⑴ 培養基的配製
培養基的配製:
1、稱量和熬煮
按培養基配方逐一稱取去皮土豆。土豆切成小塊放入鍋中,加水1000ml,在加熱器上加熱至沸騰,維持20-30min,用可用2層紗布趁熱在量杯上過濾,濾渣棄取。
2、加熱溶解
把濾液放入鍋中,加入葡萄糖20g,瓊脂15~20g(提前搞碎),然後放在石棉網上,小火加熱,並用玻棒不斷攪拌,以防瓊脂糊底或溢出,待瓊脂完全溶解後,再補充水分至所需量。
3、分裝
按實訓要求,將配製的培養基分裝入試管或500ml三角瓶內。分裝時可用三角漏斗以免使培養基沾在管口或瓶口上造成污染。
4、加棉塞
培養基分裝完畢後,在試管口或三角燒瓶口上塞上棉塞(或泡沫塑料塞或試管帽等),以阻止外界微生物進入培養基內造成污染,並保證有良好的通氣性能。
5、包紮
加塞後,將全部試管用麻繩或橡皮筋捆好,再在棉塞外包一層牛皮紙,以防止滅菌時冷凝水潤濕棉塞,其外再用一道線繩或橡皮筋紮好,用記號筆註明培養基名稱、組別、配製日期。
培養基配製注意事項:
1、培養基經滅菌後,必須放在37C溫箱培養24h,無菌生長者方可使用。
2、PDA培養基一般不需要調pH。對於要調節pH的培養基,一般用pH試紙測定其pH。如果培養基偏酸或偏鹼時,可用lmol/LNaOH或lmol/LHCL溶液進行調節。
3、調節時應逐滴加入NaOH或HCl溶液,防止局部過酸或過鹼破壞培養基成分。
4、培養基在使用時也可以做成不含瓊脂的液體培養基,用於菌類的震盪培養。
5、培養基也可以加入氯黴素或土黴素,加入量為0.2g/L培養基,主要是為了抑制細菌的生長,減少干擾性。
(1)製作培養基的方法和步驟是擴展閱讀
培養基,是指供給微生物、植物或動物(或組織)生長繁殖的,由不同營養物質組合配製而成的營養基質。
一般都含有碳水化合物、含氮物質、無機鹽(包括微量元素)、維生素和水等幾大類物質。培養基既是提供細胞營養和促使細胞增殖的基礎物質,也是細胞生長和繁殖的生存環境。
培養基種類很多,根據配製原料的來源可分為自然培養基、合成培養基、半合成培養基。
根據物理狀態可分為固體培養基、液體培養基、半固體培養基;根據培養功能可分為基礎培養基、選擇培養基、加富培養基、鑒別培養基等。
根據使用范圍可分為細菌培養基、放線菌培養基、酵母菌培養基、真菌培養基等。培養基配成後一般需測試並調節pH,還須進行滅菌,通常有高溫滅菌和過濾滅菌。
培養基由於富含營養物質,易被污染或變質。配好後不宜久置,最好現配現用。