請簡述革蘭氏染色的方法和步驟

『壹』 革蘭氏染色的步驟和原理

革蘭氏染色的步驟和原理如下:

步驟:

1、首先在載玻片上滴一小滴蒸餾水，用滾如灼燒過的接種針挑取少量細菌，置載玻片的水滴中與水混合並塗抹開，注意塗抹要均勻平坦，塗抹後直徑約為1 cm的薄層。

2、固定。將載玻片在火焰上方固定。

3、染色。加路哥式碘液大概一滴，作用1 min後用水沖洗，注意流水不要直接往薄層上沖，用過濾紙吸干。

4、脫色。用95%乙醇脫色，一般脫色時間大概為30 s。

5、觀察。

乾燥後，用油鏡鏡檢觀察，並做好記錄。

原理：染色後細菌與環境形成鮮明對比，可以清楚地觀察到細菌的形態、排列及某些結構特徵，而用以分類鑒大宏啟定。

『貳』 簡述革蘭氏染色的步驟和結果

塗片固定，草酸銨結晶紫染1分鍾，蒸餾水沖洗，加碘液覆蓋塗面染約1分鍾，水洗，用吸水紙吸去水分，加95%酒精數滴，並輕輕搖動進行脫色，20秒後水洗，吸去水分，蕃紅染色液（稀）染1分鍾後，蒸餾水沖洗。乾燥，鏡檢。

染色結果：革蘭氏陽性菌呈藍紫色，革蘭氏陰性菌呈紅色。

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臨床意義

其重要的臨床意義在於：

1、鑒別細菌；

2、選擇葯物；

3、與致病性有關：革蘭氏陽性菌能產生外毒素，革蘭氏陰性菌能產生內毒素；而內毒素主要是指革蘭氏陰性菌胞壁成分中的脂多糖，兩者的致病作用不同。

可能誤差

在實驗中經常會出現假陽性和假陰性的結果，假陽性主要是由於脫色不完全，可能是由於塗片過厚，或者是結晶紫染色過度，導致脫色不完全。

假陰性可能是因為細胞固定過度，造成細胞壁通透性的改變，而出現假陰性結果；另外，細胞培養時間太長，可能已經有部分細胞發生死亡或者自溶，也導致細胞壁通透性的改變而出現假陰性結果。

『叄』 簡述革蘭氏染色的操作步驟

革蘭氏染色法一般包括初染、媒染、脫色、復染等四個步驟，具體操作方法是：

1）塗片固定。

2）草酸銨結晶紫染1分鍾。

3）蒸餾水沖洗。

4）加碘液覆蓋塗面染約1分鍾。

5）水洗，用吸水紙吸去水分。

6）加95%酒精數滴，並輕輕搖動進行脫色，20秒後水洗，吸去水分。

7）蕃紅染色液（稀）染1分鍾後，蒸餾水沖洗。乾燥，鏡檢。

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革蘭氏染色法的意義就在於鑒別細菌，把眾多的細菌分為兩大類，革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌。

在治療上，大多數革蘭氏陽性菌都對青黴素敏感（結核桿菌對青黴素不敏感）：大多數化膿性球菌都屬於革蘭氏陽性菌，它們能產生外毒素使人致病，可以選擇青黴素族，頭孢曲松鈉等。

革蘭氏陰性菌，大多數腸道菌多屬於革蘭氏陰性菌，它們產生內毒素，靠內毒素使人致病。而革蘭氏陰性菌則對青黴素不敏感，可以選擇氟喹諾酮類葯物如諾氟沙星，左氧氟沙星等，也可以選擇大環內酯類比如克拉黴素、羅紅黴素等。所以首先區分病原菌是革蘭氏陽性菌還是陰性菌，在選擇抗生素方面意義重大。

『肆』 「革蘭氏染色」的操作步驟是什麼

革蘭氏染色法具體操作步驟：

1. 塗片固定。

2. 草酸銨結晶紫染1分鍾。

3. 純化水沖洗。

4. 加碘液覆蓋塗面染1分鍾。

5. 水洗，用吸水紙吸去水分。

6. 加95%酒精數滴，並輕輕搖動進行脫色，30秒後水洗，吸去水分。

7. 番紅染色液（稀）染10秒鍾後，純化水沖洗。乾燥，鏡檢。