一、陰道分泌物顯微鏡
陰道分泌物顯微鏡是一種臨床工具，用於檢查宮頸、陰道和外陰組織是否有異常變化。它由顯微鏡、套管、顯微鏡台及置物架構成。這種設備的優勢在於能提高活檢的准確性，提高陽性率。
二、陰道分泌物檢查方法
1、陰道滴蟲檢查
（1）懸滴法：使用棉簽從陰道後穹窿取少量分泌物，加入生理鹽水試管中立即送檢。也可在玻片上滴1～2滴生理鹽水，直接放置少量白帶，搖勻後立即在顯微鏡下觀察。滴蟲在顯微鏡下呈現梨形，顏色較綠，體積是白細胞的2～3倍，常在原位活動。在高倍鏡下還能觀察到頂端的鞭毛。採集樣本時避免使用化學試劑或肥皂水，以防滴蟲死亡導致誤診。
（2）塗片法：採用上述方法取白帶直接塗片，使用瑞氏或姬姆薩染色後在顯微鏡下檢查滴蟲。
2、陰道真菌檢查
取陰道分泌物或陰道白膜塗片，滴10%氫氧化鉀溶液1滴，蓋上玻片後在顯微鏡下尋找菌絲及其中的芽孢。也可不蓋玻片直接觀察。塗片還可以使用革蘭染色法，必要時送培養。
3、陰道清潔度檢查
根據塗片中雜菌和白細胞的數量來劃分等級。取陰道後穹窿分泌物塗片，乾燥後染色或直接在顯微鏡下觀察。I度：無雜菌和白細胞，視野非常干凈；Ⅱ度：少量白細胞和雜菌，陰道桿菌和上皮細胞中等量，常見於經產婦，屬於正常陰道液；Ⅲ度：較多雜菌和白細胞，少量陰道桿菌和上皮細胞，表明存在炎症；Ⅳ度：無上皮細胞和陰道桿菌，僅見白細胞和雜菌。
在簡單的婦科檢查中，陰道鏡可以替代顯微鏡進行常規檢查。
㈡ 血液檢驗標本採集方法
血液檢驗標本採集方法
血液檢驗標本分為全血、血漿、血清等。全血標本主要用於臨床血液學檢查,例如血細胞計數和分類、形態學檢查等;血漿標本適合內分泌激素、血栓和止血檢測血清標本多適合於臨床化學和免疫學的檢測。按照血標本採集部位的不同，分為靜脈血、動脈血和毛細血管血三種。絕大多數檢查採用靜脈血,少數檢查如血氣分析、乳酸和丙酮酸測定等需要採集動脈血，毛細血管血主要用於各種微量法檢查或大規模普查。下面是我為大家帶來的血液檢驗標本採集方法，歡迎閱讀。
一、靜脈血採集方法、注意事項和採集樣品所用材料的安全處置
1、止血帶或壓脈器：採集靜脈血時，止血帶壓迫靜脈時間不宜過長,以不超過40秒為宜，否則容易引起淤血、靜脈擴張，並且影響某些指標的檢查結果,如乳酸升高、pH值降低、K+、Ca2+、肌酸激酶升高等。
2、采血時間與部位：大多數化驗檢查要求清晨、空腹、採集靜脈血應盡可能避免在輸液同時取血,輸液不僅使血液稀釋，而且對實驗室檢查結果發生嚴重干擾，特別是血糖和電解質。
3、避免溶血、雜質污染：采血器具必須無菌、乾燥、潔凈.避免特別用力抽吸和推注、避免化學污染和細菌污染引起的溶血。因為紅細胞的某些成分與血清(漿)不同，樣本溶血可使紅細胞某些成分釋放,影響實驗室檢查結果。
4、血樣的採集：血樣要求在每一天的同一時間採集，理想的時間是早晨7：00到8：00，尤其是監測為目的時，更要保證標本採集時間的統一。最後一次食物和液體攝入應在前一天下午6：00到7：00(急診檢驗例外)。血樣採集應在不服葯期間，如在早晨服前。血樣採集時，患者應仰卧位，采血點應在同一靜脈區，通常為手臂靜脈。
5、標本採集後須立即送檢，放置過久影響檢驗結果。當取血不順利時,切忌在同一處反復穿刺，易導致標本溶血或有小凝塊，影響檢測結果。
6、採集血培養標本時應先注射厭氧瓶，盡量減少接觸空氣時間。
7、微量元素測定採集標本的注射器和容器不能含游離金屬。
8、採集樣品所用材料的安全處置：使用後的采血針、注射器針頭等銳器物應當直接放入不能刺穿的利器盒內或毀型器內進行安全處置，禁止對使用後的一次性針頭復帽，禁止用手直接接觸使用過的針頭、刀片等銳器物;注射器針筒、棉簽等其他醫療廢物放入黃色醫療廢物袋中，醫療廢物和生活垃圾分類收集存放。消毒毀形後的醫療廢物必須交給指定的醫療廢物處理廠，不得擅自廢棄。
二、臨床化學/免疫檢驗標本
臨床化學/免疫檢驗多用非抗凝血標本,最好使用真空負壓采血管。
標本採集主要注意事項有：
1、化學項目大多數需要空腹采靜脈血，多個單項化學檢測項目組合檢驗時一般可采管血;
2、采血量視檢查項目多少不同而異，通常為4.0～5.0ml;
3、多個組合檢測項目同時采血時應按下列順序采血：
血培養——無添加劑管凝血管——有添加劑管。
有添加劑管的順序為：櫞酸鹽管——肝素管——EDTA管——草酸鹽/氟化鈉管。
4、不論是抗凝血還是非抗凝血，為了縮短血清或血漿與血細胞的接觸時間，血液標本收集後，須盡可能早地將血清或血漿從全血中分離出來，避免由此而影響檢驗結果的准確性。從血液標本採集開始，必須在2h內將全血處理為血清或血漿。
1)血清(非抗凝血)：采血後標本於22～25℃(室溫)15～30min後可自行(自發)完全凝固，禁用木棍和玻棒等剝離凝塊;冷藏標本凝集較慢，加促凝劑者凝集加快。
2)血漿(抗凝血)：應採用抗凝管采血,采血後立即顛倒混合5～10次，采血後數分鍾內可離心分離血漿。
3)冷藏標本：用於穩定血液中溫度依賴性成分(抑制細胞代謝)的檢測項目，標本於2～8℃冷藏(標本採集後立即置於冰箱中，冷藏必須充分);標本需冷藏的測定項目有：兒茶酚胺、胃泌素、甲旁素、PH/血氣、NH3、乳酸、丙酮酸等。全血標本一般不冷藏，血鉀測定標本冷藏不得>2h。全血標本切忌冷凍。
4)代謝抑制劑和防腐劑的應用：用於抑制細胞代謝。血標本中加入氟化鈉後，血細胞未分離情況下血標本中Glu，22～25℃穩定24h.2～8℃穩定48h;氟化鈉不適用於新生兒及兒童的Glu測定(因兒童PCV高，細胞糖酵解難以控制);氟化鈉一麝香草酚混合劑不適合酶學檢測(因氟化鈉一麝香草酚混合劑抑制酶活性));甲醛草酸鉀抗凝保存劑不適用於血糖測定。
三、紅細胞沉降率(血沉，ESR)檢測標本
靜脈採集枸櫞酸鈉(109mmol/L，即32.06g/L)抗凝血(枸櫞酸鈉抗凝管采血)，黑帽管。
采血注意事項：
1、單獨采1管血，准備采血至2ml刻度線(抗凝劑：全血=1：4);
2、采血後立即上下顛倒混合5~10次;
3、采血後應盡快送檢(必須2h內檢測)。
四、血常規(全血細胞分析)檢驗標本
一般用EDTA1.5～2.2mg/ml抗凝(EDTA抗凝采血管-紫帽管)。
采血注意事項：
1、采血後立即上下顛倒混勻，5～10次.不可用力震盪;
2、應按抗凝管刻度采血至2ml，可不用空腹;
3、采血後應盡快送檢(需顯微鏡觀察形態的標本采血後應及時推片固定，因為超過2小時WBC形態會發生改變);
4、血型與血常規可采1管血。
五、75克葡萄糖耐量試驗(OGTT)/胰島素釋放試驗/C-肽釋放試驗
1、病人准備：試驗前3日，每日進食碳水化合物量不低於250-300克，且維持正常活動，影響試驗的葯物(如：咖啡因、口服避孕葯、水楊酸鹽等)應在3日前停用，試驗前病人應10～16小時不進食。
2、標本採集：臨床上常用方法是清晨抽空腹血後，口服75克葡萄糖，再於給糖後0.5、1、2、3小時各采血2ml/1次(共5次)。
3、標本保存：采血後1小時內分離血清並及時冷藏送檢或採用血糖專用抗凝管采血，於2～8℃保存。
4、注意事項：胰島素測定受溶血影響較大，采血時應避免溶血。
六、高血壓系列檢驗標本
1、高血壓三項(腎素、血管緊張素I、II)
1)病人准備：β-阻斷劑、血管擴張劑、利尿劑及甾體激素、甘草等影響體內腎素水平，一般要在停葯後2周測定腎素活性(PRA)，利血平等代謝慢的葯物應在停葯3周測定。不宜停葯的.病人改服胍乙啶等影響PRA較小的降壓葯。鈉攝入量影響機體PRA水平，故病人測定PRA前3天應適當減少食鹽攝入量，最好同時測定取血前24小時尿鈉含量，以供分析PRA結果時參考;
2)標本採集：靜脈取血4～5ml，拔除針頭後緩慢注入到專用抗凝管中,蓋好管塞後上
下顛倒5次,混勻後2500轉/分,離心5～10分鍾,分離血漿,將血漿裝入專用血漿管後低溫送檢。如不能立即送檢,需盡快冰凍保存(-15℃)。溶血標本不能檢測;
3)標本類型、標本量：專用抗凝管采血，分離血漿，取2ml送檢;
4)標本保存：低溫冰箱保存(-15℃以下)，可保存2個月;
5)注意事項：申請單上應註明抽血時的體位(卧位：病人在早上6-8時起床前，取靜脈血;立位：病人起床後活動3小時，取靜脈血。)和飲食情況(普食飲食、低鈉飲食);標本未及時分離血漿、反復凍融、溶血、保存不當、使用過期抗凝管等均可使結果受到影響。
2、醛固酮
1)病人准備：留樣前應停服利尿劑至少3周，停服抗高血壓葯物1周;
2)標本採集：血漿醛固酮測定應採用肝素抗凝，採集後立即分離血漿，置-20℃保存
待測;尿液標本則留取24小時尿量，用10～15mL濃鹽酸防腐;
3)申請單上註明：抽血時的體位(卧位、立位)和飲食情況(普食飲食、低鈉飲食);
尿液標本要准確記錄24小時尿量。
七、皮質醇標本採集及注意事項
正常人皮質醇的分泌存在晝夜節律，一般為早上8點或下午4點采血，送檢時請務必在申請單上註明采血時間。
八、流式細胞術檢測項目的標本採集及注意事項
1、淋巴細胞亞群系列
標本要求：EDTA或肝素抗凝全血2ml(推薦EDTA抗凝)
注意事項：該系列項目在不同年齡段的細胞數參考值不盡相同，所以送檢時請務必在申請單上註明病人年齡。
2、白血病免疫分型
標本要求：肝素抗凝骨髓或全血2ml
注意事項：請使用白血病免疫分型專用申請單
3、人類白細胞抗原B27檢測(HLA-B27)/陣發性睡眠性血紅蛋白尿症(PNH)檢
測標本要求：EDTA或肝素抗凝全血2ml備註：保證新鮮標本，流式細胞術檢測項目需要24小時內送檢;
九、微量元素檢測標本採集要求
1、所有采血人員要經過嚴格培訓並熟悉采血過程，知曉操作技術對微量元素(尤其是鉛和鋅)檢測質量的影響。
2、采血人員應戴乳膠或聚乙烯手套，若手套塗粉，需用靜脈采血皮膚清潔法處理手套後進行操作。
3、血鉛檢測采血時按順序用0.2%硝酸、純水、碘酒、酒精清潔采血區皮膚，防止環境對血鉛檢測的污染。
4、橡皮塞對鋅有污染，故普通采血管不可使用，請使用本中心提供的專用管。
5、採集方法：採集靜脈血0.5-1.0mL，採集後馬上輕輕顛倒混勻，粘上條形碼，裝入自封袋送檢。
6、如不能及時送檢，應放置2-8℃冰箱保存。
7、標本凝固或含凝塊，不能檢測。
十、遺傳學檢測標本採集要求
1、標本採集：外周血標本可使用中心配送的肝素抗凝管(遺傳專用)和采血針進行採集，採集後立即將試管輕輕顛倒混勻，以免凝血;臍帶血標本、骨髓標本可以在穿刺成功後，打開中心配送的肝素抗凝管蓋，將臍帶血或骨髓注入採集管中，立即將試管輕輕顛倒混勻，以免凝血，請注意無菌操作，不要污染管蓋。請避免使用注射器採集標本後直接注入採集管的方式進行標本採集，以免引起溶血;請勿使用EDTA等抗凝管採集標本。
2、標本量：外周血、臍帶血、骨髓各4ml;
3、標本送檢：合格標本須於采血後當天送至遺傳實驗室，故請於標本採集後及時通知艾迪康工作人員接收標本;標本有溶血、凝血現象，也視為不合格標本。骨髓標本應盡快送至實驗室。
4、標本保存：標本採集後置於18～25℃保存，不可冷凍，不可放置於高溫環境中。
5、申請單填寫：請完整填寫申請單，尤其是標本採集時間、性別、病史、臨床診斷等。
十一、基因檢測標本採集要求
1、所有用於基因診斷的標本必須用無菌試管或容器留取，嚴禁使用肝素抗凝管，採集標本時注意無菌操作。
2、為避免污染，送檢基因診斷標本項目需單人單項目單管。
3、採集方法：
1)血液標本
抽取病人靜脈血，置無菌試管中室溫自然凝固或2000轉/分離心，取分離出的EDTA抗凝血漿/血清送檢;
2)女性分泌物標本
(1)分泌物標本采樣應在非月經期進行;采樣前3天內不使用陰道內葯物，不沖洗陰道;24小時內不應有性行為;
(2)採集時先用棉簽將宮頸口或尿道口過多的分泌物輕輕擦去，更換棉拭子，將棉拭子伸入宮頸，通過上皮交界處，旋轉3～5周，以保證取得較多的柱狀上皮標本，對於懷疑HPV感染的患者，盡量採集病變部位標本，可提高HPV的檢出率。將取樣後的棉拭子放入配套的軟管中，旋緊管蓋;
(3)男性分泌物標本先清潔尿道口，將棉拭子伸入男性尿道1cm，旋轉3～5次獲得標本，將取樣後的棉拭子放入配套的軟管中，旋緊管蓋;
(4)皰疹液或疣體標本：對於生殖器或肛周有疣狀體增生，懷疑為尖銳濕疣者，宜直接採集疣體組織置於標本管中送檢。備註：疣體標本時，需要在申請單上的標本類型欄處寫上「疣體」。
4、標本保存：檢測靶核酸為DNA的標本，可在2～8℃下保存3天;檢測靶核酸為RNA
的標本，應保存在-20℃下。
十二、骨髓檢查的要求和注意事項
1、塗片要求：二張血片，六張骨髓片，懷疑白血病則需八張骨髓片。骨髓血片註明「B」，骨髓片註明「M」，以示區別。
2、申請單注意事項：
1)病例摘要:應填寫全面，尤其是肝、脾、淋巴結、出血狀況等與血液病相關的症狀以及葯物的應用等均應填寫清楚;
2)化驗結果：血常規結果一定不能缺，如果可能，MCV、MCH、MCHC及分類也一並填上;
3)採取骨髓部位也應填上，如果採取骨髓時不順，應重抽，以免耽誤病人;
4)寫上主治醫生聯系方式，如科室電話、手機號碼等(以便與臨床密切聯系)。
如何讓血液健康干凈？
魚肉
魚肉尤其是深海魚類，其含有Ω-3脂肪酸，可以降低血管內膽固醇和甘油三脂的含量，能夠降低血脂並預防高血脂引起的其他疾病。高脂血會引起高血壓、動脈硬化、動脈粥樣化、冠心病、心肌梗死、猝死、脂肪肝等疾病。魚肉除了能降低血脂，還富含多種維生素和礦物質、蛋白質，營養又不容易引起肥胖。
芹菜
從中醫角度來看，芹菜性味甘涼，具有清熱解毒、利尿消腫的作用，可以調理肝火旺盛、積食、頭痛、失眠頭痛和心煩。
從芹菜所含有的成分來看，其含有的維生素P屬於黃酮類化合物，可幫助血管恢復彈性，舒張血管，降血壓。防治高血壓引起的腦溢血，對皮膚上的紫癜也有作用。同時含有大量的膳食纖維可以延緩血糖的升高和降低膽固醇。
蕎麥
蕎麥含有的膳食纖維是精製大米的10倍，食用之後能夠降血壓、血糖和血脂。同時，其中含有大量的B族維生素，可以促進人體脂肪和碳水化合物的代謝。從中醫角度來看蕎麥還助消化、止瀉、解酒、健脾胃。
獼猴桃
獼猴桃又被稱為水果之王，含有的大量的維生素C可以提高血管的韌性，預防動脈硬化的發生。同時維生素C可以促進膠原的合成、免疫力的提高、鐵的吸收、清除自由基、抗癌和抗衰老。還對重金屬起到解毒作用。
大蒜
大蒜可以防止血液中的血脂沉澱形成的血栓，並且促進身體內部的脂肪代謝，降低膽固醇和抑制血小板的凝聚。讓血管舒張，促進血液循環，降低血液粘度，抑制血栓的形成。
另外，大蒜還可以預防感冒、防癌、抗衰老、護肝、健脾胃。
黑木耳
黑木耳中含有多糖類物質，可以抑制血栓形成、抗凝血、降低膽固醇、疏通血管和提高免疫力，是不折不扣的血管「清道夫。
另外，木耳中的膠質物還可以吸附腸道中毒素，促進腸道和血液健康。在《本草綱目》中提到食用木耳可以健脾潤膚，消除黑斑。
紅薯
紅薯中的膳食纖維可以增加糞便體積，促進腸道內毒素的排出，從而抑制毒素被腸道二次吸收，進入血液。另外，腸道干凈，可以抑制毒素被肝臟吸收，肝主藏血，肝臟好自然血液干凈。
葵花籽油
葵花籽油中90%是不飽和脂肪酸，其中66%是亞油酸，亞油酸可以促進新陳代謝，軟化血管、降低血脂和血壓，並且促進血液循環，預防腦中風、動脈硬化和冠心病等。
同時，葵花籽油含有的維生素E是油類中最高的，可以抗氧化，抑制黃褐斑和黑色素的形成。
綠茶
綠茶含有茶多酚、兒茶素、咖啡鹼和氨基酸等物質，這些物質可以幫助人體防癌、抗衰老。同時，起到降脂和減肥的作用，早在唐代的《本草拾遺》中就已經提到多喝綠茶可以「令人瘦。
另外，多喝茶可以稀釋血液，降低血液粘度，促進血液循環，減少血栓的形成，預防高血壓、血管堵塞、冠心病和心肌梗死等。
所以，想要美麗，想要健康長壽，血液必須干凈，了解這么多能清理血液的食物，今天就吃起來!
;㈢ 微生物生長的常用檢測方法
一、生長量測定法
1.1體積測量法：又稱測菌絲濃度法。
通過測定一定體積培養液中所含菌絲的量來反映微生物的生長狀況。方法是，取一定量的待測培養液（如10毫升）放在有刻度的離心管中，設定一定的離心時間（如5分鍾）和轉速（如5000rpm），離心後，倒出上清夜，測出上清夜體積為v，則菌絲濃度為（10-v）/10。菌絲濃度測定法是大規模工業發酵生產上微生物生長的一個重要監測指標。這種方法比較粗放，簡便，快速，但需要設定一致的處理條件，否則偏差很大，由於離心沉澱物中夾雜有一些固體營養物，結果會有一定偏差。
1.2稱乾重法：
可用離心或過濾法測定。一般乾重為濕重的10-20%。在離心法中，將一定體積待測培養液倒入離心管中，設定一定的離心時間和轉速，進行離心，並用清水離心洗滌1-5次，進行乾燥。乾燥可用烘箱在105℃或100℃下烘乾，或採用紅外線烘乾，也可在80℃或40℃下真空乾燥，乾燥後稱重。如用過濾法，絲狀真菌可用濾紙過濾，細菌可用醋酸纖維膜等濾膜過濾，過濾後用少量水洗滌，在40℃下進行真空乾燥。稱乾重發法較為煩瑣，通常獲取的微生物產品為菌體時，常採用這種方法，如活性乾酵母（activitydryyeast,ADY）,一些以微生物菌體為活性物質的飼料和肥料。
1.3比濁法：
微生物的生長引起培養物混濁度的增高。通過紫外分光光度計測定一定波長下的吸光值，判斷微生物的生長狀況。對某一培養物內的菌體生長作定時跟蹤時，可採用一種特製的有側臂的三角燒瓶。將側臂插入光電比色計的比色座孔中，即可隨時測定其生長情況，而不必取菌液。該法主要用於發酵工業菌體生長監測。如我所使用UNICO公司的紫外-可見分光光度計，在波長600nm處用比色管定時測定發酵液的吸光光度值OD600，以此監控E.Coli的生長及誘導時間。
1.4菌絲長度測量法：
對於絲狀真菌和一些放線菌，可以在培養基上測定一定時間內菌絲生長的長度，或是利用一隻一端開口並帶有刻度的細玻璃管，到入合適
的培養基，卧放，在開口的一端接種微生物，一段時間後記錄其菌絲生長長度，藉此衡量絲狀微生物的生長
二、微生物計數法
2.1血球計數板法:
血球計數板是一種有特別結構刻度和厚度的厚玻璃片，玻片上有四條溝和兩條嵴，中央有一短橫溝和兩個平台，兩嵴的表比兩平台的表面高0.1mm，每個平台上刻有不同規格的格網，中央0.1mm2面積上刻有400個小方格。通過油鏡觀察，統計一定大格內微生物的數量，即可算出1毫升菌液中所含的菌體數。這種方法簡便，直觀，快捷，但只適宜於單細胞狀態的微生物或絲狀微生物所產生的孢子進行計數，並且所得結果是包括死細胞在內的總菌數。
2.2染色計數法：
為了彌補一些微生物在油鏡下不易觀察計數，而直接用血球計數板法又無法區分死細胞和活細胞的不足，人們發明了染色計數法。藉助不同的染料對菌體進行適當的染色，可以更方便的在顯微鏡下進行活菌計數。如酵母活細胞計數可用美藍染色液，染色後在顯微鏡下觀察，活細胞為無色，而死細胞為藍色。
2.3比例計數法：
將已知顆粒（如黴菌孢子或紅細胞）濃度的液體與一待測細胞濃度的菌液按一定比例均勻混合，在顯微鏡視野中數出各自的數目，即可得未知菌液的'細胞濃度。這種計數方法比較粗放。並且需要配製已知顆粒濃度的懸液做標准。
2.4液體稀釋法：
對未知菌樣做連續十倍系列稀釋，根據估計數，從最適宜的三個連續的10倍稀釋液中各取5毫升試樣，接種1毫升到3組共15隻裝培養液的試管中，經培養後記錄每個稀釋度出現生長的試管數，然後查最大或然數表MPN（mostprobablynumber）得出菌樣的含菌數，根據樣品稀釋倍數計算出活菌含量。該法常用於食品中微生物的檢測，例如飲用水和牛奶的微生物限量檢查。
2.5平板菌落計數法：
這是一種最常用的活菌計數法。將待測菌液進行梯度稀釋，取一定體積的稀釋菌液與合適的固體培養基在凝固前均勻混合，或將菌液塗布於已凝固的固體培養基平板上。保溫培養後，用平板上出現的菌落數乘以菌液稀釋度，即可算出原菌液的含菌數。一般以直徑9cm的平板上出現50-500個菌落為宜。但方法比較麻煩，操作者需有熟練的技術。平板菌落計數法不僅可以得出菌液中活菌的含菌數，而且同時將菌液中的細菌進行了一次分離培養，獲得了單克隆。
2.6試劑紙法：
在平板計數法的基礎上，發展了小型商品化產品以供快速計數用。形式有小型厚濾紙片，瓊脂片等。在濾紙和瓊脂片中吸有合適的培養基，其中加入活性指示劑2，3，5-氯化三苯基四氮唑（TTC，無色）待蘸取測試菌液後置密封包裝袋中培養。短期培養後在濾紙上出現一定密度的玫瑰色微小菌落與標准紙色板上圖譜比較即可估算出樣品的含菌量。試劑紙法計數快捷准確，相比而言避免了平板計數法的人為操作誤差。
2.7膜過濾法：
用特殊的濾膜過濾一定體積的含菌樣品，經丫叮橙染色，在紫外顯微鏡下觀察細胞的熒光，活細胞會發橙色熒光，而死細胞則發綠色熒光。
2.8生理指標法：
微生物的生長伴隨著一系列生理指標發生變化，例如酸鹼度，發酵液中的含氮量，含糖量，產氣量等，與生長量相平行的生理指標很多，它們可作為生長測定的相對值。
2.9測定含氮量：
大多數細菌的含氮量為乾重的12.5%，酵母為7.5%，黴菌為6.0%。根據含氮量×6.25，即可測定粗蛋白的含量。含氮量的測定方法有很多，如用硫酸，過氯酸，碘酸，磷酸等消化法和Dumas測N2氣法。Dumas測N2氣法是將樣品與CuO混合，在CO2氣流中加熱後產生氮氣，收集在呼吸計中，用KOH吸去CO2後即可測出N2的量。
2.10測定含碳量：
將少量（乾重0.2-2.0mg）生物材料混入1毫升水或無機緩沖液中，用2毫升2%的K2Cr2O7溶液在1000C下加熱30分鍾後冷卻。加水稀釋至5毫升，在580nm的波長下讀取吸光光度值，即可推算出生長量。需用試劑做空白對照，用標准樣品做標准曲線。
2.11還原糖測定法：
還原糖通常是指單糖或寡糖，可以被微生物直接利用，通過還原糖的測定可間接反映微生物的生長狀況，常用於大規模工業發酵生產上微生物生長的常規監測。方法是，離心發酵液，取上清液，加入斐林試劑，沸水浴煮沸3分鍾，取出加少許鹽酸酸化，加入Na2S2O3臨近終點時加入澱粉溶液，繼續加Na2S2O3至終點，查表讀出還原糖的含量。
2.12氨基氮的測定：
方法是，離心發酵液，取上清液，加入甲基紅和鹽酸作指示劑，加入0.02N的NaOH調色至顏色剛剛褪去，加入底物18%的中性甲醛，反應數刻，加入0.02N的使之變色，根據NaOH的用量折算出氨基氮的含量。根據培養液中氨基氮的含量，可間接反映微生物的生長狀況。
2.13其他生理物質的測定：
P，DNA，RNA，ATP，NAM（乙醯胞壁酸）等含量以及產酸，產氣，產CO2（用標記葡萄糖做基質），耗氧，黏度，產熱等指標，都可用於生長量的測定。也可以根據反應前後的基質濃度變化，最終產氣量，微生物活性三方面的測定反映微生物的生長。如我所在BMP-2的發酵生產上，隨時監測溶氧量的變化和酸鹼度的變化，判斷細菌的長勢。
拓展：微生物的現代定義
肉眼難以看清，需要藉助光學顯微鏡或電子顯微鏡才能觀察到的一切微小生物的總稱。微生物包括細菌、病毒、真菌和少數藻類等。（但有些微生物是肉眼可以看見的，像屬於真菌的蘑菇、靈芝等。）病毒是一類由核酸和蛋白質等少數幾種成分組成的「非細胞生物」，但是它的生存必須依賴於活細胞。根據存在的不同環境分為空間微生物、海洋微生物等，按照細胞結構分類分為原核微生物和真核微生物。
微生物的主要特徵
體小面大
一個體積恆定的物體，被切割的越小，其相對表面積越大。微生物體積很小，如一個典型的球菌，其體積約1mm，可是其表面積卻很大。這個特徵也是賦予微生物其他如代謝快等特性的基礎。
吸多轉快
微生物通常具有極其高效的生物化學轉化能力。據研究，乳糖菌在1個小時之內能夠分解其自身重量1000-10000倍的乳糖，產朊假絲酵母菌的蛋白合成能力是大豆蛋白合成能力的100倍。
生長繁殖快
相比於大型動物，微生物具有極高的生長繁殖速度。大腸桿菌能夠在12.5-20分鍾內繁殖1次。不妨計算一下，1個大腸桿菌假設20分鍾分裂1次，1小時3次，1晝夜24小時分裂24×3=72次，大概可產生4722366500萬億個（2的72次方），這是非常巨大的數字。但事實上，由於各種條件的限制，如營養缺失、競爭加劇、生存環境惡化等原因，微生物無法完全達到這種指數級增長。 已知大多數微生物生長的最佳pH范圍為7.0 (6.6~7.5)附近，部分則低於4.0。
微生物的這一特性使其在工業上有廣泛的應用，如發酵、單細胞蛋白等。微生物是人類不可或缺的好朋友。
適應強 易變異
分布廣 種類多
微生物對我們生活的影響
微生物對人類最重要的影響之一是導致傳染病的流行。在人類疾病中有50%是由病毒引起。微生物導致人類疾病的歷史，也就是人類與之不斷斗爭的歷史。在疾病的預防和治療方面，人類取得了長足的進展，但是新現和再現的微生物感染還是不斷發生，像大量的病毒性疾病一直缺乏有效的治療葯物。一些疾病的致病機制並不清楚。大量的廣譜抗生素的濫用造成了強大的選擇壓力，使許多菌株發生變異，導致耐葯性的產生，人類健康受到新的威脅。一些分節段的病毒之間可以通過重組或重配發生變異，最典型的例子就是流行性感冒病毒。每次流感大流行流感病毒都與前次導致感染的株型發生了變異，這種快速的變異給疫苗的設計和治療造成了很大的障礙。而耐葯性結核桿菌的出現使原本已近控制住的結核感染又在世界范圍內猖獗起來。
微生物千姿百態，有些是腐敗性的，即引起食品氣味和組織結構發生不良變化。當然有些微生物是有益的，它們可用來生產如乳酪，麵包，泡菜，啤酒和葡萄酒。微生物非常小，必須通過顯微鏡放大約1000 倍才能看到。比如中等大小的細菌，1000個疊加在一起只有句號那麼大。
微生物能夠致病，能夠造成食品、布匹、皮革等發霉腐爛，但微生物也有有益的一面。最早是弗萊明從青黴菌抑制其它細菌的生長中發現了青黴素，這對醫葯界來講是一個劃時代的發現。後來大量的抗生素從放線菌等的代謝產物中篩選出來。抗生素的使用在第二次世界大戰中挽救了無數人的生命。一些微生物被廣泛應用於工業發酵，生產乙醇、食品及各種酶制劑等；一部分微生物能夠降解塑料、處理廢水廢氣等等，並且可再生資源的潛力極大，稱為環保微生物；還有一些能在極端環境中生存的微生物，例如：高溫、低溫、高鹽、高鹼以及高輻射等普通生命體不能生存的環境，依然存在著一部分微生物等等。看上去，我們發現的微生物已經很多，但實際上由於培養方式等技術手段的限制，人類現今發現的微生物還只佔自然界中存在的微生物的很少一部分。
微生物間的相互作用機制也相當奧妙。例如健康人腸道中即有大量細菌存在，稱為正常菌群，其中包含的細菌種類高達上百種。在腸道環境中這些細菌相互依存，互惠共生。食物、有毒物質甚至葯物的分解與吸收，菌群在這些過程中發揮的作用，以及細菌之間的相互作用機制還不明了。一旦菌群失調，就會引起腹瀉。
隨著醫學研究進入分子水平，人們對基因、遺傳物質等專業術語也日漸熟悉。人們認識到，是遺傳信息決定了生物體具有的生命特徵，包括外部形態以及從事的生命活動等等，而生物體的基因組正是這些遺傳信息的攜帶者。因此闡明生物體基因組攜帶的遺傳信息，將大大有助於揭示生命的起源和奧秘。
工業微生物涉及食品、制葯、冶金、采礦、石油、皮革、輕化工等多種行業。通過微生物發酵途徑生產抗生素、丁醇、維生素C以及一些風味食品的制備等；某些特殊微生物酶參與皮革脫毛、冶金、採油采礦等生產過程，甚至直接作為洗衣粉等的添加劑；另外還有一些微生物的代謝產物可以作為天然的微生物殺蟲劑廣泛應用於農業生產。通過對枯草芽孢桿菌的基因組研究，發現了一系列與抗生素及重要工業用酶的產生相關的基因。乳酸桿菌作為一種重要的微生態調節劑參與食品發酵過程，對其進行的基因組學研究將有利於找到關鍵的功能基因，然後對菌株加以改造，使其更適於工業化的生產過程。國內維生素C兩步發酵法生產過程中的關鍵菌株氧化葡萄糖酸桿菌的基因組研究，將在基因組測序完成的前提下找到與維生素C生產相關的重要代謝功能基因，經基因工程改造，實現新的工程菌株的構建，簡化生產步驟，降低生產成本，繼而實現經濟效益的大幅度提升。對工業微生物開展的基因組研究，不斷發現新的特殊酶基因及重要代謝過程和代謝產物生成相關的功能基因，並將其應用於生產以及傳統工業、工藝的改造，同時推動現代生物技術的迅速發展。
經濟作物柑橘的致病菌是國際上第一個發表了全序列的植物致病微生物。還有一些在分類學、生理學和經濟價值上非常重要的農業微生物，例如：胡蘿卜歐文氏菌、植物致病性假單胞菌以及中國正在開展的黃單胞菌的研究等正在進行之中。日前植物固氮根瘤菌的全序列也剛剛測定完成。借鑒已經較為成熟的從人類病原微生物的基因組學信息篩選治療性葯物的方案，可以嘗試性地應用到植物病原體上。特別像柑橘的致病菌這種需要昆蟲媒介才能完成生活周期的種類，除了殺蟲劑能阻斷其生活周期以外，只能通過遺傳學研究找到毒力相關因子，尋找抗性靶位以發展更有效的控制對策。固氮菌全部遺傳信息的解析對於開發利用其固氮關鍵基因提高農作物的產量和質量也具有重要的意義。[10]
在極端環境下能夠生長的微生物稱為極端微生物，又稱嗜極菌。嗜極菌對極端環境具有很強的適應性，極端微生物基因組的研究有助於從分子水平研究極限條件下微生物的適應性，加深對生命本質的認識。
㈣ 常規生化檢查有哪些
生殖器官的檢查包括對陰莖、尿道、睾丸、附睾、精索、前列腺等器官的視診、觸診等。查看陰莖是否為嚴重包莖，有無硬結炎症、腫瘤、發育異常等。尿道排尿困難、瘺孔、下裂、硬結及狹窄。對前列腺檢查其大小，有無肥大、硬結、腫物，取前列腺液送實驗室檢查。測量睾丸的大小、硬度，有無硬結、壓痛、鞘膜積液、腫物，是否為隱睾。輸精管的硬度，有無結節、壓痛以及有無精索靜脈曲張等。
睾丸體積的檢查常用以下方法：
（1）卡尺測量法。此法所測結果較准確，但比較繁瑣。方法為用卡尺分別測量睾丸的長徑、寬徑、厚徑；然後用各種公式計算出睾丸體積。
（2）測量子比較法。睾丸體積測量子為不同體積的狀如睾丸的橢圓形硬物，依其大小標為1～25號。測量時將被測睾丸拉起，綳緊陰囊皮膚，將測量子於睾丸旁逐一與之比較，與睾丸大小最相近的測量子體積，即可視為睾丸體積。
正常男子睾丸體積的個體變異很大，左右兩側的兩個睾丸亦有一定差異，因而所測結果只能作為參考。對睾丸發育狀況以及生殖能力的估計須經多方面檢查加以綜合分析，才能得出結論。
據調查，正常成年男子的睾丸體積（包括陰囊皮膚在內）大多相當於15至25號測量子的體積。
精液檢查是男性不育的必查項目。檢查包括精液量、顏色、粘稠度、酸鹼度：液化情況、精子密度、活力、形態等。
（1）顏色。正常人精液顏色是灰白色，禁慾時間長精液呈淺黃色。若精液呈乳白色或略帶黃綠色，常是由於生殖道或副性腺感染，精液中含有白細胞之故，精液發紅或夾有血絲血凝塊，稱血性精液。
（2）精液量。正常健康男子，每次性交射出的精液量為15～6毫升，精液體積異常一是過少，少於1毫升；二是過多，超過8毫升。精漿是精子的營養來源，其中含有穩定精液酸鹼度的緩沖物，能保護精子在酸性陰道分泌物內的存活。精子只佔精液量的1％，精液體積異常一般是精漿成分出現變化。如果精液量過少，精漿不能稀釋精子，精子往往失去活力，從而造成不育；精液過多時，精子密度降低，精液過稀，易於從陰道內流失，不利於受孕。
排精量不足1毫升或只有二三滴時，稱之為精液量過少。性交次數過於頻繁時，精液可以顯著減少，可禁慾5～7天重新測定。如果取精不得當，使精液失去，也可能造成精液量過少。造成精液量過少的原因還有：
①附性腺因素：包括睾丸功能障礙；附性腺出現感染或其他病變時。
②射精管梗阻：可因尿道狹窄、尿道憩室引起，也可能因感染水腫造成。
③膀胱括約肌功能紊亂，或局部神經支配失調時，可出現部分性逆行射精。
精液量過多可見於精囊炎，當炎症分泌物過多時，精囊液顯著增加。大多數原因不明的少精子症患者，可採用分段射精和離心分離精子的方法取精，將精液離心濃縮精子後進行人工授精。
如果患者睾丸發育不良、射精管道完全阻塞、不射精、逆行射精時則根本無精液排出。
（3）酸鹼度。正常酸鹼度為pH72～80。過高或過低都可影響精子的活動和代謝。若超過85，常說明精囊有炎症，或精液放得時間過久。若低於7，則是射精管阻塞，也可能是精液被尿污染。
（4）液化。精液剛射出時是粘稠的液體，但因受精囊分泌的凝固酶的作用很差，或畸形精子超過30％，常可造成不育。
（5）精液理化性狀異常。正常精液射出後很快凝成膠凍狀，在以後的15～30分鍾內又全部液化。如果精液射出後不凝固，或液化不全，過稠或膿性分泌物使精子活力下降，造成生育能力低下。生殖道感染也可引起不育。精液中致病菌大於103個／毫升，非致病菌大於103個／毫升，均可引起不育。
生精障礙（1）性染色體異常可使睾丸等性器官分化不良，造成真假兩性畸形以及生精障礙；常染色體異常可導致性腺及生精細胞代謝紊亂。造成不育。
（2）隱睾症或雙側睾丸發育不全者無生精能力。單側睾丸功能正常者，仍可生育。
快凝結成膠凍狀，繼而在15～30分鍾內又因前列腺分泌的液化酶而恢復成液狀。這種過程稱為精液液化。若超過30分鍾還不液化，即為不正常。精液不液化，精子不能自由活動，當然也就不會生育。精液不液化的原因，大多是由於前列腺的液化功能障礙所致。
精液粘度和液化時間是精液正常與異常的重要指標之一，主要取決於男性生殖腺中蛋白溶解酶的活性。無論精液粘稠度增高或降低，都可改變精子在精液中的活動能力。精液粘度和液化時間的異常與生殖道炎症、酒精中毒、酶原疾病等有關。
精液電描記圖是測定精液粘度和液化時間的一種方法。把精液置於裝有凝固描記儀的空氣恆溫器內檢測，記錄精液液化的電描記圖，判斷精液的粘度和液化時間。精液電描記圖測定排除了主觀因素和環境因素的影響，整個過程由電子描記顯示圖形，較為准確可靠，可用於診斷因精液物性質障礙有關的男性不育症和觀察治療效果。
（3）精子數量。精子的數量一是指每毫升精液中的精子數；二是指一次射出的精液中的總精子數。精子數量的個體差異很大，與其年齡、健康狀況以及近日是否有過射精有關。檢查前應禁慾3～10天。一般成人每毫升精液中精子數量為2000萬～15億／毫升。要反復檢查多次。一般認為，如果多次檢查精子數量均低於2000萬／毫升，應視為精子過少。這類患者即使精子形態、活力等均正常，生育能力亦較常人低，甚至造成不育。大於25億／毫升者稱為精子過多症。
精子數量減少的原因，可因睾丸本身發育障礙、外界環境因素、內分泌疾病等原因所致。精子密度過高也會影響精子的活動，發生流產的機會也比較多。有些人雖然精子密度低於2000萬／毫升，但精子活動力強，畸形率低，依然能生育；有些人盡管精子數量並不少。但活動精子百分率低，畸形精子多，結果也不能生育。一般認為，精子計數的最低限度，密度是1000萬／毫升；每次排出精子總數是5000萬。低於這個標准，基本上無生育力。
（4）精子活力：一般取已液化的精液一滴，在顯微鏡下觀察，並計數，大約計算出活動與不活動精子的百分率。一般可將精子的活動力分為五級：
1級精子毫無活動，全部為死精子。
2級精子原地打轉，動作遲鈍。
3級精子能活動，但不活潑，緩慢向前游動，方向不呈直線。
4級精子以中等速度直線向前游動。
5級精子活潑，快速直線向前游動。
精子活力包括精子活率和精子活動力。
精子爬高試驗是測定精子活動速度的一項試驗，是判斷男子生育力的一項指標。取塑料管灌滿含有果糖的精液營養液，管的上端結扎。下端垂直插入含有少量精液的試管內。放入37℃恆溫水浴箱中8小時，取出，將塑料管剪成1厘米長12段，依次把每段精液溶化後滴於計數盤上作精子計數，計算精子上升的高度及數字，以判斷精子活力。
此法簡單易行。對測定精子運動速度、判斷生育能力有一定的價值。
（5）存活率。通常在射精後1小時內，能活動的精子至少佔70％，若少於50％則為不正常。輸精管道及附屬性腺的炎症、精液標本放置在過熱或過冷的環境中、盛放精液容器中的影響、長期禁慾、精子受免疫影響而導致精子凝集等原因可致精子活動能力及存活率減弱。
（6）精子形態。形態正常的精子不應少於85％以上。如畸形精子在10％以下時，對生育無顯著影響；在20％以下時，仍有生育可能，若超過20％則可能造成不育。
精子分頭、體、尾三部分，正常精子長約50～60微米，外形如蝌蚪狀。頭部正面為卵圓形，前面是扁平的，側面是梨狀的。前緣銳薄，尾部長而彎曲，能作搖擺狀活動，於液體中以每秒25微米的速度向前移動。正常精子頭部可以變異為大頭、小頭、圓頭及尖頭等不同形態。幼稚型精子可呈小頭狀，可見頭部胞質殘余及體部胞質殘余等。衰老的精子在頭部胞漿內可見深染顆粒、頭部深染或不著色等。
①頭部：精子頭長35～50微米，寬20～30微米；精子頭呈規則橢圓形。只要精子其他形態正常。精子頭大小不是重要因素。精子頭部異常包括：圓錐形（長寬分別小於5和2微米，或長超過5微米，寬小於3微米）、不規則形、雙頭和「梨形」。
②中段：中段長50～70微米，寬10微米。寬超過2微米多反映胞漿小滴未完全退化，如果胞漿小滴大於精子頭的一半，意味著精子不成熟，屬異常，若小於或等於頭的一半應屬正常。中段斷裂也屬異常。
③尾部：尾長45微米。尾部異常常見為斷裂、雙尾或捲曲。捲曲可能與鋅元素含量有關。其他缺陷可能與無症狀生殖系統感染有關。
一個精子可能有多種缺陷，可以按其主要缺陷統計。精子形態判斷時應包括以下內容。
>60％的正常橢圓形精子頭（包括半數左右的可疑者），若<30％不正常；<6％的圓錐形精子頭，若超過10％不正常；<86％的不規則精子頭。若超過50％不正常；<05％的不成熟精子，增多意味著精子生成或精子成熟過程出現障礙；20％尾部畸形，若超過25％不正常。
如果形態異常的精子超過70％，特別是妻子有習慣性流產時，男方很可能具有染色體異常。如果異常精子少於70％，也許是精索靜脈曲張、職業或環境接觸毒物、放射線、微波、服用葯物、感染及應激等因素影響了睾丸生精過程。精子形態異常時，因為頭過大或其他形態異常不利於穿透宮頸粘液所形成的微小通道。宮頸粘液中常可見到頭特別小的精子，多數因為無頂體存在。如果畸形精子症找不出任何明確原因時則為原因不明的睾丸生精障礙，可以採用中醫葯治療方法促進生精。
精液異常的原因有：
（1）睾丸疾患：
（1）有隱睾病史者，無精子症發生率顯著升高，即使有精子，精液質量也異常。
②睾丸損傷，伴有陰囊血腫或血尿，無精子症或精液異常發生率顯著增加。
③曾發生過睾丸扭轉可有無精子症和少精子症。
④睾丸炎和附睾炎的病人，其精子密度和活動率顯著降低。
（2）泌尿生殖道疾病：
（1）性傳播疾病一般不影響精子密度。但精子活動率下降。
②泌尿生殖系統炎症常使異常精液質量，精子形態和活動率較低。
（3）其他系統疾病：
（1）青春期前後發生腮腺炎可引起無精子症，精液異常。
（2）支氣管炎特別是支氣管擴張無精子症發生率顯著增高。氣管炎患者的精'液分析異常率增高；③糖尿病與射精功能障礙相關，但不引起精液質量異常。
④6個月內曾發高燒的可使精液異常率明顯升高。
（4）其他：
①長期服用對生育產生影響的葯物。無精子率顯著升高，如各種細胞毒及抗腫瘤葯物、某些磺胺葯等。
②高溫工作中缺乏適當勞動保護條件，產棉區長期食用未經處理的棉籽油。常見到睾丸萎縮、少精子、死精子或無精子症患者。
3體外異種受精實驗：常規精液分析的各項指標完全正常，有時也不一定能使精子具有受精能力。目前常用人精子穿透倉鼠卵子的異種受精實驗。驗證男性不育者的實際生育能力。
精子穿透倉鼠卵試驗是根據倉鼠卵去除透明帶後，幾乎不再具有種屬特異性的特點而設計的，用人精子穿入倉鼠卵的百分率來評價精子的受精能力。
一般從4～12周齡的雌性倉鼠獲取卵子，經處理放入含有一定數量已獲能精子，在370c溫度中孵育3～5小時，然後吸出卵子在顯微鏡下觀察。凡卵子卵漿內有腫大的精子、頭並附有尾部者認為已受精，並且計數。
這種方法是診斷男性不育症一種很有實用價值的方法。
精子宮頸粘液穿透試驗是：
（1）玻片法：使精子與宮頸粘液直接接觸，試驗不能真實地反映客觀情況，並難以標准化及定量。
（2）毛細管法：將粘液放入一端封閉的毛細管中，另一端直立浸在粘液中，觀察精子群的活動能力。
精子穿透宮頸粘液能力與精子活動力的大小有關。宮頸粘液有篩選形態異常精子的能力，不合格的精子不能穿透宮頸粘液。如果精子在試驗中穿透能力正常，常提示不孕是由女方宮頸粘液異常所致。
前列腺液檢查正常前列腺液為白色，呈微酸性，pH63～65。內含總脂286毫克％，其中磷脂佔65％。白細胞數在10個以內，並可見到少許上皮細胞、澱粉樣物體及精子。患前列腺炎時，鏡檢白細胞數增加，或見成堆的膿細胞，卵磷脂顆粒減少。
內分泌檢查目前常用的方法有：血漿睾酮水平測定；人體絨毛膜促性腺激素刺激試驗；促性腺激素釋放激素刺激試驗。
克羅米芬是合成的女性激素衍生物，此葯可誘發排卵和產生精子，臨床常用於治療少精子症。應用克羅米芬以後能增強丘腦下部促性腺激素釋放激素的分泌，睾丸分泌睾酮也因而增加。所以克羅米芬刺激試驗，是檢查丘腦下部功能的良好辦法。
試驗需時12天，在服克羅米芬之前，先查兩天血漿和黃體生成素的基礎水平。從第三天開始連續服克羅米芬10天，用量為200毫克／日，一次或分次口服。在服葯後第九、十兩天測定血漿睾酮和黃體生成索的濃度。正常用此葯10天後與對照值相比較，黃體生成素的增長幅度為72％～245％，卵泡刺激素為45％～130％，睾酮為40％～220％。從增長幅度可以看出。卵泡刺激素增長幅度不如黃體生成素及睾酮明顯，因此陽性指標是以黃體生成素及睾酮的增長幅度為主。青春期前兒童的刺激試驗反應為陰性時，提示青春期尚未開始，但不能預示是否開始發育。16歲時一般呈陽性反應，若年齡超過17歲，興奮反應不明顯，則應進行垂體功能檢查。在青春期少年或青春期後成年，若克羅米芬刺激試驗是陰性，那麼，一般來說，年齡越大，則垂體功能低下的可能性越大。成年男性病人患單純垂體性幼稚症，可以本試驗陰性作為診斷參考。至於原發性睾丸功能低下病人，一般是黃體生成素值偏高，用葯興奮後不再上升。原發性無精子或精子稀少的病人，本試驗呈陽性。
人體絨毛膜促性腺激素刺激試驗人體絨毛膜促性腺激素（HCG）是由胎盤分泌的激素。HCG能促進男性胎兒的睾丸分泌少量睾酮，對男性胎兒的副性器官發育有意義。雖然在妊娠終未HCG已降至很低水平，但已成熟的睾丸已能分泌睾酮，足以使睾丸正常下降。HCG也能促進女性卵巢分泌雌激素和排卵，臨床上常用此葯治療不育症。為男病人進行HCG刺激試驗，可檢查體內的睾丸組織是否具有分泌功能。檢查結果如為陽性，表明體內睾丸組織有分泌功能。如檢查結果反應偏低，應考慮為隱睾症或原發性睾丸功能低下。如為陰性反應，也不能立即作出相反的診斷。女性病人檢查HCG的變化，目的在於診斷早期妊娠、葡萄胎及絨毛膜上皮癌等疾病。
促性腺激素釋放激素刺激試驗。在下丘腦的神經分泌物中，含有促性腺激素釋放素（GnRH）。若GnRH神經元損傷或垂體功能低下時，睾酮的分泌會有明顯減少。GnRH刺激試驗的目的，在於檢查垂體的功能。
血漿睾酮水平測定血漿中睾酮的濃度個體差異很大。正常壯年期男性（20～50歲）的水平最高，平均約為570～7009微克％，50歲以後，其濃度逐漸減少。血漿睾酮的水平在晝夜間有差異，早晨8～10時最高，午夜2時最低。睾酮分泌過多，原因可為睾丸的良性問質細胞瘤，血漿睾酮比正常人多100倍，因而表現為肌肉和骨骼的生長過快，性器官過早發育和副性徵過早出現。睾酮分泌不足，可見於因手術、感染、化學中毒、放射線損傷或發育不全等原因而致睾丸功能低下。也可能繼發於垂體病變，因促性腺激素減少。以致睾丸間質細胞發育不良。目前測定血漿中睾酮含量的方法很多。如放射免疫法，由於血漿用量較少，誤差也少，有一定優越性。
睾丸活組織檢查男性能否生育首先檢查睾丸組織是否受到過損害，生精功能是否正常。進行睾丸活組織檢查，除診斷男性不育外，還可診斷睾丸其他疾病。睾丸活組織檢查有兩種方法。
（1）穿刺法。用針管及針頭，抽吸少許睾丸組織。
（2）切開法。陰囊皮膚作2厘米左右的小切口，剪下一小塊睾丸組織。
睾丸組織切片檢查時可見，在正常情況下，青春期前曲細精管細小，無基底膜，僅有原始生殖細胞和支持細胞，間質細胞不明顯。青春期後則表現為曲細精管直徑加寬，有較薄的基底膜。上皮細胞能顯示精子發育成熟的各個時期。精原細胞靠近基底膜，成熟的生殖細胞靠近白細胞管管腔，管腔內可有較多精子。睾丸的生殖病理變化，主要出現在曲細精管生精上皮和曲細精管基底膜。
男性不育症經睾丸活動組織檢查，一般常見的病變如下：睾丸不成熟，其組織為青春期前的組織；精子發生低下，各時期精子都有，但數量減少；曲細精管變性，曲細精管透明變性或纖維化；克氏綜合症，可見曲細精管細小，無生精細胞，唯有支持細胞的基底膜增厚，有時表現為透明；單純支持細胞綜合症，無各期生殖細胞，僅有支持細胞：成熟障礙或生精阻滯生精過程被阻止在初級精母細胞或精原細胞階段；睾丸組織接近正常，不育的原因應考慮輸精管道被阻塞。
總之，睾丸活組織檢查，是確診男性不育症的重要方法。
輸精管、精囊造影常用於男性不育症的檢查通過尿道或陰囊部注入造影響劑，使射精管、精囊、輸精管及附睾顯影，以了解各部輸送通道梗阻、炎症、結核、先天性畸形及其臨近組織的有關病變。
常用的輸精管、精囊造影方法有下述兩種。
（1）經輸精管法。切開陰囊外上部，顯露輸精管，用注射針刺入輸精管注入造影劑15～5毫升。
（2）經尿道逆行插管法。先用尿道鏡或膀胱鏡插入尿道後，在精阜兩旁找到射精管開口，將細導管插入1～3厘米，然後注入造影劑2～5毫升。
輸精管、精囊造影對於診斷男性不育的原因有著重要意義，可以發現精子運輸通道的先天性畸形、炎症、腫瘤等疾病，另外對前列腺病變的診斷也有一定的幫助。
多普勒超聲檢查對可疑的精索靜脈曲張及隱性精索靜脈曲張患者，通過一般物理檢查不易確診時用多普勒超聲儀檢查能獲得較為准確的結果。
免疫學檢查目前最常用的抗精子抗體測定技術有精子凝集試驗、毛細血管內凝集試驗、胎盤內凝集試驗、補體依賴性精子制動試驗以及抗體標記熒光免疫技術等。
精子凝集試驗的血清精子凝集抗體滴度取1∶32作為有臨床意義的低限標准。低於1∶32者生育力稍有減低。1∶64～1∶512為中滴度，可以生育，但生育力較低，1∶512以上為高滴度，表明被檢者無生育力。精漿中的抗精子抗體滴度與血清中的滴度也不完全一致。精漿的精子凝集抗體滴度1∶16，生育力顯著降低。但並不是不能生育；滴度高於1∶32，可能不育。這些滴度數值只適用於精子計數每毫升2000萬以上的男性不育患者。
漢光免疫法檢測，不管其他方法檢測抗精子抗體是否陽性，它總是約有30％的患者出現陽性反應。所以，臨床上價值不大。
混合抗球蛋白反應試驗，此法特異性較強。測定抗精子抗體的准確性超過90％。由於操作技術簡單，可作為一種篩選試驗。
染色體檢查染色體異常者一般生育功能都受到影響。如果一個不育患者的睾丸體積小於12毫升，或者兩性畸形都應該檢查染色體，因其染色體異常的可能性很大。另外，妻子有習慣性流產或畸胎史時，夫妻雙方應做染色體鑒定。
染色體異常有兩種情況：一種是染色體的數目異常；另一種是染色體的結構畸變。
在男性不育中，性染色體數異常引起的病症常見的是先天性曲細精管發育不全綜合症，其典型核型是47XXY，還有47XXY／46XY嵌合型。在女性不育中，性染色體異常的疾病有性腺發育不全。而染色體結構畸變中，染色體易位是引起不育症的一個主要的原因。如果夫婦有一方是染色體平衡易位攜帶者，雖然他本身並無異常表現，但可能給後代帶來染色體異常的危險性。這樣的胚胎在妊娠早期流產的可能性很大，倖存者可能是染色體病患者。因而在妊娠20周左右應做產前診斷，通過羊水細胞培養鑒定胎兒的染色體的結構和數目是否正常，異常時應及早做人工流產。
檢查染色體一般是從患者靜脈采血15毫升，鑒定核型和分辯染色體的數H和形態結構。染色體檢查為遺傳疾病以及某些其他疾病的病因、發病機制、診斷、預防以至預後等提供了科學依據。
交媾試驗：交媾試驗是檢查精子是否能穿過宮頸的試驗方法。
精子射進陰道後要穿過宮頸。宮頸粘液由宮頸腺體分泌。宮頸粘液的量和性質隨月經周期中雌激素和孕激素水平出現周期性變化。在月經中期，宮頸粘液大且稀薄、拉絲長，使精子易穿過。如果精子活動能力差，或宮頸粘液少而粘稠，或存在抗精子抗體等，將會影響精子穿透宮頸粘液。
（1）試驗的時間：在月經周期中，宮頸粘液能夠允許精子穿透的時間的長度每個婦女不同。同一個婦女的每個周期也有差異。應因人而異確定出進行精子穿透試驗的最佳時間。可採用B超監測排卵來判斷排卵日期。試驗應該盡可能靠近排卵期進行，可以根據基礎體溫、宮頸粘液的變化和陰道細胞學檢查來確定排卵時間。
每對夫婦在進行試驗前應該至少禁慾2天。在同房前24小時內禁止陰道內用葯或沖洗。上床前把大小便排盡，避免同房後幾小時內上廁所。性交後仰卧，屈膝，墊高臀部休息至少30分鍾，防止精液流出。試驗應在性交後6～8小時進行，18～24小時進行也是可以的。
（2）性交後試驗技術：醫生將沒有塗抹滑潤劑的陰道窺器插入陰道，用不帶針頭的注射器、吸管，分別吸取陰道後穹窿、宮頸外口和宮頸內口的宮頸粘液，高倍顯微鏡下觀察精子情況。
①陰道後穹窿樣本。由於陰道內酸性環境，精子在陰道內僅能存活2小時，檢查陰道樣本的目的在於證實精液確實進入陰道內。
②宮頸外口樣本。宮頸外口精子數目隨著性交後時間延長而減少。性交後2～3小時，在宮頸下段積聚大量的精子。在宮頸粘液中，根據精子移動情況可以分為4級：1迅速和直線向前運動；2緩慢直線或非直線運動；3非向前運動；4不活動精子。
一對正常夫婦性交後，在宮頸內樣本通常用400倍視野可以觀察到25個以I級和Ⅱ級活動精子，如果用高視野有10個以上I級活動精子，即可以認為是良好的；如果僅有5個活動精子，並且為遲鈍緩慢或轉圈運動形式，則說明精液中精子數目少和活動率差，或者宮頸粘液異常。
性交後4小時開始，宮頸外口的精子數目逐漸減少。所以在4小時以上間隔時間檢查，從宮頸下段收集到的宮頸粘液中僅可發現很少的精子。
③宮頸內口樣本。在射精後，少數精子迅速到達宮頸內口，而且數目逐漸增多。約在2～3小時後達到一個高峰。在24小時之內，精子數目相對穩定。
所以在性交後6～10小時，用高倍視野具有I和Ⅱ級活動度的精子數目大多為10個，即屬於正常范圍。在性交後10～24小時，可檢測到的精子數目與6～10小時相似。
（3）試驗結果：性交後試驗的目的，不僅在於檢查性交後數小時以後，在宮頸粘液中活動的精子數目，而且還要評價精子的活動狀況。在性交後6～10小時宮頸內存在適當數量的活動精子，就可排除由宮頸因素引起的不育。
試驗陰性不能輕易下結論，因為有可能選擇的時間不當。有時由於性交後試驗進行得太早或太晚，可以造成假陰性結果。如果不能利用准確可靠的時間來確定排卵時間，則有必要在一個周期中重復作幾次性交後試驗。
一旦證實性交後試驗為陰性，可以進一步確定是精子質量問題，或是由於宮頸粘液的有害因素，並且可測定宮頸粘液中是否存在抗精子抗體。對於性交後試驗陰性的不育夫婦，可以利用人工授精辦法，幫助他們受孕。