『壹』 2微克RNA反轉錄後的cDNA濃度大約為多少
可以大概估算。考慮一下幾個因素：
1. 大多數RNA是28s，16s ，5s等rRNA，mRNA其實佔少數。他們都會反轉錄為cDNA.。你若估計mRNA反轉為cDNA的量較難。
2、反轉錄和你添加的引物量有關。假設你加了1份引物，那就只能轉錄1分cDNA，按100%的反轉效率計算，你能合成大概2ug cDNA。若你添加了2份引物，那就只能轉錄2份cDNA，按100%的反轉效率計算，你能合成大概4ug cDNA。這些都是估算。
3.你問的是濃度，我上面大概估算了下量。折算為濃度時，須看你做上述反應，用的反應體系是多大？50ul？100ul？ 有估算量和反應體系，你大概就能算出cDNA的濃度啦。
4.盡管能基本估算出濃度，但是這樣做，意義不大。
『貳』 反轉錄PCR和熒光定量PCR
反轉錄PCR（Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction，RT-PCR）又稱為逆轉錄PCR。其原理是：提取組織或細胞中的總RNA，以其中的mRNA作為模板，採用Oligo(dT)或隨機引物利用逆轉錄酶反轉錄成cDNA。再以cDNA為模板進行PCR擴增，而獲得目的基因或檢測基因表達。RT-PCR使RNA檢測的靈敏性提高了幾個數量級，使一些極為微量RNA樣品分析成為可能。該技術主要用於：分析基因的轉錄產物、獲取目的基因、合成cDNA探針、構建RNA高效轉錄系統。
熒光定量PCR是通過熒光染料或熒游標記的特異性的探針，對PCR產物進行標記跟蹤，實時在線監控反應過程，結合相應的軟體可以對產物進行分析，計算待測樣品的初始模版。
原理是PCR擴增時在加入一對引物的同時加入一個特異性的熒光探針，該探針為一寡核苷酸，兩端分別標記一個報告熒光基團和一個淬滅熒光基團。探針完整時，報告基團發射的熒光信號被淬滅基團吸收；剛開始時, 探針結合在DNA任一一條單鏈上;PCR擴增時，Taq酶的5』端－3』端外切酶活性將探針酶切降解，使報告熒光基團和淬滅熒光基團分離，從而熒光監測系統可接收到熒光信號，即每擴增一條DNA鏈，就有一個熒光分子形成，實現了熒光信號的累積與PCR產物形成完全同步。
科學研究應用於：醫學、農牧、生物相關分子生物學定量研究。
『叄』 知道RNA濃度，反轉錄時怎麼計算加的模板量呢 ，RNA濃度單位是ng/ul 模板的加入量單位為ug，還有PCR也是ug
看你的結果，有幾種原因：1，模版濃度太低；2，上樣量太少；3，緩沖液有問題。你的RNA濃度是1749.91ng/ul ，也就是1.74ug/ul，因此加入1ul的RNA也就差不多是1ug的量。
『肆』 做逆轉錄實驗中，配置25ul體系，需要Total RNA 1ug ，請問這1ug怎麼換算成ul
這要通過分光光度計進行測定，算出總RNA的含量，取10ulRNA提取液，稀釋300倍，以同體積的水作為對照，用UV-2401紫外分光光度計測RNA260nm處和280nm處的吸收值並計算純度公式OD260/OD280。濃度公式=總濃度（ng/nl）=（OD260）*（稀釋倍數n）*40
如要計算很麻煩，所以一般加2-5ul，量多不礙事。
自己的經驗所得~~
『伍』 PCR時，將RNA反轉錄成cDNA反應體系怎麼算
pcr時，將rna反轉錄成cdna反應體系怎麼算
再以cdna為模板進行pcr擴增，而獲得目的基因或檢測基因表達。rt-pcr使rna檢測的靈敏性提高了幾個數量級，使一些極為微量rna樣品分析成為可能。該技術主要用於：分析基因的轉錄產物、獲取目的基因、合成cdna探針、構建rna高效轉錄系統。
rt-
pcr即逆轉錄pcr，是將rna的逆轉錄（rt）和cdna的聚合酶鏈式擴增反應（pcr）相結合的技術。rt-pcr技術靈敏而且用途廣泛，可用於檢測細胞/組織中基因表達水平，細胞中rna病毒的含量和直接克隆特定基因的cdna序列等。