① 什麼是革蘭氏染色法染色過程應注意什麼
革蘭氏染色法是細菌學中廣泛使用的一種鑒別染色法,1884年由丹麥醫師、細菌學家漢斯·克里斯蒂安·約阿希姆·革蘭氏(HansChristianJoachimGram,1853-1938)創立。革蘭氏染色法一般包括初染、媒染、脫色、復染等四個步驟。
注意事項:
1.選用活躍生長期菌種染色,老齡的革蘭氏陽性細菌會被染成紅色而造成賀雹假陰性。
2.塗片不宜過厚,以免脫色不完全造成假陽性。
3.脫色是革蘭氏染色是否成功的關鍵,脫色不夠造芹拍答成假陽性,脫色過度造成假陰性。
方法原理:
用於生物染色的染料主要有鹼性染料、酸性染料和中性染料三大類。鹼性染料的離子帶正電荷,能和帶負電荷的物質結合。因細菌蛋白質等電點較低,當它生長於中性、鹼性或弱酸性的溶液中時常帶負電荷,所以通常採用鹼性染料(如美藍、結晶紫、鹼性復紅或孔雀綠等)使其著色。
酸性染料嫌慧的離子帶負電荷,能與帶正電荷的物質結合。當細菌分解糖類產酸使培養基pH下降時,細菌所帶正電荷增加,因此易被伊紅、酸性復紅或剛果紅等酸性染料著色。中性染料是前兩者的結合物又稱復合染料,如伊紅美藍、伊紅天青等。