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沉水植物附著細菌數量測量方法

發布時間:2023-07-16 22:38:11

如何對土壤中細菌、放線菌及黴菌數量進行測定,要求設計實驗方案!求指點,謝謝啦!

【實驗內容及步驟】
一、分離
1. 制備土壤懸液及系列稀釋液
稱取土壤1g,放入99mL無菌水的三角瓶中,振盪10min,即為稀釋10-2的土壤懸液。另取裝有無菌試管5支,用記號筆編上10-3、10-4、10-5、10-6 、10-7 。在每隻試管中用無菌吸管加入4.5ml無菌水。取已稀釋成10-2的土壤液,振盪後靜止0.5min,用無菌吸管吸取0.5mL土壤懸液加入10-3的無菌水的試管中,並在試管內輕輕吹吸數次,使之充分混勻,即成10-3土壤稀釋液。同法依次連續稀釋至10-4、10-5、10-6、10-7土壤懸液。
2. 倒平板
將已經配製好的牛肉膏蛋白腖培養基、高氏一號培養基、土豆培養基在電熱爐上熔化。在無菌工作台的酒精燈旁,將培養基倒入培養皿中,加蓋後輕輕搖動使其在培養基上均勻鋪開,平置於桌面上,待其凝固後即為平板,注意保證無菌操作。
3. 塗布法分離各類微生物
將0.2ml菌懸液滴在平板表面中央位置,右手拿無菌塗布器平放在平板表面,將菌懸液先沿一條子線輕輕的來回推動,是之均勻分布,然後改變方向沿另一直線來回推動,平板邊緣可改變方向用塗布器再塗布幾次。
4. 培養(incubation)
28~30C, 24~48hr
5. 觀察記錄結果、記數(counting plates):細菌數量=數出的菌落數/稀釋度。例如,10-5稀釋度時菌落數為125個,則細菌數量=125/10-5=1.25*107個/ml。

這個是大學的實驗,用的方法是稀釋塗平板計數。

Ⅱ 如何測物品上的細菌數量我是高中生方法盡可能簡單的闡述 ~

一。使用細菌總數測試片,只需要購買細菌總數測試片,再按要求使用,有說明書。
二。紅細胞計數法
首先要了解這個方法的原理。把N個紅細胞與細菌均勻混合,再數出一小塊區域內的紅細胞數n和細菌數m。因為細胞已經均均勻混合,所以,局部的細胞數比和整體的細胞數比是接近相同的。即 n/m=N/M (n為局部紅細胞數, N為總紅細胞數,m為局部細菌數,M為總細菌數)n,m已數出。N又已知。所以總細菌數N就可以算出來。再取幾個局部,算平均值,就能得到較精確的細菌數目。
如果這樣做,只要數出一小塊區域內的細菌數就可以知道總細菌數。如果不加紅細胞,一個一個數,用要數到何年何月啊!細菌可是對數增長。加入紅細胞的作用就像比例尺一樣,地圖上總有1:XXX的比例尺,你在顯微鏡的一個是視野里看到的紅細胞數目就像地圖上你測得的距離,數清一個是視野的菌數後,乘以相應分散度就可以了,分散度時用紅細胞算的,具體的教材上應該有。不用也可以,不過要換成相應大小別的東西代替,總之用光學顯微鏡差菌數,這是不可缺少的。

這里運用了樣方法,就是在若干樣方中計數全部個體,然後將其平均數推廣,來估計種群總體數量的方法。樣方法相關知識:
①樣 方: 樣方也叫樣本,從研究對象的總體中抽取出來的部分個體的集合,叫做樣方。

②隨機取樣: 在抽樣時如果總體中每一個個體被抽選的機會均等,且每一個個體被選與其他個體間無任何牽連,那麼,這種既滿足隨機性,又滿足獨立性的抽樣,就叫做隨機取樣(或叫做簡單隨機取樣)。隨機取樣不允許摻入任何主觀性,否則,就難以避免調查人員想獲得調查屬性的心理作用,往往使調查結果偏大。

③適用范圍:植物種群密度,昆蟲卵的密度 ,蚜蟲、跳蝻的密度,細菌數量測量等。
樣方法取樣方法
①點狀取樣法點狀取樣法中常用的為五點取樣法,如圖A,當調查的總體為非長條形時,可用此法取樣。在總體中按梅花形取5個樣方,每個樣方的長和寬要求一致。這種方法適用於調查植物個體分布比較均勻的情況。
②等距取樣法當調查的總體為長條形時,可用等距取樣法,如圖B,先將調查總體分成若乾等份,由抽樣比率決定距離或間隔,然後按這一相等的距離或間隔抽取樣方的方法,叫做等距取樣法。例如,長條形的總體為100 m長,如果要等距抽取10樣方,那麼抽樣的比率為1/10,抽樣距離為10 m,然後可再按需要在每10 m的前1 m內進行取樣,樣方大小要求一致。

樣方法的兩種邊角統計方式如下圖(紅色為需統計邊線)

樣方法具體步驟如下:

①確定調查對象;

②選取樣方:必須選擇一個該種群分布較均勻的地塊,使其具良好的代表性;

③計數:計數每個樣方內該種群數量;
樣方法的兩種邊角統計方式
④計算:取各樣方平均數。

Ⅲ 若要測定培養液中微生物的菌體數,若要測定其活菌數量,用什麼方法

(1)微生物生長繁殖所需的主要營養物質有碳源、水、氮源、無機鹽四類,培養基配製時,基本過程為計算、稱量、溶化、調pH、滅菌、倒平板五個步驟.
(2)若要測定培養液中微生物B的菌體數,可在顯微鏡下用血細胞計數板直接計數;若要測定其活菌數量,可選用稀釋塗布平板法進行計數.
(3)採用稀釋塗布平板法檢測水樣中的細菌含量,在塗布接種前,隨機取若干滅菌後的空平板先行培養一段時間,這樣做的目的是檢測培養基平板滅菌是否合格.
(4)三塊平板有兩塊平板長有菌落,說明含有菌株並可在培養基上生長;而其中一塊未見菌落,說明菌株死亡.因此,應在接種過程中接種環灼燒後未冷卻或未足夠冷卻,使菌株因溫度過高被殺死.
(5)纖維素酶是一種復合酶,一般認為它至少含有三種組分,即C 1 酶、C x 酶、葡萄糖苷酶,其中葡萄糖糖苷酶可將纖維二糖分解成葡萄糖;剛果紅可以與纖維素形成紅色復合物,當纖維素被纖維素酶分解後,紅色復合物無法形成,出現以纖維素分解菌為中心的透明圈,我們可以通過是否產生透明圈來篩選纖維素分解菌.
故答案為:
(1)氮源和無機鹽先調PH,後滅菌
(2)血細胞計數板稀釋塗布平板
(3)檢測培養基平板滅菌是否合格
(4)接種環溫度過高,菌被殺死
(5)纖維二糖紅透明圈

Ⅳ 我們有什麼辦法測量微生物生物量

1. 直接計數測定 根據微生物種類,有血球計數板和細菌計數板;或者用電子計數器計數
2. 比濁法 根據菌懸液的濃度在一定范圍內與光密度成正比,可以用分光光度計測OD值,用OD值表示樣品菌液濃度
3. 核酸計數法 熒光定量PCR技術
4. 活菌計數法 MPN和平板計數法
由於測定方法的限制,前幾種計數結果不太准確,目前應用廣泛的是第四種
對糞大腸菌群和光合細菌可用MPN,對其他微生物可用平板計數法

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