革蘭染色的方法步驟及意義

Ⅰ 革蘭染色原理步驟和結果意義是什麼

革蘭氏染色法一般包括初染、媒染、脫色、復染等四個步驟。結果：革蘭氏陽性菌呈藍紫色，革蘭氏陰性菌呈紅色。

革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌在化學組成和生理性質上有很多差別，染色反應不一樣。現在一般認為革蘭氏陽性菌體內含有特殊的核蛋白質鎂鹽與多糖的復合物。

它與碘和結晶紫的復合物結合很牢，不易脫色，陰性菌復合物結合程度底，吸附染料差，易脫色，這是染色反應的主要依據。

(1)革蘭染色的方法步驟及意義擴展閱讀

細菌對於革蘭氏染色的不同反應，是由於它們細胞壁的成分和結構不同而造成的。革蘭氏陽性細菌的細胞壁主要是由膚聚糖形成的網狀結構組成的，在染色過程中，當用乙醇處理時，由於脫水而引起網狀結構中的孔徑變小，通透性降低，使結晶紫一碘復合物被保留在細胞內而不易脫色。

因此，呈現藍紫色；革蘭氏陰性細菌的細胞壁中膚聚糖含量低，而脂類物質含量高，當用乙醇處理時，脂類物質溶解，細胞壁的通透性增加，使結晶紫一碘復合物易被乙醇抽出而脫色，然後又被染上了復染液（番紅）的顏色，因此呈現紅色。

Ⅱ 簡述革蘭氏染色的操作步驟

革蘭氏染色法一般包括初染、媒染、脫色、復染等四個步驟，具體操作方法是：

1）塗片固定。

2）草酸銨結晶紫染1分鍾。

3）蒸餾水沖洗。

4）加碘液覆蓋塗面染約1分鍾。

5）水洗，用吸水紙吸去水分。

6）加95%酒精數滴，並輕輕搖動進行脫色，20秒後水洗，吸去水分。

7）蕃紅染色液（稀）染1分鍾後，蒸餾水沖洗。乾燥，鏡檢。

(2)革蘭染色的方法步驟及意義擴展閱讀

革蘭氏染色法的意義就在於鑒別細菌，把眾多的細菌分為兩大類，革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌。

在治療上，大多數革蘭氏陽性菌都對青黴素敏感（結核桿菌對青黴素不敏感）：大多數化膿性球菌都屬於革蘭氏陽性菌，它們能產生外毒素使人致病，可以選擇青黴素族，頭孢曲松鈉等。

革蘭氏陰性菌，大多數腸道菌多屬於革蘭氏陰性菌，它們產生內毒素，靠內毒素使人致病。而革蘭氏陰性菌則對青黴素不敏感，可以選擇氟喹諾酮類葯物如諾氟沙星，左氧氟沙星等，也可以選擇大環內酯類比如克拉黴素、羅紅黴素等。所以首先區分病原菌是革蘭氏陽性菌還是陰性菌，在選擇抗生素方面意義重大。

Ⅲ 革蘭染色的實驗步驟

革蘭氏染色法一般包括初染、媒染、脫色、復染等四個步驟，具體操作方法是：

1、塗片固定。

2、草酸銨結晶紫染1分鍾。

3、蒸餾水沖洗。

4、加碘液覆蓋塗面染約1分鍾。

5、水洗，用吸水紙吸去水分。

6、加95%酒精數滴，並輕輕搖動進行脫色，20秒後水洗，吸去水分。

7、蕃紅染色液（稀）染1分鍾後，蒸餾水沖洗。乾燥，鏡檢。

(3)革蘭染色的方法步驟及意義擴展閱讀：

革蘭染色反應的原理：

革蘭染色反應是細菌分類和鑒定的重要性狀。它是1884年由丹麥醫師Gram創立的。

革蘭染色法（Gram stain）不僅能觀察到細菌的形態，而且還可將所有細菌區分為兩大類：染色反應呈藍紫色的稱為革蘭氏陽性細菌，用G+表示；染色反應呈紅色（復染顏色）的稱為革蘭氏陰性細菌，用G-表示。

細菌對革蘭氏染色的不同反應，是由於它們細胞壁的成分和結構不同而造成的。

革蘭氏陽性細菌的細胞壁主要是由肽聚糖形成的網狀結構組成的，在染色過程中，當用乙醇處理時，由於脫水而引起網狀結構中的孔徑變小，通透性降低，使結晶紫-碘復合物被保留在細胞內而不易脫色，因此，呈現藍紫色。

革蘭氏陰性細菌的細胞壁中肽聚糖含量低，而脂類物質含量高，當用乙醇處理時，脂類物質溶解，細胞壁的通透性增加，使結晶紫-碘復合物易被乙醇抽出而脫色，然後又被染上了復染液（番紅）的顏色，因此呈現紅色。

Ⅳ 革蘭氏染色的步驟和原理

原理：革蘭氏染色法可將所有的細菌區分為革蘭氏陽性菌（G+）和革蘭氏陰性菌（G-）兩大類，是細菌學上最常用的鑒別染色法。該染色法之所以能將細菌分為G+菌和G-菌，是因為一般認為革蘭氏染色是基於細菌細胞壁特殊化學組分進行染色的。

步驟：

(一)塗片固定

在干凈的載玻片中央滴加一滴蒸餾水，用接種環進行無菌操作，挑取培養物少許，置載玻片的水滴中，與水混合做成菌懸液並塗布成直徑約1cm的薄層。

(二)染色

在固定過的塗片菌膜上滴加草酸銨結晶紫染液，染色液應完全覆蓋整個菌膜，染色1min。

(三)水洗

染色到一定的時間，拿住玻片使之成450角，用細小的水流把多餘的染料沖洗掉，被菌體吸附的染料則保留。

(四)媒染

加碘液覆蓋塗面染1 min。在媒染處理時，媒染劑與染料形成不溶性的化合物，可增加染料和細菌的親和力。

(五)水洗，用吸水紙吸去水分

用細小的水流緩慢沖洗塗片上的染色液，用吸水紙吸干。

(六)脫色

加95%酒精數滴，並輕輕搖動進行脫色， 20 s~30 s後再進行水洗，吸去水分。

(七)復染

蕃紅染色液染色10 s後， 自來水沖洗。

(八)乾燥，鏡檢

染色的結果，革蘭氏正反應菌體都呈紫色，負反應菌體都呈紅色。

(4)革蘭染色的方法步驟及意義擴展閱讀

標本乾燥後即進行固定，固定的目的有三個：

(1)殺死微生物，固定細胞結構。

(2)保證菌體能更牢固的粘附在載玻片上，防止標本水洗時被水沖洗掉。

(3)改變染料對細胞的通透性，因為死的原生質比活的原生質易於染色。

Ⅳ 簡述革蘭氏染色的步驟和結果

塗片固定，草酸銨結晶紫染1分鍾，蒸餾水沖洗，加碘液覆蓋塗面染約1分鍾，水洗，用吸水紙吸去水分，加95%酒精數滴，並輕輕搖動進行脫色，20秒後水洗，吸去水分，蕃紅染色液（稀）染1分鍾後，蒸餾水沖洗。乾燥，鏡檢。

染色結果：革蘭氏陽性菌呈藍紫色，革蘭氏陰性菌呈紅色。

(5)革蘭染色的方法步驟及意義擴展閱讀

臨床意義

其重要的臨床意義在於：

1、鑒別細菌；

2、選擇葯物；

3、與致病性有關：革蘭氏陽性菌能產生外毒素，革蘭氏陰性菌能產生內毒素；而內毒素主要是指革蘭氏陰性菌胞壁成分中的脂多糖，兩者的致病作用不同。

可能誤差

在實驗中經常會出現假陽性和假陰性的結果，假陽性主要是由於脫色不完全，可能是由於塗片過厚，或者是結晶紫染色過度，導致脫色不完全。

假陰性可能是因為細胞固定過度，造成細胞壁通透性的改變，而出現假陰性結果；另外，細胞培養時間太長，可能已經有部分細胞發生死亡或者自溶，也導致細胞壁通透性的改變而出現假陰性結果。

Ⅵ 革蘭染色法的步驟、結果及其臨床意義分別是什麼

一般包括初染、媒染、脫色、復染等四個步驟，具體操作方法是：1）塗片固定。2）草酸銨結晶紫染1分鍾。3）自來水沖洗。4）加碘液覆蓋塗面染約1分鍾。5）水洗，用吸水紙吸去水分。6）加95%酒精數滴，並輕輕搖動進行脫色，20秒後水洗，吸去水分。7）蕃紅染色液（稀）染1分鍾後，自來水沖洗。乾燥，鏡檢。
具體試驗 流程
1、 取載玻片用紗布擦乾，載玻片的一面用marker筆畫一個小圈（用來大致確定菌液滴的位置）。塗菌的部位在火焰上烤一下，除去油脂。 2、 塗片：液體培養基：左手持菌液試管，在酒精燈火焰附近5cm左右打開管蓋；右手持接種環在火焰中燒灼滅菌，等冷卻後從試管中沾取菌液一環，在潔凈無脂的載玻片上塗直徑2mm左右的塗膜，最後將接種環在火焰上燒灼滅菌。固體培養基：先在載玻片上滴一滴無菌水，再用接種環取少量菌體，塗在載玻片上，使其薄而均勻。 3、 晾乾：讓塗片在空氣中自然乾燥。 4、 固定：讓菌膜朝上，通過火焰2-3次固定（以不燙手為宜）。 5、 染色：將固定過的塗片放報紙上，滴加草酸銨結晶紫液，染1min。 6、 水洗：用水緩慢沖洗塗片上的染色液，用吸水紙吸干。簡單染色結束可觀察細胞形態。 7、 媒染：滴加1滴碘液，染1min，水洗。 8、 脫色：吸去殘留水，連續滴加95%乙醇脫色20-30s至流出液無紫色，立即水洗。 9、 復染：滴加蕃紅復染3-5min，水洗。至此，革蘭氏染色結束。

結果：革蘭氏陽性菌呈藍紫色，革蘭氏陰性菌呈紅色。

其重要的臨床意義在於：1.鑒別細菌 2.選擇葯物 3.與致病性有關：革蘭氏陽性菌能產生外毒素，革蘭氏陰性菌能產生內毒素；而內毒素主要是指革蘭氏陰性菌胞壁成分中的脂多糖，兩者的致病作用不同。