吸收系數的測量方法

① 紫外_可見分光光度法，用吸收系數法定量，公式是什麼

一、原理可見光、紫外線照射某些物質，主要是由於物質分子中價電子能級躍遷對輻射的吸收，而產生化合物的可見紫外吸收光譜。基於物質對光的選擇性吸收的特性而建立分光光度法或稱吸收光譜法的分析方法。它是以朗伯──比耳定律為基礎。1朗伯—比耳定律A=lg—-=ECLT式中A為吸收度；T為透光率；E為吸收系數，採用的表示方法是（E1％1cm），其物理意義為當溶液濃度為1%（g/ml），液層厚度為1cm時的吸收度數值；C為100ml溶液中所含被測物質的重量（按乾燥品或無水物計算），g；L為液層厚度，cm。二、使用范圍凡具有芳香環或共軛雙鍵結構的有機化合物，根據在特定吸收波長處所測得的吸收度，可用於葯品的鑒別、純度檢查及含量測定。三、儀器可見-紫外分光光度計。其應用波長范圍為200～400nm的紫外光區、400～850nm的可見光區。主要由輻射源（光源）、色散系統、檢測系統、吸收池、數據處理機、自動記錄器及顯示器等部件組成。本儀器是根據相對測量的原理工作的，即先選定某一溶劑（或空氣、試樣）作為標准（空白或稱參比）溶液，並認為它的透光率為100％（或吸收度為0），而被測的試樣透光率（或吸收度）是相對於標准溶液而言，實際上就是由出射狹縫射出的單色光，分別通過被測試樣和標准溶液，這兩個光能量之比值，就是在一定波長下對於被測試樣的透光率（或吸收度）。本儀器可精密測定具有芳香環或共軛雙鍵結構的有機化合物、有色物質或在適當條件下能與某些試劑作用生成有色物的物質。使用前應校正測定波長並按儀器說明書進行操作。四、儀器的校正1.波長的准確度試驗以儀器顯示的波長數值與單色光的實際波長值之間誤差表示，應在±1.0nm范圍內。可用儀器中氘燈的486.02nm與656.10nm譜線進行校正。2.吸收度的准確度試驗3.雜散光的試驗4.波長重現性試驗5.解析度試驗五、測定方法1.對照品比較法（1）按各品種項下的方法，分別配製供試品溶液和對照品溶液，對照品溶液中所含被測成分的量應為供試品溶液中被測成分標示量的100±10%，所用溶劑也應完全一致，在規定的波長測定供試品溶液和對照品溶液的吸收度後，按下式計算含量，即得。（2）計算式A樣×G對/稀釋倍數×100×1含量（%）=————————————--×100%A對×G樣/稀釋倍數×100×12.吸收系數法（1）按各品種項下的方法配製供試品溶液，在規定的波長處測定其吸收度，再以該品種在規定條件下的吸收系數計算含量。用本法測定時，應注意儀器的校正和檢定。（2）計算式A樣含量（%）=——————————————-×100%G樣/稀釋倍數×(E1％1cm)對×100×13.計算分光光度法採用計算分光光度法應慎重。本法有多種，使用時均應按各品種項下規定的方法進行。當吸收度處在吸收曲線的陡然上升或下降的部位測定時，波長的微小變化可能對測定結果造成顯著影響，故對照品和供試品測試條件應盡可能一致。若測定時不用對照品，如維生素A測定法，則應在測定時對儀器作仔細的校正和檢定。六、注意事項1.空白溶液與供試品溶液必須澄清，不得有渾濁。如有渾濁，應預先過濾，並棄去初濾液。2.測定時，除另有規定外，應以配製供試品溶液的同瓶溶劑為空白對照，採用1cm的石英吸收池。3.在規定的吸收峰波長±2nm以內測試幾個點的吸收度，以核對供試品的吸收峰波長位置是否正確，除另有規定外，吸收峰波長應在該品種項下規定的波長±2nm以內；否則應考慮該試樣的真偽、純度以及儀器波長的准確度，並以吸收度最大的波長作為測定波長。4.一般供試品溶液的吸收度讀數，以在0.3～0.7之間的誤差較小。5.吸收池應選擇配對，否則要引入測定誤差。

② 紫外可見分光光度法，用吸收系數法定量，公式是什麼

A=ECL C=A/EL

A為吸收度；T為透光率；E為吸收系數，採用的表示方法是（E1％1cm），其物理意義為當溶液濃度為1%（g/ml），液層厚度為1cm時的吸收度數值；C為100ml溶液中所含被測物質的重量（按乾燥品或無水物計算），g；L為液層厚度，cm。

在給定波長，溶劑和溫度等條件下，吸光物質在單位濃度，單位液層厚度時的吸收度稱為吸收系數。

根據比爾定律，吸光度A與吸光物質的濃度c和吸收池光程長b的乘積成正比。當c的單位為g/L，b的單位為cm時，則A=abc，比例系數a稱為吸收系數，單位為L/g.cm-1；當c的單位為mol/L，b的單位為cm時，則A=εbc，比例系數ε稱為摩爾吸收系數，單位為L/mol.cm-1，數值上ε等於a與吸光物質的摩爾質量的乘積。

它的物理意義是：當吸光物質的濃度為1mol/L，吸收池厚為1cm，以一定波長的光通過時，所引起的吸光度值A。ε值取決於入射光的波長和吸光物質的吸光特性，亦受溶劑和溫度的影響。顯然，顯色反應產物的ε值愈大，基於該顯色反應的光度測定法的靈敏度就愈高。

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紫外分光光度法是根據物質分子對波長為200nm-400nm這一范圍的電磁波的吸收特性所建立起來的一種定性、定量和結構分析方法。操作簡單、准確度高、重視性好。波長長（頻率小）的光線能量小，波長短（頻率大）的光線能量大。分光光度測定是關於物質分子對不同波長和特定波長處的輻射吸收程度的測量。

吸收系數可由光度法測量。光度法是利用物質對光吸收的特徵及吸收的程度而進行定性、定量分析的一類分析方法。根據測定時所用的光源不同，分光光度法可分為可見先分光光度法、紫外先分光光度法及紅外光譜法等。

分光光度法靈敏度高，特別適用於微量組分的測定。目前對微量組分的測定已能達到1～10μg/L的數量級，若事先經分離、富集，可測定含量更少的物質。分光光度法測量的相對誤差一般為2～5%，精密的儀器可減至1～2%，完全能滿足測定微量組分的要求。