A. 乳酸、丙酮酸和乙酸如何鑒定
丙酮酸檢測試劑盒可測各種動物血清（漿）、組織以及培養細胞、細胞培養上清液等樣本中丙酮酸含量。丙酮酸與顯色劑反應，反應產物在鹼性溶液中顯紅棕色，顏色深淺與丙酮酸含量成正比，通過比色可以測定出丙酮酸的含量。
原理：丙酮酸鹽檢測試劑盒提供了一種簡單、直接和可自動化操作的程序來測量不同生物學標本中丙酮酸的含量。適用標本類型包括：食物、細胞、培養基和發酵培養基。丙酮酸鹽檢測試劑盒基本原理如下：丙酮酸鹽被丙酮酸酶氧化，在酶反應過程中產生顏色（λ=570 nm）或者熒光（Ex/Em=535/587 nm），可使用酶標儀或熒光計檢測到。光的強度與丙酮酸含量是成正比的，因此通過檢測光的強度即可精確的得到丙酮酸的含量。試劑盒檢測范圍為1-10 uM丙酮酸。
丙酮酸檢測試劑盒
丙酮酸分子式CH3COCOOH，原稱焦性葡萄酸(德Brenztr-aubensure)，是參與整個生物體基本代謝的中間產物之一。丙酮酸可通過乙醯CoA和三羧酸循環實現體內糖、脂肪和氨基酸間的互相轉化，因此，丙酮酸在三大營養物質的代謝聯系中起著重要的樞紐作用。
丙酮酸是糖無氧代謝的產物，研究工作者將丙酮酸和乳酸一同測定，並用二者的比值推測循環衰竭的嚴重程度；此外，它還對維生素B1缺乏有一定的研究意義，同時作為一種重要的精細化工中間體,廣泛應用於醫葯、農葯、食品等領域,尤其是作為醫葯中間體,具有良好的發展前景。
應用[4][5]
用於大腸桿菌丙酮酸代謝途徑改造及丙酮酸高產菌株培育
丙酮酸作為最重要有機酸之一,在醫葯、食品、化工等領域以及科學研究中都具有廣泛的用途。目前高質量的丙酮酸在國內市場缺口較大,丙酮酸工業化生產的前景十分廣闊。
從野生型大腸桿菌K-12 MG1655菌株出發,利用CRISPR/Cas9技術敲除了乳酸脫氫酶基因（ldh A）,截斷了乳酸合成途徑;敲除了丙酮酸氧化酶基因（pox B）、磷酸轉乙醯基酶基因（pta）和乙酸激酶基因（ack A）,截斷了乙酸合成途徑;敲除了丙酮酸-甲酸裂解酶基因（pfl B）,截斷了甲酸合成途徑;敲除了磷酸烯醇丙酮酸合成酶基因（pps A）,減少了丙酮酸生成磷酸烯醇式丙酮酸;敲除了磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶基因（ppc）,減少了磷酸烯醇式丙酮酸的消耗;通過敲除延胡索酸還原酶復合體基因（frd BC）,削弱了三羧酸循環途徑。最後得到了一株可以初步積累丙酮酸的基因工程改造菌株MG1655-GP7（E.coli K-12 MG1655Δldh AΔpfl BΔack AΔptaΔpox BΔppcΔfrd BCΔpps A）,這株菌在使用5 L發酵罐發酵68小時後丙酮酸產量達到32.07 g/L。
這表明只利用基因工程的手段是可以使大腸桿菌積累丙酮酸的。大腸桿菌利用葡萄糖作為碳源時,葡萄糖經糖酵解途徑會產生過量的ATP與NADH從而抑制丙酮酸的積累,使用氧化程度較高的葡萄糖酸作為碳源可解決此問題;當葡萄糖進入細胞後不經EMP途徑而是進入Entner-Doudoroff（ED）途徑,產生的ATP與NADH的量只有前者的一半,會相應的促進丙酮酸的積累。為了進一步提高產量,作者又敲除磷酸葡萄糖異構酶基因（pgi）以抑製糖酵解途徑;同時敲除6-磷酸葡萄糖酸脫氫酶基因（gnd）以抑制磷酸戊糖途徑,並減少6-磷酸-葡萄糖酸的消耗;還在敲除磷酸葡萄糖轉移酶基因（pts G）和磷酸烯醇丙酮酸葡萄糖轉移酶基因（pts I）的基礎上敲入運動發酵單胞菌中葡萄糖轉運蛋白基因（glf）來改良葡萄糖轉運系統,減少大腸桿菌細胞轉運葡萄糖時磷酸烯醇式丙酮酸的消耗。
並計劃上調葡萄糖-6-磷酸脫氫酶基因（zwf）、葡萄糖酸-6-磷酸脫水酶基因（edd）和2-酮-3-脫氧葡萄糖酸-6-磷酸醛縮酶基因（eda）的表達以強化ED途徑,平衡ATP和NADH的水平,引導碳流更多的流向丙酮酸合成方向。
目前通過基因編輯的方法得到了一株生產丙酮酸能力理論上較MG1655-GP7菌株有所提高的MG1655-GP12（E.coli K-12 MG1655Δldh AΔpfl BΔack AΔptaΔpox BΔppcΔfrd BCΔpps AΔgndΔpgiΔpts GΔpts I::glf）菌株,該菌株的生產能力正在評估中。但經多次基因改造後,基因工程菌株MG1655-GP12出現了較野生型菌株生長緩慢的現象,本實驗對該菌株進行了實驗室適應性進化,經多次傳代後篩選到一株生長速度恢復到野生型菌株75%的MG1655-GP12-1菌株。
B. 乙酸測定方法
本篇文章介紹的是乙酸含量的測定方法，名為「冰醋酸—冰醋酸的測定—中和滴定法」。這種方法適用於測定冰醋酸中的冰醋酸含量，通過滴定法實現。
方法原理是將供試品與新沸過的冷水和酚酞指示液混合，隨後使用氫氧化鈉滴定液進行滴定。滴定液的使用量與冰醋酸的含量直接相關。使用的試劑包括1mol/L氫氧化鈉滴定液、36%乙酸、酚酞指示液以及基準鄰苯二甲酸氫鉀和紫色石蕊溶液。
在實驗准備階段，需要配製氫氧化鈉滴定液，取適量氫氧化鈉溶解並冷卻後，靜置澄清備用。標定時，通過滴定鄰苯二甲酸氫鉀溶液，每毫升氫氧化鈉滴定液相當於204.2mg的鄰苯二甲酸氫鉀，以此計算滴定液的濃度。試劑需要儲存在聚乙烯塑料瓶中，瓶塞設有兩孔，分別連接鈉石灰管和吸液管。
酚酞指示液的制備則是將1g酚酞與100mL乙醇混合溶解。操作步驟是取供試品4mL，加入預稱重的錐形瓶中，加水、酚酞指示液，然後用氫氧化鈉滴定液滴定，每毫升滴定液相當於60.05mg的C2H4O2。
所有操作需嚴格遵循「精密稱取」和「精密量取」的要求，以確保測量的准確性。方法的具體參考可查閱中華人民共和國葯典（2010年版，二部，p.1253）。
乙酸，俗名醋酸，廣泛存在於自然界，它是一種有機化合物，是烴的重要含氧衍生物，是典型的脂肪酸。乙酸被公認為食醋內酸味及刺激性氣味的來源。在家庭中，乙酸稀溶液常被用作除垢劑。食品工業方面，在食品添加劑列表E260中，乙酸是規定的一種酸度調節劑。