A. 誰能提供熒光顯微鏡操作規程
熒光顯微鏡操作規程(以OLYMPUS為例)
OLYMPUS日光型膠片照相步驟
■ 設備標注及基本狀態
⒈色溫測定光路轉換拉桿①,插入;
⒉照相光路轉換拉桿②,插入;
⒊照明光源電壓調節鈕③,中間位;
⒋燈光型膠片色溫平衡(LBD)濾光器④,使用日光型膠片時推向後面,請勿扳動;
⒌單色反差濾光片插槽⑤,使用彩色膠片時不用濾色片;
⒍視場光闌和孔徑光闌,調到約3/4打開位置,請勿轉動。
■ 安裝與准備
⒈ 安裝:裝上照相機(圓點對合,順時針旋轉至入位),裝上膠卷;相機短輸出線連接到自動曝光本體,長輸出線連接到數據輸入控制儀;
⒉ 通電:接通自動曝光控制儀及顯微鏡電源,初始化1~2分鍾後膠片自動卷片至第1張,並自動顯示膠片感光度(ISO),抽除載物台下面的遮光板。
■ 明亮視野彩色負片自動曝光
⒈ 粗准焦:拉出①②拉桿,調節取景器的屈光度調節環至雙十線清晰可辨;全部插入②拉桿,調節准焦旋鈕,找到切片平面;
⒉ 色溫調節:將切片空白處移至視野中央,拉出②拉桿,色溫調節盤轉至D,調節③鈕至色溫平衡顯示在黃色三角(此時③鈕顯示大致在相機標志,色溫約為5000~6000)。調定色溫後一直到攝影終止,不要對上述步驟進行調整,光亮的調節只能用ND濾光器進行!
⒊ 准焦:插入②拉桿,按常規用雙筒目鏡對要拍攝的部位進行准焦;
⒋ 拍照:插入①拉桿(或部分插入),拉出②拉桿,自動曝光控制儀顯示屏左下角顯示曝光時間,一般以0.01~0.50秒之間為好(超過0.50秒需增加倒易律失效補償)。按下曝光按鈕(EXPOSE),自動曝光和卷片;
⒌ 結束:拍照結束後自動倒片,插入①②拉桿,切斷電源,按安裝相機相反步驟把相機取下,另行保管。
■ 熒光暗視野彩色負片自動曝光
⒈ 接通熒光電源開關(綠色按鈕)。關閉熒光電源後必須等候半小時以上才能再開機,以免燒壞熒光電源!
⒉ 接通可見光電源,准焦;
⒊ 插入載物台下遮光板,選用合適的激發波長(WU、WIB或WIG),觀察熒光顯色;
⒋ 連續按動自動曝光控制儀上的自動曝光選擇按鈕(MODE/AUTO)直至出現「FL-AUTO」;
⒌ 其餘照相步驟同上。如細胞沒有布滿視野,可選用定點測光(拉出自動曝光本體上的准焦范圍選擇拉桿,參照使用說明書p.5和p.21)。
■ 注意事項和提示
⒈ 常用的膠卷多為日光型。
⒉ 使用日光型膠片時把燈光型膠片色溫平衡(LBD)濾光器④推向後面,請勿扳動。
⒊ 使用彩色膠片時單色反差濾光片插槽⑤里不必放置濾色片。
⒋ 視場光闌和孔徑光闌,調到約3/4打開位置,請勿轉動。
⒌ 調定色溫後一直到攝影終止,不要對各項參數進行調整,光亮的調節只能用ND濾光器(在LBD調節鈕後面)進行。
⒍ 關閉熒光電源後必須等候半小時以上才能再開機,以免燒壞熒光電源。
⒎ 在切斷電源情況下安裝或取下相機。膠卷未照完時取下,相機會自動關閉遮光板,保證膠卷不會感光。取下的相機應放在乾燥器內保存。
⒏ 熒光暗視野照相最好選用感光度高的膠卷如ISO=400。
⒐ 本室照相系統配備的照相鏡頭為PE3.3×,如物鏡為10×,則放大倍數為33×。
⒑ 使用完畢請在登記簿作記錄。
敬請注意:使用完畢請在登記簿作記錄,否則將追究責任。
B. nikon熒光顯微鏡使用方法
nikon熒光顯微鏡使用方法與其他熒光顯微鏡使用方法相同。
首先關電燈並開啟汞燈。
然後根據樣品熒光素選擇相應的濾光片。
第三,放好標本並找到正確的視野。
需拍照則需要准備好相機。
拍攝速度設定在0.5-10秒內。
使用結束後關閉所有電源並做好使用記錄。
C. 熒光顯微鏡的使用注意事項
操作要注意汞燈不要頻繁開關,打開之後半小時之內不要關閉,關閉後半小時不要打開。開機時注意把光強調到最小,這樣可以延長燈泡壽命。熒光觀察完畢後注意把熒光轉換到空擋。