA)有兩角和它們的夾邊對應相等的兩個三角形全等
24
推論(AAS)
有兩角和其中一角的對邊對應相等的兩個三角形全等
25
邊邊邊公理(SSS)
有三邊對應相等的兩個三角形全等
26
斜邊、直角邊公理(HL)
有斜邊和一條直角邊對應相等的兩個直角三角形全等
27
定理1
在角的平分線上的點到這個角的兩邊的距離相等
28
定理2
到一個角的兩邊的距離相同的點,在這個角的平分線上
29
角的平分線是到角的兩邊距離相等的所有點的集合
30
等腰三角形的性質定理
等腰三角形的兩個底角相等
(即等邊對等角)
31
推論1
等腰三角形頂角的平分線平分底邊並且垂直於底邊
32
等腰三角形的頂角平分線、底邊上的中線和底邊上的高互相重合
33
推論3
等邊三角形的各角都相等,並且每一個角都等於60°
34
等腰三角形的判定定理
如果一個三角形有兩個角相等,那麼這兩個角所對的邊也相等(等角對等邊)
35
推論1
三個角都相等的三角形是等邊三角形
36
推論
2
有一個角等於60°的等腰三角形是等邊三角形
37
在直角三角形中,如果一個銳角等於30°那麼它所對的直角邊等於斜邊的一半
38
直角三角形斜邊上的中線等於斜邊上的一半
39
定理
線段垂直平分線上的點和這條線段兩個端點的距離相等
40
逆定理
和一條線段兩個端點距離相等的點,在這條線段的垂直平分線上
41
線段的垂直平分線可看作和線段兩端點距離相等的所有點的集合
42
定理1
關於某條直線對稱的兩個圖形是全等形
43
定理
2
如果兩個圖形關於某直線對稱,那麼對稱軸是對應點連線的垂直平分線
44定理3
兩個圖形關於某直線對稱,如果它們的對應線段或延長線相交,那麼交點在對稱軸上
45逆定理
如果兩個圖形的對應點連線被同一條直線垂直平分,那麼這兩個圖形關於這條直線對稱
應該是這些,不知道全不全.

❻ 自動噴水流量計算方法

噴頭流量用q表示,q=K√10P。

P——水霧噴頭的工作壓力MPa。

K——水霧噴頭的流量系數,由生產廠家提供。

消防噴淋泵、消防增壓泵,根據使用的實際情況來定。用與消防系統的泵類型都差不多的,只是揚程和流量各有不同。

消防泵主要分為立式消防泵和卧式消防泵,輸送液體的流量是消防泵選型的重要性能數據之一,輸送液體的流量直接關繫到整個裝置的的生產能力。

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一、系統組成

1、乾式噴水滅火系統

由閉式噴頭、管道系統、乾式報警閥、報警裝置、充氣設備、排氣設備和供水設備等組成。

2、濕式噴水滅火系統

由噴頭、管道系統、濕式報警閥、報警裝置和供水設施等組成。由於該系統在報警閥的前後管道內始終充滿著壓力水,故稱濕式噴水滅火系統或濕管系統。

二、系統特點

1、乾式噴水滅火系統

其管路和噴頭內平時沒有水,只處於充氣狀態,在報警閥後管路內無水,不怕凍結,不怕環境溫度高。因此,該系統適用於環境溫度低於4℃和高於70℃的建築物和場所。

2、濕式噴水滅火系統

管路在噴頭中始終充滿水,所以應用受環境溫度的限制,適合安裝在室內溫度不低於4℃,且不高於70℃能用水滅火的建、構築物內。

消防檢查的意義:

為了防止火災;減少人員財產損失;預防災難發生;保證人身安全。

依照國家的消防法律和法規、對消防工作所進行的一系列管理活動。在消防部門指導下,結合該地區的具體情況,開展預防、撲火救災,維護地區的公共安全。

消防安全管理是公共安全管理的一項重要內容,也是保證社會主義現代化建設順利進行,保護公共財產和居民生命安全的一項重要工作。

做好消防安全管理工作,落實責任,強化預防,整治隱患,夯實基礎,進一步提升火災防控和滅火應急救援能力,不斷提高公共消防安全水平,有效預防火災和減少火災危害,為經濟社會發展、人民安居樂業創造良好的消防安全環境。



❼ 圖中有幾個三角形如何計算要解題思路或公式

總共有18個三角形。

解題思路:

這道題數水平的線段有幾條即可,因為每條水平線段與最上面那個點可組成一個三角形。

解題步驟:

由於每條水平線都有6條線段,所以一共可以組成 6×3 共18個三角形。

1 、在平面上三角形的內角和等於180°(內角和定理)。

2 、在平面上三角形的外角和等於360° (外角和定理)。

3、 在平面上三角形的外角等於與其不相鄰的兩個內角之和。

(7)asapod計算方法擴展閱讀:

四線:

中線:

連接三角形的一個頂點及其對邊中點的線段叫做三角形的中線(median)。

高:

從一個頂點向它的對邊所在的直線畫垂線,頂點和垂足之間的線段叫做三角形的高(altitude)。

角平分線:

三角形一個內角的平分線與這個角的對邊相交,這個角的頂點與交點之間的線段叫做三角形的角平分線(bisector of angle)。

中位線:

三角形的三邊中任意兩邊中點的連線叫中位線。它平行於第三邊且等於第三邊的一半。

判定:

1、兩個三角形對應的三條邊相等,兩個三角形全等,簡稱「邊邊邊」或「SSS";

2、兩個三角形對應的兩邊及其夾角相等,兩個三角形全等,簡稱「邊角邊」或「SAS」;

3、兩個三角形對應的兩角及其夾邊相等,兩個三角形全等,簡稱「角邊角」或「ASA」;

4、兩個三角形對應的兩角及其一角的對邊相等,兩個三角形全等,簡稱「角角邊」或「AAS」;

5、兩個直角三角形對應的一條斜邊和一條直角邊相等,兩個直角三角形全等,簡稱「斜邊、直角邊」或「HL」;

註:「邊邊角」即「SSA」和「角角角」即:"AAA"是錯誤的證明方法。

❽ 用ASA的公式計算,各位學霸幫幫忙。


如圖,用公式即可

❾ 維生素C所有實驗方法,國內外人士的研究概況

目前研究Vc測定方法的報道較多,有關Vc的測定方法如熒光法、2,6-二氯靛酚滴定法、2,4-二硝基苯肼法、碘量法、光度分析法、化學發光法、電化學分析法及色譜法等,各種方法對實際樣品的測定均有滿意的效果。為了解國內Vc含量測定方法及其應用方面的現狀及發展態勢。方法以"Vc或抗壞血酸和測定"為檢索詞對1994~2002年中國期刊網全文資料庫(CNKI)中的理工A、B和醫葯衛生專輯進行篇名檢索,對所得有關Vc含量測定的文獻數據分別以年代、作者區域、載刊等級、樣品類型、測定方法等進行計量分析。結果核心期刊載刊文獻占文獻總量的45.06%,其中光度法佔65.69%,電化法佔18.63%,色譜法佔12.75%;復雜被測樣品文獻占文獻總量的45.06%,其中光度法佔60.92%,色譜法佔19.54%,電化法佔10.34%。結論目前國內Vc含量測定仍以光度法為主流,但近年來色譜法,特別是HPLC法上升趨勢尤為明顯。
1.4.1還原型Vc的測定
1.4.1.1 2,6-二氯酚靛酚法(2,6-D法)
其原理是利用2,6-二氯酚靛酚鈉鹽(C12H6O2NCl2Na)在酸性條件下將還原型抗壞血酸氧化成氧化型抗壞血酸,而其本身被還原成無色的衍生物;當還原型抗壞血酸全部被氧化時,過量的2,6-二氯靛酚鈉鹽呈現紅色,指示終點。該方法適於測定無色和淺色樣液或提取液中的AsA,無須特殊儀器,操作簡便、快速、准確[7]。
由於大多數果蔬和其製品有顏色,影響了終點的准確性。使用白陶土脫色[8]和加1,2-二氯乙烷[9]均不能得到理想的結果。作為對該法的改進,向一定量的AsA提取液中加入過量2,6-D與AsA作用後,剩餘的2,6-D被二甲苯萃取、比色。樣液中AsA含量與二甲苯萃取液中淺紅色呈線性負相關。因花青素不溶於二甲苯,故可測定深色樣品[10]。應用流動注射分析(Flow Injection Analysis,簡稱FIA),使該法的分析速度更快(120樣品/h)、靈敏(檢出限0.5 ug/ml)[11]。由於2,6-二氯靛酚和還原型抗壞血酸具有不同的電位(2,6-二氯靛酚的氧化還原電位是150mV,AsA的氧化還原電位是100 mV),利用鉑和氯化銀復合電極測定其電位差的變化,可准確地測定樣液中AsA的含量。該法適宜色澤較深樣品中AsA的測定。溶解氧測定是利用極譜分析法原理進行的,其基本電路與電位滴定相似[12]。但樣品中同時存在的Fe2+、Sn2+、SO2、SO3、S2O32-等還原性雜質對本法則有干擾。扣除樣品中內源還原性物質是對2,6-二氯靛酚法的一個改進[13]。
1.4.1.2 碘量法
其原理是基於AsA還原碘,自身氧化DAsA,而碘可由碘酸鉀還原碘化鉀來得到,當多餘碘存在時,澱粉呈藍色,指示終點。反應式如下:
KI+KIO3+6H→2K++3H2O+I2 (1-1)
還原型抗壞血酸+I2+2H+→氧化型抗壞血酸+2HI
該法簡便,但在測定深色樣品時,准確度欠佳[14]。
1.4.1.3 分光光度法
其原理是三價鐵離子被AsA還原二價鐵離子,後者與4,7-二苯基-1,10-菲咯啉(Bathophenanthroline, BP)生成紅色絡合物,其強度與樣品中AsA含量有化學計量關系。該法具有快速,靈敏的優點;此外,樣品中DAsA還可被Dithiothreitol (DTT)還原為AsA,同時測定DAsA的含量[15]。
採用流動注射分析停留技術還可實現AsA與果蔬常用抗褐變劑L-半胱氨酸的同時測定[16]。
1.4.1.4 間接光度法
測定是在pH=5.0的乙酸-乙酸鈉緩沖溶液中,抗壞血酸與鐵(III)和1,10-二氮雜菲溶液相互作用,形成橘紅色的Fe(II)-二氮雜菲絡合物,在波長510 nm處,吸光度與50mL抗壞血酸含量在10~200ug濃度內呈線性關系。該法的特點是簡便快速,靈敏度高,干擾少[15]。
1.4.1.5 紫外光度法
其原理是還原型Vc(AsA)在紫外區243.8nm處有最大吸收峰,以Cu2+作催化劑,利用溶解氧,將在243.8nm處有最大吸收的AsA選擇性氧化為243.8nm處無最大吸收峰的DAsA,進行本底校正,此法具有簡便、快速、准確的特點[17]。
1.4.1.6 光電比濁法
其原理是在酸性提取液中的AsA,可被亞硒酸氧化成DAsA,後者還原成元素硒,在一定條件下,其溶液中形成穩定的懸濁液。當20~50mL浸出液中AsA含量在0~4mg時,濁度與AsA含量成正比。樣品中含有單寧、山梨酸、還原酮類不幹擾測定。Fe2+、SO2在常溫下干擾不明顯,僅亞錫離子有干擾[18]。
1.4.1.7 高效液相色譜法(HPLC)
此法的優點不僅操作簡便,分離時間短,對結構不穩定的Vc尤為適合;缺點是所用儀器較為昂貴[20]。
1.4.1.8 極譜法
其原理是用溴水將AsA氧化成DAsA,而後者與鄰苯二胺縮合,可用於極譜定量測定Vc含量。脫氫型的還原糖、還原酸等對測定有干擾,可用氯仿萃取分離干擾物質後進行測定[18]。
1.4.2 Vc總量的測定
1.4.2.1 2,4-二硝基苯肼法
此法為測定Vc總量最常用的方法。其原理是用活性炭把AsA氧化成DAsA,在pH5以上時,後者分子重排,其內酯環裂開生成2,3-二酮古樂糖酸(DKG),與硝基苯肼偶聯,生成紅色的脎,其呈色強度與DKG濃度成正比;如果再測定出DKG、DKG + DAsA的含量,則可計算出AsA、DAsA的含量。該法雖然測試過程長、須嚴格掌握測試條件,但其准確度和精密度均較高[20]。
1.4.2.2 熒光分光光度計法
其測定Vc的基本原理是:樣品中的AsA被氧化成DAsA,並與鄰苯二胺反應,生成熒光物質喹喔啉(Quinoxaline)衍生物,熒光強度與DAsA的濃度成正比,用熒光計測定熒光強度。該法具有較強的專一性,樣品中有些成分會造成干擾,可作空白試驗校正干擾物質所產生的熒光。此法的優點是,生成熒光物質所需時間短,操作簡單,能在短時間內測定Vc總量和分開測定AsA、DAsA的含量[19]。
1.4.2.3 過氧化物酶法
果蔬中的Vc在過氧化氫存在下,添加合成底物1,4-二氨基苯,通過過氧化物酶氧化顯色,作為Vc氧化終點,然後比色測定。該法的特點是不需要昂貴的儀器,適應性強,容易掌握,費用低,檢測快速,不需要預先純化所分析的試樣[20]。
這個是我論文的綜述部分,你看看吧!

❿ AsA-POD活性的計算方法

一、抗壞血酸含量測定

【原理】

還原型抗壞血酸(AsA)可以把鐵離子還原成亞鐵離子,亞鐵離子與紅菲咯啉(4,7-二苯基-1,10-菲咯啉,BP)反應形成紅色螯合物。在534nM波長的吸收值與AsA含量正相關,故可用比色法測定。脫氧抗壞血酸(DAsA)可由二硫蘇糖醇(DTT)還原成AsA。測定AsA總量,從中減去還原型AsA,即為DAsA含量。

【儀器與用具】

離心機;分光光度計;研缽;試管。

【試劑】

5%三氯乙酸(TCA);

20%TCA;

無水乙醇溶液;

0�4%磷酸—乙醇溶液;

0�5%BP—乙醇溶液;

0�03%FeCl3—乙醇溶液;

0�6g/L DTT;

NA2HPO4—NAOH溶液:以0�2Mol/L NA2HPO4和1�2Mol/L NAOH等量混合;

60MMol/L DTT—乙醇。

【方法】

1.製作標准曲線配製濃度為2mg/L,4mg/L,6mg/L,8mg/L,10mg/L,12mg/L,14Mg/L的AsA系列標准液。取各濃度標准液1�0Ml於試管中,加入1�0Ml 5%TCA、1.0ml乙醇搖勻,再依次加入0�5Ml 0�4%H3PO4—乙醇、1�0Ml 0�5%BP—乙醇、0�5Ml 0�03%FeCl3—乙醇,總體積5�0Ml。將溶液置於30℃下反應90Min,然後測定A534。以AsA濃度為橫坐標,以A534為縱坐標繪制標准曲線,求出線性方程。

2.提取取植物葉片1�0g,按1∶5(W/V)加入5%TCA研磨,4000r/Min離心10Min,上清液供測定。

3.測定

(1)AsA測定取1.0Ml樣品提取液於試管中,按上述相同的方法進行測定,並根據標准曲線計算AsA含量。

(2)DAsA測定向1.0Ml樣品液中加入0�5Ml 60MMol/L DTT—乙醇溶液,用NA2HPO4—NAOH混合液,將溶液PH調至7~8,置於室溫下10Min,使DAsA還原。然後加入0�5Ml 20%TCA,把PH調至1~2。按AsA相同方法進行測定,計算出總AsA含量,從中減去AsA,即得DAsA含量。

二、抗壞血酸過氧化物酶(AsA-POD)活性

【原理】

AsA-POD催化AsA與H2O2反應,使AsA氧化成單脫氫抗壞血酸(MDAsA)。隨著AsA被氧化,溶液中290nM波長下的消光值(A290)下降,根據單位時間內A290減少值,計算AsA-POD活性。AsA氧化量按消光系數2�8(MMol/L)/CM計算,酶活性可用每克鮮重每小時氧化AsA的微摩爾數μMol/g·H表示。

【儀器】

離心機;紫外分光光度計;研缽;試管。

【試劑】

50MMol/L K2PO4—KH2PO4緩沖液(PH7�0,內含0�1MMol/L EDTA-NA2)�

0�3MMol/L AsA;

20μMol/L AsA;

0�06MMol/L H2O2。

【方法】

1�酶液制備取1�0g植物葉片剪碎,按1∶3(W/V)加入預冷的50MMol/L K2HPO4—KH2PO4緩沖液進行研磨提取,用兩層紗布過濾,濾液在4000r/Min下離心10Min,上清液作酶粗提液供測定。

2.酶活性測定3Ml反應混合液中含50MMol/L K2HPO4—KH2PO4緩沖液(PH7�0),0.1MMol/L EDTA-NA2,0.3MMol/L AsA,0�06MMol/L H2O2和0.1Ml酶液。加入H2O2後立即在20℃下測定10~30s內的A290變化,計算單位時間內AsA減少量及酶活性。

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