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回收目的基因的方法和步驟

發布時間:2025-03-18 05:45:41

1. 重組dna技術包括哪些主要步驟

重組DNA技術主要包括四個步驟:提取目的基因、目的基因與運載體結合、將目的基因導入受體細胞、目的基因的檢測和表達。

1、提取目的基因

獲取目的基因主要有兩條途徑:一條是從供體細胞的DNA中直接分離基因;另一條是人工合成基因。直接分離基因最常用的方法是「鳥槍法」,又叫「散彈射擊法」。

2、目的基因與運載體結合

目的基因與運載體結合的過程實際上是不同來源的DNA重新組合的過程,是基因工程的核心。

3、將目的基因導入受體細胞

用人工方法使體外重組的DNA分子轉移到受體細胞,主要是借鑒細菌或病毒侵染細胞的途徑。目的基因導入受體細胞後,就可以隨著受體細胞的繁殖而復制,由於細菌的繁殖速度非常快,在很短的時間內就能夠獲得大量的目的基因。

4、目的基因的檢測和表達

目的基因導入受體細胞後,是否可以穩定維持和表達其遺傳特性,只有通過檢測與鑒定才能知道。受體細胞必須表現出特定的性狀,才能說明目的基因完成了表達過程。

(1)回收目的基因的方法和步驟擴展閱讀

重組DNA技術是指將一種生物體(供體)的基因與載體在體外進行拼接重組,然後轉入另一種生物體(受體)內,使之按照人們的意願穩定遺傳並表達出新產物或新性狀的DNA體外操作程序,也稱為分子克隆技術。因此,供體、受體、載體是重組DNA技術的三大基本元件。

重組DNA技術使用的酶有限制性核酸內切酶、DNA連接酶。常用的載體有質粒載體、噬菌體載體、Ti質粒、人工染色體。

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