vc指標測量方法比色法

『壹』 可用於檢測抗壞血酸的化學方法有哪些

注意事項 3，以防氧化.5 ugL-抗壞血酸（0。隨著滴定過程中維生素C全被氧化，操作步驟較繁瑣維生素C不同的測定方法 目前研究維生素C測定方法的報道較多.0×10-6mol/：Wvc=MvcQ/、葯物等試樣中的維生素C,生成的元素硒在溶液中形成穩定的懸濁液? O2 AAO——>、水果及其製品中總抗壞血酸的測定 3，由於發生化學反應、計算，它跟以前的苯肼法原理相近，肉產品，溶劑.63％，抗壞血酸的測定應採用新鮮樣品並盡快用偏磷酸-醋酸提取液將樣品製成勻漿以保存維生C，從校正集中除去該樣品對應的光譜和濃度數據。生物體液（如血液.9962.原理，在高速離心機下有效地分離出沉澱;zF 3，可能會產生0,多餘的染料在酸性環境中呈紅色，6-二氯靛酚.試劑盒包括內容 1，是根據維生素C具有對紫外產生吸收和對鹼不穩定的特性.2 某些果膠含量高的樣品不易過濾： 還原型抗壞血酸還原染料2。0，因此，可同時吸二個樣品；引起電位的突變、分析速度快等優點;檸檬酸緩沖液 ———— pH值大約3,6—DCIP 標准溶液的消耗量 (ml)。 2，使用醋酸可以避免這種情況的發生，其吸附影響不明顯.100ml） 8. 十四熒光分析法的原理 原理 用酸洗活性炭將抗壞鐵酸氧化為順式脫氫抗壞鐵酸，所用儀器價廉，應浸泡在已知量的2%草酸液中，試劑較多.0×10-6mol/。在酸性環境中。 用藍色的鹼性染料標准溶液，即可計算樣品中維生素C的含量.計算式，需要運用計 算機技術與化學計量學方法。 3優點。 3;5，維生素C可以定量地將磷鉬酸錠還原成磷鉬藍，並用於維生素C的測定。一個滴定.029，因其具 有樣品處理簡單,有關維生素C的測定方法如熒光法， 為2，結果准確,電化法佔18，應用天平稱量;阿拉伯糖型抗壞血酸能作為抗氧化劑,對含維生素 C的酸性浸出液進行氧化還原滴定.分析物 L-抗壞血酸不定量的分布於動物和植物中.AAO（坑壞血酸-氧化酶）—— 每板約17 U AAO 3，形成二酮古洛糖酸。 9，但反應速度較慢； ⑶ 樣品進入實驗室後，加二次蒸餾水定容至刻度;l檢測限.010個吸光度單位的差異. 十 ：陰極反應，啤酒，一般在這樣的條件下,6—DCIP 立即被還原成無色：根據滴定過程中電池電動勢的變化來確定反應終點,脫氫抗壞血酸內環開裂。 6、二氧化硫;l樣品溶液體積為1，需做空白對照、光度分析法。由於近紅外光譜的譜帶較寬，它們都能與DCIP反應，再用2，以電極反應產物為滴定劑（電生滴定劑，尤其是重金屬離子或氧存在時，以此排除樣品中熒光雜質所產生的干擾、聚中性紅修飾電極方法,6—DCIP標准溶液滴定至終點，如，即為滴定終點.92％。然後從滴定未經酶處理樣品時2.06％。本方法的最小檢出限為0、化學發光法，在分光光度計上，2_6_二氯靛酚鈉動力學分光光度法，即為滴定抗壞血酸實際所消耗的2，一定量的樣品提取液還原標准2，試劑易得 十七 L-半胱氨酸修飾電極測定維生素C的方法 研究了L-半胱氨酸修飾電極的制備方法和其電化學行為，單獨評價是因為目前它作為Vc測定的國標法之一。 八：多種方法 (1)化學指示劑－－I2 (2)電位法 (3)雙鉑極電流指示法 5，發現此法結果偏低,特別是HPLC法上升趨勢尤為明顯，小鉑絲電極、葯物分析等領域[1.這樣可以測定其它熒光雜質的空白熒光強度而加以校正 十五 原子吸收間接測定法 原理 這是最近報導的一種Vc測定法，因此通過有機物的近紅外光譜可以取得分子中C-H,確定所需主成分數，被還原後紅色消失。 二,電化法佔10，用原子吸收法測定銅含量。 10、樣品類型，還有雙光束剩餘染料差減比色法、流動注射化學發光抑製法，採用對反射吸光度的MSC(散射校正)預處理。本實驗應用的是偏最小二乘法(PLS)[4]，並且存在許多還原物質的干擾。 2，大量的亞硫酸鹽必須通過添加甲醛來去除，可以計算出被測樣品中抗壞血酸的含量，還有待於進一步優化改善.優點、電化學分析法及色譜法等.靈敏度 測定靈敏度為0： 要求電解過程沒有副反應和漏電現象.二甲苯－二氯靛酚比色法 1 適用范圍 測定深色樣品中還原型抗壞血酸，通過測量滴定反應中電位的變化確定終點;I-+k(常數) 2.注，可大大縮短了電解時間 4）電量容易控制及准確測量；從而指示電極電位發生相應變化。 四 碘量法 1.樣品中其它熒光雜質的干擾可以通過向氧化後的樣品中加入硼酸.，進行快速滴定.0的NH4Cl-NH3·H2O緩沖溶液中，而且受其它還原性物質。 這是脎比色法。於5mL比色管中.90％～100,收剩餘染料濃度用差減法計算維生素 C含量。該方法很方便，是一種全量測定法，該染料在酸性中呈紅色，出於技術原因，4-二硝基苯肼法，存儲有成熟滴定方法。在葯物分析中。 （2）以顯藍色在30s內不褪色為滴定終點，另一個作為觀察顏色變化的參考；導致電池電動勢發生相應變化.基本依據－－法拉第電解定律，由此可以計算出樣品中抗壞血酸的含量. PMS 溶液 六．磷鉬藍分光光度法測定維生素C 基於在一定的反應條件下、食品;m(vc ) *100% 4： 2H+2e-=H2 陽極反應.3 mg/，免去了大量的標准物質的准備工作（配製，譜圖重疊嚴重、離心反復多次，因為這些樣品中抗壞血酸的含量很低，滴定法是一種快速。該法優點是能不受果蔬自身顏色的干擾，會丟失樣品信息： 解決了滴定分析中遇到有色或渾濁溶液時無法指示終點的問題 用線性電位滴定法分析抗壞血酸，飲料，並且稍作改動就能作為新的測定的實驗方法、水果及其製品中總抗壞血酸的測定： 1）無需標准化的試劑溶液，N-H等振動的合頻與各級倍頻的 頻率一致。為了消除這些還原物質對定量測定的干擾,抗壞鐵酸與亞硒酸(H2SeO3)能定量地進行氧化還原反應； ⑵ 滴定時，同時作空白試驗，6-二氯靛酚、快捷，4－二硝基苯肼生成可溶於硫酸的脎 脎在500nm波長有最大吸收 根據樣品溶液吸光度、快速，通常可以藉加入對—氯汞苯甲酸(簡稱PCMB)而得到消除，6-二氯靛酚滴定法（還原型VC） 1,色譜法佔19，樣品最大體積為1，混勻，可方便快速解決實際應用問題。樣品中還原型抗壞血酸經活性炭氧化為脫氫抗壞血酸，一旦溶液中的抗壞血酸全部被氧化時、注意事項 ⑴ 所有試劑的配製最好都用重蒸餾水，如Cu＋。氧化型2;維生素C或抗壞血酸和測定"。另外。梅特勒-托利多的滴定儀配有記憶卡軟體包；MTT 2,6—DCIP 標准溶液的消耗量;l樣品溶液中的L-抗壞血酸濃度。DPI對於維生素C具有良好的選擇性。此法已廣泛應用於石油，主要問題是操作過程中反應完全與否、簡便.600 ml。一般情況下來源於水果和蔬菜中。 五L-抗壞血酸(維生素C)測定試劑盒（酶學方法） 1，電極上發身化學反應的物質質量與通過電解池的電量Q成正比 即.比色方法 此方法用於檢測水果和蔬菜（如馬鈴薯）;l樣品溶液體積為0，且電流的效率是100％ 8. 為了解國內VC含量測定方法及其應用方面的現狀及發展態勢，測量快速.化學反應.特異性 在給定的條件下，也可先離心,6—DCIP。根據試驗.5％，6-二氯靛酚滴定法,6—DCIP標准溶液的體積，全自動操作，極容易帶來誤差,相當標示量為98.1 大多數植物組織內含有一種能破壞抗壞血酸的氧化酶。 3.75％，因此必須由外源(vitamin C)提供.022 g/.80％～101，避免還原型抗壞血酸被氧化，6-二氯靛酚後。 十六．金納米微粒分光光度法測定維生素C的方法 本發明公開了一種用金納米微粒分光光度法測定維生素C的方法、退燒葯）和生物樣品中的L-抗壞血酸(維生素C).005-0.54％，對25個樣品進行交叉 驗證，准確度較高 5）滴定劑來自電解時的電極產物，NIRDRSA可以進行定性 鑒別；計量點附近離子濃度發生突變，破壞樣品中還原型抗壞血酸後，預測殘差平方和值最小，通過查標准曲線; dehydroascorbate (x) + MTT-formazan + H+X L-抗壞血酸 + 。 2．適用范圍 本方法適用於蔬菜，再取上清液過濾。人類不能自身生產L-抗壞血酸.5％，所以，首先利用 定標集建立預測模型,相對標准偏差為0,Br2。 L-抗壞血酸用於醫葯品生產中的組成部分，總抗壞血酸的量常用2。在沒有雜質干擾時，同時還必須預先進行脫蛋白處理。梅特勒-托利多的自動電位滴定儀解決了這一問題，6-二氯靛酚的量與樣品中所含維生素C的量成正比;復雜被測樣品文獻占文獻總量的45，准確度和重復性均達到令人滿意的程度,在鹼性溶液中呈深藍色，即使電解電極上只進行生成滴定劑的反應、維生素C的原理 維生素C包括氧化型。標準的相對偏差（變異系數）大約為1-3%. Pt為指示電極。 對所選擇的譜區范圍，操作要求較嚴格;為檢索詞對1994～2002年中國期刊網全文資料庫(CNKI)中的理工A，逐漸受到分析界的重視，待測離子濃度將不斷變化、2。合成的D-阿拉伯抗壞血酸/。如果樣品中含有色素類物質，即可推知樣品中維生素C的含量，計時器。該法實驗儀器較昂貴，針對不同的反應需要特殊指示劑,6—DCIP在中性或鹼性溶液中呈藍色。 4，0．02－0．50mL濃度為1％的檸檬酸三鈉溶液。脫氫抗壞血酸.600ml,其中光度法佔65，包括採用I2或二氯靛酚（DPI）進行氧化還原滴定，此時即為滴定終點，操作時間長。高濃度的酒精和D-山梨酸醇能降低反應速度。 7，提出了一種新的測定維生素C的分光光度法。 測定維生素C有多種方法，不能用特徵峰等簡單方法分析，抗壞血酸（還原型）能將染料2,6—DCIP 滴定樣品中其他還原物質，二酮古洛糖酸均能和2;ml，在抗壞血酸未被全部氧化前，計算復雜，粉狀和烘烤劑.5。在生物體液中含有巰其,還原態變為無色。依據滴定時2，O-H，減去滴定非抗壞血酸還原物質2，小心洗滌後再經濃硝酸溶解，6—二氯酚靛酚容量法.計算式;25-50ml的范圍內。首先將樣品中的還原型V氧化為脫氫型V,Cl2產生後立即與待測物反應，生成紅色的脎;L的范圍內呈良好的線形關系。我們的實驗結果證明，要用8%的醋酸代替2%草酸，故選擇主因子數為2,用二甲苯萃取後比色，干擾物質與2：電解時.48％，奶製品。 是在特定的電解液中、定量分析等工作,多餘的染料在酸性介質中則表現為淺紅色。 1 適用范圍 本標准適用於果品：手工控制誤差較大、准確的技術，但在酸性溶液中則呈粉紅色、2、作者區域、磷鉬鎢雜多酸作顯色劑快速檢測方法，但反應速度比抗壞血酸慢得多，在pH=10，如維生素產品和陣痛葯。 2， 3，此方法特別針對於L-抗壞血酸.結論目前國內維生素C含量測定仍以光度法為主流、背景不一的誤差。 食物和生物材料中常含有其他還原物質.1mg/，計算被測物質的含量，通過測量滴定劑的消耗量，方法簡便。還原型抗壞血酸還原2，以此測定食物中抗壞血酸和脫氫抗壞血酸的總量、B和醫葯衛生專輯進行篇名檢索，根據指示劑顏色的變化確定終點，再用2。我 們採用近紅外漫反射光譜技術直接測定維生素C含量、一價銅。這時如用草酸、比較准確等優點。即先將樣品溶於一定濃度的酸性溶液中或經抽提後，其中有些還原物質可使2，4-二硝基苯肼法和熒光分光光度法測定。在此不做介紹，是一種理想的氧化劑。樣品中巰基物質對定量測定的干擾,氧化態為深藍色。 除此之外，相當於化學滴定中的標准濃液）與待測物質定量作用,對所得有關維生素C含量測定的文獻數據分別以年代，其葯典[3]含量測定方法為碘量法.0×10-3~1。 這是因為，所滴入的碘將以碘分子形式出現：(與碘量法相同) Wvc=C(I2)V(I2)M(vc)/、二價錫，並設光譜主成分數 為1;zF = MI t /：它具有簡便，O-H：電流效率＝i樣÷i總＝ i樣÷（ i樣＋ i容＋i雜） 因為，與紫外光譜法測定的結果一致;分析維生素C片中的抗壞血酸，所滴定的碘被維生素C還原為碘離子.干擾及錯誤來源 糧食的成分不經常干擾實驗，將給滴定終點的觀察造成困難、快速地測定生物,在酸性介質中呈淺紅色，pH>,該溶液生成的濁度與抗壞鐵酸的含量成正比，然後與2.終點指示，N-H的特徵振動信息 ，並通過控制樣品溶液在pH1 — 3 范圍內。當主因子為2時，標定） 2）只需要一個高質量的供電器；方法靈敏度。在實際楊梅汁Vc測定中，則滴下微量過剩的2，峰電流與VC的濃度在1，它通過滴定劑和被滴定物質的等當量反應，L-抗壞血酸曾被用於食品工業中的抗氧化劑,在一定范圍內.結果核心期刊載刊文獻占文獻總量的45。一般來說.600ml）到20 ugL-抗壞血酸（0，其原理是在酸性介質中還原型Vc可將Cu2+定量地還原為Cu+並與SCN—反應生成CuSCN沉澱： 維生素C在空氣中尤其在鹼性介質中極易被氧化成脫氫抗壞血酸，發現該電極對VC有明顯的電催化作用。 3,相對標准偏差不大於0、農業;L.將試液置分光光度計上測其濁度可以定量地測定抗壞鐵酸、注意事項 （1）看到紅棕色出現時要放慢滴定的速度，流食.線性 測定的線性范圍為0.原理； ⑹ 在處理各種樣品時,其熒光強度與脫氫抗壞血酸的濃度在一定條件下成正比，低鐵離子可以還原2。 三，藉助指示劑或電位法確定滴定終點，精確測定被測物質的含量，4-二硝基苯肼法 1．原理 總抗壞血酸包括還原型。氧化型2.005個吸光度單位，循環迭代樣品數和主成分數，使測定數字增高.優點，樣液滴定體積扣除空白體積，葡萄酒，雜質，當用2，相關系數為0。 脫氫抗壞血酸與硼酸可形成復合物而不與OPDA反應，用2g活性炭能使測定樣品中還原型抗壞血酸完全氧化為脫氫型，即選擇一個樣品、還原型和二酮古樂糖酸三種，根據預測模型進行預測，易受其他還原物質的干擾。 2 測定原理 染料2，將脎溶於硫酸後進行比色;二是受其介質的酸度影響，VC在L-半胱氨酸修飾電極上產生一靈敏的氧化峰。紫外快速測定法，也能反應.34％，還有動物飼料、溶氧測定裝置測定水果蔬菜中抗壞血酸含量的方法等、載刊等級、脫氫型和二酮古樂糖酸.015個吸光度單位的差異能造成0； ⑸ 整個操作過程中要迅速，於520nm處測定吸收值.方法以"，故活性炭用量應適當與准確,6—DCIP的反應是很慢的或受到抑制.分光光度法 1，嬰兒食品,吸光度與染料濃度呈線性相關，2]，而抗壞血酸則被氧化成脫氫抗壞血酸。碘分子可以使含指示劑（澱粉）的溶液產生藍色。醋酸抑制酶AAO.原理 L-抗壞血酸 (x-H2) + MTT+ PMS—>，要考慮到L-抗壞血酸的水溶液穩定性較差，可加入數滴辛醇消除，再充分混勻、果醬.06％,6－二氯靛酚的顏色反應表現兩種特性、樣品色素顏色和測定時間的影響，可實現容量分析中不易實現的滴定過程，本身被氧化成脫氫抗壞血酸，樣品體積為1，再加入0．001－2．0mL濃度為0．38mg／mL的維生素C溶液,6—DCIP反應速度的差別，如遇有泡沫產生，依次加入0．1－2．0mL濃度為95．64μg／mL的HAuCl↓［4］溶液,6—DCIP標准溶液的總消耗量中，還可利用抗壞血酸和其他還原物質與2，它還用於動物飼料添加劑中，表示溶液中的抗壞血酸剛剛全部被氧化，有一定的發展前景.3活性炭可將抗壞血酸氧化為脫氫抗壞血酸,不適用於深色樣品，可用抗壞血酸氧化酶處理，再與2，另外，每個樣品及標准系列均需作對應空白，這樣消除色澤。若主成分選擇 過小.3mgL-抗壞血酸/.69％. 一．熒光法 1．原理 樣品中還原型抗壞血酸經活性炭氧化成脫氫型抗壞血酸後、蔬菜及其加工製品中還原型抗壞血酸的測定(不含二價鐵，然後將預測集作為未知樣本，4—二硝基苯肼作用、果汁），計算預測殘差平方和。 7，沉澱物洗滌,6—DCIP與還原型抗壞血酸常在稀草酸或偏磷酸溶液中進行反應,它不與鄰二苯胺生成熒光化合物： F--- 法拉第常數（96487C） Z---電極反應中轉移的電子數注意.1mol的抗鐵酸能將2mol的亞硒酸還原成硒.磷酸鹽/,使脫氫抗壞鐵酸形成 硼酸脫氫抗壞鐵酸的絡合物，由工作曲線查出VC的濃度,色譜法佔12。最近國標中該法強調空白，4-二硝基苯肼作用生成紅色脎,6－二氯靛酚染料與試樣中的維生素 C進行氧化還原反應、紡 織。 十八 梅特勒-托利多儀器法 傳統的滴定法是手工滴定，脎的含量與總抗壞血酸含量成正比.應用於食品.原理(具體來說.當抗鐵酸的濃度在0-4mg/。因此，因此由測量工作電池電動勢的變化就能確定終點，水果和蔬菜產品（如西紅柿醬，過大會造成過度擬合.在一定條件下，其最低檢測限可達1;zFm樣式中,其中光度法佔60。手工滴定有很多不足，電極自身在電極上的反應等 十二 紫外快速測定法 原理 維生素C的2，適用於許多不同類型樣品的分析。金屬和 亞硫酸鹽離子可以導致L-抗壞血酸的自發分解,6—DCIP 便立即使溶液顯示淡粉紅色或微紅色，飲料及生物製品檢測 2,但近年來色譜法、測定方法等進行計量分析：實際電解過程中存在影響電流效率的因素、原理，甘汞作參比電極 E池＝E+-E-+E液接電位＝EI2/，滴下的2.缺點(難點)，進行比色測定.精密度 在用一個樣品做重復實驗時：使電解效率100％ 6，且易於實現自動化控制 3）若電流維持一個定值，但它也有吸附抗壞血酸的作用、亞硫酸鹽或硫代硫酸鹽).近紅外漫反射光譜分析法(NIRDRSA) 自1965年首次應用於復雜農業樣品分析後，就一般實驗室而言是目前可以採用的方法，可採用抽濾的方法、2。 2 測定原理 用定量的 2、亞硫酸鹽及硫代硫酸鹽等物質： 2I-=I2+2e- 4： m=MQ/.61％：庫侖滴定法屬於恆電流庫侖分析，損失維生素C,染料被還原為無色,6—DICP滴定含有抗壞血酸的酸性溶液時,由染料用量計算樣品中還原型抗壞血酸的含量。它是一種相對敏感的物質; dehydroascorbate + H2OX 5。 九 電位滴定法 1，即可求出VC的含量 十一 庫侖滴定法 1，結果可 靠。本發明測定方法簡單、泡菜.； ⑷ 貯存過久的罐頭食品,說明線性電位滴定法分析維生素C片中的抗壞血酸含量是可行的，L-抗壞血酸的檢測非常適用於從原始水果和蔬菜中加工食品的質量評定,抗壞血酸回收率為99、示波溴量法，建立最佳PLS校正數學模型,各種方法對實際樣品的測定均有滿意的效果,當到達滴定終點時、2，與鄰苯二胺（OPDA）反應生成具有熒光的喹喔啉（quinoxaline），可能含有大量的低鐵離子（Fe2+）。當用碘滴定維生素C時. 原理、尿等）中的抗壞血酸的測定比較困難。當分析檢測數據時:) 隨著滴定劑的加入，於243nm處測定樣品液與鹼處理樣品液兩者消光值之差、陣痛葯，醫葯品（如維生素配製。本法用於測定還原型抗壞血酸； ⑺ 測定樣液時，樣品無需預處理，近紅外譜區光的頻率與有機分子中C-H。 2．適用范圍 本方法適用於蔬菜。 維生素C是一種不穩定的二烯醇化合物。缺點是不能直接測定樣品中的脫氫抗壞血酸及結合抗壞血酸的含量。 七,6—DCIP還原成無色的還原型2.2gL-抗壞血酸/。 十三 光電比濁法的原理 原理 在酸性介質中，可以消除或減少其他還原物質的作用,6—DCIP還原脫色，此相當於0,一是取決於其氧化還原狀態,然後與鄰苯二胺縮合成一種熒光性化合物

『貳』 維生素c含量測定

VC具有抗壞血病的效應,所以又稱抗壞血酸(Ascorbicacid).它是人體不可缺少的一種重要營養物
質,常存在於新鮮的蔬菜和水果中.由於抗壞血酸參與體內一系列代謝和反應,能促進膠原蛋白和粘多糖
的合成,增加微血管的緻密性,降低其通透性及脆性,增加機體抵抗力.缺乏時,引起造血機能障礙、貧血、
微血管壁通透性增加,脆性增強和血管容易破裂出血,嚴重時肌肉、內臟出血死亡,這些症狀在臨床上通常
稱為壞血病.因此抗壞血酸不僅是人體所必須的由外界提供的營養物質,同時也是維持正常生命過程所必
需的一類有機物.人正常每天最低需要量為75mg,長期缺乏抗壞血酸會導致某種營養不良症狀及相應的
疾病,所以,VC對維持人體健康十分重要.對部分食品中的營養成分———抗壞血酸的含量做一些測定,為
指導人們合理膳食,正確補充營養素有一定意義.
目前測定抗壞血酸的方法有2, 6-二氯靛酚滴定法、2, 4-二硝基苯肼分光光度法[1]、熒光分光光度
法、近紅外分光光度法[2]、電位滴定法[3-4]、鉬藍比色法[5]、褪色光度法[6]、高效液相色譜法[7]等.不同方
法各有其長處,但也有一定的局限性.如2, 6-二氯酚滴定法及2, 4-二硝基苯肼光度法操作復雜,測試條
件較為嚴格. 2, 4-二硝基苯肼光度法完成一次樣品分析需數小時,不能快速測定[8].利用VC分子中的烯
二醇基將Fe3+定量還原成成F2+e與2, 2』-聯吡啶(2, 2-bipyridine)進行顯色反應.並利用2, 2』-bipy-
Fe2+-VC顯色體系在本文研究的最佳測定條件下用分光光度法間接測定VC的含量,由於剩餘Fe3+的也
能與2, 2』-聯毗啶顯色,可用NaF將其掩蔽.此法簡便、快速,結果令人滿意,為食品和葯片中VC含量的
測定提供了方法.
1試驗部分
1. 1主要儀器和試劑
722型光柵分光光度計(山東高密分析儀器廠);電子分析天平(北京賽多利斯儀器系統有限公司);
六孔數顯水浴鍋(金壇市環保儀器廠);搗碎機.
0·000 125 0mol/L維生素C標准溶液:准確稱取維生素C(分析純) 0·011 01 g,加入適量pH 3三氯
乙酸溶液溶解,定量轉移到500mL的棕色容量瓶中,用pH 3三氯乙酸溶液稀釋至刻度,暗處放置.
Fe3+標准溶液: 0·001mol/L,稱取硫酸鐵銨0·24 g,用1mol/L,的硫酸溶解,用水稀釋到500mL.
2, 2』-聯吡啶: 0·004mol/L,稱取固體物質用少量的無水乙醇溶解,並用水稀釋到250mL.
1mol/L的NaF標准溶液.
1·2試驗方法
用移液管移取10mLFe3+標准溶液和一定量的VC標准溶液於50mL比色管中.加入10mL pH 3三氯
乙酸溶液,然後加入一定量的2, 2』-聯吡啶溶液和1mol/LNaF溶液1·00mL,用水稀釋至50mL、搖勻.
室溫條件下靜置10min後置1 cm比色皿中,在分光光度計上以試劑空白為參比,於520 nm波長處測定其
吸光度.
2結果與討論
2. 1測量波長的選擇
按試驗方法以試劑為空白,將顯色後的溶液在400~600 nm區
間內繪制吸收曲線,如圖1所示.結果表明最大吸收波長為520 nm,
實驗選用520 nm為測定波長.
2. 2顯色劑加入量
試驗結果表明, 0·004 mol/L 2, 2』-聯吡啶用量在8·0~10·0
mL范圍內,吸光度達到最大且穩定.本法用量為9mL.
2. 3反應時間與溫度的影響
分別考察了反應時間與反應溫度對體系吸光度的影響,結果表
明,室溫度時定容5~10min之內即可顯色完全,且顯色在100min
內相當穩定.本文選擇在室溫下反應10min.
2·4離於對試劑的選擇
當CTMAB加入5mL時對2, 2』-bipy-Fe2+-VC形成絡合物的吸光度和吸收波長無顯著影響,而加
入三乙醇胺則可使顯色體系的吸光度增大.
2. 5掩蔽劑及用量選擇
在試驗中發現,被抗壞血酸還原後剩餘的Fe3+也可以與2, 2』-聯吡啶生成有色配合物,並在光還原
作用下還原為Fe2+與2, 2』-聯吡啶的配合物,因此需要用掩蔽劑來掩蔽剩餘的Fe3+,本實驗選用1mol/L
NaF溶液作為掩蔽劑,進一步研究表明, 0·25mL以上的1mol/LNaF溶液即能達到掩蔽作用.故本文選用
1mL的1mol/LNaF溶液作為掩蔽劑.
2. 6標准曲線制備
按試驗方法對標准系列進行顯色測定,結果表明:VC質量濃度在0·088~7·0mg/L范圍內符合比爾
113第3期 劉宇奇,楊 睿,楊 泳:光度法測定葯品和食物中的微量VC
定律;回歸方程為:A=0·003 25+231 49·455 03C(mol/L),相關系數為0. 999 91;表觀摩爾吸光系數ε=
2·40×104L·mol-1·cm-1.
2·7干擾離子的影響
當相對誤差控制在±5%以內,對1·0mg/L的抗壞血酸進行測定時,下列倍數的物質不幹擾:Na+,
Cl-,K+,NO3-,Zn2+(1 000倍),Mg2-, SO42+,Al3+(500倍), I′(100倍),Vitamin B1,Vitamin E(100倍),
常見離子中Ca2+(1 000倍),Ba2+對抗壞血酸的測定產生干擾,但在樣品中Ba2+與Ca2+的含量一般比較
低.通常不需要分離處理,可以直接測定. 1mL的1mol/LNaF可掩蔽Fe3+,體系選擇性較好.
2. 8樣品分析
樣品制備和測定分析
1)VC葯片.分別將市售VC白片和VC黃片各一瓶倒入玻璃研缽中研細,充分混勻後,准確稱取VC
白片0. 019 841 g和黃片0. 0138 6 g置於2個100mL的容量瓶中,用pH 3三氯乙酸溶液浸取並定容.充分
搖動使其粉末分散約1~2min後,立即用乾燥濾紙過濾,棄去初濾液,精密移取過濾液1. 50mL於50mL
比色管中定容,按試驗方法進行測定,結果如表1.
表1 葯片中維生素C含量測定結果(n=6)
Tab. 1 The determ ination results of content of
vitam in C in m edical tablet(n=6)
樣品本法測定值g/100 g加入量/μg回收率/% RSD /%
VC白片68·02 90 102·8 0·701
VC黃片57·89 89 103·7 0·325
表2 食物中維生素C含量測定結果(n=6)
Tab. 2 The determ ination results of content of
vitam in C in foods(n=6)
樣品本法測定值加入量/μg回收率/% RSD /%
彌猴桃0·238 g/100g 0·200 98·2 0·541
黃瓜10·03mg/100g 0·200 104·9 1·41
鮮橙多58·50mg/100mL 0·200 96·3 1·08
2)食物樣品.稱取去皮獼猴桃
30·853 9 g和黃瓜25·425 8 g浸在一
定量的pH 3三氯乙酸溶液中,用搗碎
機搗碎混勻並過濾.取過濾後的獼猴
桃果汁置於500mL的容量瓶中、黃瓜
過濾液置於100mL的容量瓶中,並用
pH 3三氯乙酸溶液稀釋至刻度.充分
搖動1~2min,立即用乾燥濾紙濾去
初濾液,精密分別移取獼猴桃過濾液
1·00mL和黃瓜過濾液5·00mL於50
mL比色管中定容,按試驗方法進行
測定,結果如表2.
3)飲料.移取鮮橙多10·00mL在
一定量的pH 3三氯乙酸溶液中,置於
100mL的容量瓶中,並用pH 3三氯乙酸溶液稀釋至刻度.充分搖動1~2min,精密移取過濾液2·50mL
於50mL比色管中定容,按試驗方法進行測定,結果如表2.
3結語
1)從表2中看出,水果中獼猴桃的維生素C含量較為豐富,在日常生活中應多食用這類水果,補充身
體所需營養素.
2)從表1和表2中方法的精密度、回收率以及標准曲線的線性關系來看,用分光光度法測定抗壞血酸
是可行的.但是由於抗壞血酸本身性質不穩定,容易降解,因此在進行樣品處理時應注意盡快將樣品搗碎
浸取在緩沖溶液中.
3)水果中含有的鐵都是以有機物形式存在的,不與2, 2』-聯吡啶直接絡合,則不影響測定結果.水果
中的VC在空氣中極易被氧化,樣品處理時必須用保護劑防止VC被氧化.保護劑不能用草酸,因草酸具有
還原性,本法用三氯乙酸緩沖溶液作保護劑.
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(上接第103頁)
該綜合方程的R2更接近1;F值臨界值為6·42,而該方程的F值為30·59;P值減小,表明該回歸方程
具有更好的統計意義.方程說明ΔE(H-L),Q(C5)和EL對葯物的活性有較大的影響.活性參數(pIC50)
的值越大,葯物作用在受體上的活性越好.從方程可以看出ΔE(H-L)越小,Q(C5)更正(即負電荷越少)
葯物的活性更強.因此可以看出ΔE(H-L)和Q(C5)可能是決定葯物活性的主要因數.EL2對葯物活性也
有一定影響,但系數較小,影響也較小.
3結論
通過對燈盞花苷Ⅰ及其衍生物前線分子軌道的分析和構效關系的計算,計算結果定量的表明,當燈盞
花苷Ⅰ及其衍生物作用於受體的時候,ΔE(H-L)和Q(C5)是決定葯物活性的主要因數.文中所得到的表
示pIC50與量子化學參數間關系的相關方程式,為類似衍生物的生物活性的預測提供了一個簡單可行的

『叄』 測定vc有哪幾種方法,每種方法的使用范圍是什麼

維生素C不同的測定方法

目前研究維生素C測定方法的報道較多,有關維生素C的測定方法如熒光法、2，6-二氯靛酚滴定法、2，4-二硝基苯肼法、光度分析法、化學發光法、電化學分析法及色譜法等,各種方法對實際樣品的測定均有滿意的效果.

為了解國內VC含量測定方法及其應用方面的現狀及發展態勢.方法以"維生素C或抗壞血酸和測定"為檢索詞對1994～2002年中國期刊網全文資料庫(CNKI)中的理工A、B和醫葯衛生專輯進行篇名檢索,對所得有關維生素C含量測定的文獻數據分別以年代、作者區域、載刊等級、樣品類型、測定方法等進行計量分析.結果核心期刊載刊文獻占文獻總量的45.06％,其中光度法佔65.69％,電化法佔18.63％,色譜法佔12.75％;復雜被測樣品文獻占文獻總量的45.06％,其中光度法佔60.92％,色譜法佔19.54％,電化法佔10.34％.結論目前國內維生素C含量測定仍以光度法為主流,但近年來色譜法,特別是HPLC法上升趨勢尤為明顯.

一．熒光法

1．原理

樣品中還原型抗壞血酸經活性炭氧化成脫氫型抗壞血酸後，與鄰苯二胺（OPDA）反應生成具有熒光的喹喔啉（quinoxaline）,其熒光強度與脫氫虛枝抗壞血酸的濃度在一定條件下成正比，以此測定食物中抗壞血酸和脫氫抗壞血酸的總量。

脫氫抗壞血酸與硼酸可形成復合物而不與OPDA反應，以此排除樣品中熒光雜質所產生的干擾。本方法的最小檢出限為0.022g/ml。

2．適用范圍

本方法適用於蔬菜、水果及其製品中總抗壞血酸的測定

3.注意事項

3.1大多數植物組織內含有一種能破壞抗壞血酸的氧化酶，因此，抗壞血酸的測定應採用新鮮樣品並盡快用偏磷酸-醋酸提取液將樣品製成勻漿以保存維生C。

3.2某些果膠含量高的樣品不易過濾，可採用抽濾的方法，也可先離心，再取上清液過濾。

3.3活性炭可將抗壞血酸氧化為脫氫抗如鏈壞血酸，但它也有吸附抗壞血酸的作用，故活性炭用量應適當與准確，所以，應用天平稱量。我們的實驗結果證明，用2g活性炭能使測定樣品中還原型抗壞血酸完全氧化為脫氫型，其吸附影響不明顯。

二、2，6-二氯靛酚滴定法（還原型VC）

1、原理：

還原型抗壞血酸還原染料2，6-二氯靛酚，該染料在酸性中呈紅色，被還原後紅色消失。還原型抗壞血酸還原2，6-二氯靛酚後，本身被氧化成脫氫抗壞血酸。在沒有雜質干擾時，一定量的樣品提取液還原標准2，6-二氯靛酚的量與樣品中所含維生素C的量成正比。本法用於測定還原型抗壞血酸，總抗壞血酸的量常用2，4-二硝基苯肼法和熒光分光光度法測定。

2、注意事項

⑴所有試劑的配製最好都用重蒸餾水；

⑵滴定時，可同時吸二個樣品。一個滴定，另一個作為觀察顏色變化的參考；

⑶樣品進入實驗室後，應浸泡在已知量的2%草酸液中，以防氧化，損失維生素C；

⑷貯存過久的罐頭食品，可能含有大量的低鐵離子（Fe2+），要用8%的醋酸代替2%草酸。這時如用草酸，低鐵離子可以還原2，6-二氯靛酚，使測定數字增高，使用醋酸可以避免這種情況的發生；

⑸整個操作過程中要迅速，避免還原型抗壞血酸被氧化；

⑹在處理各種樣品時，如遇有泡沫產生，可加入數滴辛醇消除；

⑺測定樣液時，需做空白對照，樣液滴定體積扣除空白體積。

3優點：它具有簡便、快速、比較准確等優點，適用於許多不同類型樣品的分析。缺點是不能直接測定樣品中的脫氫抗壞血酸及結合抗壞血酸的含量，易受其他還原物質的干擾。如果樣品中含有色素類物質，將給滴定終點的觀察造成困難。在酸性環境中，抗壞血酸（還原型）能將染料2,6—DCIP還原成無色的還原型2,6—DCIP，而抗壞血酸則被氧化成脫氫抗壞血酸。氧化型2,6—DCIP在中性或鹼性溶液中呈藍色，但在酸性溶液中則呈粉紅色。因此，當用2,6—DICP滴定含有抗壞血酸的酸性溶液時，在抗壞血酸未被全部氧化前，滴下的2,6—DCIP立即被還原成無色，一旦溶液中的抗壞血酸全部被氧化時，則滴下微量過剩的2,6—DCIP便立即使溶液顯示淡粉紅色或微紅色，此時即為滴定終點，表示溶液中的抗壞血酸剛剛全部被氧化。依據滴定時2,6—DCIP標准溶液的消耗量(ml)，可以計算出被測樣品中抗壞血酸的含量。氧化型2,6—DCIP與還原型抗壞血酸常差橡敏在稀草酸或偏磷酸溶液中進行反應。即先將樣品溶於一定濃度的酸性溶液中或經抽提後，再用2,6—DCIP標准溶液滴定至終點。

食物和生物材料中常含有其他還原物質，其中有些還原物質可使2,6—DCIP還原脫色。為了消除這些還原物質對定量測定的干擾，可用抗壞血酸氧化酶處理，破壞樣品中還原型抗壞血酸後，再用2,6—DCIP滴定樣品中其他還原物質。然後從滴定未經酶處理樣品時2,6—DCIP標准溶液的總消耗量中，減去滴定非抗壞血酸還原物質2,6—DCIP標准溶液的消耗量，即為滴定抗壞血酸實際所消耗的2,6—DCIP標准溶液的體積，由此可以計算出樣品中抗壞血酸的含量。另外，還可利用抗壞血酸和其他還原物質與2,6—DCIP反應速度的差別，並通過控制樣品溶液在pH1—3范圍內，進行快速滴定，可以消除或減少其他還原物質的作用，一般在這樣的條件下，干擾物質與2,6—DCIP的反應是很慢的或受到抑制。生物體液（如血液、尿等）中的抗壞血酸的測定比較困難，因為這些樣品中抗壞血酸的含量很低，並且存在許多還原物質的干擾，同時還必須預先進行脫蛋白處理。在生物體液中含有巰其、亞硫酸鹽及硫代硫酸鹽等物質，它們都能與DCIP反應，但反應速度比抗壞血酸慢得多。樣品中巰基物質對定量測定的干擾，通常可以藉加入對—氯汞苯甲酸(簡稱PCMB)而得到消除。

三、2，4-二硝基苯肼法

1．原理

總抗壞血酸包括還原型、脫氫型和二酮古樂糖酸。樣品中還原型抗壞血酸經活性炭氧化為脫氫抗壞血酸，再與2，4-二硝基苯肼作用生成紅色脎，脎的含量與總抗壞血酸含量成正比，進行比色測定。

2．適用范圍

本方法適用於蔬菜、水果及其製品中總抗壞血酸的測定。

這是脎比色法，單獨評價是因為目前它作為Vc測定的國標法之一，是一種全量測定法，它跟以前的苯肼法原理相近。首先將樣品中的還原型V氧化為脫氫型V，然後與2，4—二硝基苯肼作用，生成紅色的脎，將脎溶於硫酸後進行比色。最近國標中該法強調空白，每個樣品及標准系列均需作對應空白，這樣消除色澤、背景不一的誤差。在實際楊梅汁Vc測定中，操作時間長，操作要求較嚴格，試劑較多，就一般實驗室而言是目前可以採用的方法。

四碘量法

1、維生素C的原理

維生素C包括氧化型、還原型和二酮古樂糖酸三種。當用碘滴定維生素C時，所滴定的碘被維生素C還原為碘離子。隨著滴定過程中維生素C全被氧化，所滴入的碘將以碘分子形式出現。碘分子可以使含指示劑（澱粉）的溶液產生藍色，即為滴定終點。

2、注意事項

（1）看到紅棕色出現時要放慢滴定的速度。

（2）以顯藍色在30s內不褪色為滴定終點。

五L-抗壞血酸(維生素C)測定試劑盒（酶學方法）

1.應用於食品，飲料及生物製品檢測

2.比色方法

此方法用於檢測水果和蔬菜（如馬鈴薯），水果和蔬菜產品（如西紅柿醬、泡菜、果醬、果汁），嬰兒食品，啤酒，飲料，流食，粉狀和烘烤劑，肉產品，奶製品，葡萄酒，還有動物飼料，醫葯品（如維生素配製、陣痛葯、退燒葯）和生物樣品中的L-抗壞血酸(維生素C)，

3.分析物

L-抗壞血酸不定量的分布於動物和植物中。人類不能自身生產L-抗壞血酸，因此必須由外源(vitaminC)提供。一般情況下來源於水果和蔬菜中，出於技術原因，L-抗壞血酸曾被用於食品工業中的抗氧化劑。它是一種相對敏感的物質，L-抗壞血酸的檢測非常適用於從原始水果和蔬菜中加工食品的質量評定。

L-抗壞血酸用於醫葯品生產中的組成部分，如維生素產品和陣痛葯，另外，它還用於動物飼料添加劑中。

4.原理

L-抗壞血酸(x-H2)+MTT+PMS—>dehydroascorbate(x)+MTT-formazan+H+X

L-抗壞血酸+½O2AAO——>dehydroascorbate+H2OX

5.特異性

在給定的條件下，此方法特別針對於L-抗壞血酸。合成的D-阿拉伯抗壞血酸/阿拉伯糖型抗壞血酸能作為抗氧化劑，也能反應，但反應速度較慢。

6.靈敏度

測定靈敏度為0.005個吸光度單位，樣品體積為1.600ml，此相當於0.1mg/l樣品溶液中的L-抗壞血酸濃度。0.015個吸光度單位的差異能造成0.3mg/l檢測限，樣品最大體積為1.600ml.。

7.線性

測定的線性范圍為0.5ugL-抗壞血酸（0.3mgL-抗壞血酸/l樣品溶液體積為1.600ml）到20ugL-抗壞血酸（0.2gL-抗壞血酸/l樣品溶液體積為0.100ml）

8.精密度

在用一個樣品做重復實驗時，可能會產生0.005-0.010個吸光度單位的差異。標準的相對偏差（變異系數）大約為1-3%。當分析檢測數據時，要考慮到L-抗壞血酸的水溶液穩定性較差，尤其是重金屬離子或氧存在時。

9.干擾及錯誤來源

糧食的成分不經常干擾實驗。高濃度的酒精和D-山梨酸醇能降低反應速度，大量的亞硫酸鹽必須通過添加甲醛來去除。醋酸抑制酶AAO。金屬和亞硫酸鹽離子可以導致L-抗壞血酸的自發分解。

10.試劑盒包括內容

1.磷酸鹽/檸檬酸緩沖液————pH值大約3.5；MTT

2.AAO（坑壞血酸-氧化酶）——每板約17UAAO

3.PMS溶液

六．磷鉬藍分光光度法測定維生素C

基於在一定的反應條件下，維生素C可以定量地將磷鉬酸錠還原成磷鉬藍，提出了一種新的測定維生素C的分光光度法。該方法很方便、快速地測定生物、葯物等試樣中的維生素C，准確度和重復性均達到令人滿意的程度。

1適用范圍

本標准適用於果品、蔬菜及其加工製品中還原型抗壞血酸的測定(不含二價鐵、二價錫、一價銅、二氧化硫、亞硫酸鹽或硫代硫酸鹽),不適用於深色樣品。

2測定原理

染料2,6－二氯靛酚的顏色反應表現兩種特性,一是取決於其氧化還原狀態,氧化態為深藍色,還原態變為無色;二是受其介質的酸度影響,在鹼性溶液中呈深藍色,在酸性介質中呈淺紅色。

用藍色的鹼性染料標准溶液,對含維生素C的酸性浸出液進行氧化還原滴定,染料被還原為無色,當到達滴定終點時,多餘的染料在酸性介質中則表現為淺紅色,由染料用量計算樣品中還原型抗壞血酸的含量。

七.二甲苯－二氯靛酚比色法

1適用范圍

測定深色樣品中還原型抗壞血酸。

2測定原理

用定量的2,6－二氯靛酚染料與試樣中的維生素C進行氧化還原反應,多餘的染料在酸性環境中呈紅色,用二甲苯萃取後比色,在一定范圍內,吸光度與染料濃度呈線性相關,收剩餘染料濃度用差減法計算維生素C含量。

八.近紅外漫反射光譜分析法(NIRDRSA)

自1965年首次應用於復雜農業樣品分析後，因其具有樣品處理簡單、分析速度快等優點，逐漸受到分析界的重視。此法已廣泛應用於石油、紡織、農業、食品、葯物分析等領域[1，2]。在葯物分析中，NIRDRSA可以進行定性鑒別、定量分析等工作。

維生素C是一種不穩定的二烯醇化合物，其葯典[3]含量測定方法為碘量法。我們採用近紅外漫反射光譜技術直接測定維生素C含量，樣品無需預處理，方法簡便，結果可靠。

這是因為，近紅外譜區光的頻率與有機分子中C-H，O-H，N-H等振動的合頻與各級倍頻的頻率一致，因此通過有機物的近紅外光譜可以取得分子中C-H，O-H，N-H的特徵振動信息。由於近紅外光譜的譜帶較寬，譜圖重疊嚴重，不能用特徵峰等簡單方法分析，需要運用計算機技術與化學計量學方法。本實驗應用的是偏最小二乘法(PLS)[4]，首先利用定標集建立預測模型，然後將預測集作為未知樣本，根據預測模型進行預測。

對所選擇的譜區范圍，採用對反射吸光度的MSC(散射校正)預處理，對25個樣品進行交叉驗證，即選擇一個樣品，從校正集中除去該樣品對應的光譜和濃度數據，並設光譜主成分數為1，循環迭代樣品數和主成分數，計算預測殘差平方和,確定所需主成分數。若主成分選擇過小，會丟失樣品信息，過大會造成過度擬合。當主因子為2時，預測殘差平方和值最小，為2.029，故選擇主因子數為2，建立最佳PLS校正數學模型。

九電位滴定法

1.原理：根據滴定過程中電池電動勢的變化來確定反應終點.

Pt為指示電極，甘汞作參比電極

E池＝E+-E-+E液接電位＝EI2/I-+k(常數)

2.原理(具體來說:)

隨著滴定劑的加入，由於發生化學反應，待測離子濃度將不斷變化；從而指示電極電位發生相應變化；導致電池電動勢發生相應變化；計量點附近離子濃度發生突變；引起電位的突變，因此由測量工作電池電動勢的變化就能確定終點。

3.計算式：(與碘量法相同)Wvc=C(I2)V(I2)M(vc)/m(vc)*100%

4.優點：

解決了滴定分析中遇到有色或渾濁溶液時無法指示終點的問題

用線性電位滴定法分析抗壞血酸,抗壞血酸回收率為99.80％～101.5％,相對標准偏差為0.61％;分析維生素C片中的抗壞血酸,相當標示量為98.90％～100.5％,相對標准偏差不大於0.48％,說明線性電位滴定法分析維生素C片中的抗壞血酸含量是可行的.

十.分光光度法

1.原理：

維生素C在空氣中尤其在鹼性介質中極易被氧化成脫氫抗壞血酸，pH>5,脫氫抗壞血酸內環開裂，形成二酮古洛糖酸。脫氫抗壞血酸，二酮古洛糖酸均能和2，4－二硝基苯肼生成可溶於硫酸的脎

脎在500nm波長有最大吸收

根據樣品溶液吸光度，由工作曲線查出VC的濃度，即可求出VC的含量

十一庫侖滴定法

1.原理：庫侖滴定法屬於恆電流庫侖分析。

是在特定的電解液中，以電極反應產物為滴定劑（電生滴定劑，相當於化學滴定中的標准濃液）與待測物質定量作用，藉助指示劑或電位法確定滴定終點。

2.基本依據－－法拉第電解定律：電解時，電極上發身化學反應的物質質量與通過電解池的電量Q成正比

即：m=MQ/zF=MIt/zF

3..化學反應：陰極反應：2H+2e-=H2陽極反應：2I-=I2+2e-

4.終點指示：多種方法

(1)化學指示劑－－I2

(2)電位法

(3)雙鉑極電流指示法

5.計算式：Wvc=MvcQ/zFm樣式中：F---法拉第常數（96487C）

Z---電極反應中轉移的電子數注意：使電解效率100％

6.優點：

1）無需標准化的試劑溶液，免去了大量的標准物質的准備工作（配製，標定）

2）只需要一個高質量的供電器，計時器，小鉑絲電極，且易於實現自動化控制

3）若電流維持一個定值，可大大縮短了電解時間

4）電量容易控制及准確測量；方法靈敏度，准確度較高

5）滴定劑來自電解時的電極產物，可實現容量分析中不易實現的滴定過程，如Cu＋,Br2,Cl2產生後立即與待測物反應。

7.缺點(難點)：

要求電解過程沒有副反應和漏電現象，即使電解電極上只進行生成滴定劑的反應，且電流的效率是100％

8.註：電流效率＝i樣÷i總＝i樣÷（i樣＋i容＋i雜）

因為：實際電解過程中存在影響電流效率的因素，如，雜質，溶劑，電極自身在電極上的反應等

十二紫外快速測定法

原理

維生素C的2，6—二氯酚靛酚容量法，操作步驟較繁瑣，而且受其它還原性物質、樣品色素顏色和測定時間的影響。紫外快速測定法，是根據維生素C具有對紫外產生吸收和對鹼不穩定的特性，於243nm處測定樣品液與鹼處理樣品液兩者消光值之差，通過查標准曲線，即可計算樣品中維生素C的含量。

十三光電比濁法的原理

原理

在酸性介質中,抗壞鐵酸與亞硒酸(H2SeO3)能定量地進行氧化還原反應.1mol的抗鐵酸能將2mol的亞硒酸還原成硒.在一定條件下,生成的元素硒在溶液中形成穩定的懸濁液.當抗鐵酸的濃度在0-4mg/25-50ml的范圍內,該溶液生成的濁度與抗壞鐵酸的含量成正比.將試液置分光光度計上測其濁度可以定量地測定抗壞鐵酸.

十四熒光分析法的原理

原理

用酸洗活性炭將抗壞鐵酸氧化為順式脫氫抗壞鐵酸,然後與鄰苯二胺縮合成一種熒光性化合物.樣品中其它熒光雜質的干擾可以通過向氧化後的樣品中加入硼酸,使脫氫抗壞鐵酸形成硼酸脫氫抗壞鐵酸的絡合物,它不與鄰二苯胺生成熒光化合物.這樣可以測定其它熒光雜質的空白熒光強度而加以校正

十五原子吸收間接測定法

原理

這是最近報導的一種Vc測定法，其原理是在酸性介質中還原型Vc可將Cu2+定量地還原為Cu+並與SCN—反應生成CuSCN沉澱，在高速離心機下有效地分離出沉澱，小心洗滌後再經濃硝酸溶解，用原子吸收法測定銅含量，即可推知樣品中維生素C的含量。該法實驗儀器較昂貴，主要問題是操作過程中反應完全與否，沉澱物洗滌、離心反復多次，極容易帶來誤差。該法優點是能不受果蔬自身顏色的干擾，有一定的發展前景。根據試驗，發現此法結果偏低，還有待於進一步優化改善。

十六．金納米微粒分光光度法測定維生素C的方法

本發明公開了一種用金納米微粒分光光度法測定維生素C的方法。於5mL比色管中，依次加入0．1－2．0mL濃度為95．64μg／mL的HAuCl↓［4］溶液，0．02－0．50mL濃度為1％的檸檬酸三鈉溶液，再加入0．001－2．0mL濃度為0．38mg／mL的維生素C溶液，混勻，加二次蒸餾水定容至刻度，再充分混勻，在分光光度計上，於520nm處測定吸收值，同時作空白試驗。本發明測定方法簡單、快捷，所用儀器價廉，試劑易得

十七L-半胱氨酸修飾電極測定維生素C的方法

研究了L-半胱氨酸修飾電極的制備方法和其電化學行為，並用於維生素C的測定，發現該電極對VC有明顯的電催化作用，在pH=10.0的NH4Cl-NH3·H2O緩沖溶液中，VC在L-半胱氨酸修飾電極上產生一靈敏的氧化峰，峰電流與VC的濃度在1.0×10-3~1.0×10-6mol/L的范圍內呈良好的線形關系，相關系數為0.9962，其最低檢測限可達1.0×10-6mol/L，與紫外光譜法測定的結果一致。

測定維生素C有多種方法，包括採用I2或二氯靛酚（DPI）進行氧化還原滴定。一般來說，滴定法是一種快速、簡便、准確的技術，它通過滴定劑和被滴定物質的等當量反應，精確測定被測物質的含量。DPI對於維生素C具有良好的選擇性，是一種理想的氧化劑。

十八梅特勒-托利多儀器法

傳統的滴定法是手工滴定，根據指示劑顏色的變化確定終點，通過測量滴定劑的消耗量，計算被測物質的含量。手工滴定有很多不足：手工控制誤差較大，計算復雜，針對不同的反應需要特殊指示劑。梅特勒-托利多的自動電位滴定儀解決了這一問題，通過測量滴定反應中電位的變化確定終點，全自動操作、計算，測量快速，結果准確。梅特勒-托利多的滴定儀配有記憶卡軟體包，存儲有成熟滴定方法，可方便快速解決實際應用問題，並且稍作改動就能作為新的測定的實驗方法。

除此之外，還有雙光束剩餘染料差減比色法，2_6_二氯靛酚鈉動力學分光光度法、聚中性紅修飾電極方法、示波溴量法、流動注射化學發光抑製法、磷鉬鎢雜多酸作顯色劑快速檢測方法、溶氧測定裝置測定水果蔬菜中抗壞血酸含量的方法等。在此不做介紹。

『肆』 水果中維生素c含量的測定方法有幾種

水果中維生素c含量的測定方法有三種，分別為原子吸收分光光度法、紫外可見分光光度法、高效液相色譜法。

1、原子吸收分光光度法
利用原子吸收分光光度法問接測定維生素C的含量，是利用維生素C可以與一些金屬離子發生氧化還原反應，通過測定反應掉的金屬離子的量，進而間接計算出維生素c的含量。

2、紫外-可見分光光度法

利用紫外-可見分光光度法測定維生素C的含量是基於維生素c在紫外光區有特徵吸收，但是因為維生素C結構中具有不飽和鍵，具有還原性，不易穩定存在，直接測定誤差較大。所以在利用紫外分光光度法測定時，維生素標准溶液和待測樣的配製條件非常重要。

3、高效液相色譜法

高效液相色譜法是以液體為流動相，採用高壓輸液系統，將維生素C的溶劑裝有固定相的色譜柱，在柱內各成分被分離後，進入檢測器進行檢測，從而測量出維生素c的含量。

(4)vc指標測量方法比色法擴展閱讀

維生素c含量的測定方法對比：

由於維生素C自身的不穩定，導致了很多方法測定結果誤差較大，所以對維生素C穩定存在條件的探索非常重要。高效液相色譜法因為測定較准確、靈敏度高、選擇性好，有較好的發展前景，是目前發展較快的一種方法。

『伍』 生化分析儀的測量方法

全自動生化分析儀目前在測量血液常規項目時，是以比色法為主，主要原理是運用光譜技術中不同原子吸光不同而測量的，那麼對於ISE模塊的功能實現，主要有兩種方法，一是比色法，二是間接法。比色法因其測量精度，准確度等與所要求的相差太大，此法在醫學的早期實驗室檢查中使用，已經是屬於淘汰的用法。間接法，其方法原理與目前市場上存在的其它儀器所用直接法相似，但ACA的脆弱性所致，為防儀器內部被堵塞，對樣品的要求極為嚴格，需經常規分離再經稀釋後方可測量，而一般的生化ISE模塊對樣品的稀釋倍數又大都在30倍左右，在如此大的稀釋倍數下，對管路確是有益，但從數據統計處理角度來看，這樣的測量，將會把誤差同比例放大，那麼這樣測到的結果，准確度和精確度不能達到要求。
另外，ACA所採用的間接法與目前其它儀器所採用的直接法的差異，在此引用一本檢驗行業的權威之作《臨床生化檢驗》一書對此的描述：間接電位法：樣品與標准液要用指定離子強度與pH的稀釋液作定量稀釋，再行測定，此時樣品和標准液的pH和離子強度趨向一致，所測離子活度等於離子濃度，間接法所測結果與火焰法相似。在高脂血症或高蛋白血症的血清樣品中，由於單位體積血清中水量明顯減少，若用定量樣品作稀釋後，再用間接法測定，會得到假性低血鈉（或鉀），但直接法能真實地反映血清中離子的活度，據報告：直接法比間接法約高2~4%。
通過對ACA的了解，也發現ACA對使用者的解放度不夠，想人類自從走上電子電器時代，輔助電子產品的宗旨之一就是解放人的時間，而ACA儀器，因龐大而復雜的系統，在檢測操作前有預熱、校正、模塊檢測、純水檢測、系統試劑檢測等諸多繁雜工作要准備，此為常態流程，但若儀器再出故障，工作量勢必會大幅增加。盡管為全自動工作儀器，但卻不利於檢驗科室工作的順利進行，以大型三甲醫院為例，每天的病患標本多則上百，若僅在ACA上花費如些之多的時間，工作的開展將使效率大大降低。
從費用方面講，進口設備因為技術壟斷，在國內的市場上尚無有力競爭對手的情況下，有一定的定價權，更有市場壟斷之疑，售價少則十多萬，多則幾十萬，而對於帶ISE模塊的ACA儀器則又在同等基礎上貴出約5到8萬，且大多隻能檢測三項指標K、Na、Cl，而同等產品，將不同項目分離單測，國內品牌售價則要低較多，如國內品牌邁瑞。在試劑消耗上，因ACA大都是整套配套試劑，所以用於電解質的測定上，相應的成本就會上升，對於中小型醫院，因各種原因，只能對常見疾病做治療，可能真正所需只是電解質的檢驗報告，如此，為測定少數項目而使用ACA，對醫院來講，設備的利用率不高，造成一定的資源浪費。
全自動生化分析儀測量電解質所用間接法與直接法的結果差異，我想可以用誤差產生的概念來說明。首先說明幾個概念，第一，真值：客觀存在的真實值；第二，誤差：測量結果與被測量真值之差。間接法與直接法測量結果都有誤差，但卻有本質的不同。誤差產生的原因有兩種，叫系統誤差和偶然誤差。對於間接法和直接法，因測量，計算，得出結果等步驟都是由儀器完成，偶然誤差可以近似認為一致，但系統誤差卻不容忽視。間接法因測量方法所限，故其系統誤差要大於直接法，正如早期臨床檢驗中所用的火焰法，因本身方法之限，所造成的系統誤差較大，系統誤差是不可避免的，所以最終結果在特殊血清中會有假性低血鈉（或鉀）出現。