測量水果中維生素c含量方法

⑴ 怎麼測定蔬菜或水果中維他命C的含量

1、證明蔬菜（水果）中維生素C的存在

2、比較不同蔬菜（水果）中維生素C含量的多少

【實驗原理】

本實驗利用維生素C的還原性，使其與氧化性的I2反應：

澱粉溶液遇到碘會變成藍紫色，這是澱粉的特性。維生素C能與藍紫色溶液中的碘發生作用，使溶液變成無色。通過這個原理，可以用來檢驗一些蔬菜中的維生素C。通過消耗I2的量可以計算維生素C的含量。

【儀器葯品】酸式滴定管，錐形瓶，研缽，碘水，澱粉試液

【實驗步驟】

1、取新鮮蔬菜或水果100克，切碎，磨成糊狀，擠出汁液。

2、取汁液10 mL，加澱粉溶液數滴。

3、用常溫下I2的飽和水溶液進行滴定，至溶液顯藍色。根據不同蔬菜或水果消耗的碘水的量判斷維生素C含量的多少。

【實驗討論】

1、方法選擇：

此方法簡單，操作易行，現象明顯，適合作為中學實驗。

此實驗有兩種操作方法：①用碘水滴定蔬菜或水果汁液，②用蔬菜或水果汁液滴定碘水。對於汁液較少的蔬菜或水果，選擇方法①較合適；對於方法②終點較易判斷，但需要較多的汁液。

2、維生素C的提取：

對於汁液較少的蔬菜或水果，需要使用提取液，可選用的提取液如下：

①2％草酸②偏磷酸－醋酸溶液

3、脫色劑：

有些蔬菜或水果汁液顏色較深，對滴定終點的判斷有影響，需要脫色可選的脫色劑如下①30％ZnAc溶液和15％K4Fe(CN)6②活性炭③白陶土

4、滴定速度：為了避免其他物質的干擾，滴定要迅速，整個過程不要超過2分鍾。

5、其它問題：pH值對此反應有影響，pH值的選擇需進一步探討

⑵ 維生素C的提取及含量測定

收稿日期:2007-07-04.基金項目:昆明理工大學科研啟動基金資助項目(項目編號:校青2006-18).
第一作者簡介:劉宇奇(1975-),女,碩士,講師.主要研究方向:分析化學及配位化學.E-mai:l1iuNqi7547@ 163. com
光度法測定葯品和食物中的微量VC
劉宇奇1,楊 睿1,楊 泳2
(1.昆明理工大學理學院,雲南昆明650093; 2.昆明醫學院葯理教研室,雲南昆明650031)
摘要:採用一種簡單、快速的方法測定VC,該方法基於在室溫下,抗壞血酸能快速地將Fe3+還原
成Fe2+,Fe2+與2, 2』-聯吡啶反應生成紅色配合物,配合物的最大吸收峰位於520 nm波長處,
VC的質量濃度在0·088~7·0mg/L范圍內符合比爾定律,該方法用於食品和葯片中VC含量的
測定,結果的相對標准偏差小於1·5%,回收率在96·3% ~105·0%之間.
關鍵詞:分光光度法;聯毗啶;維生素C;含量測定
中圖分類號:O65文獻標識碼:A文章編號:1007-855X(2008)02-0112-04
Determination ofVitamin C in Foods and
MedicalTabletby Spectrophotometry
LIU Yu-qi1, YANG Rui1, YANG Yong2
(1.Faculty ofScience, KunmingUniversity ofScience and Engineering, Kunming 650093, China;
2. Deptartment ofPharmacology, KunmingUniversity ofMedicalScience, Kunming 650031, China)
Abstract:A simple and fastmethod is used for the determination ofVC in this paper. Thismethod is based on
the fact thatunder room temperature, ascorbic acid recesFe(III) toFe(II) quickly and the latter reactswith
bipyridine (2, 2』-hipy) to form a reddish colored complexwith its absorptionmaximum at thewavelength of520
nm. Beer』s law is obeyed in the concentration range of0·088-7·0mg ofVC per1000mL ofsolution. The pro-
posedmethod is then applied to the determination of foods andmedical table.t RSDs' (n=6) is less than 1·5%
with recoveries in the range of96·3% -105·0%.
Key words:spectrophotometry; vitamin C; bipyridine; contentdetermince
0前言
VC具有抗壞血病的效應,所以又稱抗壞血酸(Ascorbicacid).它是人體不可缺少的一種重要營養物
質,常存在於新鮮的蔬菜和水果中.由於抗壞血酸參與體內一系列代謝和反應,能促進膠原蛋白和粘多糖
的合成,增加微血管的緻密性,降低其通透性及脆性,增加機體抵抗力.缺乏時,引起造血機能障礙、貧血、
微血管壁通透性增加,脆性增強和血管容易破裂出血,嚴重時肌肉、內臟出血死亡,這些症狀在臨床上通常
稱為壞血病.因此抗壞血酸不僅是人體所必須的由外界提供的營養物質,同時也是維持正常生命過程所必
需的一類有機物.人正常每天最低需要量為75mg,長期缺乏抗壞血酸會導致某種營養不良症狀及相應的
疾病,所以,VC對維持人體健康十分重要.對部分食品中的營養成分———抗壞血酸的含量做一些測定,為
指導人們合理膳食,正確補充營養素有一定意義.
目前測定抗壞血酸的方法有2, 6-二氯靛酚滴定法、2, 4-二硝基苯肼分光光度法[1]、熒光分光光度
法、近紅外分光光度法[2]、電位滴定法[3-4]、鉬藍比色法[5]、褪色光度法[6]、高效液相色譜法[7]等.不同方
法各有其長處,但也有一定的局限性.如2, 6-二氯酚滴定法及2, 4-二硝基苯肼光度法操作復雜,測試條
件較為嚴格. 2, 4-二硝基苯肼光度法完成一次樣品分析需數小時,不能快速測定[8].利用VC分子中的烯
二醇基將Fe3+定量還原成成F2+e與2, 2』-聯吡啶(2, 2-bipyridine)進行顯色反應.並利用2, 2』-bipy-
Fe2+-VC顯色體系在本文研究的最佳測定條件下用分光光度法間接測定VC的含量,由於剩餘Fe3+的也
能與2, 2』-聯毗啶顯色,可用NaF將其掩蔽.此法簡便、快速,結果令人滿意,為食品和葯片中VC含量的
測定提供了方法.
1試驗部分
1. 1主要儀器和試劑
722型光柵分光光度計(山東高密分析儀器廠);電子分析天平(北京賽多利斯儀器系統有限公司);
六孔數顯水浴鍋(金壇市環保儀器廠);搗碎機.
0·000 125 0mol/L維生素C標准溶液:准確稱取維生素C(分析純) 0·011 01 g,加入適量pH 3三氯
乙酸溶液溶解,定量轉移到500mL的棕色容量瓶中,用pH 3三氯乙酸溶液稀釋至刻度,暗處放置.
Fe3+標准溶液: 0·001mol/L,稱取硫酸鐵銨0·24 g,用1mol/L,的硫酸溶解,用水稀釋到500mL.
2, 2』-聯吡啶: 0·004mol/L,稱取固體物質用少量的無水乙醇溶解,並用水稀釋到250mL.
1mol/L的NaF標准溶液.
1·2試驗方法
用移液管移取10mLFe3+標准溶液和一定量的VC標准溶液於50mL比色管中.加入10mL pH 3三氯
乙酸溶液,然後加入一定量的2, 2』-聯吡啶溶液和1mol/LNaF溶液1·00mL,用水稀釋至50mL、搖勻.
室溫條件下靜置10min後置1 cm比色皿中,在分光光度計上以試劑空白為參比,於520 nm波長處測定其
吸光度.
2結果與討論
2. 1測量波長的選擇
按試驗方法以試劑為空白,將顯色後的溶液在400~600 nm區
間內繪制吸收曲線,如圖1所示.結果表明最大吸收波長為520 nm,
實驗選用520 nm為測定波長.
2. 2顯色劑加入量
試驗結果表明, 0·004 mol/L 2, 2』-聯吡啶用量在8·0~10·0
mL范圍內,吸光度達到最大且穩定.本法用量為9mL.
2. 3反應時間與溫度的影響
分別考察了反應時間與反應溫度對體系吸光度的影響,結果表
明,室溫度時定容5~10min之內即可顯色完全,且顯色在100min
內相當穩定.本文選擇在室溫下反應10min.
2·4離於對試劑的選擇
當CTMAB加入5mL時對2, 2』-bipy-Fe2+-VC形成絡合物的吸光度和吸收波長無顯著影響,而加
入三乙醇胺則可使顯色體系的吸光度增大.
2. 5掩蔽劑及用量選擇
在試驗中發現,被抗壞血酸還原後剩餘的Fe3+也可以與2, 2』-聯吡啶生成有色配合物,並在光還原
作用下還原為Fe2+與2, 2』-聯吡啶的配合物,因此需要用掩蔽劑來掩蔽剩餘的Fe3+,本實驗選用1mol/L
NaF溶液作為掩蔽劑,進一步研究表明, 0·25mL以上的1mol/LNaF溶液即能達到掩蔽作用.故本文選用
1mL的1mol/LNaF溶液作為掩蔽劑.
2. 6標准曲線制備
按試驗方法對標准系列進行顯色測定,結果表明:VC質量濃度在0·088~7·0mg/L范圍內符合比爾
113第3期 劉宇奇,楊 睿,楊 泳:光度法測定葯品和食物中的微量VC
定律;回歸方程為:A=0·003 25+231 49·455 03C(mol/L),相關系數為0. 999 91;表觀摩爾吸光系數ε=
2·40×104L·mol-1·cm-1.
2·7干擾離子的影響
當相對誤差控制在±5%以內,對1·0mg/L的抗壞血酸進行測定時,下列倍數的物質不幹擾:Na+,
Cl-,K+,NO3-,Zn2+(1 000倍),Mg2-, SO42+,Al3+(500倍), I′(100倍),Vitamin B1,Vitamin E(100倍),
常見離子中Ca2+(1 000倍),Ba2+對抗壞血酸的測定產生干擾,但在樣品中Ba2+與Ca2+的含量一般比較
低.通常不需要分離處理,可以直接測定. 1mL的1mol/LNaF可掩蔽Fe3+,體系選擇性較好.
2. 8樣品分析
樣品制備和測定分析
1)VC葯片.分別將市售VC白片和VC黃片各一瓶倒入玻璃研缽中研細,充分混勻後,准確稱取VC
白片0. 019 841 g和黃片0. 0138 6 g置於2個100mL的容量瓶中,用pH 3三氯乙酸溶液浸取並定容.充分
搖動使其粉末分散約1~2min後,立即用乾燥濾紙過濾,棄去初濾液,精密移取過濾液1. 50mL於50mL
比色管中定容,按試驗方法進行測定,結果如表1.
表1 葯片中維生素C含量測定結果(n=6)
Tab. 1 The determ ination results of content of
vitam in C in m edical tablet(n=6)
樣品本法測定值g/100 g加入量/μg回收率/% RSD /%
VC白片68·02 90 102·8 0·701
VC黃片57·89 89 103·7 0·325
表2 食物中維生素C含量測定結果(n=6)
Tab. 2 The determ ination results of content of
vitam in C in foods(n=6)
樣品本法測定值加入量/μg回收率/% RSD /%
彌猴桃0·238 g/100g 0·200 98·2 0·541
黃瓜10·03mg/100g 0·200 104·9 1·41
鮮橙多58·50mg/100mL 0·200 96·3 1·08
2)食物樣品.稱取去皮獼猴桃
30·853 9 g和黃瓜25·425 8 g浸在一
定量的pH 3三氯乙酸溶液中,用搗碎
機搗碎混勻並過濾.取過濾後的獼猴
桃果汁置於500mL的容量瓶中、黃瓜
過濾液置於100mL的容量瓶中,並用
pH 3三氯乙酸溶液稀釋至刻度.充分
搖動1~2min,立即用乾燥濾紙濾去
初濾液,精密分別移取獼猴桃過濾液
1·00mL和黃瓜過濾液5·00mL於50
mL比色管中定容,按試驗方法進行
測定,結果如表2.
3)飲料.移取鮮橙多10·00mL在
一定量的pH 3三氯乙酸溶液中,置於
100mL的容量瓶中,並用pH 3三氯乙酸溶液稀釋至刻度.充分搖動1~2min,精密移取過濾液2·50mL
於50mL比色管中定容,按試驗方法進行測定,結果如表2.
3結語
1)從表2中看出,水果中獼猴桃的維生素C含量較為豐富,在日常生活中應多食用這類水果,補充身
體所需營養素.
2)從表1和表2中方法的精密度、回收率以及標准曲線的線性關系來看,用分光光度法測定抗壞血酸
是可行的.但是由於抗壞血酸本身性質不穩定,容易降解,因此在進行樣品處理時應注意盡快將樣品搗碎
浸取在緩沖溶液中.
3)水果中含有的鐵都是以有機物形式存在的,不與2, 2』-聯吡啶直接絡合,則不影響測定結果.水果
中的VC在空氣中極易被氧化,樣品處理時必須用保護劑防止VC被氧化.保護劑不能用草酸,因草酸具有
還原性,本法用三氯乙酸緩沖溶液作保護劑.
參考文獻:
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[8]奚長生.磷鉬藍分光光度法測定維生素C[J].光譜學與光譜分析, 2001, 21(5): 723-725.
(上接第103頁)
該綜合方程的R2更接近1;F值臨界值為6·42,而該方程的F值為30·59;P值減小,表明該回歸方程
具有更好的統計意義.方程說明ΔE(H-L),Q(C5)和EL對葯物的活性有較大的影響.活性參數(pIC50)
的值越大,葯物作用在受體上的活性越好.從方程可以看出ΔE(H-L)越小,Q(C5)更正(即負電荷越少)
葯物的活性更強.因此可以看出ΔE(H-L)和Q(C5)可能是決定葯物活性的主要因數.EL2對葯物活性也
有一定影響,但系數較小,影響也較小.
3結論
通過對燈盞花苷Ⅰ及其衍生物前線分子軌道的分析和構效關系的計算,計算結果定量的表明,當燈盞
花苷Ⅰ及其衍生物作用於受體的時候,ΔE(H-L)和Q(C5)是決定葯物活性的主要因數.文中所得到的表
示pIC50與量子化學參數間關系的相關方程式,為類似衍生物的生物活性的預測提供了一個簡單可行的
方法.
參考文獻:
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115第3期 劉宇奇,楊 睿,楊 泳:光度法測定葯品和食物中的微量VC

分光光度法測定大棗中的維生素C含量
袁葉飛,甄漢深,歐賢紅
(廣西中醫學院,廣西南寧 530001)
摘要:目的:建立大棗中維生素C含量的測定方法。方法:用乙酸從大棗中提取維生素C,
由維生素C形成脎,於波長490 nm處測定脎的吸光度。結果:維生素C標准溶液的濃度在8~
16μg/ml范圍內線性關系良好(r=0. 999 7),平均回收率為99. 76%,大棗中含維生素C 4. 752
mg/g,與傳統碘量法相比,測定結果基本一致。結論:本方法操作簡便,結果可靠,重現性好,可作
為大棗中的維生素C含量測定方法。
關鍵詞:大棗;維生素C;分光光度法
中圖分類號:R927. 2 文獻標識碼:A 文章編號: 1000-2219(2006)02-0041-03
大棗為鼠李科植物棗(Ziziphus jujubaMil.l )的
燥成熟果實,具有補中益氣、養血安神等功效[1]。
棗中富含維生素C、山楂酸和環磷酸腺苷,筆者采
分光光度法測定大棗中的維生素C含量,取得了
好的結果。
儀器與試葯
. 1 儀器 Agilent 8453型紫外可見分光光度計
美國);METTLER AE100電子分析天平(瑞士)。
. 2 試葯 大棗由廣西南寧市醫葯公司提供,產於
西灌陽,經本院中葯鑒定教研室鑒定。維生素C
R(四川成都科龍化工試劑一廠生產,批號
50426)。硫酸鐵銨AR(四川成都科龍化工試劑一
生產,批號040130),實驗時以蒸餾水配成0. 003
ol/L的溶液。乙酸AR(國葯集團化學試劑有限公
生產,批號20050519),實驗時以蒸餾水配成1. 2
ol/L的溶液。硫酸AR(廣西師范學院化學試劑廠
產,批號200406101),實驗時以蒸餾水配成500
l/L的溶液。2, 4-二硝基苯肼AR(中國醫葯集團
海化學試劑公司生產,批號T2002061),實驗時以
00 ml/L硫酸溶液配成1 ml/L的溶液,過濾,不用
放入冰箱內,每次用前必須過濾。乙酸鈉AR(中
醫葯集團上海化學試劑公司生產,批號
20041105)。pH 6. 0的乙酸-乙酸鈉緩沖溶液,由
9 g乙酸鈉和3 ml乙酸混合,最後用蒸餾水稀釋至
L而成。
方法與結果
. 1 對照品溶液的制備 維生素C原料經乙醇二
者簡介:袁葉飛(1973-),男,博士研究生,講師。
次重結晶,真空度60 mmHg, 50℃乾燥至恆重,符合
《中華人民共和國葯典》2005年版規定,碘量法測定
含量為999. 70 g/kg。精密稱取已純化並乾燥的維
生素C 10 mg,置於100 ml容量瓶中,蒸餾水定容、
搖勻,配製成100μg/ml的維生素C水溶液。
2. 2 供試品溶液的制備 稱取去核鮮棗10. 00 g,
置乳缽中,加少量1. 2 mol/L乙酸溶液,研碎,過濾,
用1. 2 mol/L乙酸溶液反復洗滌濾渣及乳缽後,所
得濾液再離心,將離心後的濾液全部轉移至200 ml
容量瓶,用蒸餾水定容。
2. 3 標准曲線繪制 分別精密移取100μg/ml維
生素C標准溶液2. 0, 2. 5, 3. 0, 3. 5, 4. 0 ml於25 ml
容量瓶中,各加入5 ml pH=6的乙酸-乙酸鈉緩沖
溶液,搖勻,隨之加入2. 0 ml0. 003 mol/L硫酸鐵銨
溶液,搖勻後,再加1. 5 ml1ml/L 2, 4-二硝基苯肼
溶液,搖勻,最後用蒸餾水定容到25 ml。立即置於
37℃水浴鍋中,恆溫反應2 h。冷卻後,在Agilent
8453型紫外可見分光光度計上於波長490 nm處
測定吸光度。維生素C含量與脎的吸光度的關系
見表1。
表1 維生素C含量與吸光度的關系
編號體積(ml)濃度(μg/ml)吸光度
1 2. 0 8 0. 149 3
2 2. 5 10 0. 318 7
3 3. 0 12 0. 472 0
4 3. 5 14 0. 608 2
5 4. 0 16 0. 767 8
將吸光度(A)與濃度(c)進行線性回歸,得回歸
方程A=0. 076 32c-0. 452 7,相關系數r=0. 999 7。
40
果表明維生素C在8~16μg/ml范圍內,線性關
良好。
. 4 試驗條件
.4. 1 酸度的影響:以乙酸和乙酸鈉配成一系列酸
的緩沖液,餘下同標准曲線項操作,結果表明,緩
液的pH值在5. 0~6. 8范圍內脎的最大吸收峰
在490 nm處,吸光度最大且恆定。本實驗選用
H=6的乙酸-乙酸鈉緩沖溶液。
.4. 2 乙酸-乙酸鈉緩沖溶液的用量:同標准曲線
操作,加入3~9 ml pH=6的乙酸-乙酸鈉緩沖溶
時,脎的吸光度基本保持不變,本實驗選用5 ml。
.4. 3 硫酸鐵銨用量:同標准曲線項操作,改變硫
鐵銨用量,其用量分別為1. 0, 1. 5, 2. 0, 2. 5, 3. 0
l。結果表明,硫酸鐵銨加入量以2. 0 ml為宜。
在1. 5~2. 5 ml范圍內,吸光度保持穩定)
. 4. 4 2, 4-二硝基苯肼溶液用量:同標准曲線項
作, 2, 4-二硝基苯肼用量分別為0. 5, 1. 0, 1. 5,
. 0, 2. 5 ml。結果表明,加入量以1. 5 ml為宜。
在1. 0~2. 0 ml范圍內,吸光度保持穩定)
. 4. 5 成脎的反應溫度:當溫度低於30℃時反應
完全。溫度上升到37℃時,吸光度趨於最大,
7℃以後,吸光度趨於穩定。
4.6 成脎的反應時間:在1. 0, 1. 5, 2. 0, 2. 5, 3. 0 h
末,脎的吸收光度分別為0. 483 1, 0. 502 6, 0. 608 1,
0. 608 0, 0. 608 1。結果表明,反應2 h末脎的吸光
度達到最大值並且比較穩定。
2.4. 7 共存物質的干擾影響:對於9. 6μg/ml的維
生素C量,下列共存離子或物質(mg)不幹擾(相對
誤差≤5% ):蔗糖(12. 0);葡萄糖(6. 0);果糖
(4. 0);蛋白質(5. 0); Ca2+、Mg2+、K+、Na+(4. 0);
天冬氨酸、蘇氨酸、酪氨酸(8. 0);維生素B2(1. 0);
煙醯胺(2. 0);山楂酸(1. 1);環磷酸腺苷(2. 5);檸
檬酸(0. 9);酒石酸(2. 1)。
2. 5 精密度試驗:精密移取對照品溶液6份,每
份2. 5 m,l按標准曲線項操作測定吸光度,RSD為
0. 09% (n=6),說明精密度良好。
2.6 重現性試驗 精密移取供試品溶液6份,每份
1. 5 ml於25 ml容量瓶中,以下操作按標准曲線項
測定吸光度並計算含量,結果RSD為0. 23% (n=
6),說明重現性良好。
2. 7 穩定性試驗 精密移取對照品溶液2. 5m,l按
標准曲線項操作,每隔0. 5 h測定1次吸光度,結果
其RSD為0. 2%(n=6),脎至少在2. 5 h內穩定。
2. 8 回收率試驗 採用加樣回收法。取供試液
0. 2 ml於25 ml容量瓶中,再分別精密加入對照品
100, 200, 300μg,餘下按標准曲線下操作。見表2。
表2 回收率測定結果
編號樣品含維生素C量(μg)加入維生素C量(μg)測得總維生素量(μg)回收率(% )平均回收率(% )RSD(% )
1
2
3
4
5
6
47. 52
47. 52
47. 52
47. 52
47. 52
47. 52
100
100
200
200
300
300
146. 62
148. 31
246. 89
245. 56
346. 92
348. 02
99. 10
100. 79
99. 69
99. 02
99. 80
100. 17
99. 76 0. 667 7
表3 大棗中維生素C含量測定結果比較
編號分光光度法
測定值(mg/g)均值(mg/g)
碘量法
測定值(mg/g)均值(mg/g)
均值相對差
(% )
1 4. 746 4. 718
2 4. 749 4. 722
3 4. 758 4. 752 4. 731 4. 724 0. 593
4 4. 747 4. 711
5 4. 757 4. 724
6 4. 755 4. 738
9 大棗中維生素C含量測定 精密移取1. 5 ml
試品溶液於25 ml容量瓶中,共6份,以下操作同
准曲線項,測定脎的吸光度,經測定脎的平均吸光
為0. 635 3,RSD=0. 23% (n=6)。把平均吸光
代入回歸方程A=0. 076 32c-0. 452 7,得c=
4. 256μg/m,l則大棗中含維生素C 4. 752 mg/g。
.10 結果比較 用分光光度法與傳統的碘量法分
別測定大棗中維生素C的含量並相比較,結果基本
一致,均值相對誤差為0. 593%。見表3。
3 討論
目前,測定果蔬中的維生素C含量的方法一般
採用電位滴定法[2]、碘量法[1]等,但所有這些方法
都有標准溶液標定繁瑣、操作程序復雜、費時等缺
點。筆者根據Fe3+使維生素C氧化成脫氫抗壞血
酸,脫氫抗壞血酸再與2, 4-二硝基苯肼作用生成
脎,脎的量與抗壞血酸含量成正比這一原理,採用分
光光度法直接測定大棗中的維生素C含量。本方
法與傳統碘量法測定大棗中的維生素C的含量,結
果基本一致,因而本方法結果可靠。另外本方法操
作簡便,重現性好,克服了碘量法的缺點。

⑶ 維生素c含量的直接碘量法測定，維生素c含量怎麼計算

一、測量試劑

1、I2溶液（0.05mol/L）：3.3g I2和5g KI，置於研缽中加少量水，在通風櫥中研磨。待I2全部溶解後，將溶液轉入棕色試劑瓶，加水稀釋至250L，搖勻，放置暗處保存。

2、Na2S2O3標准溶液(0.01mol/L)，澱粉溶液（5%）。

3、HAc(1+1) 固體Vc樣品（維生素片劑） 重鉻酸鉀(A.R)。

二、測量步驟：

1、I2的標定 用移液管移取25.00 ml Na2S2O3標准溶液於250ml錐形瓶中，加50ml蒸餾水，5ml 0.5%澱粉溶液，然後用I2溶液滴定至溶液呈淺藍色，30s內不褪色即為終點。平行三次，計算I2溶液的濃度。

2、維生素C的測定 准確稱取約0.2g研成粉末的維生素C葯片，置於250ml錐形瓶中，加入100ml新煮沸過並冷卻的蒸餾水，立即用I2標准溶液滴定至出現穩定的淺藍色，30s 內不褪色即為終點，記下I2溶液體積。平行三次，計算式樣中維生素C的百分量。

(3)測量水果中維生素c含量方法擴展閱讀：

維生素C又稱抗壞血酸Vc，分子式C6H8O6。Vc具有還原性，可被I2定量氧化，因而可用I2標准溶液直接測定。其滴定反應式：C6H8O6＋I2= C6H6O6＋2HI

用直接碘量法可測定葯片，注射液，飲料，蔬菜，水果等的V含量。

I2微溶於水而易溶於KI溶液，但在稀的KI溶液中溶解得很慢，所以配製I2溶液時不能過早加水稀釋，應先將I2和KI混合，用少量水充分研磨，溶解完全後再加水稀釋。

I與KI間存在如下平衡：I2＋I－ =I3－

游離I2容易揮發損失，這是影響碘溶液穩定性的原因之一。因此溶液中應維持適當過量的I－離子 ，以減少I2的揮發。空氣能氧化I－離子，引起I2濃度增加：4 I－＋O2＋4H＋ =2I2＋2H2O

此氧化作用緩慢，但能為光，熱，及酸的作用而加速，因此I2溶液應處於棕色瓶中置冷暗處保存。I2能緩慢腐蝕橡膠和其他有機物，所以I應避免與這類物質接觸。

I2 溶液的標定用Na2S2O3標定。而Na2S2O3一般含有少量雜質，在PH=9-10間穩定，所以在Na2S2O3溶液中加入少量的Na2CO3，Na2S2O3見光易分解可用棕色瓶儲於暗處，經8-14天，用K2C2O7做基準物間接碘量法標定Na2S2O3溶液的濃度。其過程為：K2C2O7與KI先反應析出I2：析出的I2再用標準的Na2S2O3溶液滴定：從而求得Na2S2O3的濃度。這個標定Na2S2O3的方法為間接碘量法。

1、碘量法的基本反應式：

2S2O32－＋I2=S4O62－＋2I－

2、標定Na2S2O3溶液時有：

6I－＋Cr2O72－＋14H＋=2Cr3＋＋3I2＋7H2O 2S2O32－＋I2=S4O62－＋2I－

3、Na2S2O3標定時有:

n(K2C2O7): 6n(Na2S2O3)=1:6

由於Vc的還原性很強，較容易被溶液和空氣中的氧氧化，在鹼性介質中這種氧化作用更強，因此滴定宜在酸性介質中進行，以減少副反應的發生。考慮到I2在強酸性中也易被氧化，故一般選在PH為3-4的弱酸性溶液中進行滴定。

參考資料來源：網路--碘量法

⑷ 探究不同水果蔬菜中維生素c含量多少的實驗

驗名稱：比較不同蔬菜或水果中維生素C的含量
一、目的要求：
1、運用科學的方法比較不同蔬菜或水果中維生素C的含量．

2、在探究過程中逐漸養成周密地考慮問題的思維習慣．
二、實驗器材：（供參考）
材料：青椒、小白菜、西紅柿、菠菜、馬鈴薯、芹菜、茼蒿等蔬菜；

蘋果、甜橙（或橘子）、葡萄、油桃、梨、西瓜等水果．
用具：榨汁機（或研缽）、燒杯、試管、滴管、紗布、吸水紙、清水、高錳酸鉀溶液
三、實驗原理：

蔬菜和水果中含有維生素C．不同果蔬中維生素C的含量不同．維生素C具有一種奇妙的特性--它的水溶液能夠使高錳酸鉀溶液褪色，並且果蔬中維生素C含量越高，所滴菜汁或果汁的量就越少．根據這一特性，我們就可以測定出蔬菜或水果中維生素C含量的多少．
四、實驗方案：
（一）檢查器材
（二）榨取果汁、蔬菜汁．
（三）溶液褪色試驗
五、實驗操作：（1）、首先把試管編上號：1、2.（2）、在2個試管中各裝上2毫升等量的高錳酸鉀溶液．（3）、取1支潔凈、乾燥的小滴管吸取蘋果汁液，逐滴地滴入2號試管中，邊滴、邊震盪、邊觀察，直至高錳酸鉀褪去顏色為止，記錄滴數；再用同一支小滴管，在清水中清洗干凈後，用吸水紙吸干滴管內外的水分．取獼猴桃汁液滴入3號試管中，操作方法同2號試管，記錄滴數．
最後比較1號、2號試管的滴數：滴數多的維生素C含量少，滴數少的維生素C含量多．
六、記錄數據，得出結論：

任選兩種新鮮
蔬菜或水果
高錳酸鉀
溶 液
所滴菜汁或果汁
滴 數
實 驗 結 論

獼猴桃汁
1號試管：2ml
8滴
獼猴桃汁含較多的維生素C

蘋果汁
2號試管：2ml
14滴

⑸ 我們一般說獼猴桃的維生素C含量高，這個含量是怎麼測定的，用什麼方法

測量維生素含量的方法有很多，比如說紫外分光光度法，紅外光譜法，2,6二氯靛酚滴定法、高效液相色該法、銅藍比色法、等等。
實驗室常用的方法是2,6-二氯酚靛酚，2,6-二氯酚靛酚( DCPIP )法是多年採用的經典方,該方法簡單易行、快速,日前仍被廣泛應用。但是在定深色蔬萊時,受到顏色干擾,滴定終點難判斷。還抗壞血酸在中性和微酸性環境中能將染料2,6-二氯面酚還原成無色的還原型2,6一二氯酚靛酸酚。當抗壞血酸未被完全氧化時,滴下的2,6-二氯酚酚被還原成無色。而溶液中的抗壞血酸完全氧化時,清的2,6一-二氯酚靛酚立即使溶液變成紅色,表示溶液抗壞血酸剛剛被全部氧化,此時為滴定終點。

⑹ 測定vc有哪幾種方法,每種方法的使用范圍是什麼

維生素C不同的測定方法

目前研究維生素C測定方法的報道較多,有關維生素C的測定方法如熒光法、2，6-二氯靛酚滴定法、2，4-二硝基苯肼法、光度分析法、化學發光法、電化學分析法及色譜法等,各種方法對實際樣品的測定均有滿意的效果.

為了解國內VC含量測定方法及其應用方面的現狀及發展態勢.方法以"維生素C或抗壞血酸和測定"為檢索詞對1994～2002年中國期刊網全文資料庫(CNKI)中的理工A、B和醫葯衛生專輯進行篇名檢索,對所得有關維生素C含量測定的文獻數據分別以年代、作者區域、載刊等級、樣品類型、測定方法等進行計量分析.結果核心期刊載刊文獻占文獻總量的45.06％,其中光度法佔65.69％,電化法佔18.63％,色譜法佔12.75％;復雜被測樣品文獻占文獻總量的45.06％,其中光度法佔60.92％,色譜法佔19.54％,電化法佔10.34％.結論目前國內維生素C含量測定仍以光度法為主流,但近年來色譜法,特別是HPLC法上升趨勢尤為明顯.

一．熒光法

1．原理

樣品中還原型抗壞血酸經活性炭氧化成脫氫型抗壞血酸後，與鄰苯二胺（OPDA）反應生成具有熒光的喹喔啉（quinoxaline）,其熒光強度與脫氫抗壞血酸的濃度在一定條件下成正比，以此測定食物中抗壞血酸和脫氫抗壞血酸的總量。

脫氫抗壞血酸與硼酸可形成復合物而不與OPDA反應，以此排除樣品中熒光雜質所產生的干擾。本方法的最小檢出限為0.022 g/ml。

2．適用范圍

本方法適用於蔬菜、水果及其製品中總抗壞血酸的測定

3. 注意事項

3.1 大多數植物組織內含有一種能破壞抗壞血酸的氧化酶，因此，抗壞血酸的測定應採用新鮮樣品並盡快用偏磷酸-醋酸提取液將樣品製成勻漿以保存維生C。

3.2 某些果膠含量高的樣品不易過濾，可採用抽濾的方法，也可先離心，再取上清液過濾。

3.3活性炭可將抗壞血酸氧化為脫氫抗壞血酸，但它也有吸附抗壞血酸的作用，故活性炭用量應適當與准確，所以，應用天平稱量。我們的實驗結果證明，用2g活性炭能使測定樣品中還原型抗壞血酸完全氧化為脫氫型，其吸附影響不明顯。

二、2，6-二氯靛酚滴定法（還原型VC）

1、原理：

還原型抗壞血酸還原染料2，6-二氯靛酚，該染料在酸性中呈紅色，被還原後紅色消失。還原型抗壞血酸還原2，6-二氯靛酚後，本身被氧化成脫氫抗壞血酸。在沒有雜質干擾時，一定量的樣品提取液還原標准2，6-二氯靛酚的量與樣品中所含維生素C的量成正比。本法用於測定還原型抗壞血酸，總抗壞血酸的量常用2，4-二硝基苯肼法和熒光分光光度法測定。

2、注意事項

⑴ 所有試劑的配製最好都用重蒸餾水；

⑵ 滴定時，可同時吸二個樣品。一個滴定，另一個作為觀察顏色變化的參考；

⑶ 樣品進入實驗室後，應浸泡在已知量的2%草酸液中，以防氧化，損失維生素C；

⑷ 貯存過久的罐頭食品，可能含有大量的低鐵離子（Fe2+），要用8%的醋酸代替2%草酸。這時如用草酸，低鐵離子可以還原2，6-二氯靛酚，使測定數字增高，使用醋酸可以避免這種情況的發生；

⑸ 整個操作過程中要迅速，避免還原型抗壞血酸被氧化；

⑹ 在處理各種樣品時，如遇有泡沫產生，可加入數滴辛醇消除；

⑺ 測定樣液時，需做空白對照，樣液滴定體積扣除空白體積。

3優點：它具有簡便、快速、比較准確等優點，適用於許多不同類型樣品的分析。缺點是不能直接測定樣品中的脫氫抗壞血酸及結合抗壞血酸的含量，易受其他還原物質的干擾。如果樣品中含有色素類物質，將給滴定終點的觀察造成困難。在酸性環境中，抗壞血酸（還原型）能將染料2,6—DCIP還原成無色的還原型2,6—DCIP，而抗壞血酸則被氧化成脫氫抗壞血酸。氧化型2,6—DCIP在中性或鹼性溶液中呈藍色，但在酸性溶液中則呈粉紅色。因此，當用2,6—DICP滴定含有抗壞血酸的酸性溶液時，在抗壞血酸未被全部氧化前，滴下的2,6—DCIP 立即被還原成無色，一旦溶液中的抗壞血酸全部被氧化時，則滴下微量過剩的2,6—DCIP 便立即使溶液顯示淡粉紅色或微紅色，此時即為滴定終點，表示溶液中的抗壞血酸剛剛全部被氧化。依據滴定時2,6—DCIP 標准溶液的消耗量 (ml)，可以計算出被測樣品中抗壞血酸的含量。氧化型2,6—DCIP與還原型抗壞血酸常在稀草酸或偏磷酸溶液中進行反應。即先將樣品溶於一定濃度的酸性溶液中或經抽提後，再用2,6—DCIP標准溶液滴定至終點。

食物和生物材料中常含有其他還原物質，其中有些還原物質可使2,6—DCIP還原脫色。為了消除這些還原物質對定量測定的干擾，可用抗壞血酸氧化酶處理，破壞樣品中還原型抗壞血酸後，再用2,6—DCIP 滴定樣品中其他還原物質。然後從滴定未經酶處理樣品時2,6—DCIP標准溶液的總消耗量中，減去滴定非抗壞血酸還原物質2,6—DCIP 標准溶液的消耗量，即為滴定抗壞血酸實際所消耗的2,6—DCIP標准溶液的體積，由此可以計算出樣品中抗壞血酸的含量。另外，還可利用抗壞血酸和其他還原物質與2,6—DCIP反應速度的差別，並通過控制樣品溶液在pH1 — 3 范圍內，進行快速滴定，可以消除或減少其他還原物質的作用，一般在這樣的條件下，干擾物質與2,6—DCIP的反應是很慢的或受到抑制。生物體液（如血液、尿等）中的抗壞血酸的測定比較困難，因為這些樣品中抗壞血酸的含量很低，並且存在許多還原物質的干擾，同時還必須預先進行脫蛋白處理。在生物體液中含有巰其、亞硫酸鹽及硫代硫酸鹽等物質，它們都能與DCIP反應，但反應速度比抗壞血酸慢得多。樣品中巰基物質對定量測定的干擾，通常可以藉加入對—氯汞苯甲酸(簡稱PCMB)而得到消除。

三、2，4-二硝基苯肼法

1．原理

總抗壞血酸包括還原型、脫氫型和二酮古樂糖酸。樣品中還原型抗壞血酸經活性炭氧化為脫氫抗壞血酸，再與2，4-二硝基苯肼作用生成紅色脎，脎的含量與總抗壞血酸含量成正比，進行比色測定。

2．適用范圍

本方法適用於蔬菜、水果及其製品中總抗壞血酸的測定。

這是脎比色法，單獨評價是因為目前它作為Vc測定的國標法之一，是一種全量測定法，它跟以前的苯肼法原理相近。首先將樣品中的還原型V氧化為脫氫型V，然後與2，4—二硝基苯肼作用，生成紅色的脎，將脎溶於硫酸後進行比色。最近國標中該法強調空白，每個樣品及標准系列均需作對應空白，這樣消除色澤、背景不一的誤差。在實際楊梅汁Vc測定中，操作時間長，操作要求較嚴格，試劑較多，就一般實驗室而言是目前可以採用的方法。

四 碘量法

1、維生素C的原理

維生素C包括氧化型、還原型和二酮古樂糖酸三種。當用碘滴定維生素C時，所滴定的碘被維生素C還原為碘離子。隨著滴定過程中維生素C全被氧化，所滴入的碘將以碘分子形式出現。碘分子可以使含指示劑（澱粉）的溶液產生藍色，即為滴定終點。

2、注意事項

（1）看到紅棕色出現時要放慢滴定的速度。

（2）以顯藍色在30s內不褪色為滴定終點。

五L-抗壞血酸(維生素C)測定試劑盒（酶學方法）

1.應用於食品，飲料及生物製品檢測

2.比色方法

此方法用於檢測水果和蔬菜（如馬鈴薯），水果和蔬菜產品（如西紅柿醬、泡菜、果醬、果汁），嬰兒食品，啤酒，飲料，流食，粉狀和烘烤劑，肉產品，奶製品，葡萄酒，還有動物飼料，醫葯品（如維生素配製、陣痛葯、退燒葯）和生物樣品中的L-抗壞血酸(維生素C)，

3.分析物

L-抗壞血酸不定量的分布於動物和植物中。人類不能自身生產L-抗壞血酸，因此必須由外源(vitamin C)提供。一般情況下來源於水果和蔬菜中，出於技術原因，L-抗壞血酸曾被用於食品工業中的抗氧化劑。它是一種相對敏感的物質，L-抗壞血酸的檢測非常適用於從原始水果和蔬菜中加工食品的質量評定。

L-抗壞血酸用於醫葯品生產中的組成部分，如維生素產品和陣痛葯，另外，它還用於動物飼料添加劑中。

4.原理

L-抗壞血酸 (x-H2) + MTT+ PMS—> dehydroascorbate (x) + MTT-formazan + H+X

L-抗壞血酸 + ½ O2 AAO——> dehydroascorbate + H2OX

5.特異性

在給定的條件下，此方法特別針對於L-抗壞血酸。合成的D-阿拉伯抗壞血酸/阿拉伯糖型抗壞血酸能作為抗氧化劑，也能反應，但反應速度較慢。

6.靈敏度

測定靈敏度為0.005個吸光度單位，樣品體積為1.600ml，此相當於0.1mg/l樣品溶液中的L-抗壞血酸濃度。0.015個吸光度單位的差異能造成0.3 mg/l檢測限，樣品最大體積為1.600 ml.。

7.線性

測定的線性范圍為0.5 ugL-抗壞血酸（0.3mgL-抗壞血酸/l樣品溶液體積為1.600ml）到20 ugL-抗壞血酸（0.2gL-抗壞血酸/l樣品溶液體積為0.100ml）

8.精密度

在用一個樣品做重復實驗時，可能會產生0.005-0.010個吸光度單位的差異。標準的相對偏差（變異系數）大約為1-3%。當分析檢測數據時，要考慮到L-抗壞血酸的水溶液穩定性較差，尤其是重金屬離子或氧存在時。

9.干擾及錯誤來源

糧食的成分不經常干擾實驗。高濃度的酒精和D-山梨酸醇能降低反應速度，大量的亞硫酸鹽必須通過添加甲醛來去除。醋酸抑制酶AAO。金屬和 亞硫酸鹽離子可以導致L-抗壞血酸的自發分解。

10.試劑盒包括內容

1.磷酸鹽/檸檬酸緩沖液 ———— pH值大約3.5；MTT

2.AAO（坑壞血酸-氧化酶）—— 每板約17 U AAO

3. PMS 溶液

六．磷鉬藍分光光度法測定維生素C

基於在一定的反應條件下，維生素C可以定量地將磷鉬酸錠還原成磷鉬藍，提出了一種新的測定維生素C的分光光度法。該方法很方便、快速地測定生物、葯物等試樣中的維生素C，准確度和重復性均達到令人滿意的程度。

1 適用范圍

本標准適用於果品、蔬菜及其加工製品中還原型抗壞血酸的測定(不含二價鐵、二價錫、一價銅、二氧化硫、亞硫酸鹽或硫代硫酸鹽),不適用於深色樣品。

2 測定原理

染料2,6－二氯靛酚的顏色反應表現兩種特性,一是取決於其氧化還原狀態,氧化態為深藍色,還原態變為無色;二是受其介質的酸度影響,在鹼性溶液中呈深藍色,在酸性介質中呈淺紅色。

用藍色的鹼性染料標准溶液,對含維生素 C的酸性浸出液進行氧化還原滴定,染料被還原為無色,當到達滴定終點時,多餘的染料在酸性介質中則表現為淺紅色,由染料用量計算樣品中還原型抗壞血酸的含量。

七.二甲苯－二氯靛酚比色法

1 適用范圍

測定深色樣品中還原型抗壞血酸。

2 測定原理

用定量的 2,6－二氯靛酚染料與試樣中的維生素 C進行氧化還原反應,多餘的染料在酸性環境中呈紅色,用二甲苯萃取後比色,在一定范圍內,吸光度與染料濃度呈線性相關,收剩餘染料濃度用差減法計算維生素 C含量。

八.近紅外漫反射光譜分析法(NIRDRSA)

自1965年首次應用於復雜農業樣品分析後，因其具 有樣品處理簡單、分析速度快等優點，逐漸受到分析界的重視。此法已廣泛應用於石油、紡 織、農業、食品、葯物分析等領域[1，2]。在葯物分析中，NIRDRSA可以進行定性 鑒別、定量分析等工作。

維生素C是一種不穩定的二烯醇化合物，其葯典[3]含量測定方法為碘量法。我 們採用近紅外漫反射光譜技術直接測定維生素C含量，樣品無需預處理，方法簡便，結果可 靠。

這是因為，近紅外譜區光的頻率與有機分子中C-H，O-H，N-H等振動的合頻與各級倍頻的 頻率一致，因此通過有機物的近紅外光譜可以取得分子中C-H，O-H，N-H的特徵振動信息 。由於近紅外光譜的譜帶較寬，譜圖重疊嚴重，不能用特徵峰等簡單方法分析，需要運用計 算機技術與化學計量學方法。本實驗應用的是偏最小二乘法(PLS)[4]，首先利用 定標集建立預測模型，然後將預測集作為未知樣本，根據預測模型進行預測。

對所選擇的譜區范圍，採用對反射吸光度的MSC(散射校正)預處理，對25個樣品進行交叉 驗證，即選擇一個樣品，從校正集中除去該樣品對應的光譜和濃度數據，並設光譜主成分數 為1，循環迭代樣品數和主成分數，計算預測殘差平方和,確定所需主成分數。若主成分選擇 過小，會丟失樣品信息，過大會造成過度擬合。當主因子為2時，預測殘差平方和值最小， 為2.029，故選擇主因子數為2，建立最佳PLS校正數學模型。

九 電位滴定法

1.原理：根據滴定過程中電池電動勢的變化來確定反應終點.

Pt為指示電極，甘汞作參比電極

E池＝E+-E-+E液接電位＝EI2/I-+k(常數)

2.原理(具體來說:)

隨著滴定劑的加入，由於發生化學反應，待測離子濃度將不斷變化；從而指示電極電位發生相應變化；導致電池電動勢發生相應變化；計量點附近離子濃度發生突變；引起電位的突變，因此由測量工作電池電動勢的變化就能確定終點。

3.計算式：(與碘量法相同) Wvc=C(I2)V(I2)M(vc)/m(vc ) *100%

4.優點：

解決了滴定分析中遇到有色或渾濁溶液時無法指示終點的問題

用線性電位滴定法分析抗壞血酸,抗壞血酸回收率為99.80％～101.5％,相對標准偏差為0.61％;分析維生素C片中的抗壞血酸,相當標示量為98.90％～100.5％,相對標准偏差不大於0.48％,說明線性電位滴定法分析維生素C片中的抗壞血酸含量是可行的.

十 .分光光度法

1. 原理：

維生素C在空氣中尤其在鹼性介質中極易被氧化成脫氫抗壞血酸，pH>5,脫氫抗壞血酸內環開裂，形成二酮古洛糖酸。脫氫抗壞血酸，二酮古洛糖酸均能和2，4－二硝基苯肼生成可溶於硫酸的脎

脎在500nm波長有最大吸收

根據樣品溶液吸光度，由工作曲線查出VC的濃度，即可求出VC的含量

十一 庫侖滴定法

1.原理：庫侖滴定法屬於恆電流庫侖分析。

是在特定的電解液中，以電極反應產物為滴定劑（電生滴定劑，相當於化學滴定中的標准濃液）與待測物質定量作用，藉助指示劑或電位法確定滴定終點。

2.基本依據－－法拉第電解定律：電解時，電極上發身化學反應的物質質量與通過電解池的電量Q成正比

即： m=MQ/zF = MI t /zF

3..化學反應：陰極反應： 2H+2e-=H2 陽極反應： 2I-=I2+2e-

4.終點指示：多種方法

(1)化學指示劑－－I2

(2)電位法

(3)雙鉑極電流指示法

5.計算式：Wvc=MvcQ/zFm樣式中： F--- 法拉第常數（96487C）

Z---電極反應中轉移的電子數注意：使電解效率100％

6.優點：

1）無需標准化的試劑溶液，免去了大量的標准物質的准備工作（配製，標定）

2）只需要一個高質量的供電器，計時器，小鉑絲電極，且易於實現自動化控制

3）若電流維持一個定值，可大大縮短了電解時間

4）電量容易控制及准確測量；方法靈敏度，准確度較高

5）滴定劑來自電解時的電極產物，可實現容量分析中不易實現的滴定過程，如Cu＋,Br2,Cl2產生後立即與待測物反應。

7.缺點(難點)：

要求電解過程沒有副反應和漏電現象，即使電解電極上只進行生成滴定劑的反應，且電流的效率是100％

8.註：電流效率＝i樣÷i總＝ i樣÷（ i樣＋ i容＋i雜）

因為：實際電解過程中存在影響電流效率的因素，如，雜質，溶劑，電極自身在電極上的反應等

十二 紫外快速測定法

原理

維生素C的2，6—二氯酚靛酚容量法，操作步驟較繁瑣，而且受其它還原性物質、樣品色素顏色和測定時間的影響。紫外快速測定法，是根據維生素C具有對紫外產生吸收和對鹼不穩定的特性，於243nm處測定樣品液與鹼處理樣品液兩者消光值之差，通過查標准曲線，即可計算樣品中維生素C的含量。

十三 光電比濁法的原理

原理

在酸性介質中,抗壞鐵酸與亞硒酸(H2SeO3)能定量地進行氧化還原反應.1mol的抗鐵酸能將2mol的亞硒酸還原成硒.在一定條件下,生成的元素硒在溶液中形成穩定的懸濁液.當抗鐵酸的濃度在0-4mg/25-50ml的范圍內,該溶液生成的濁度與抗壞鐵酸的含量成正比.將試液置分光光度計上測其濁度可以定量地測定抗壞鐵酸.

十四熒光分析法的原理

原理

用酸洗活性炭將抗壞鐵酸氧化為順式脫氫抗壞鐵酸,然後與鄰苯二胺縮合成一種熒光性化合物.樣品中其它熒光雜質的干擾可以通過向氧化後的樣品中加入硼酸,使脫氫抗壞鐵酸形成 硼酸脫氫抗壞鐵酸的絡合物,它不與鄰二苯胺生成熒光化合物.這樣可以測定其它熒光雜質的空白熒光強度而加以校正

十五 原子吸收間接測定法

原理

這是最近報導的一種Vc測定法，其原理是在酸性介質中還原型Vc可將Cu2+定量地還原為Cu+並與SCN—反應生成CuSCN沉澱，在高速離心機下有效地分離出沉澱，小心洗滌後再經濃硝酸溶解，用原子吸收法測定銅含量，即可推知樣品中維生素C的含量。該法實驗儀器較昂貴，主要問題是操作過程中反應完全與否，沉澱物洗滌、離心反復多次，極容易帶來誤差。該法優點是能不受果蔬自身顏色的干擾，有一定的發展前景。根據試驗，發現此法結果偏低，還有待於進一步優化改善。

十六．金納米微粒分光光度法測定維生素C的方法

本發明公開了一種用金納米微粒分光光度法測定維生素C的方法。於5mL比色管中，依次加入0．1－2．0mL濃度為95．64μg／mL的HAuCl↓［4］溶液，0．02－0．50mL濃度為1％的檸檬酸三鈉溶液，再加入0．001－2．0mL濃度為0．38mg／mL的維生素C溶液，混勻，加二次蒸餾水定容至刻度，再充分混勻，在分光光度計上，於520nm處測定吸收值，同時作空白試驗。本發明測定方法簡單、快捷，所用儀器價廉，試劑易得

十七 L-半胱氨酸修飾電極測定維生素C的方法

研究了L-半胱氨酸修飾電極的制備方法和其電化學行為，並用於維生素C的測定，發現該電極對VC有明顯的電催化作用，在pH=10.0的NH4Cl-NH3·H2O緩沖溶液中，VC在L-半胱氨酸修飾電極上產生一靈敏的氧化峰，峰電流與VC的濃度在1.0×10-3~1.0×10-6mol/L的范圍內呈良好的線形關系，相關系數為0.9962，其最低檢測限可達1.0×10-6mol/L，與紫外光譜法測定的結果一致。

測定維生素C有多種方法，包括採用I2或二氯靛酚（DPI）進行氧化還原滴定。一般來說，滴定法是一種快速、簡便、准確的技術，它通過滴定劑和被滴定物質的等當量反應，精確測定被測物質的含量。DPI對於維生素C具有良好的選擇性，是一種理想的氧化劑。

十八 梅特勒-托利多儀器法

傳統的滴定法是手工滴定，根據指示劑顏色的變化確定終點，通過測量滴定劑的消耗量，計算被測物質的含量。手工滴定有很多不足：手工控制誤差較大，計算復雜，針對不同的反應需要特殊指示劑。梅特勒-托利多的自動電位滴定儀解決了這一問題，通過測量滴定反應中電位的變化確定終點，全自動操作、計算，測量快速，結果准確。梅特勒-托利多的滴定儀配有記憶卡軟體包，存儲有成熟滴定方法，可方便快速解決實際應用問題，並且稍作改動就能作為新的測定的實驗方法。

除此之外，還有雙光束剩餘染料差減比色法，2_6_二氯靛酚鈉動力學分光光度法、聚中性紅修飾電極方法、示波溴量法、流動注射化學發光抑製法、磷鉬鎢雜多酸作顯色劑快速檢測方法、溶氧測定裝置測定水果蔬菜中抗壞血酸含量的方法等。在此不做介紹。